應用能量消散劑治療良性前列腺增生的制作方法

專利名稱：：應用能量消散劑治療良性前列腺增生的制作方法
技術領域：
：本發明涉及良性前列腺增生的治療(treatment)和預防(prevention)，并且應用于醫學領域和相關的領域，包括但不限于化學領域、醫學化學領域、和生物學領域。
背景技術：
：良性前列腺增生(BenignProstaticHyperplasia，BPH)，一種前列腺上皮細胞異常生長并且阻塞尿流的疾病，折磨著美國超過1千萬的成年男性，和遍及世界上其它地區的另外數百萬成年男性。直到相對近期，外科干預(surgicalintervention)是該疾病的唯一治療方法，并且甚至在今天，手術是最后手段的治療，當其它治療不是有效的，或者停止有效時，幾乎不可避免地依賴于手術。前列腺手術和其恢復是痛苦的，并且，手術本身可能不是有效的，并且呈現了嚴重副作用的風險。對于手術在BPH治療中的作用的近期綜述，參見Barry，2001(完整的引用在下面被提供)。僅兩類藥物是目前可以得到的、用以治療BPH的癥狀。一類藥物包括抑制睪酮(testosterone)的活性形式(雙氫睪酮或者DHT)產生的化合物。這些藥物的應用可以引起男性的性欲喪失，和肌肉塊喪失，以及音調的喪失，并且與高度前列腺癌的發生增多相關。另外，這種治療被在首次給予該藥物和患者的前列腺的大小明顯降低之間de非常長的延遲(數月)所限制。目前被用于BPH的第二類藥物，α-腎上腺素能阻斷劑，松弛平滑肌，允許尿液更通暢地通過尿道。雖然此類藥物比第一種藥物更加迅速地減輕癥狀，它不減少前列腺的大小，或者防止前列腺變得更大，這可以導致最終的外科干預。因此，存在著對可以治療BPH的基礎疾病狀態而沒有嚴重的副作用的藥物的明顯的、未予滿足的需求。本發明滿足了這種需求。發明概述本發明提供了用于治療BPH的方法和組合物，通過給予一種化合物(一種“能量消散劑(anergolyticagent)”)實施，所述化合物在前列腺上皮細胞中抑制糖酵解，損害線粒體功能，或者要不然干擾能量代謝。本發明的方法可以如此被實踐，通過應用抑制前列腺上皮細胞中的糖酵解的任何一種糖酵解抑制劑(glycolyticinhibitor)，或者應用損害這些細胞中的能量產生或者線粒體功能的任何一種化合物。此化合物的例證性種類包括，沒有限制地，直接地或者間接地抑制糖酵解的化合物，干擾能量代謝的化合物，損害線粒體功能的化合物，線粒體毒物，糖酵解抑制劑，己糖激酶的抑制劑，氯尼達明或者氯尼達明類似物，棉酚或者棉酚類似物，3-溴丙酮酸或者其類似物，和2-脫氧葡萄糖(2DG)或者2DG類似物。此外，根據本發明的方法，可以使用直接地或者間接地干擾HIF-1α表達的藥劑(agent)，(從而降低前列腺上皮細胞的葡萄糖攝取)。因此，在一個方面，本發明提供了一種用于治療良性前列腺增生(benignprostatichypertrophy(BPH))的方法，通過向需要這種治療的人類對象，給予一種治療有效量的藥劑實施，所述藥劑干擾前列腺細胞中的能量代謝(一種“能量消散制劑”)。在一種相關的方法中，本發明提供了一種用于減輕與BPH相關的癥狀的方法，通過向顯示該癥狀的人類對象，給予一種治療有效量的能量消散劑(energolyticagent)實施。在一種相關的方法中，本發明提供了一種方法，用于降低人類對象的前列腺大小，通過向該對象給予一種治療有效量的能量消散劑實施。在一種相關的方法中，本發明提供了一種方法，用于預防BPH，通過向一名人類對象，給予一種預防有效量的能量消散劑實施。在一些實施方案中，能量消散劑選自2-脫氧葡萄糖，3-溴丙酮酸，棉酚(棉子酚，gossypol)，草氨酸(oxamate)，碘乙酸，apoptolidin，氯尼達明，以及3-溴丙酮酸、棉子酚、草氨酸、碘乙酸、apoptolidin和氯尼達明的一種類似物。在本發明的一些實施方案中，對象既沒有被診斷為癌癥，也不處于針對癌癥的治療中，和/或具有大于大約2ng/ml的血清PSA；和，或者，具有小于大約10ng/ml的血清PSA，和/或以前曾對BPH治療過。在一些實施方案中，能量消散劑的給予是與用于BPH的其它治療相聯合的。用于BPH的其它治療可以是，例如，給予干擾前列腺上皮細胞中的能量代謝的第二種藥劑，施行前列腺減小手術，和/或給予來自目前被用于治療BPH的兩類藥物之一類中的一種藥物。在一種實施方案中，能量消散劑每日給予一次，持續至少5天。在本發明的一個方面，當在治療起始后60天時或者在治療起始后60天之后測定，并且與治療起始之前的基線相比，受試者的AUASI或者IPSS評分被降低了至少3分，任選地降低了至少大約5分；前列腺大小被減少至少大約20％，任選地減少了至少大約40％；和/或血清PSA水平被降低了至少大約20％，任選地降低了至少大約40％。本發明進一步提供了一種用于治療BPH的方法，通過下列步驟實施(a)在一名患者中診斷BPH，(b)向該患者給予一種能量消散劑(EA)，和(c)確定該患者中的BPH的一個或者多個表現是否被減輕。也提供了一種用于治療BPH的方法，由(a)向一名診斷為BPH的患者給予一種能量消散劑，和(b)確定該患者中的BPH的一個或者多個表現是否減輕。附圖簡述圖1顯示了氯尼達明(I，R＝Cl)、托尼達明(tolnidamine)(I，R＝CH3)、AF-2364(II)和AF-2785(III)的結構。圖2顯示了選擇出的2-DG類似物的結構。圖3顯示了在常氧和低氧的情況下，和氯尼達明存在以及不存在時，LNCaP細胞中的HIF-1α的表達。圖3A顯示了應用細胞核提取物的分析結果。圖3B和3C顯示了應用全細胞提取物的分析結果。圖4顯示了在常氧和低氧的情況下，和氯尼達明存在以及不存在時，PC-3細胞中的HIF-1α的表達。圖4A顯示了應用細胞核提取物的分析。圖4B和4C顯示了應用全細胞提取物的分析。圖5顯示了在LNCaP細胞(圖5A)和PC-3細胞(圖5B)中，氯尼達明誘導的細胞凋亡。圖6顯示了在前列腺上皮細胞中，氯尼達明誘導的細胞凋亡。圖7顯示了在前列腺上皮細胞中(圖7A)和前列腺基質細胞中(圖7B)，氯尼達明誘導的細胞凋亡。圖8顯示了0-600μM的氯尼達明對HIF-1α和其它蛋白質的表達的影響，以在來自LNCaP細胞的全細胞提取物測定，所述的LNCaP細胞是在低氧環境下被培養的。圖9顯示了0-600μM的氯尼達明對HIF-1α和其它蛋白質表達的影響，以在來自LNCaP細胞的細胞核提取物測定，所述的LNCaP細胞是在低氧環境下被培養的。發明詳述1.定義提供下面的定義來幫助理解本發明。如果沒有其它限定，在此應用的所有技術術語、符號和其他的科學或醫學術語或專有名詞，意圖具有被化學和醫學領域的技術人員所普遍理解的含義。在一些情況下，具有被普遍理解的含義的術語，在此被定義，用以明晰和/或方便參閱，并且此處的這種定義所包含的內容，不一定被解釋為，與此領域中所一般理解的術語的定義，代表了一種實質上的不同。如在此被應用，“治療”一種疾態或者一個患者(“treating”aconditionsorpatient)是指，采取步驟以獲得有益的或者希望的結果，包括臨床結果。對于本發明的目的，有益的或者希望的臨床結果包括但不限于，BPH的一個或者多個癥狀的緩解或者改善，疾病程度的減輕，疾病進程的延遲或者減慢，疾病狀態的改善、減輕或者穩定化，和在下面描述的其它有益的結果。如在此被應用，一個癥狀或者多個癥狀的“減輕(reduction)”(和此短語的語法上同等成分)意味著一個癥狀(多個癥狀)的嚴重程度或者發生頻率的降低，或者一個癥狀(多個癥狀)的消除。如在此被應用，向對象“給予”藥物或者藥物的“給予”(“administering”or“administrationof”adrugtoasubject)(和此短語的語法上同等成分)，既包括直接給予，包含自給予；又包括間接給予，包含開藥的行為。例如，如在此被應用，醫生指示患者自給予藥物和/或提供給患者藥物處方，是向該患者給予藥物。如在此被應用，BPH的“表現”(a“manifestation”ofBPH)是指患有BPH的對象的癥狀、體征、解剖狀態(例如，前列腺的大小)、生理狀態(例如，PSA水平)、或者報告特征(例如，AUASI評分)。如在此被應用，藥物的“治療有效量(therapeuticallyeffectiveamount)”是指藥物的量，當向患有BPH的對象給予此藥物量時，將具有意圖的治療效果，例如，在該對象中，BPH的一個表現或者多個表現的緩解、改善、減輕或者消除。通過一個劑量的給予，全部的治療效果不一定必然發生，全部的治療效果可以僅發生在一系列劑量的給予之后。因此，治療有效量可以經一次或者多次給藥被給予。如在此被應用，藥物的“預防有效量(prophylacticallyeffectiveamount)”是指藥物的量，當向對象給予此藥物量時，將具有意圖的預防效果，例如，防止或者延遲疾病或者癥狀的發生(或者再發生)，或者減小疾病或者癥狀發生(或者再發生)的可能性。通過一個劑量的給予，全部的預防效果不一定必然發生，全部的預防效果可以僅發生在一系列劑量給予之后。因此，預防有效量可以經一次或者多次給藥被給予。如在此被應用，“TID”和“QD”具有其通常的涵義，分別為“每日三次(threetimesaday)”和“每日一次(oncedaily)”。2.良性前列腺增生和代謝抑制劑的效應本發明提供了組合物和方法，在良性前列腺增生(benignprostatichyperplasia(BPH))的治療中是有用的。具體地，本發明涉及抑制或者損害前列腺上皮細胞中的能量產生的化合物的應用，以便用于BPH的治療或者預防。BPH(也稱為良性前列腺增生(benignprostatichyperplasia))特性的簡短討論將有助于理解本發明。BPH涉及前列腺中細胞的過度生長(增生)，這導致前列腺的增大，并且導致下尿路癥狀和尿道疾病。前列腺含有分泌型的上皮細胞，位于結締組織和平滑肌的基質中(對于前列腺解剖的更詳細的描述，參見Barry，2003)；并且，BPH涉及上皮成分的增生。在正常的前列腺中，分泌性的上皮成分是顯著的，原因在于，與其它正常組織相比，該組織中的鋅的水平是非常高的。高的鋅水平的一個后果是，通過涉及線粒體-順烏頭酸酶(m-順烏頭酸酶)的鋅抑制機制，在分泌上皮中，經由三羧酸循環(TCA)和氧化磷酸化的能量生成被實質地降低了，致使此組織與其它器官和組織相比，更多地依賴糖酵解作為能量來源。TCA循環中的關鍵酶，m-順烏頭酸酶的鋅抑制作用，導致前列腺上皮細胞中TCA循環至少大大地被降低，或者可能幾乎完全阻斷。m-順烏頭酸酶的基于鋅的抑制效應的另一個生理后果是，檸檬酸從TCA循環偏離出來，這使前列腺能夠分泌大量的檸檬酸入精液中，檸檬酸被精子作為能量來源而運用。參見，一般地，Costello，1999；Costelloetal.，2000；CostelloandFranklin，2000。由于體內的其它正常細胞不積累鋅直至抑制檸檬酸代謝的水平，前列腺上皮細胞唯一地依賴糖酵解(無氧代謝)，并且因此唯一地對糖酵解的抑制劑敏感，以及對使這些細胞中的三羧酸循環幾乎完全阻斷增加的化合物敏感，所述的化合物包括但不限于干擾ATP和/或NADH/NADPH產生的化合物，減少葡萄糖運輸的化合物，和HIF-1α抑制劑。本發明的方法以這種在前列腺上皮細胞中對糖酵解增加的依賴性和在前列腺上皮細胞中的三羧酸循環的幾乎完全阻斷為目標。進一步地，由于在分泌上皮中，經由三羧酸循環(TCA)和氧化磷酸化的能量產生被顯著地降低(但可能未被完全消除)；在前列腺上皮細胞中，損害線粒體功能的藥劑也可以具有不同的效應。不意圖受限于特殊機理，認為給予抑制前列腺上皮細胞中的糖酵解和/或線粒體功能的藥劑，優先地，相對于其它細胞，使這些細胞發生能量饑餓。不意圖受限于特殊機理，認為，依靠抑制糖酵解，或者依靠進一步損害線粒體的功能，或者兩者，通過優先地破壞檸檬酸產生細胞，致使與BPH相關的的足夠的增生性檸檬酸產生細胞被破壞，以便降低前列腺的大小、減輕疾病狀態及其臨床后果。因此，根據本發明的方法，以損害能量產生(降低ATP水平)的劑量，向患有BPH或者對BPH易感的人或者其它哺乳動物，給予抑制或者損害前列腺上皮細胞的能量產生的化合物，持續時間一段時間，其可導致至少一些檸檬酸產生細胞的優先破壞，這是通過使它們，相對于體內其它細胞，發生能量饑餓實現。抑制或者損害前列腺上皮細胞中的能量產生的化合物，在此被稱為“能量消散劑(energolyticagent)”或者“EA”。對讀者將是顯然的，在本發明實踐中有用的能量消散劑包括，抑制糖酵解的化合物，損害線粒體功能的化合物，和兩種作用均有的化合物，包括，在所有情形下，在前列腺中直接地或者間接地作用于葡萄糖代謝的化合物。因此，在一種實施方案中，能量消散劑是損害前列腺上皮細胞中的糖酵解的化合物。在一種實施方案中，能量消散劑是損害前列腺上皮細胞中的線粒體功能的化合物。在一種實施方案中，能量消散劑既干擾糖酵解，又干擾線粒體功能。在一種實施方案中，應用藥劑的聯合作用，包括，在一種實施方案中，給予一種是糖酵解抑制劑的藥劑，并且同時或者同期給予第二種藥劑，第二種藥劑是線粒體功能的抑制劑。能量消散劑的一種類型，包括抑制糖酵解(直接地或者間接地)的化合物。例如，EA可以抑制一種酶，該酶催化葡萄糖向丙酮酸轉變中的一個步驟，或者丙酮酸氧化為乙酰輔酶A中的一個步驟。用于示例，并且不是用于限制，能量消散劑可以是己糖激酶、葡萄糖激酶、磷酸果糖激酶、醛糖、磷酸甘油酸激酶、烯醇化酶、丙酮酸激酶、丙酮酸脫氫酶的一種抑制劑。用于說明并且不是用于限制，這種化合物包括那些在美國專利5,824,665中描述的化合物(6-氨基-6-脫氧-葡萄糖；N-乙酰-β-D-甘露糖胺；D-甘露糖胺；N-α-(p-甲苯磺酰基)-L-賴氨酸氯甲基酮)；磷酸甘油酸、醌的甲基化物；落羽松酮(taxodone)；taxodione；α-亞甲基內酯；euparotinacetate；eupacunin；vernolepin；argaricacid；喹哪啶酸(quinaldicacid)；5′-p-氟磺酰基苯酰基腺苷；5-酮-D-果糖；5-酮-D-果糖-1，6-二磷酸；Mg-磷酸甘油酸；2，3-二磷酸甘油酸；3(反式)-氯磷酸烯醇式丙酮酸；3(順式)-氰磷酸烯醇式丙酮酸；D-丙醇二酸；磷酸半醛；氨基磷酸烯醇式丙酮酸；D-磷酸縮水甘油；L-磷酸縮水甘油；羥基-1-環丙烷羧酸；D(-)3-磷酸甘油酸；乙醛酸；羥基丙酮酸；kynurenate；黃尿酸；a-氰-4-羥基肉桂酸；溴丙酮酸；氟丙酮酸)或者其藥學上可接受的類似物或者衍生物。參見Bisswanger，1981；Furuta，1982；Waymack，1979；Lowe，1984；Bisswanger，1980；Colombo，1975；Hanson，1970；McCune，1989；Mansour，1978；Avigad，1974；Scopes，1982；Gunter，1982；Liu，1990；Wirsching，1985；Spring，1971；Rose，1969；O′Leary，1981；deDomenech，1980；和Johnson，1982。能量消散劑的另一種類型，包括損害線粒體功能的化合物(例如，線粒體毒物)。線粒體毒物包括但不限于在美國專利6,670,330中描述的線粒體毒物。如在上面所記載的，一些能量消散劑可以既干擾糖酵解功能，又干擾線粒體功能。例如，并且不是意圖將本發明限制于具體的作用機制，藥物氯尼達明破壞線粒體膜，這導致線粒體上結合的己糖激酶活性降低；并且，通過糖酵解途徑和氧化磷酸化途徑，干擾ATP生成。也應該理解到，損害糖酵解的藥劑通常也會，至少間接地，降低線粒體的能量生成，是通過減少可利用的、用于進入TCA循環的丙酮酸的量而實現。下面討論幾個示例性的能量消散劑。2-脫氧葡萄糖和2-脫氧葡萄糖的類似物適合用于本發明方法的一個能量消散劑是2-脫氧-D-葡萄糖(2-deoxy-D-glucose(2-DG))。2-DG被己糖激酶磷酸化，生成2-DG-6-磷酸，其不再進一步被代謝，其抑制己糖激酶。已被顯示，2-DG在癌細胞中抑制糖酵解作用。能量消散劑的另一個例子是2-DG的類似物，具有糖酵解抑制活性。如在此所應用，2-DG類似物是除了2-DG以外的任何一個D-葡萄糖類似物，其在葡萄糖環的第2位不具有羥基基團。對于本發明的目的，L-葡萄糖及其L-類似物不是2-DG類似物。葡萄糖類似物包括甘露糖、半乳糖、葡萄糖，和5-硫-葡萄糖。葡萄糖或者2-DG的類似物可以具有一個氟替代在葡萄糖環上的任何一個位置上的氫；因此，2-氟-2-脫氧-D-葡萄糖(2-FDG)和2-雙氟-2-脫氧-D-葡萄糖是2-DG類似物。葡萄糖或者2-DG的類似物可以具有一個氨基基團替代位于葡萄糖環上除了第6位的任何一個位置上的羥基基團；因此，2-氨基-2-脫氧-D-葡萄糖(2-葡萄糖胺)和2-氨基-2-脫氧-D-半乳糖(2-半乳糖胺)是2-DG類似物。其它示例說明的2-DG類似物，包括2-F-甘露糖、2-甘露糖胺、2-脫氧半乳糖、2-F-脫氧半乳糖，和含有一個或者多個前述的或者下述的2-DG類似物的二寡糖、三寡糖、和其它寡糖。在本發明方法中有用的其它2-DG類似物，包括在圖2中顯示的類似物。在本發明方法中有用的2-DG類似物，也包括那些在Reinhold，2000，Oncol.Rep.，71093-97中描述的類似物(例如，2-脫氧-D-葡萄糖-四乙酸)，和在PCT出版物WO01/82926(Lampidis，2Mar.2001)中描述的類似物。適用于本發明方法的另外的2-DG類似物，在美國專利申請號10/(2004年1月9日提交；律師對本案編號(attorneydocketnumber)54492-2000400))，題目是“TreatmentOfCancerWith2-Deoxyglucose.”中被描述。3-溴丙酮酸及其類似物適用于本發明方法的另一類能量消散劑是3-鹵代-丙酮酸類，包括但不限于3-溴丙酮酸，是己糖激酶的一種抑制劑。對于3-鹵代-丙酮酸的另外的信息，參見美國專利6,670,330號和美國專利申請出版物20030087961號。棉子酚和棉子酚類似物適用于本發明方法的另一類能量消散劑，是由棉子酚及其類似物構成的種類，包括但不限于棉子酚-(+)，棉子酚-(-)，棉子酚-(+)和棉子酚-(-)的混合物，乙酸棉子酚，棉子酚醛，棉子酚半縮醛，棉子酚醌，gossypolone，其代謝物，和其生理上可接受的鹽。可以用于本發明方法的棉子酚、棉子酚類似物、制劑、和單位劑量形式，在PCT專利申請WO02/097053；WO02/47673號，美國專利6,114,397和4,381,298；和美國專利申請出版物2002137801中被描述。氯尼達明和氯尼達明類似物適用于本發明方法的一類能量消散劑的一個例子，是由氯尼達明((1-(2，4-二氯苯基)-1H-吲哚-3-羧酸；DoridaminaTM；氯尼達明在此也被稱為LND，參見美國專利3,895,026號)及其類似物構成的種類。氯尼達明首先被確定為一種抗精子生成劑(anti-spermatogenicagent)，并隨后在歐洲的少數幾個國家被批準用于乳腺癌、宮頸癌、肺癌和前列腺癌的治療。參見Silvestrini，1981；Gattoetal.，2002。已經報道，LND的抗癌性質至少部分是由于線粒體膜崩解，這導致線粒體結合的己糖激酶活性降低，并且干擾通過糖酵解途徑和氧化磷酸化的ATP生成。參見，Floridietal.，1981，Fanciullietal.，1996；和Gatto，2002。也參見Kaplan，2000。通過給予氯尼達明及其類似物治療BPH的方法，在同時處于有待審查的美國專利申請號10/＿＿(題目是“TreatmentOfBenignProstaticHypertrophy”，律師編號(attorneydocketno.)54492-2000100，2004年1月16日提交)中有描述。氯尼達明類似物的例子包括，但不限于，托尼達明；AF-2364，和AF-2785(參見表1，Ansarietal，1998；和Corsietal.，1976)；由Silvestrini，1981；Lobletal.，1981，Chengetal.，2001，和在美國專利3,895,026和6,001,865號中被描述的化合物。其它的能量消散劑在本發明的方法中有用的其它有用糖酵解抑制劑、線粒體毒劑、和己糖激酶抑制劑，是已知的，或者可以應用本領域中已知的或者此處描述的分析方法被鑒定出來。例如，作為能量消散劑用于本發明用途的化合物，包括那些在PCT專利出版物WO01/82926，和美國專利6,670,330；6,218,435；5,824,665；5,652,273；和5,643,883號；以及美國專利申請出版物20030072814；20020077300(例如，apoptolidin)；和20020035071號中被描述的化合物。作為能量消散劑用于本發明用途的化合物，也包括在美國專利出版物20020035071(Pitha)中被描述的抗代謝物，包括3-O-甲基葡萄糖(Jayetal.，1990，J.Neurochem.55989-1000)；脫水糖，如1，5-脫水-D-葡萄糖醇(Polygalitrol)(Solsetal.，1954，J.Biol.Chem.，210581-95；1，5-脫水葡萄糖醇-6-磷酸(Craneetal.，1954，J.Biol.Chem.，210597-696；2.5-脫水-D-甘露醇和2，5-脫水葡萄糖醇)。作為能量消散劑，用于本發明用途的化合物，也包括乳酸脫氫酶的抑制劑，例如草氨酸(oxamate)；和三磷酸甘油醛脫氫酶的抑制劑，例如碘乙酸(iodoacetate)(參見Lampidis，WO01/82926)。在前列腺上皮細胞中干擾能量生成的、對BPH和它的癥狀的治療是有用的化合物，可以通過本領域技術人員已知的、或者此處描述的篩選和分析鑒定。例如，用于鑒定干擾線粒體功能的化合物的方法是已知的，如那些在美國專利6,183,948和6,479,251中被描述的方法。對于己糖激酶抑制劑(參見Fanciullietal.，1996，和Floridietal.，1981)和其它糖酵解酶抑制劑的分析，也是已知的，并且可以用于篩選適用于本發明方法的化合物，如此處所教導的那樣。此外，在本發明實踐中有用的一些藥劑，是通過它們模擬氯尼達明的一種或者多種活性的能力而被鑒定出來的，例如氯尼達明的一種或者多種活性是在前列腺上皮細胞中或者在體外細胞系中誘導細胞凋亡，或者抑制HIF-1α蛋白表達/積累的低氧誘導(例如，抑制HIF-1α蛋白表達/積累的低氧誘導)。由本發明所提供的、以鑒定具有這些性質的化合物的分析和篩選方法，描述于下面的第7節和實施例中。細胞系中的細胞凋亡分析。如實施例2所顯示，在源自人類前列腺細胞的細胞系中，氯尼達明誘導了細胞凋亡。與PC3細胞(ATCCNO.CLR-1435)相比，在LNCaP細胞(ATCCNO.CLR-1740)中，細胞凋亡的誘導效應明顯更強，這與產生檸檬酸的前列腺細胞對代謝抑制劑如氯尼達明的易感性是一致的，其中PC3細胞是一種氧化檸檬酸的前列腺來源細胞系，LNCaP細胞是一種產生檸檬酸的前列腺衍生細胞系。在本發明的一些采用能量消散劑治療或者預防BPH或者其表現的實施方案中，一種具有相似的凋亡誘導活性的藥劑被選擇出來。因此，在本發明的一些實施方案中，給予一種能量消散劑以治療BPH，所述能量消散劑在檸檬酸-產生的前列腺細胞，如LNCaP細胞中，誘導細胞凋亡(提高半胱胺酸蛋白酶3(caspase3)的活性)。在本發明的一些實施方案中，給予一種藥劑以治療BPH，所述藥劑在LNCaP細胞中誘導凋亡的程度，較在PC3細胞中顯著更強。在本發明的一些實施方案中，在LNCaP細胞中，通過該藥劑所導致的凋亡誘導比在PC3細胞中大至少大約2倍(以及，有時是大至少大約3倍，大至少大約4倍，或者大至少大約10倍)；當分析時，藥劑的濃度是在使兩種細胞系中的凋亡水平差異為最大時的濃度(只要在分析中應用的藥劑的濃度是不大于1mM的)。原代培養物中的細胞凋亡分析。如實施例2所顯示，氯尼達明在人前列腺上皮細胞的原代培養物中誘導細胞凋亡。與人前列腺基質細胞的原代培養物相比，在人前列腺上皮細胞的原代培養物中，凋亡的誘導顯著更強，這與產生檸檬酸的前列腺細胞對代謝抑制劑如氯尼達明的敏感性是一致的。在本發明的一些實施方案中，在其中，一種能量消散劑被用于BPH或者其表現的治療或者預防，這樣一種具有相似的凋亡誘導活性的藥劑就被選擇出來了。因此，在本發明的一些實施方案中，用于本發明的能量消散劑在前列腺上皮細胞中誘導了細胞凋亡。在本發明的一些實施方案中，給予一種藥劑治療BPH，該藥劑在前列腺上皮細胞的原代培養物中誘導凋亡，與在人前列腺基質細胞的原代培養物中相比，達到了更加顯著增強的程度。在本發明的一些實施方案中，該劑在基質細胞中不顯著地誘導細胞凋亡。在本發明的一些實施方案中，通過該藥劑在上皮細胞中誘導細胞凋亡，比在基質細胞中大至少大約2倍(以及，有時大至少4倍，有時大10倍，并且有時大至少20倍)；當分析是在使兩種細胞系中的凋亡水平的差異為最大時的類似物的濃度的情況下(只要在分析中，所應用的類似物的濃度是不大于1mM的)。在一種實施方案中，本發明提供了一種方法，以鑒定BPH治療中有用的藥劑，這種方法包括下列步驟確定該藥劑在前列腺上皮細胞中所誘導的細胞凋亡與在前列腺基質細胞中所誘導的細胞凋亡相比，是否達到了較強的程度；如果此藥劑在前列腺上皮細胞中所誘導的細胞凋亡與在前列腺基質細胞中所誘導的細胞凋亡相比，確實達到了較強的程度；那么，則鑒定此藥劑是在BPH治療中有用的一種藥劑。如在此所描述，各種各樣分析方法，如caspase3分析，可以被用于確定細胞凋亡的誘導效應。HIF-α表達分析。如在實施例1中所示，在濃度為200微摩爾時，在低氧條件下培養的檸檬酸產生細胞中，氯尼達明降低HIF-1α的表達/積累(正如在細胞核組分中所測定的)近乎2倍，并且，在更高的氯尼達明濃度下，氯尼達明降低HIF-α表達/積累多于5倍(即，大于10倍)。因此，在本發明的一些實施方案中，與不存在氯尼達明時的培養物相比，在低氧條件下培養的LNCaP細胞中，能量消散劑以至少大約2倍，至少大約5倍，或者至少大約10倍，降低了HIF-1α的表達(防止HIF-1α的積累)。在對應于實施例1的附圖中，氯尼達明對前列腺細胞中的HIF-1α表達的影響，在LNCaP細胞中看起來比與PC3細胞更深刻，細胞培養在低氧條件下(氧的水平＜0.1％)。根據本發明用于BPH治療的一些氯尼達明類似物，可能具有相似的效應。這些實驗的結果不是確定地建立由氯尼達明引起的HIF-1α抑制作用的機制或者特異性。氯尼達明對HIF-1α水平的效應，可以全部地或者部分地歸因于蛋白質合成的普遍抑制，這被Floridietal.，1985描述為氯尼達明的一種活性。氯尼達明對HIF-1α水平的效應，也可能全部地或者部分地，歸因于氯尼達明對線粒體氧利用的影響。Hagenetal.2003報道，HIF-1α是組成性地被合成，但在氧存在下被降解。可能的是，在低氧情況下，由氯尼達明造成的對線粒體呼吸作用的抑制減少了由線粒體引起的氧消耗。這反過來可能導致氧依賴性酶，脯氨酰水解酶的活性增加，該酶在HIF-1α降解通路中起作用。除了如上面描述的那些體外分析，能量消散劑可以在體內被評價，用于本發明的用途。作為例子并且不是窮盡的，合適的分析方法包括前列腺功能和活性的測量，包括前列腺功能的體內測量和前列腺大小的體內測量。前列腺功能的體內測量。一種化合物對前列腺功能的影響，具體來說，對呼吸作用的影響，可以在給予該化合物之后，通過監測前列腺組織代謝(例如，由動物前列腺生成的ATP、檸檬酸、和/或乳酸產量的減少)而予以評定。一些在本發明中有用的能量消散劑將是可檢測的。應用磁共振光譜學(magneticresonancespectroscopy，MRS)技術或者其它方法，在動物中，包含人類、非人類靈長類動物、或者其它哺乳動物，體內直接監測和/或間接監測ATP、檸檬酸、和/或乳酸水平。對于MRS分析的描述，參見，例如，NarayanandKurhanewicz，1992；Kurhanewiczetal.，1991；Thomasetal.，1990。前列腺大小的體內測定。應用標準方法(例如，對于人類應用超聲照相，和在動物中應用超聲照相和/或器官重量比較)，在給予該化合物后，可以評定化合物對前列腺大小的效應。分析可以在人類，或者，更經常地，在健康的非人類動物或者在猴子、狗、大鼠、或者其它BPH動物模型中操作(參見Jeyarajetal.，2000；Leeetal.，1998；Mariottietal.，1982)。一些在本發明中有用的能量消散劑會可檢測地減少前列腺的大小。各種各樣能量消散劑中的任何一種，可以被用于BPH的治療。在一種實施方案中，能量消散劑是己糖激酶的抑制劑。在一種實施方案中，能量消散劑是葡萄糖激酶的抑制劑。在一種實施方案中，能量消散劑是磷酸果糖激酶的抑制劑。在一種實施方案中，能量消散劑是醛糖的抑制劑。在一種實施方案中，能量消散劑是磷酸甘油酸激酶的抑制劑。在一種實施方案中，能量消散劑是烯醇化酶的抑制劑。在一種實施方案中，能量消散劑是丙酮酸激酶的抑制劑。在一種實施方案中，能量消散劑是丙酮酸脫氫酶的抑制劑。在一種實施方案中，能量消散劑是乳酸脫氫酶的抑制劑。在一種實施方案中，能量消散劑是3-磷酸甘油醛脫氫酶的抑制劑。在一種實施方案中，能量消散劑是葡萄糖轉運的抑制劑。在一種實施方案中，能量消散劑降低葡萄糖轉運蛋白水平(glucosetransporterlevels)，或者防止其水平升高。在一種實施方案中，能量消散劑是2-脫氧-D-葡萄糖(2-脫氧葡萄糖或者2-DG)。在一種實施方案中，能量消散劑是2-脫氧葡萄糖的一種類似物。在一種實施方案中，能量消散劑是2-脫氧-D-葡萄糖四乙酸或者5-硫-葡糖。在一種實施方案中，能量消散劑是棉子酚(或棉酚，gossypol)。在一種實施方案中，能量消散劑是棉子酚類似物。在一種實施方案中，能量消散劑是3-溴丙酮酸。在一種實施方案中，能量消散劑是一種3-溴丙酮酸類似物。在一種實施方案中，能量消散劑是氯尼達明的一種類似物。在一種實施方案中，能量消散劑是氯尼達明。在一種實施方案中，能量消散劑是托尼達明。在一種實施方案中，能量消散劑是草氨酸(oxamate)。在一種實施方案中，能量消散劑是碘乙酸(iodoacetate)。在一種實施方案中，能量消散劑是apoptolidin。在一種實施方案中，能量消散劑是apoptolidin的一種類似物。在一種實施方案中，能量消散劑具有小于1000的分子量，任選地小于500。在一種實施方案中，能量消散劑是合成的，在自然界中不發生。在一種實施方案中，能量消散劑不同于己糖激酶抑制劑。在一種實施方案中，能量消散劑不同于葡萄糖激酶抑制劑。在一種實施方案中，能量消散劑不同于磷酸果糖激酶抑制劑。在一種實施方案中，能量消散劑不同于醛糖抑制劑。在一種實施方案中，能量消散劑不同于磷酸甘油酸激酶抑制劑。在一種實施方案中，能量消散劑不同于烯醇化酶抑制劑。在一種實施方案中，能量消散劑不同于丙酮酸激酶抑制劑。在一種實施方案中，能量消散劑不同于丙酮酸脫氫酶抑制劑。在一種實施方案中，能量消散劑不同于乳酸脫氫酶抑制劑。在一種實施方案中，能量消散劑不同于3-磷酸甘油醛脫氫酶抑制劑。在一種實施方案中，能量消散劑不同于葡萄糖轉運抑制劑。在一種實施方案中，能量消散劑不降低葡萄糖轉運蛋白水平，或者防止其水平升高。在一種實施方案中，能量消散劑不是HIF-1α的直接或者間接抑制劑。在一種實施方案中，能量消散劑不同于2-脫氧葡萄糖(2-deoxyglucose)。在一種實施方案中，能量消散劑不同于2-脫氧葡萄糖(2-deoxyglucose)的一種類似物(ananolog)。在一種實施方案中，能量消散劑不同于2-脫氧-D-葡萄糖四乙酸(2-deoxy-D-glucosetetraacetate)。在一種實施方案中，能量消散劑是不同于5-硫-葡糖。在一種實施方案中，能量消散劑不同于棉子酚。在一種實施方案中，能量消散劑不同于一種棉子酚類似物。在一種實施方案中，能量消散劑不同于3-溴丙酮酸。在一種實施方案中，能量消散劑不同于一種3-溴丙酮酸類似物。在一種實施方案中，能量消散劑不同于氯尼達明。在一種實施方案中，能量消散劑不同于托尼達明。在一種實施方案中，能量消散劑不同于一種氯尼達明類似物。在一種實施方案中，能量消散劑不同于(順)烏頭酸酶抑制劑。在一種實施方案中，能量消散劑不同于草氨酸。在一種實施方案中，能量消散劑不同于碘乙酸。在一種實施方案中，能量消散劑不同于apoptolidin。在一種實施方案中，能量消散劑不同于一種apoptolidin類似物。在一些實施方案中，能量消散劑不同于鋅，或者不同于任意在2004年1月1日已知的、用于BPH治療用途的藥劑之外的任何藥劑，而不考慮該藥劑是否已知可以抑制糖酵解或者損害線粒體功能。盡管作為例證，廣泛的各種各樣的能量消散劑已在此被描述，應該理解的是，適合于根據本發明應用的、用于BPH的治療或者預防或者緩解其癥狀的能量消散劑，將是藥學上可接受的，即在應用給藥的劑量和制劑的情形下，對對象將是無毒的；或者與該藥劑相關的任何毒性所致有害效應(例如，副作用)將被對對象的益處所超過。用于藥學上可接受藥劑的鑒定和評價的方法，在醫學領域和藥學領域是已知的。例如，應用細胞培養分析和動物研究，可以估計治療指數(即，治療效應與毒性效應的劑量比，其可以表示為ED50/LD50之比)。在一些實施方案中，能量消散劑是上述指明的化合物的藥學上可接受的鹽。藥學上可接受的鹽(pharmaceuticallyacceptablesalts)包括用酸加成的鹽，以及用帶有堿的鹽。帶有堿的鹽是，例如，堿金屬或者堿土金屬，如鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽或者鎂鹽；或者銨鹽，如帶有氨或者合適的有機胺，例如，二乙胺、雙-(2-羥乙基)-胺、或者三-(2-羥乙基)-胺的那些鹽。用于形成酸加成鹽的合適的酸是，例如，無機酸，例如氫氯酸、氫溴酸、硫酸或者磷酸；或者有機酸，例如有機磺酸，如如苯磺酸、4-甲苯磺酸或者甲烷磺酸，和有機羧酸，如乙酸、乳酸、棕櫚酸、硬脂酸、蘋果酸、馬來酸、延胡索酸、酒石酸、抗壞血酸或者檸檬酸。在一些實施方案中，能量消散劑是上述指明的化合物的前體藥物，或者藥學上具有活性的代謝物的前體藥物。前體藥物形式(prodrugforms)在此領域中是已知的，并且包括上面所列舉化合物的酯、酰胺和其他衍生物。4.給予能量消散劑提供益處的患者相應地，向被診斷為BPH，或者顯示了BPH癥狀的人類受試者給予一種能量消散劑，提供了如下益處，諸如一個或者多個癥狀的嚴重程度或者發生頻率的減少，在前列腺的大小上或者在增大速度上的減少，可察覺的生活質量的改善，和BPH的其它表現向更正常狀態的逆轉。進一步地，向需要預防BPH的人類受試者給予一種能量消散劑，提供了如下益處，如在受試者中，BPH的出現、再出現或者進展的可能性降低。對讀者來說，顯而易見的是下面的內容僅僅是為了方便而被組織成小節的，并且在任何一個組織化小節中的公開內容是適用于此處公開的本發明的任何一個方面的。在本發明的一個方面，向需要BPH治療的對象給予一種能量消散劑。如在此所應用，“需要對BPH治療的對象(asubjectinneedoftreatmentforBPH)”是診斷為BPH的男人。可以應用技術上已知的方法和標準來診斷BPH。最普通的測驗是直腸指診檢查，在該檢查中，醫生確定前列腺是否為正常大小和硬度。其它的診斷性分析包括尿流速度檢驗，排尿后的殘留尿體積測定(例如，通過腹部顫動，殘余尿引流，X-射線尿道造影術，或者超聲照相)，AmericanUrologicAssociationSymptomIndex(AUASI；Barryetal.，1992)或者InternationalProstateSymptomScore(IPSS；Barryetal.，2001)中的中度癥狀或者嚴重癥狀評分，和在此領域中已知的其它檢驗。BPH治療的希望的臨床結果包括，但不限于，BPH的一個或者多個癥狀的緩解或者改善(參見下面)；在前列腺大小上的減少(參見下面)；與開始治療前的基線測量值相比，在AUASI或者IPSS評分上的減少(例如，減少3分或者更多，如減少5分或者更多)；AUASI或者IPSS評分小于8；血清PSA減少至少大約20％，如至少大約40％；血清PSA小于4，如小于2；尿動力學參數的改善；和其它被治療醫生認可的、作為受試者BPH的嚴重程度降低的標志的希望結果。對治療的反應的評價，可以在首次給予該藥物后的任何一個時間進行。例如，在開始治療后的大約30天、大約60天、或者大約90天時進行評價。替代地，可以在開始治療后的大約6個月、12個月、18個月、24個月或者更多月進行評價。替代地，可以在治療的療程結束之后，在少于大約30天、大約30天、大約60天、或者大約90天時，進行評價。在一個相關的方面，向展現出BPH相關癥狀的人類對象給予一種能量消散劑，以減少該癥狀的發生頻率和嚴重程度。如在此所應用，“BPH相關癥狀(asymptomassociatedwithBPH)”是指下列癥狀中的任何一個或者多個(1)尿急；(2)尿液的尿末滴瀝；(3)尿頻；(4)夜尿；(5)弱/慢尿流；(6)不充分排空感；(7)尿中斷；(8)尿變形；(9)排尿困難；(10)血尿；(11)急性尿潴留；(12)尿路感染；(13)尿失禁。根據本發明的方法給予一種能量消散劑，典型地，引起這些癥狀中的一個或者多個的嚴重程度的降低，或者消除；通常地，或者引起所有這些癥狀的嚴重程度的降低，或者消除；并且經常引起所有這些癥狀的消除。在另一個相關的方面，給予一種能量消散劑，以在需要減少前列腺大小的人類受試者中減小前列腺大小。如在此所應用，“需要減小前列腺大小的受試者(asubjectinneedofreductionofprostatesize)”是指具有增大的前列腺的男人，增大的前列腺是通過下列方法測定的(1)成像(例如，超聲照相法，磁共振成像)和/或(2)直接或者間接由前列腺壓迫尿道引起的一個或者多個體征或者癥狀(例如，包括此處討論的BPH癥狀)。血清PSA(前列腺特異抗原(prostatespecificantigen))的減少，也是前列腺體積減少的一個有用代表。盡管在個體間不同，增大的前列腺在大小上經常超過30克、40克或者50克。由于一些因素，包括在治療起始時的增大程度，前列腺大小的減少程度將從受試者到受試者而變化，但是會典型地減少至少大約10％體積，更經常地減少至少大約20％體積，有時減少大約40％體積，有時減少大約50％體積，并且有時，觀察到前列腺大小減少甚至超過50％。這種減少可以通過成像或者其它方法被測定。在一些情況下，血清PSA也可以作為前列腺體積的一個有用代替而予以應用。在一個相關的方面，向血清PSA水平大于2ng/ml的受試者給予一種能量消散劑。PSA僅由前列腺的上皮細胞分泌。對于患有BPH的男人，與具有較低PSA水平的男人相比，較高的PSA水平提示出在上皮細胞增殖與基質細胞增殖之間存在一個相對較高的比值。本發明提供了適合應用于確定將會對一種能量消散劑的治療順利地起反應的患者的一些診斷方法。因此，在PSA水平大于2ng/ml的對象中，此治療可以提供特別好的結果。從而，通過鑒定具有血清PSA值大于2ng/ml的受試者，預期從本發明方法能最顯著受益的受試者可以被從患有BPH的男性人群中選出。在本發明的一種實施方案中，受試者具有大于大約4ng/ml的PSA水平。由于與患有BPH相比，較高的PSA水平更密切地與前列腺癌相關，所以，在一種實施方案中，被選擇出接受一種能量消散劑療法的受試者具有小于大約10ng/ml的PSA水平。在本發明的一個方面，向會受益于BPH預防的受試者給予一種能量消散劑。在一個例子中，“會受益于BPH預防的受試者(asubjectwhowouldbenefitfromprophylaxisofBPH)”是男性，以前經手術治療、經尿道微波熱療、經尿道針消融術、經尿道電氣化術、激光治療、氣囊擴張術、前列腺尿道支架、藥物治療、或者其它治療而治療過BPH，并且目前未被診斷患有BPH或者具有BPH癥狀。在另一種例子中，會受益于BPH預防的受試者是一名男性，由于年齡關系而處于發生BPH的提高的風險中(例如，大于40歲、大于50歲、大于60歲、或者大于70歲的男人)。在另一種例子中，會受益于BPH預防的受試者是一名男性，其無癥狀，或者具有十分輕微的癥狀，以致于不可以明確地下BPH的診斷，但他具有升高的血清PSA水平(例如，PSA＞2ng/ml，或者，在一些情況下，＞4ng/ml)。由前述可以清楚的是，在一些情況下，被給予一種能量消散劑的受試者是一名男性，他以前已經接受過BPH治療，而在其它情況下，受試者是一名男性，以前沒有接受過BPH治療。在本發明的一種實施方案中，需要治療或者預防BPH的受試者，不是也處于癌癥治療中。在一種相關的實施方案中，需要針對BPH進行治療或者預防的受試者不曾被診斷為患有癌癥。在一種實施方案中，需要BPH治療或者預防的受試者不患有癌癥。在一種實施方案中，需要BPH治療的受試者忠有一種不是前列腺癌的癌癥，但是不患有前列腺癌。如此處所應用，“癌癥(cancer)”具有其普通的醫學意義，是指惡性腫瘤(包括頭部癌癥、頸部癌癥、前列腺癌和乳腺癌，白血病和淋巴瘤)，通常的特征為無性系形成能力(clonality)、自主性(autonomy)、退行發育(anaplasia)、和轉移(metastasis)(參見Mendelsohn，1991)。在一種實施方案中，本發明提供了一種在患者中治療BPH的方法，通過向該患者給予一種能量消散劑而實施。在一種相關的實施方案中，本發明提供了一種用于治療BPH的方法，包括(a)向診斷為BPH的患者給予一種能量消散劑，和(b)確定在所述的患者中，BPH的一個表現或者多個表現是否被減輕。在一種實施方案中，本發明提供了一種治療BPH的方法，通過(a)在一位患者中診斷BPH，(b)向該患者給予一種能量消散劑，和(c)確定在所述的患者中，BPH的一個表現或者多個表現是否被減輕。在前述的實施方案中，任選地，受試者未被診斷為癌癥，或者處于癌癥的治療中，任選地具有PSA＞2ng/ml；任選地具有的PSA＞2ng/ml和＜10ng/ml。在另一方面，本發明提供了一種方法，需要(a)廣告一種能量消散劑用于BPH治療的用途，和(b)向個體出售一種用于BPH治療用途的能量消散劑。在一種實施方案中，該廣告提及了一個商標，該商標等同于一種能量消散劑產品，所出售的能量消散劑由相同的商標區分。應該理解到，能量消散劑被出售給的個體包括法人(公司)和類似個體，并且“向個體出售BPH用于BPH的治療用途(sellingBPHtoindividualsforusefortreatmentofBPH”包括向，例如，醫療機構出售以向患者銷售，從而用于BPH治療。5.給予的劑量、途徑、時間表和持續時間各種途徑、給藥時間表、和劑量形式適于治療和預防BPH的能量消散劑的給予。對于普通的技術實踐人員，在閱讀本發明的公開內容后，合適的給藥時間表和給藥方式將是明顯的，和/或，可以應用常規的藥理學方法來確定。給予能量消散劑的劑量、時間表和持續時間將取決于各種因素。首要的因素，當然，是一種具體藥劑的選擇。其它的重要因素包括對象的年齡、體重、和健康狀況；BPH癥狀的嚴重程度，如果有的話；還包括對象的醫療史、聯合治療、治療目標(例如，治療或者預防)；給予藥物的優選方式；應用的制劑；患者對藥物的反應；和類似因素。借助使用該藥劑治療一個另外適應癥的以前經驗(例如，氯尼達明被給予以治療癌癥，是以如下劑量被給予的150mg劑量，每日三次，持續大約一個月的時期)，和從人和其它哺乳動物的新研究中，提供出關于給藥的指導性方針。細胞培養研究常常被用于本領域，以使劑量最優化；并且此處公開的分析可以被用于確定這種劑量(例如，確定在前列腺上皮細胞中、而不是在前列腺基質細胞或者其它細胞中誘導出明顯細胞凋亡的劑量)。對于具體藥劑，科學文獻(包括，例如，此處引用的專利和非專利出版物)提供了關于劑量、制劑、和劑量形式的相當多的指導，適合于特定藥劑或者藥劑的特定種類，例如，已知的或者預測的能導致血清中該藥劑(或者代謝物)的生物有效血清水平的劑量。例如，可以給予一種能量消散劑，用于BPH的治療，該能量消散劑的劑量，以被治療患者體重的每kg而言，在大約1mg至大約2g的范圍內，給予多于一次的劑量。在一種實施方案中，給予一種能量消散劑，劑量范圍，以相對于被治療患者體重的每kg而言，是大約1mg至大約5。在另一種實施方案中，給予一種能量消散劑，劑量范圍以被治療患者體重的每kg給予大約100mg至大約1g。在一些其它的實施方案中，給予一種能量消散劑，劑量以被治療患者體重每kg對應于大約50mg至250mg給予。在另一種實施方案中，治療有效量是大約50mg/kg至大約500mg/kg。用于示例性說明，可以向患者每日給予，或者每隔一日給予，或者每周一次給予一種能量消散劑的治療有效量。通常地，藥劑的多次給予被應用。取決于由實施者所選擇的劑量，和患者的方便要求，全部劑量可以每日一次給予，或者該劑量可以以多個較小的劑量，在一天的時間過程中給予。例如，該劑量可以被分成兩個較小的劑量，每日兩次被給予；或者被分為三個較小的劑量，并且每日三次被給予。另外地，劑量可以被合并，并且每隔一日一次，或者甚至以更少的頻率被給予，但是在任何情況下，劑量是在一段時間期間內被重復給予的。為了最佳的治療益處，治療有效量的給予持續多日，典型地，持續至少連續5天；并且經常持續至少一周，并且經常持續數周或者更長。在一種實施方案中，給予能量消散劑每日一次(qday)，每日兩次(bid)，每日三次(tid)，或者每日四次(qid)，或者每隔一日一次(qod)，或者每周一次(qweek)，并且，治療被持續一段時期，范圍是從三天至兩周或者更長。在一種實施方案中，治療被持續1至3個月。在另一種實施方案中，治療被持續1年。因此，可以給予患者能量消散劑1個星期、1個月、2個月、3個月、6個月，或者1年或者更長。對于預防性應用，可以不確定地持續治療，貫穿患者的一生。如在醫學中所熟知的，如果觀察到毒性，或者為了患者的方便，治療可以被臨時地中止，而不背離本發明的范圍。用于示例并且不是用于限制，本發明提供了一種含有能量消散劑的藥物制劑，適合于口服給予(包括片劑，膠囊和丸劑)，并且含有該化合物，在1至100mg之間；并且在另一種實施方案中，含有的該化合物在1至10mg之間。在另一種實施方案中，制劑含有的該化合物在200至1000mg之間，并且在另一種實施方案中，含有的該化合物在500至1000mg之間。另外，本發明提供了該化合物的控釋和緩釋制劑，允許每日一次口服給藥。本發明的這種緩釋制劑(包括片劑、膠囊和丸劑)，包含該活性化合物，在1mg至3g之間；在各種各樣的替換性實施方案中，包括一種制劑，含有的該化合物在1mg至10mg之間；包括另一種制劑，含有的該化合物在150mg至500mg之間；和另一種制劑，包括的該化合物在750mg至2g之間。在治療和預防應用中，能量消散劑可以，在長達數月或者數年的期間內，被以單一的一次或者多次給予。在本發明的一種實施方案中，向有癥狀的(例如，正經歷排尿困難)BPH患者給予該藥劑，僅僅至癥狀減輕或者消失，并且其后停止治療，除非癥狀不重新出現和直至癥狀重新出現。當癥狀重新出現時，重新開始給予該藥劑。在另一種實施方案中，治療在癥狀消失之后持續，或者治療減少至可接受的目標水平，至少持續一段時間，如一周、兩周、一個月或者幾個月。在另一種實施方案中，向有癥狀的受試者給予藥物，以防止癥狀的發展或者再發生(即，預防性地給予)。這段時期可以包括，TID持續給藥，持續2至6個月或者更長，或者僅1至8周。本發明的一些藥劑，如氯尼達明及其類似物，150mg的劑量，TID口服，持續7-30天，可以產生治療BPH中的全部治療益處，同時限制或者消除不希望的副作用。在又一種實施方案中，根據本發明方法，通過向BPH患者給予劑量高得多的化合物、持續較短時期(即，較少地給予；在一種實施方案中，一種代謝抑制劑的單一一次給予，足以提供BPH癥狀的緩解)來治療BPH。當用于口服輸送的制劑配制時，優選的劑量形式包括丸劑、片劑、膠囊、囊片和類似形式，任選地用于持續釋放而被制劑。用于經口給予的其它適合的形式包括，含片劑、酏劑(elixirs)、懸浮液、糖漿、速釋片(wafers)、錠劑和類似物。也預期了其它的給予方式，包括腸道外給予、噴霧吸入、經皮、直腸、前列腺內注射(例如，包含EA的微顆粒)和其它路徑。就氯尼達明來說，代表性的給藥時間表，在共同的、懸而未決的美國專利申請號10/＿＿(題目是“TreatmentOfBenignProstaticHypertrophy，”律師對本案的編號(attorneydocketno.)54492-2000100，2004年1月16日提交)中被描述。在一種實施方案中，劑量形式是150mg單位劑量形式，在商標名DoridaminaTM下上市(例如，150mgTID口服，大約30天)。其它預期的給藥方案包括，用于示例并且不是用于限制，“低劑量”(例如，在1-300mg/日、5-300mg/日、5-70mg/日、1-25mg/日、20-45mg/日、40-65mg/日、40-70mg/日、50-100mg/日、50-200mg/日、和50-300mg/日的每日總劑量范圍內給藥)，“高劑量”(例如，每日總劑量大于0.5g，如在0.5-5g/日、0.5-3g/日、0.5-1g/日、和1-3g/日、或者更高劑量)，和“中間劑量”(例如，大于300并且小于500mg/天的劑量，如在＞300-400或者400＜500范圍內的劑量，例如，450mg/日)。就2-脫氧葡萄糖(2-DG)和其類似物(2-DGA)來說(例如，如那些在圖2中所示的物質)，代表性的給藥時間，在共同的、懸而未決的美國專利申請號10/＿＿(題目是“TreatmentOfCancerWith2-Deoxyglucose，”律師對本案編號(attorneydocketno.)54492-20004.00，2004年1月9日提交)中被描述。例如，可以給予2DG和2DGA用于BPH治療，劑量范圍是，以被治療患者每公斤體重而言，給予2-DG或者2-DGA大約1mg至大約2g。在另一種實施方案中，給予2-DG或者2-DGA的劑量范圍是，以被治療患者每公斤體重而言，給予2-DG或者2-DGA大約10mg至大約1g。在一些其它的實施方案中，給予2-DG或者2-DGA的劑量范圍，以被治療的患者每公斤體重而言，給予2-DG或者2-DGA大約50至250mg。在另一種實施方案中，治療有效量是大約25mg/kg至大約150mg/kg。用于示例，向患者給予2-DG或者2-DGA的治療有效量，是每日給予，或者每隔一日一次給予，或者每周一次給予，并且應用藥物的多次給予。取決于由實施者選擇出的劑量，和患者的方便，全部劑量可以每日一次給予，或者該劑量可以以多個較小的劑量，在一天的時間過程中給予。例如，該劑量可以被分成兩個較小的劑量，并且每日兩次被給予；或者被分為三個較小的劑量，并且每日三次被給予。另外地，劑量可以被聯合，并且每隔一日一次，或者甚至更少的頻率被給予，但是在任何情況下，劑量是在一段時間期間被重復給予的。對于最佳的治療益處，治療有效量的給予持續多日，典型地，持續至少連續5天，并且經常持續至少一周，并且經常持續數周或者更長。在一種實施方案中，給予2-DG或者2-DGA每日一次(qday)，每日兩次(bid)，每日三次(tid)，或者每日四次(qid)，或者每隔一日一次(qod)，或者每周一次(qweek)，并且，治療被持續一段時期，范圍是從3天至2周或者更長。在一種實施方案中，治療被持續1至3個月。在另一種實施方案中，治療被持續1年。因此，可以給予患者2-DG或者2-DGA，為期1周、1個月、2個月、3個月、6個月、或者1年或者更長。對于預防性應用，可以不確定地持續治療，貫穿患者的一生。如在醫學中所熟知的，如果觀察到毒性，或者為了患者的方便，治療可以被臨時地中止，而不背離本發明的范圍。應該理解的是，這些給藥時間是用于示例性地說明的，而不是用于限制，并且，在治療過程中，例如，根據患者對療法的反應情況，給藥時間表可以改變。6.治療聯合能量消散劑可以與其它藥劑或者過程療法(prodedures)聯合起來施用給BPH患者，所述其它藥劑包括能量消散劑和非能量消散劑，所述過程療法試圖治療BPH，以便改善BPH的癥狀、加強能量消散劑的效應、或者提供其它治療的益處。藥劑“與......聯合”(anagent“incombinationwith”)的給予包括，平行給予(parralleladministration)(在一段時期內，向患者給予兩種制劑，例如隔天給予EA和坦索羅辛(tamsulosin)，持續1個月)，共同給予(co-administration)(其中在大約相同時間給予藥劑，例如，在彼此大約30分鐘的時間內)，和共制劑(co-formulation)(其中藥劑被組合或者混合成單一劑量形式，適于口服或者腸道外給予)。與能量消散劑聯合給予的代表性藥劑的例子(或者是能量消散劑的聯合，諸如，例如，氯尼達明和2-DG的聯合)，包括但不限于，鋅、α-阻斷劑、5-α-還原酶抑制劑、和植物提取物(參見下面)。如上所述，多個不同的能量消散劑可以被用于聯合使用中。鋅如上面所討論的，前列腺的分泌型上皮細胞中的高鋅濃度抑制m-順烏頭酸酶(線粒體-順烏頭酸酶)，增加該組織上對關于能量生成的糖酵解的依賴性。根據本發明的方法，在一些患者中，共同給予鋅(例如，氯化鋅、葡萄糖酸鋅、硫酸鋅、醋酸鋅、天門冬氨酸鋅(zincaspatate)、檸檬酸鋅、甘油酸鋅、氧化鋅、吡啶甲酸鋅(zincpicolinate)，和其它含鋅化合物)和本發明的一種藥物組合物，可能是有益的，以便最大化該治療的效能。用于示例而不是作為限制，可以給予15-300mg/日的鋅，典型地，給予30-50mg/日的鋅。α-腎上腺素能阻斷劑α-阻斷劑緩解BPH的一些癥狀，而不治療基礎疾病(underlyingdisease)。這些制劑通過松弛膀胱頸部的肌肉和前列腺的肌肉，減輕尿道的壓力起作用。代表性的α-阻斷劑包括多沙唑嗪doxazosin(Cardura)、特拉唑嗪terazosin(Hytrin)、坦索羅辛tamsulosin(Flomax)、阿夫唑嗪alfuzosin(Xatral)、和哌唑嗪prazosin(Hypovase)。在本發明的一種實施方案中，將一種α-阻斷劑與一種能量消散劑聯合給予，以治療BPH。在另一種實施方案中，將α-阻斷劑以較“標準劑量”(在不存在與能量消散劑共同給予時，以劑量形式給予的量)更低的劑量(用量)或者更少的頻率(例如，隔天而不是每天)給予。5-α-還原酶抑制劑5-α-還原酶抑制劑抑制睪酮向雙氫睪酮2(DHT)的轉變，雙氫睪酮2是有助于前列腺增大的一種雄激素。代表性的5-α-還原酶抑制劑是非那利得finasteride(Proscar)。在本發明的一種實施方案中，將5-α-還原酶抑制劑與一種能量消散劑聯合給予，以治療BPH。在另一種實施方案中，將5-α-還原酶抑制劑以較“標準劑量”更低的劑量(數量)或者更少的頻率(例如，隔天而不是每天)給予。植物。鋸齒矮棕櫚(SawPalmetto(鋸棕櫚(Serenoarepens)))或者其提取物，或者非洲刺李(PygeumAfricanum)或者其提取物，可以和一種能量消散劑聯合給予，用于獲得BPH治療中的治療益處。過程療法(procedures)。此外，可以將EA與用于BPH治療的過程療法聯合在一起給予，或者在BPH治療的過程療法之前給予，用于BPH治療的過程療法包括，手術(經尿道前列腺切除術；經尿道前列腺切割術；或者開放式前列腺切除術)、激光治療、經尿道微波熱療、氣囊擴張術、前列腺尿道支架放置、經尿道針刺消融、前列腺的經尿道電汽化術，或者其它非藥物治療。Hif-1α抑制劑。在一些實施方案中，將本發明的一種能量消散劑與一種Hif-α抑制劑聯合，向BPH患者給予。如無其它指出，用于此處的“Hif-1α”是指一種藥劑，其引起前列腺細胞中的Hif-1α水平的降低，但不特異地干擾該細胞中的糖酵解或者線粒體功能。代表性的Hif-1α抑制劑包括，但不限于，P13激酶抑制劑；LY294002；雷帕霉素(rapamycin)；組蛋白脫乙酰酶抑制劑，如[(E)-(1S，4S，10S，21R)-7[(z)-亞乙基]-4，21-二異丙基-2-噁-12，13-二硫代-5，8，20，23-四氮雜雙環-[8，7，6]-二十三碳-16-烯-3，6，9，22-戊酮(FR901228，depsipeptide(縮肽))；熱休克蛋白90(Hsp90)抑制劑，如格爾德霉素(geldanamycin)，17-烯丙胺-格爾德霉素(17-AAG)，和其它格爾德霉素類似物，和根赤殼菌素和根赤殼菌素衍生物如KF58333；染料木素(genistein)；茚酮(indanone)；staurosporin；蛋白激酶1(MEK-1)抑制劑，如PD98059(2’-氨基-3’-甲氧基黃酮)；PX-12(1-甲基丙基2-咪唑基二硫化物)；pleuritinPX-478；1，4-二氧化喹喔啉；丁酸鈉(NaB)；sodiumnitropurruside(SNP)和其它NO供體；微管抑制劑，如新生霉素，panzem(2-甲氧雌二醇或者2-ME2)，長春新堿，紫杉烷類(taxanes)，埃坡霉素(epothilones)，discodermolide，和前述物質的任何一種衍生物；香豆素；巴比土酸和硫代巴比土酸類似物；喜樹堿；和YC-1，一種在Biochem.Pharmacol.，15Apr2001，61(8)947-954中被描述的化合物，此處并入作為參考文獻，和其衍生物。在本發明的一個方面，Hif-1α抑制劑可以被單獨給予(不與本發明的能量消散劑聯合使用)，以治療患有BPH的對象。7.分析方法(assays)在一個方面，本發明提供了用于確定化合物對BPH治療的有用性的方法，提供了用于鑒定在BPH治療中有用的化合物的方法。在一種實施方案中，該方法涉及(a)用該化合物接觸檸檬酸產生細胞(citrate-producingcell)；(b)用該化合物接觸檸檬酸氧化細胞(citrate-oxidizingcell)；和(c)檢測，與檸檬酸氧化細胞相比，所述接觸對檸檬酸產生細胞的差異效應。一個差異效應(differentialeffect)(例如，如此處所描述的)提示，該藥劑對于BPH的治療可能是有用的。之后，可以實施進一步的和確認性的分析。該方法可以在體外方便地被實施。在一個相關的方面，本發明提供了一種方法，用于確定化合物對BPH治療的有用性，通過(a)用該化合物接觸在低氧條件下培養的檸檬酸產生細胞；和(b)鑒定化合物為對BPH治療是有用的，如果該接觸導致在HIF-1α表達上(在細胞核組分中被測定)的劑量依賴性減少，減少至少大約2倍，有時減少至少大約5倍，和有時減少至少大約10倍。為數不少的針對HIF-1α表達的分析是已知的。通常地，免疫分析(例如，免疫印跡和酶聯免疫吸附試驗(ELISAs))是最方便的。用于這種類型的分析的試劑和方法，在此領域是熟知的。其它蛋白質的表達可以被測定(參見，例如，圖7)，以便獲得相對表達值。這些方法的開發，部分地，是基于如下發現能量消散劑氯尼達明誘導了前列腺細胞的細胞凋亡；以及，與檸檬酸氧化細胞相比，在檸檬酸產生細胞中的此誘導實質上更加顯著，和氯尼達明降低前列腺細胞中的HIF-1α的表達(積累)，特別是在低氧條件下。各種各樣的細胞和分析方法可以用于本發明的方法中。檸檬酸產生細胞和檸檬酸氧化細胞類型是已知的，并且可以應用
技術領域：
中已知的分析方法和標準來鑒定。參見，例如，CostelloandFranklin，1997，Urology503-12和Franklinetal.，1995，Endocrine3603-607。適合的產檸檬酸細胞包括前列腺上皮細胞的原代培養物，和某些來自前列腺上皮細胞的業已建立的細胞系(例如，LNCaP細胞)。適合的氧化檸檬酸的細胞，包括前列腺基質細胞的原代培養物，和某些來自前列腺細胞的業已建立的細胞系(許多惡性的前列腺上皮細胞經歷明顯的代謝轉化，從檸檬酸產生轉變為檸檬酸氧化，參見，Franklinetal.；1995，Endocrine3603-607)。在一種實施方案中，檸檬酸產生細胞是LNCaP細胞，并且檸檬酸氧化細胞是PC-3細胞。人前列腺上皮細胞和前列腺基質細胞的原代培養物是商業上可得到的(例如，細胞可以從CambrexBioScienceRockland，Inc.，191ThomastonStreet，Rockland，Maine04841被得到)，并且，可以根據熟知的組織培養方法而制備(參見，例如，Peehl，DM，CultureofEpithelialCellsProstateCulture，1992，159-180)。源自前列腺的建系細胞系，可以從美國典型培養物保藏中心AmericanTypeCultureCollection(ATCC)，P.O.Box1549，Manassas，VA20108USA得到，或者根據熟知的方法被制備。在另一種實施方案中，細胞選自重組細胞組，這些重組細胞選自下列(i)一種細胞，任選地是一種非前列腺細胞的細胞，其已被修飾以便積累鋅至抑制m-順烏頭酸酶的水平，和是一種非前列腺細胞的細胞，其不能代謝檸檬酸。在一種實施方案中，該細胞是一種已被修飾而不表達m-順烏頭酸酶或者僅表達其失活突變體的細胞。在一種實施方案中，細胞是人細胞(盡管也可以應用源于其它哺乳動物的細胞)。在一種實施方案中，細胞已通過修飾而被永生化，因此，端粒酶表達成為組成型的。在一種典型的分析中，用測試化合物(testcompound)接觸細胞，通常在一個濃度范圍內(例如，10、50、100、200、400、600和800μM)。通過向培養細胞的培養基中加入該化合物，或者使用發生接觸的任何其他方法，方便地實現接觸。在一種實施方案中，該化合物，處于載體(例如，脂質體載體)中或者溶劑中，被導入細胞中或者細胞培養物中。將被理解的是，正如通常應用在藥物篩選分析中，合適的對照(例如，陰性對照)和統計學方法被應用。分析可以在全細胞，細胞提取物或者，替代性地，在細胞核提取物中進行。如在下面的實施例中所公開的，已經發現，氯尼達明對檸檬酸產生細胞和檸檬酸氧化細胞的差異效應中的一些，在生長在低氧條件下的細胞中，是最驚人的。因此，在本發明的一些實施方案中，細胞在低氧條件下生長。例如，細胞可以在低的氧水平下被培養(例如，＜0.1％＝。通過在高細胞密度下培養，也可以導致低氧條件。差異效應的一個例子是，細胞凋亡的誘導在檸檬酸產生細胞中強于與之對比的檸檬酸氧化細胞。在一種實施方案中，差異效應是，與檸檬酸氧化細胞相比，在檸檬酸產生細胞中的細胞凋亡誘導更強。在一種實施方案中，差異效應是至少大約10倍，或者至少大約20倍。用于細胞凋亡或者其標志物、或者它的其它指示物分析的為數眾多的分析方法，是已知的；并且可以被用于本分析方法中。用于舉例而不是受其限制，細胞凋亡分析包括，對caspase3的分析；對DNA片段化的分析(例如，DNA片段原位末端標記技術(TUNEL分析)，BDBiosciencesNo556381)，和磷脂酰絲氨酸外翻分析(AnnexinV分析)(例如，BDBiosciencesNo556547)。在對應于實施例1的附圖中，與PC-3細胞相比，在LNCaP細胞中，氯尼達明對前列腺細胞中HIF-1α表達的影響，看起來更加深刻，細胞是在低氧條件下培養的，氧水平＜0.1％。根據本發明，對BPH治療有用的一些能量消散劑可以具有相似的效應。因此，另一個可被測定的差異效應是，在檸檬酸產生細胞中，HIF-1α表達降低較在檸檬酸氧化細胞中更強，特別是在低氧條件下培養的細胞中。例如，該差異是至少大約2倍，有時是至少大約4倍。8.實施例實施例1氯尼達明降低前列腺細胞中的HIF-1α的表達本實施例顯示了，在源自人類前列腺癌轉移灶的兩種細胞系中，氯尼達明處理對HIF-1α表達的效應。LNCaP是檸檬酸產生細胞(ATTCNo.CRL-1740)，而PC3是檸檬酸氧化細胞(ATTCNo.CRL-1435)。參見Franklinetal；1995，Endocrine3603-607。細胞可以從美國典型培養物保藏中心AmericanTypeCultureCollection(ATCC)P.O.Box1549，Manassas，VA20108USA獲得。如圖3和圖4所示，氯尼達明處理降低了HIF-1α蛋白的水平，在細胞核(NE)和全細胞提取(WCE)制備物中進行檢測。抑制作用是劑量依賴性的，并且在常氧(僅PC3細胞)和低氧(LNCaP細胞和PC3細胞)情況下觀察。氯尼達明的效應對HIF-1α亞單位是特異性的，并且，除了在800μM濃度下，在測試的條件下，對肌動蛋白、caspase3、NF-κB、或IκBα的蛋白水平沒有可檢測到的抑制作用。然而，已經報道，氯尼達明是總體上抑制蛋白質的合成(參見Floridietal.，見上文)，并且此處呈現的結果不應該被解釋為確定的證據，確切地說明氯尼達明是HIF-1α的一種特異性抑制劑，或者氯尼達明在BPH治療中的治療學效應，全部地或部分地，歸因于它對任何細胞種類中的HIF-1α積累的抑制效應。方法。以5×105個細胞的密度，將細胞鋪板于培養皿中，并且，然后，在37℃培養箱中(5％CO2)維持2天。分析之前，用預熱的(37℃)RPMI-1640培養液(ATCCNo.30-2001；10mMHEPES；1mM丙酮酸鈉；2mML-谷氨酰胺；4500mg葡萄糖/L；1500mg碳酸氫鈉/L)將細胞清洗2次。在常氧或者低氧(氧水平＜0.1％＝下，于37℃，在氯尼達明不存在或者以不同濃度存在時，用2ml培養液溫育細胞4小時。在溫育結束后，將培養皿置于冰上，并且用冷的PBS緩沖液(4℃)迅速洗滌細胞2次。對于細胞核提取物，用緩沖液A(10mMTris，pH7.5；1.5mMMgCl2；10mMKCl和蛋白酶抑制劑)和緩沖液C(0.5MNaCl；20mMTrispH7.5；1.5mMMgCl2；20％甘油和蛋白酶抑制劑)，依次裂解細胞。用于本實驗的蛋白酶抑制劑是五種蛋白酶抑制劑的混合物(500mMAEBSF-HCl，1mg/ml抑肽酶Aprotinin，1mME-64，500mMEDTA和1mM亮抑肽酶Leupeptin；CalbiochemNO539131)。對于全細胞裂解物，用150mMNaCl；10mMTrispH7.5；10mMEDTA；1％TritonX-100；0.5％脫氧膽酸鹽；和蛋白酶抑制劑，裂解細胞。應用Bio-Rad蛋白分析法，測定蛋白質濃度。將等量的蛋白加樣在SDS-PAGE凝膠上。樣品轉移至PVDF膜之后，用含有5％脫脂奶粉的TBST封閉膜，4℃過夜。隨后，用第一抗體(HIF-1α，HIF-1β，和肌動蛋白)和堿性磷酸酶偶聯的第二抗體溫育該膜，每次溫育2小時。為檢測caspase3、NF-κB、P65和IκBα的表達，用含有5％脫脂奶粉的TBST封閉膜，室溫1小時，并且，通過與相應的抗體在4℃下的過夜溫育、且和堿性磷酸酶偶聯的第二抗體溫育1小時，檢測蛋白質。應用比色底物，檢測特定蛋白質；并且應用NIH成像系統定量每種蛋白質的強度。在分別的實驗中，通常如上所述進行，在來自低氧條件下培養細胞的LNCaP全細胞提取物(圖6)或者細胞核提取物(圖7)中，測量0-600μM氯尼達明對HIF-1α和其它蛋白的表達的影響。實施例2氯尼達明在檸檬酸產生細胞中誘導細胞凋亡為了確定在氯尼達明處理的細胞中是否發生細胞凋亡，評價了氯尼達明對產生檸檬酸的細胞(LNCaP)和氧化檸檬酸的細胞(PC3)的影響。如在圖4中所示，氯尼達明誘導檸檬酸產生細胞(LNCaP)中的caspase3的活化，達到比在檸檬酸氧化細胞(PC3)中大得多的程度。caspase3的活化是一個時間依賴性過程(圖5)。也檢測了氯尼達明在下述細胞中的效應在前列腺上皮細胞(其積累檸檬酸)的原代培養物中；或者在前列腺基質細胞的原代培養物中，其不積累檸檬酸。如在圖5中所示，氯尼達明僅在前列腺上皮細胞中，以劑量依賴方式，誘導細胞凋亡。與此相反，氯尼達明處理后，在前列腺基質細胞中沒有觀察到細胞凋亡的誘導。方法免疫印跡如在實施例2中所描述，實行免疫印跡。為了檢測caspase3的表達，用含有5％脫脂奶粉的TBST封閉膜，室溫1小時，并且，通過與caspase3抗體4℃過夜溫育并且和堿性磷酸酶偶聯的第二抗體溫育1小時，檢測caspase3蛋白。應用比色底物，檢測特異的蛋白質，并且應用NIH成像系統定量每種蛋白質的強度。原代細胞培養物人前列腺上皮細胞(CambrexNo.CC-2555)的原代培養物，和人前列腺基質細胞(CambrexNo.CC-2508)的原代培養物，是從CambrexBioScienceRockland，Inc.(191ThomastonStreet，Rockland，Maine04841)獲得的。細胞凋亡分析以2×104個細胞/孔的密度，將細胞鋪板于96孔板中，并且，然后，在37℃培養箱中(5％CO2)維持16小時。將氯尼達明以不同的濃度加入每個孔，并且，然后，在37℃培養6小時。為評價caspase3的活性，在caspase3抑制劑(PromegaNoG5961)存在或者不存在時，將均質緩沖液和caspase3底物(PromegaNoG7791；PromegaCorporation，2800WoodsHollowRoad，MadisonWIUSA53711)加入到每個孔中。用熒光板讀數器，在激發光485nm和發射光530nm下，測定被切割底物的熒光強度。9.引用的參考文獻Ansarietal.，1998，“Long-TermSequelaeofTolnidamineonMaleReproductionAndGeneralBodyMetabolisminRabbits”Contraception57271-279.Anseletal.，1999，inPharmaceuticalDosageFormsandDrugDeliverySystems，7thed.，LippincottWilliams&Wilkins，Philadelphia，pp.1-562.AvigadandEnglard，1974，″5-Keto-D-Fructose.8.Synthesisof5-Keto-D-Fructose1，6-BisphosphateandSomeofitsProperties″Biochem.Biophys.Acta343(2)330-340.Barryetal.，1992，“SymptomIndexForBenignProstaticHyperplasia”JUrol.1481549-1557.Barryetal.，2001，“MeasuringtheSymptomsAndHealthImpactofBenignProstaticHyperplasiaAndItsTreatments”BENIGNPROSTATICHYPERPLASIA(5THINTERNATIONALCONSULTATIONONBPH).HealthPublication，Ltd.Barryetal.，2003，“BenignProstaticHyperplasic“inSCIENTIFICAMERICANMEDICINE，DaleandFedermanEds.，WebMDInc.Bisswanger，1981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胞是LNCaP細胞。全文摘要本發明提供了一種用于良性前列腺增生的治療或者預防的方法，通過給予一種干擾前列腺上皮細胞中的能量代謝的藥劑來實施，具體地，干擾前列腺上皮細胞中的ATP和NADH/NADPH的產生。文檔編號C12Q1/06GK1738629SQ200480002300公開日2006年2月22日申請日期2004年1月16日優先權日2003年1月17日發明者G·提馬思,H·E·塞利科,F·孟申請人:施瑞修德制藥公司