專利名稱：快速篩選病原微生物敏感藥物的裝置的制作方法
技術領域：
本實用新型涉及一種快速篩選病原微生物敏感藥物的裝置。
背景技術：
藥敏試驗是輔助感染性疾病診斷、處方的重要手段。現有技術包括多種輔助感染性疾病處方的藥敏試驗方法。但實施這些方法需要較完備的實驗室條件，如配備無菌操作臺、生化培養箱等，必須由具有一般微生物實驗技能的技術人員才能進行操作，在臨床實踐特別是獸醫臨床上的應用有一定的局限性。
因此，急需一種快速篩選病原微生物(以下簡稱病原)敏感藥物的裝置用于臨床實踐和生產實踐。目前指導養殖者選擇動物病害用藥的產品只有一些“病原”檢測試劑盒。這類產品價格較高，適用面窄，只能用于某種特定微生物的檢測。用此類產品指導選藥的缺陷是只能證明患病動物體內是否含有該微生物，但不能確定該微生物是造成疾病的病原，即使該微生物是所患疾病的一種病原，也不一定是唯一的、主要的病原。另外，微生物的藥物敏感性變化較快，僅根據以往的經驗用藥不一定能有效治療疾病。因此，僅憑這種檢測結果處方并不可靠。
發明內容
本實用新型的目的是提供一種快速篩選病原微生物敏感藥物的裝置，該裝置應操作簡便，快捷，不需嚴格的試驗條件和專業人員操作。
本實用新型建立了一種簡便、快捷的選藥裝置，無需進行病原的分離鑒定即可直接進行病原敏感藥物的篩選。
本裝置包括裝置A和裝置B，其中裝置A可以獨立用于藥敏選藥，也可以與裝置B配套使用。裝置B不單獨使用，是裝置A的附加裝置。分述如下裝置A是一種內部有分隔條并帶有盒蓋的盒體，形狀不限，如可以是扁平的圓盒或長方形或正方形盒。
盒體內設有多個分隔條，分隔條最好形狀和大小相同，數目不限，可根據實際需要確定，常用數量為6-30根。分隔條將盒體的內部空間分成多個分隔區，分隔區最好形狀大小相同。分隔條的一端與盒內壁相連，另一端可與盒內壁相連，也可以不相連，以不相連為優選。盒內裝有固體培養基，其高度不應高于分隔條。固體培養基的配方及組成可以包括本領域技術人員熟知的各種常規培養基成分。
裝置A可以標有刻度，幫助讀取藥敏試驗結果；其中圓形盒體可帶有螺紋和/或密封圈，長方形或正方形的盒體可帶有卡槽和/或密封圈，保證盒的密封性，減少雜菌等污染，延長預先灌注的培養基的保存時限。
裝置A的材料可以用塑料或玻璃等對病原和培養基無影響的材料，用透明或半透明材料最好，無需開盒即可觀察藥敏試驗結果。塑料為裝置A的最佳材料，既可以避免裝置的磕碰損壞，又易制作螺紋，且造價低廉，透明度好。
一種實施方式如圖1-2所示盒體1為圓形，各分隔條3自盒外周向中心排列，外側與盒體1外周相連，但分隔條3在圓心處互不相連，形成圓形空隙。使用時從圓心處向盒內注入液體，通過旋轉盒體，使培養物均勻分布在各分隔區內的培養基4上，但培養物不漫過分隔條，即分隔條3能將其兩邊的培養基分隔開來。
另一種實施方式如圖7-8所示盒體1為長方形，分隔條3平行排列，一端與盒體的一邊相連，另一端不與盒體的另一邊相連，留有空隙，分隔區呈鋼琴鍵盤狀，使用時從空隙處加入培養物。
另一種實施方式是盒蓋內包括有多個突起部位，可將待選藥物或含藥載體，如含藥濾紙片等，用粘貼等方式附著在其上。當盒蓋與盒體密封后，這些突起部位可嵌入盒體的每個間隔中，與固體培養基表面接觸。
單獨用裝置A按以上幾種實施方式操作時，在各種藥物的作用下，盒體中固體培養基表面的每個區域病原群落生長面積將有所不同。比較各個分隔區內病原群落的分布情況，就能篩選出較佳的病害治療藥物。
裝置B是與裝置A配套使用的待選藥物攜帶裝置，不單獨使用。形狀是與裝置A相對應的條狀物，使用時置于裝置A內。
當裝置A為圓形時，裝置B為圖3-4所示的環形貯藥圈5；圖5-6是貯藥圈放入圓形裝置A的示意圖。當裝置A為長方形時，裝置B為圖9-10所示的直線形貯藥條6。裝置B有若干個間隔，每個間隔內設有一個貯藥處，用于放置待選藥物或含藥載體，各貯藥處互不相連。貯藥處可以是一個凹槽7，也可以是可附著藥物或含藥載體的平面或凸起狀等。所述含藥載體指含有藥物的紙片、棉花、瓊脂等。
裝置B的間隔數量應與所用的裝置A中盒體的間隔數量相同，使用時可將裝置B固定在盒體的固體培養基上，使裝置B的間隔與盒體的間隔一一對應。裝置B的每個間隔可設有凹口，嵌入盒體后藥物或含藥載體可與固體培養基表面接觸。裝置B固定在盒體內后，其高度應低于裝置A高度，保證盒體密封。
若裝置A的分隔條只有一端與盒體閉合，則裝置B嵌合在分隔條與盒體閉合的一端，以保證待選藥物不會滲透到其它分隔區。
現介紹一種裝置A和裝置B配套使用，進行選藥的具體步驟1)從患病的人或動物體內和/或體表取樣樣本可以取自患病個體(人或動物)體表或體內的病灶組織，血液、組織液、分泌物等體液，肝臟、腎臟等實體性內臟器官，尿液、糞便等排泄物，也可以是上述一種或幾種成分的混合物。
2)將樣本置于液體培養基中進行病原擴增培養首先根據疾病特征初步判斷病原類型，不同類型病原的營養需求略有不同，應根據病原類型選擇相應的培養基。
將樣本加入液體培養基中培養，至培養液混濁。培養溫度以與人體或動物體溫相近為宜，一般需培養6～12小時。若培養溫度較低，可適當延長培養時間。含有固體物的樣本最好先經破碎處理，以便其所攜帶的病原微生物能充分釋放。助破碎物可以是碎玻璃等不影響培養液理化性質的堅硬物質，培養容器可以是錐形瓶或試管，以試管為佳。
3)將培養物作為病原替代物進行敏感藥物篩選將所取樣本的液體培養物倒入盒體固體培養基上，待培養基表面干燥后將裝置B嵌入盒體中，使裝置B攜帶的每個待選藥物或含藥載體能直接接觸固體培養基。然后將裝置A閉合密封，倒置培養至培養基表面出現肉眼可見的病原群落。培養溫度以接近患病個體的體溫為宜，室溫也可。培養時間一般約8～24小時。用于藥敏試驗的每個待選藥物既可以是單種藥物，也可以是一種或多種藥物混合，如中西藥混合、兩種以上抗生素混合等。
在不同藥物的作用下，盒體1中固體培養基表面的每個區域病原群落生長面積將有所不同。比較各個分隔區內病原群落的分布情況，就能篩選出較佳的病害治療藥物。
若由取自不同部位的樣本做出的藥敏試驗結果不完全一致，則應根據疾病的癥狀和病原的生長特性做出選擇。例如a組樣本為病灶組織，b組樣本為血液、內臟器官或其組合物，兩組樣本的藥敏試驗結果略有不同，則選藥方法如表1所示。
表1選藥方法
注——代表病原長勢好壞不影響選藥方法。
表1所述的三種狀態均指樣本加入液體培養基中正常培養后的狀態狀態①代表病原不侵入機體組織或血液；狀態②代表病原侵入機體組織或血液，由于a組樣本多與外界環境直接接觸，如體表物質、腸道等，取樣時攜帶雜菌的可能性大，因此其藥敏試驗結果只能作為參考；狀態③代表所選擇的培養基不能滿足病原的生長需求，或疾病為非感染性疾病。發生狀態③所述情況時，應通過個體觀察和鏡檢等手段重新判定病原的類型，并更換培養基進行試驗。如果病原在各種培養基上均不能正常生長，則說明疾病為非感染性疾病或病原為病毒等不能在培養基上生長的微生物。
若患病個體為動物，選藥時應同時考慮到動物品種、動物生理、給藥方式、環境條件等因素，使藥物的選擇更為合理。
操作本裝置無需使用超凈工作臺，但需采取簡單的防止污染措施，如取樣時對取樣部位外表面和取樣的器具(如刀具、器皿)進行消毒，操作時應盡可能選擇干凈的空間等。
本實用新型的優點是操作簡便、快捷、準確，對細菌等病原一般可在12～36小時內完成治療藥物的篩選。與傳統的藥敏試驗方法相比，使用本裝置不需要逐個進行每種病原的分離、鑒定和藥敏試驗，而是將含有所有病原的樣本作為病原替代物擴增培養后直接進行藥敏試驗，大大縮短了試驗周期，同時也降低了對試驗環境和操作人員的要求。不具備經典藥敏試驗條件的養殖單位也可以利用本裝置較容易地選擇出合適的治療藥物，避免了判斷病原種類時可能產生的人為失誤，提高了用藥的針對性和準確性，進而減少了經濟損失。本裝置雖然簡單，但在實際應用中卻取得了難以預料的準確結果。
圖1、圖2是圓形盒體的裝置A的結構示意圖及其剖面圖；圖3、圖4是環形的裝置B結構示意圖及其剖面圖；圖5、圖6是圓形盒體的裝置A和環形的裝置B配套使用時的結構示意圖及其剖面圖；圖7、圖8是長方形盒體的裝置A的結構示意圖及其剖面圖；圖9、圖10是直線形的裝置B結構示意圖及其剖面圖。
以上各圖中，1是裝置A中盒體、2是盒蓋，3是置于盒體1中的分隔條，4是置于盒體1中的固體培養基，5是裝置B中的環形貯藥圈，6是直線形的貯藥條，7是位于貯藥圈上的貯藥處，8是貯藥圈上的若干凹口，其數量與分隔條3數量相同。
以下結合附圖和實施例進一步說明本實用新型如下具體實施方式
實施例1 用圓形裝置A和裝置B選藥參照附圖1～附圖6圖中每個分隔條3從外周向中心方向將盒體1分隔，各分隔條的長度小于盒的半徑，即在盒中心互不接觸；貯藥圈5是放置待選藥物的貯藥裝置，使用時固定在盒體1中固體培養基4的表面，貯藥圈5上設有多個凹口8，能嵌入盒中每個分隔條3上。貯藥圈5上有若干貯藥處7，每個貯藥處上貼有含不同待選藥物的濾紙片。
使用時將含有細菌的培養液倒入盒中，均勻分布在培養基4表面，待培養基表面基本干燥后將貯藥圈5卡入盒體1，使貯藥圈5上的含藥濾紙充分接觸培養基表面。將盒體密閉、倒置，在適溫下培養若干時間，至培養基4表面出現可見菌落。然后根據各分隔區內抑菌圈的大小選藥。
實施例2 用長方形裝置A和裝置B選藥參照附圖7～附圖10圖中每個分隔條3從長方形盒體的一條長邊向對邊平行排列，將盒體1分隔(即盒體1的各分隔區呈鋼琴鍵盤狀平行排列)各分隔條的長度小于盒的寬度，即分隔條不與盒體的對邊相連，留有空隙；貯藥條6是放置待選藥物的貯藥裝置，使用時固定在盒體1中固體培養基4的表面，貯藥條6上設有多個凹口8，能嵌入盒中每個分隔條3上。貯藥條6上有若干貯藥處7，每個貯藥處上貼有含不同待選藥物的濾紙片。
使用時將含有細菌的培養液倒入盒中，使其均勻分布在培養基4表面，待培養基表面基本干燥后將貯藥條6卡入盒體1，使貯藥條6上的含藥濾紙充分接觸培養基表面。將盒體密閉、倒置，其余培養及選藥操作同實施例1。
實施例3 用圓形裝置A選藥參照附圖1圖中每個分隔條3從外周向中心方向將盒體1分隔，各分隔條的長度小于盒的半徑，即在盒中心互不接觸。
使用時將含有細菌的培養液倒入盒中，使其均勻分布在培養基4表面，待培養基表面基本干燥后，將含有不同待選藥物的濾紙片分別放在各分隔區緊鄰盒外周的培養基表面上。將盒體密閉，其余培養及選藥操作同實施例1。
實施例4 魚爛尾病選藥
2000年4月中旬，福建省羅源海星水產苗種場繁育的一月齡花尾胡椒鯛苗出現爛尾病，一周內苗種死亡率約達到60％。爛尾病一般為細菌性感染引起，根據魚苗的發病特點初步診斷后，選取細菌性培養基進行藥敏試驗。
1)取樣魚苗體小，取瀕死的整只魚苗經體表消毒后置于營養肉湯培養基培養。
2)一次培養取3個含有4ml營養肉湯培養基的試管，試管中含有助破碎物玻璃渣，每管加入2只瀕死魚苗，加塞密封，振蕩試管至魚苗破碎，室溫下靜置培養6小時至培養液混濁。
3)二次培養取3個含有固體營養瓊脂培養基的裝置A，每個裝置A有20個分隔區，每個試管對應一個裝置A進行二次培養。輕輕振蕩試管，將培養液搖勻，靜置2分鐘，讓較大固狀物沉淀。打開管塞，將1～2ml培養物倒入盒體的中心部位，旋轉盒體，至培養物均勻分布在各分隔區的培養基上，倒去多余液體，蓋上盒蓋，倒置至培養基表面基本干燥后，將含有不同待選藥物的裝置B嵌入裝置A，使待選藥物能接觸培養基表面。裝置B正面的貯藥處貼有含有待選藥物的濾紙，背面貼有待選藥物編號。密封，倒置裝置A，室溫下靜置培養10小時至菌落出現。
裝置B待選藥物編號對應的藥物如表2所示。
表2 魚爛尾病待選藥物
4)選藥及治療根據裝置A表面的刻度讀取每個分隔區抑菌圈的大小，結果如表3所示。3個裝置A的藥敏試驗結果基本一致。抑菌效果較好的抗菌藥有7種，其中環丙沙星和氯霉素效果最好。考慮到氯霉素有可能造成魚苗造血系統障礙等毒副作用，購買環丙沙星拌餌口服，同時全池潑灑。第3天開始死亡率大幅下降，5天后病情基本穩定。
表3 魚爛尾病藥敏試驗結果
權利要求1.一種篩選病原微生物敏感藥物的裝置，其特征是所述裝置由內部有多個分隔條(3)并帶有盒蓋(2)的盒體(1)組成；分隔條(3)一端與盒體(1)內壁相連，將盒內分成多個分隔區。
2.根據權利要求1所述的一種篩選病原微生物敏感藥物的裝置，其特征是形狀是圓形、長方形或正方形的扁平盒體。
3.根據權利要求1或2所述的一種篩選病原微生物敏感藥物的裝置，其特征是帶有螺紋或卡槽。
4.根據權利要求1或2所述的一種篩選病原微生物敏感藥物的裝置，其特征是帶有密封圈。
5.根據權利要求1或2所述的一種篩選病原微生物敏感藥物的裝置，其特征是所述盒蓋內有多個用于攜帶待選藥物的突起部位。
6.根據權利要求1或2所述的一種篩選病原微生物敏感藥物的裝置，其特征是還包括一個可內置于盒體的待選藥物攜帶裝置，形狀是與盒體相對應的條狀物。
7.根據權利要求6所述的一種篩選病原微生物敏感藥物的裝置，其特征是所述藥物攜帶裝置是貯藥圈(5)或貯藥條(6)。
8.根據權利要求6所述的一種篩選病原微生物敏感藥物的裝置，其特征是所述藥物攜帶裝置分若干區域，每個區域有一個貯藥處，且各貯藥處互不接觸。
9.根據權利要求6所述的一種篩選病原微生物敏感藥物的裝置，其特征是所述貯藥處是凹槽、平面或凸起。
10.根據權利要求6所述的一種篩選病原微生物敏感藥物的裝置，其特征是所述藥物攜帶裝置設有凹口，可嵌入盒體(1)的分隔條(3)上。
專利摘要本實用新型涉及一種快速篩選病原微生物敏感藥物的裝置，包括可密封的盒體及盒內的固體培養基；盒內有多個分隔條將內部分成多個分隔區。該裝置還可包括待選藥物攜帶裝置。本裝置操作簡單、方便，能在操作條件達不到專業要求的場所如家庭、養殖場、野外進行快速準確的藥敏試驗。
文檔編號C12Q1/18GK2682084SQ200320131549
公開日2005年3月2日 申請日期2003年12月30日 優先權日2003年12月30日
發明者楊小強, 郭銀漢 申請人:楊小強, 北京東方天甲科技發展有限公司