專利名稱：一種米曲霉真菌及其在普洱茶生產(chǎn)中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種米曲霉真菌及其在普洱茶生產(chǎn)中應(yīng)用，屬生物技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
眾所周知，曲霉屬(Aspergillus)。有多種活性強(qiáng)大的酶系，可用于工業(yè)生產(chǎn)，如淀粉酶用于淀粉的糖化、液化以及酒精工業(yè)或制造葡萄糖和消化劑。果膠酶用于水解聚半乳糖醛酸，產(chǎn)生的纖維素酶為Cx酶，含有較強(qiáng)的蛋白酶及果膠酶，當(dāng)?shù)孜飌h值達(dá)到3.0時它仍能發(fā)揮作用。米曲霉能分解有機(jī)質(zhì)產(chǎn)生多種有機(jī)酸如抗壞血酸、檸檬酸、葡萄糖酸和沒食子酸等。此菌系還可在甾族化合物11-α位起羥化作用。
在普洱茶大生產(chǎn)過程中，該菌系能分泌酶類作用于基質(zhì)。在淀粉酶的作用下，將原料中的直鏈支鏈淀粉降解為糊精及各種低分子糖類，如麥芽糖、葡萄糖等，在蛋白酶的作用下，將不易消化的大分子蛋白質(zhì)降解為蛋白胨、多肽及各種氨基酸。在果膠酶、糖化酶、纖維素酶的作用下使發(fā)酵基質(zhì)大分子不溶物質(zhì)轉(zhuǎn)化為可溶解于水的小分子物質(zhì)，對普洱茶品質(zhì)的形成帶來積極的作用。
在普洱茶研究領(lǐng)域，由于長期缺乏學(xué)科的研究，尤其是從微生物的角度來進(jìn)行普洱茶的研究。而如何通過對云南普洱茶加工中微生物的研究，并從普洱茶加工中篩選有益優(yōu)勢微生物菌株應(yīng)用到生產(chǎn)中來提升普洱茶的品質(zhì)尚未見公開的文獻(xiàn)報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是從微生物的角度對進(jìn)行普洱茶進(jìn)行研究，為生產(chǎn)企業(yè)提供高品質(zhì)普洱茶有益菌株來源。本發(fā)明的另一目的是通過控制有益菌種在普洱茶生產(chǎn)中的比例，為促進(jìn)云南普洱茶品質(zhì)穩(wěn)定和提高發(fā)揮作用。
本發(fā)明的具有提高普洱茶品質(zhì)功能的真菌，由生產(chǎn)菌株經(jīng)米曲霉純化培養(yǎng)及天然培養(yǎng)基培養(yǎng)后得到，生產(chǎn)菌株為米曲霉(Aspergillus oryzae)PAsp0502，保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏單位地址北京是海淀區(qū)中關(guān)村北一條13號，保藏日期2005年5月16日，保藏號CGMCC No.1374。
本發(fā)明的米曲霉(Aspergillus oryzae)PAsp0503的形態(tài)學(xué)特征為該菌類生長稍局限，10-14天直徑可達(dá)2.5-3cm，菌絲初為白色，常常出現(xiàn)黃色區(qū)域，厚絨狀，黑色，反而無色或中央部分略帶黃褐色。鏡檢后觀察得到分生孢子頭幼時球形，漸變?yōu)榉派湫位蛄殉蓭讉€放射的柱狀物，一般為1-3mm，直徑15-20μm，壁厚，光滑。頂囊球形一般直徑45-75μm。小梗雙層，自頂囊全面著生，褐色，?；话?0-30×5-6μm，長者可達(dá)60-70μm，寬8-10μm，有的具橫隔，分生孢子球形，直徑大多4-5μm，粗糙。
本發(fā)明經(jīng)常規(guī)的米曲霉純化培養(yǎng)工序及天然培養(yǎng)基培養(yǎng)后得到。
本發(fā)明的米曲霉(Aspergillus oryzae)PAsp0502真菌有提高普洱茶品質(zhì)的作用，可應(yīng)用于普洱茶的生產(chǎn)工藝中。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于將PAsp0502按一定的比例用于普洱茶的大生產(chǎn)過程中，其普洱茶中的茶多糖含量為2-4％、茶褐素含量為10-12％，普洱茶的品質(zhì)有明顯的提高，并縮短了加工時間，對普洱茶品質(zhì)的穩(wěn)定和提高發(fā)揮重要作用。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1PAsp0502菌種的純化從采集到的茶樣中，通過公知的平板分離得到米曲霉菌株。米曲霉純化培養(yǎng)基為馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂20g、蒸餾水1000ml、ph自然。馬鈴薯去皮，切成塊，煮熟半小時，然后用紗布過濾，在加瓊脂和糖，熔化后補(bǔ)足水至1000ml。121℃滅菌20min。
純化方法(1)將固體培養(yǎng)基熔化，冷卻至45℃，注入無菌培養(yǎng)皿中，每皿約15～20毫升，稍微搖轉(zhuǎn)，靜置，使成平板備用。
(2)取要分離的茶樣2g，在火焰旁加到裝有98ml無菌水的研缽中研碎，此時得到的是10-2的菌懸液。
(3)稀釋按十倍稀釋法把菌懸液稀釋至10-8，十倍法是指下一管的菌懸液要比上一管的稀十倍。
(4)接種事先準(zhǔn)備好的平板9套，分別標(biāo)號為10-6、10-7、10-8，每個稀釋度寫三套平皿，以便比較。在每個已標(biāo)號的平皿中注入1ml相應(yīng)的菌懸液，用涂布棒涂均勻，放入25～28℃培養(yǎng)24小時觀察。
(5)培養(yǎng)2～5天后，挑取單個菌落，并移植于斜面上培養(yǎng)，待形成子實(shí)器官后檢查是否只有一種菌而且這種菌是否符合米曲霉的特征。
(6)最后把選出的菌種接種到天然培養(yǎng)基上(葡萄糖30g、麩皮10g、玉米粉50g、蛋白胨10g、酵母膏1.0g、加蒸餾水至1000，不調(diào)ph值)。放到28℃恒溫箱中早晚搖動培養(yǎng)5～7天后，在無菌超作臺上用無菌濾紙過濾，無菌收獲濾紙上的菌絲和米曲霉的孢子，放到28±2℃恒溫箱中干燥即可用于接種發(fā)酵試驗(yàn)。
實(shí)施例2PAsp0502的生產(chǎn)應(yīng)用將毛茶按傳統(tǒng)的方法進(jìn)行濕熱，隨后在毛茶中接種重量比為0.1-0.8％的PAsp0502讓其發(fā)酵，當(dāng)堆溫升高到37℃左右時，PAsp0502開始進(jìn)行代謝，并且隨著堆溫進(jìn)一步的升高，分泌出大量的葡萄糖淀粉酶、糖化酶、蛋白酶、纖維素酶和果膠酶等。在普洱茶大生產(chǎn)過程中，該菌系分泌酶類作用于基質(zhì)。在淀粉酶的作用下，將原料中的淀粉降解為糊精及各種低分子的糖類，如麥芽糖、葡萄糖等；在蛋白酶的作用下，將不易消化的大分子蛋白質(zhì)降解為蛋白胨、多肽及各種氨基酸；在果膠酶、糖化酶、纖維素酶的作用下使大分子不溶物質(zhì)轉(zhuǎn)化為可溶于水的小分子物質(zhì)，有益于普洱茶品質(zhì)及保健機(jī)理的形成。
經(jīng)接種PAsp0502后生產(chǎn)的普洱茶，其品質(zhì)有明顯的提高，普洱茶中的茶多糖含量為2-4％、茶褐素含量為10-12％，形成的普洱茶產(chǎn)品，湯色紅濃明亮，滋味甘滑，獨(dú)特陳香。
權(quán)利要求
1.一種米曲霉真菌，由生產(chǎn)菌株經(jīng)米曲霉純化培養(yǎng)及天然培養(yǎng)基培養(yǎng)后得到，其特征在于生產(chǎn)菌株為米曲霉(Aspergillus oryzae)PAsp0502，保藏日期2005年5月16日，保藏號CGMCC No.1374。
2.權(quán)利1所說的真菌，其特征在于該真菌有提高普洱茶品質(zhì)的作用，可應(yīng)用于普洱茶的生產(chǎn)工藝中。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種米曲霉真菌及其在普洱茶生產(chǎn)中應(yīng)用，屬生物技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明的米曲霉真菌由米曲霉純化培養(yǎng)、天然培養(yǎng)基培養(yǎng)工序后得到，其特征在于生產(chǎn)菌株為米曲霉(Aspergillus oryzae)PAsp0502，保藏日期2005年5月16日，保藏號CGMCC No.1374。該真菌有提高普洱茶品質(zhì)的作用，可應(yīng)用于普洱茶的生產(chǎn)工藝中。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于將PAsp0502按一定的比例用于普洱茶的大生產(chǎn)過程中，其普洱茶中的茶多糖含量為2－4％、茶褐素含量為10－12％，普洱茶的品質(zhì)有明顯的提高，并縮短了加工時間，對普洱茶品質(zhì)的穩(wěn)定和提高發(fā)揮重要作用。
文檔編號A23F3/06GK1752203SQ20051001094
公開日2006年3月29日 申請日期2005年7月28日 優(yōu)先權(quán)日2005年7月28日
發(fā)明者周紅杰, 龔加順, 秘鳴, 趙龍飛 申請人:秘鳴