專利名稱：食品中活菌總數的快速檢測方法
技術領域：
食品衛生檢驗——細菌學方法背景情況介紹菌落總數指每克或每毫升樣品中含有的活細菌總數。菌落總數檢測是食品、化妝品、藥品、環境衛生等各領域樣品衛生檢驗的基本指標之一。該指標指示產品生產過程的一般衛生狀況和產品的衛生質量，并可在生產各環節中監測各工序的產品衛生質量的變化情況。
原國家標準規定的檢測方法是平板菌落計數法，對不同樣品培養1～2天后計數形成的菌落數，即代表樣品中的活菌數。該方法得到計數結果至少需要2天時間。要實現樣品的快速檢測，必須擺脫長時間培養的方法。
本發明采用將樣品接種在含有特殊培養劑的薄膜上培養和顯色，然后在顯微鏡下掃描計數的方法實現樣品中活細菌數的快速檢測。
本方法的工作原理牛奶是一種優質的細菌培養基，在37℃條件下牛奶中的天然菌可以迅速生長繁殖形成微小的菌團，將其接種在特定培養基上使微菌團呈色就可以在低倍鏡下對其進行計數。采用顯微鏡下掃描和軟件分析技術即可實現對食品樣品中活細菌數量的快速檢測。
檢測操作步驟樣品進行均質處理使其中所含有的活細菌充分分散；接種一定量樣品于含有特定培養基的承載膜上；置于適溫下進行培養后；將膜置于顯微鏡下進行掃描計數。實現本發明檢測方法的途徑是①適當的承載膜，要求膜可以支持樣品中的活細菌在營養基質上生長并在膜上形成微菌落、可以使微菌落固定在膜上并呈色、膜經染色后其透明度適于在顯微鏡下用透射光觀察且膜的顏色與菌落顏色反差明顯；②樣品分散處理方法；③特定的培養基配方可以使細菌菌落呈現顏色而膜呈現不同的顏色；④顯微掃描裝置；⑤圖象分析、識別與計數技術；⑥對各種待檢樣品的檢測靈敏度不低于國標方法。
權利要求
1.本發明是將樣品經過分散處理后，接種于浸透特定營養液的承載膜上經3～5代培養形成微菌落并呈色以進行活菌計數的方法；該承載膜允許營養物質通過，以保證細菌在其上生長的營養需求；具有一定的透明度可以直接在顯微鏡下觀察微菌落；具有一定強度能經受處理和轉移。
2.在本權利要求1中提到的可以吸收特定培養基以支持樣品中的活細菌生長并在膜上形成微菌落的承載膜，其透明度適于在顯微鏡下用透射光觀察；膜的強度允許對其進行成型、滅菌、接種、轉移等操作。
3.在本權利要求1中提到的樣品處理程序；包括溶解、稀釋、均質等步驟。
4.在本權利要求1中提到的特定的培養基配方可以使細菌在膜上生長形成菌落并使菌落呈現顏色。
全文摘要
本發明是對樣品進行均質處理使其中所含有的活細菌充分分散，接種一定量樣品于承載膜上，置于培養基質上于37℃培養，對培養后的承載膜進行固定和染色，將膜置于顯微鏡下進行掃描計數。本檢測方法的優點是①樣品只經過短時間培養，檢測時間短，約3～5小時可以得到檢測結果；②通過顯微觀測識別菌落；③對各種待檢樣品的現場檢測，靈敏度不低于國標方法。
文檔編號C12Q1/04GK1605630SQ20031010012
公開日2005年4月13日 申請日期2003年10月10日 優先權日2003年10月10日
發明者張彩, 陳慶森, 龐廣昌, 胡志和, 閻亞麗 申請人:天津商學院