專利名稱：加工人參的方法和加工過的人參提取物的用途的制作方法
技術領域：
本發明涉及加工人參的方法及所加工過的人參的提取物的用途。更具體地，本發明涉及加工過的人參的提取物或加工過的人參的皂苷部分的提取物，其改善人參糖苷(ginsenoside)(Rg3+Rg5)/(Rb1+Rb2+Rc+Rd)的比率為10-45是由于通過將人參與下列草藥混合而起到的協同作用諸如五味子(Schizandrae Fructus)、山楂(Crataegi Fructus)、山茱萸(Corni Fructus)、木瓜(ChaenomelisFructus)、烏梅(Mume Fructus)、香橙(Citrus junos)、枳殼(Aurantii Fructus)、蘋果、石榴和檸檬，和通過在70-120℃的溫度加熱含人參和前述草藥成分的混合物加工人參的方法。
背景技術：
人參是一種全球有名的強壯劑。因而，進行了大量的研究以便鑒別和描述其成分的特征以及所述成分的藥理作用。這些研究揭示了人參具有多種治療作用諸如預防衰老和動脈硬化；改善高脂血癥、糖尿病、高血壓、腦功能和肝功能；抗氧化；抗緊張(antistress)；增強免疫反應；增進抗血栓形成作用；保護腦神經元；抗癌作用，等。近來，已報道紅參含少量的Rg3，一種具有多種作用諸如舒張血管[J.Nat.Prod.63，1702(2000)]、抑制血小板凝集[Biol.Pharm.Bull.21，79(1998)，Korean J.Ginseng Sci.21，132(1997)]、保護腦神經元[J.Neuroscience Res.53，426(1998)，Neuro Report 9，226(1998)]的人參糖苷，同時人參糖苷Rg3、Rg5、Rh2和Rhl具有抗癌活性[Jpn.J.cancer Res.87，357(1996)，J.cancer Res.Clin.Oncol.120，24(1993)，Anticancer Res.17，1067(1997)，CancerLetters 150，41(2000)，Dietary Anticarcinogenesis andAntimutagenesis 274(2000)]。
為長期貯藏的目的，通常將鮮人參加工成白參和紅參。已報道紅參含微量人參糖苷諸如Rg3、Rg5、Rk1、Rh2和Rh1以及在鮮人參或白參中所不含的麥芽酚，因此賦予紅參增進治療作用。還發明了一種能夠從鮮人參或白參制備紅參提取物的設備(Korea Unexamined PatentPublication No.10-2001-19628)。另外，還有主要集中于通過增加在紅參中所含少量的前述人參糖苷來增進藥物作用的研究。
近來已經揭示“曬參”(sun ginseng)，一種經過新方法加工的人參類型，其中將人參在120-180℃溫度熱處理，該溫度明顯高于在制造紅參時所用溫度，因此增加通常在常規紅參中所含少量的重要的藥物成分并產生新的成分，能增進存在的藥物作用[J.NaturalProducts 63，1702，2000，Korea Patent No.192678]。然而，這種方法有幾個缺點需要特殊的設備諸如高壓加熱器和要求在比那些常規使用的溫度高的溫度高熱處理因而導致人參的碳化，特別是在大量生產的時候。
發明概述因此，本發明的目的是提供用于加工人參的新方法，其中所加工的人參的提取物能夠明顯增加有更加增進的藥物作用的人參糖苷含量。在本發明中，發明人使人參與其他重要的草藥混合，并將所得混合物在70-120℃加熱，最終獲得加工過的人參提取物，其中人參糖苷(Rg3+Rg5)/(Rb1+Rb2+Rc+Rd)的比率增加到10-45，優選為20-45，因此大幅度升高所加工過的人參的提取物的藥物作用。例如，如此獲得的按照本發明制備的加工過的人參提取物顯示，與其他常規的人參的提取物相比血管舒張率增高約65-97倍。此外，在本發明中，將人參與選自下列至少一種草藥混合五味子、山楂、山茱萸、木瓜、烏梅、香橙、枳殼、蘋果、石榴和檸檬，并在70-120℃的溫度熱處理，導致將基于原人參二醇(protopanaxadiol)皂苷轉化成人參糖苷諸如Rg3、Rg5、Rk1，同時將基于原人參三醇(protopanaxatriol)皂苷轉化成人參糖苷諸如Rg2、F4、Rh1等。
本發明的另一個目的是提供加工過的人參的皂苷部分的提取物和其中人參糖苷(Rg3+Rg5)/(Rb1+Rb2+Rc+Rd)的比率增加到10-45，優選為20-45，伴隨更加增進的藥物作用的加工過的人參的皂苷部分的提取物。
本發明的再一個目的是提供含有前述所加工的人參的濃縮或稀釋的提取物的補充健康飲料。
本發明的再一個目的是提供以片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑形式的含有前述所加工的人參的提取物的補充保健食品或藥物。
附圖的簡要說明本發明的前述各方面和其他特征將在下面的說明中結合附圖解釋，其中
圖1顯示本發明加工過的人參的皂苷部分和常規人參的皂苷部分的薄層色譜(PGComp.Ex.4；GCEx.21；GSEx.22；RGComp.Ex.5；RGSEx.28)；圖2顯示本發明加工過的人參的皂苷部分和常規人參的皂苷部分的薄層色譜(1Comp.Ex.4；2Ex.22；3Ex.21；4Ex.23；5Ex.24；6Ex.25；7Ex.26；8Ex.27；9Comp.Ex.5；10Ex.28)；圖3顯示用白參加五味子或白參加山楂加工的人參的皂苷部分的高效液相色譜結果(PG-QComp.Ex.4；GC-1Ex.21；GS-1Ex.22)；和圖4顯示按照本發明所加工的人參的皂苷部分、常規人參的皂苷部分和人參糖苷Rg3舒張血管的比較結果。
發明的公開本發明涉及加工過的人參提取物或其皂苷部分的提取物，其中人參糖苷(Rg3+Rg5)/(Rb1+Rb2+Rc+Rd)的比率為10-45。
本發明還涉及用于加工人參的新方法，其中將人參與選自下列至少一種草藥混合五味子、山楂、山茱萸、木瓜、烏梅、香橙、枳殼、蘋果、石榴和檸檬的果實(Fructus)，并將所得混合物在70-120℃的溫度熱處理。
本發明還涉及以多種形式制備的藥物或保健食品，所述藥物或保健食品含所加工的人參的前述提取物或其皂苷部分提取物作為活性成分，這基于下面的結果所加工的人參或其皂苷部分提取物在治療以及預防心血管病、勃起功能障礙、腦神經元和相關疾病、抗癌等方面是有效的。
本發明如下文所闡明進行更詳細的描述。
在本發明中，對于使用的100份人參，關于選自下列組中至少一種，酸性天然草藥的用量是10-1000份，所述組由五味子、山楂、山茱萸、木瓜、烏梅、香橙、枳殼、蘋果、石榴和檸檬組成。在4-10倍重量于上述混合物重量的水存在下，將所選擇的草藥和人參混合并加熱1-6小時，冷卻到室溫，過濾，濃縮并最終制備成提取物或粉末的形式。更具體地，在這個步驟中所使用的水量比上面的混合物在起初提取階段時的水量高7-10倍。
加熱的過程在70-120℃的溫度，優選在所述成分的沸點進行。另外，使用工業用常規設備足以在沒有進一步的必要的精密設備的情況下進行大規模商業生產。
加熱過程所要求的時間為1-6小時，優選3-5小時。如果加熱過程長于6小時，很可能將人參糖苷Rg3和Rg5分解，同時在提取物的總產出率方面將沒有明顯的變化。
如此獲得的加工過的人參提取物可直接用于滿足本發明的目的，然而，提取可進一步包括蒸發水的步驟，其后在乙醇或甲醇存在下加熱提取1-3小時。引入醇提取過程將使獲得更滿意的結果變成可能，特別是當將其應用于為提高皂苷提取的產出率而設計的方法的時候。
如此獲得的加工過的人參提取物通常含有源自草藥和人參的無藥物作用的雜質。因而，如此獲得的加工過的人參的提取物可通過使用下面的步驟進一步純化，包括通過使用二氯甲烷提取；通過使用水飽和丁醇提取上述提取物的水相幾次并合并丁醇提取物；以水洗滌丁醇提取物；濃縮上述丁醇提取物；且將上述濃縮的丁醇提取物溶解在甲醇中。
上述步驟可增加目的皂苷部分提取物的純度，從而可將這種純化的皂苷部分提取物用于制造要求更高純度皂苷的產品。
在本發明中所用人參的實例是鮮人參、白參、須人參(hairy rootginseng)、紅參、人參(Panax ginseng)葉、西洋參、三七或Panaxjaponicus。
本發明中所用草藥的實例是產生酸性性質的那些草藥，諸如五味子、山楂、山茱萸、木瓜、烏梅、香橙、枳殼、蘋果、石榴和檸檬。可將選自上述草藥組中的至少一種作為混合處方與人參一起使用。
在上述的草藥當中，五味子含多種木酚素且因而在以下方面顯示作用預防肝損傷、修復肝損傷、使肝功能正常化、加速膽汁酸的分泌，并還可用作主要與肺、肝和腎有關的抗菌劑、抗氧化劑、消化劑。另外，它還在緩解疲勞、緩解壓力、緩解視疲勞和促進認知能力方面顯示作用。
山楂具有幫助胃液分泌、抗菌活性的作用并延長抗高血壓活性，因而可以用作健胃藥以及治療腸道疾病的制劑。另外，山楂還有擴張冠狀動脈和降低膽固醇的作用，并因此用作促進血液循環藥。
已知山茱萸具有諸如利尿、暫時性緩解高血壓、抗菌活性、抗組胺活性的作用，并因此用作營養滋補劑、收斂劑和止血劑。
香橙用作香料同時枳殼是用作食物原料或草藥的芳香健胃藥。香橙和枳殼的果實含大量植物有機酸并因此可用作醋的代用品或除去魚腥氣的香料。
在上述草藥中，烏梅具有抗菌活性、促進胃液分泌、促進精力恢復和止渴的作用，并因此用作收斂劑、鎮咳祛痰劑、解熱劑和驅蟲劑。
在上述草藥中，木瓜有助于身體新陳代謝并促進胃液的分泌。
在上述草藥中，蘋果富含維生素和礦物質，特別是纖維素，并因此是對腸道病癥有效的制劑和鎮靜劑。
在上述草藥中，已知石榴為滋補劑并有效預防高血壓和動脈硬化。另外，石榴顯示對腹瀉、痢疾、胃痛、白帶的治療作用，也用作驅蟲劑。
檸檬含大量維生素C并因此有助于緩解疲勞和保持健康皮膚。
如上面所述，本發明的特征在于，由于通過熱提取由人參和至少一種下列草藥組成的混合物導致的協同作用，將人參糖苷(Rg3+Rg5)/(Rb1+Rb2+Rc+Rd)的比率改善到10-45，所述草藥選自由五味子、山楂、山茱萸、木瓜、烏梅、香橙、枳殼、蘋果、石榴和檸檬所組成的組。與單味人參的常規提取物不同，在本發明中加工過的人參的提取物在治療和預防高血壓、動脈硬化、血栓形成、勃起功能障礙、腦中風、記憶障礙、發揮抗癌活性和減輕抗癌藥的副作用方面展示優良的藥物作用。
此外，本發明還涉及藥物和保健食品，包括作為活性成分的根據本發明制備的加工過的人參提取物或其皂苷部分提取物，且可通過常規制備工藝制造各種含加工過的人參提取物的藥物、保健食品和其他食品添加劑。例如，通過使用常規添加劑諸如乳化劑、滑潤劑、黏合劑、甜味劑、芳香劑可將上述藥物制備成下列形式用于口服給藥，所述藥物形式包括片劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、丸劑、顆粒劑、液體等，以及將上述藥物制備成注射劑。
用在本發明中的用于制備加工過的人參提取物的人參和草藥一直用作藥物和食譜食品，且熱處理不產生有害物質。因此，可安全服用加工過的人參的提取物或其皂苷部分的提取物。
成人優選每天服用2-4次，按照本發明每單劑量提取過的人參提取物或其皂苷部分提取物約100-1000mg。
當將提取過的人參提取物或其皂苷部分提取物用作食品添加劑，可將它們加入到飲料、片、顆粒、丸、香口膠和糖果形式的食品中。
如前所述，可將所加工過的人參提取物以多種制劑形式給藥，并在促進勃起功能障礙、血液循環、緩解疲勞、高血壓、動脈硬化的治療、血栓形成的治療、腦中風的治療、增進腦功能方面顯示作用，并且還顯示抗癌活性和減輕抗癌藥的副作用。
下面的實施例意在說明本發明，不過，不應該認為它們限制所附權利要求定義的本發明的范圍。
實施例實施例1將2.5kg白參、1.5kg五味子和40L水在提取槽中混合在一起，并煮沸4小時(內部溫度為120℃)。在蒸發除去20L水后，將所得混合物加入48L乙醇，煮沸2小時，冷卻至室溫并過濾(第一濾液)。
將所得殘余物加入18L水和48L乙醇，加熱沸騰3小時，冷卻并過濾(第二濾液)。將第一和第二濾液合并所得的混合物濃縮直至其三分之一體積，噴霧干燥從而最終獲得加工過的人參提取物的粉末。
實施例2將2.5kg白參和1.5kg山楂如實施例1中同樣加工，最終獲得加工過的人參提取物的粉末。
實施例3將50g須人參、30g五味子與700mL水混合并煮沸4小時。將所得混合物冷卻至室溫并過濾。然后將所得濾液真空濃縮從而最終獲得加工過的人參提取物。
實施例4將20g紅參、15g五味子與300mL水混合并煮沸3小時。將所得混合物冷卻至室溫并過濾。然后將所得濾液真空濃縮從而最終獲得加工過的人參提取物。
實施例5將25g切碎的鮮人參、20g山楂與200mL水混合并煮沸4小時。將所得混合物冷卻至室溫并過濾。然后將所得濾液真空濃縮從而最終獲得加工過的人參提取物。
實施例6通過與實施例3中相同的方法用20g白參、25g木瓜與400mL水獲得加工過的人參提取物。
實施例7通過與實施例3中相同的方法用20g白參、15g烏梅果實與300mL水獲得加工過的人參提取物。
實施例8通過與實施例3中相同的方法用15g白參、15g香橙與200mL水獲得加工過的人參提取物。
實施例9通過與實施例3中相同的方法用15g紅參、20g枳殼與300mL水獲得加工過的人參提取物。
實施例10相應地將20g西洋參和20g山茱萸；20g Panax japonicus和20g山楂；15g三七、20g干人參葉和15g五味子與350mL水混合，并煮沸4小時，其后通過蒸發將水蒸餾。然后，以400mL乙醇加入該混合物，并加熱回餾2小時，且冷卻至室溫。將所得的混合物過濾，且將所得濾液真空濃縮從而最終獲得加工過的人參提取物。
實施例11將10g白參和10g山楂與200mL水混合，并煮沸1小時。在蒸發100mL水后，將保留的混合物煮沸3小時并通過蒸發除去剩余的水。然后，以400mL甲醇加入該混合物，并加熱回餾1小時。將該混合物冷卻，過濾，從而最終獲得加工過的人參提取物。
實施例12將10g白參和10g五味子如實施例11中同樣加工，最終獲得加工過的人參提取物的粉末。
實施例13將10g白參和10g山茱萸如實施例11中同樣加工，最終獲得加工過的人參提取物的粉末。
實施例14將10g白參和10g木瓜如實施例11中同樣加工，最終獲得加工過的人參提取物的粉末。
實施例15將10g白參和10g烏梅果實如實施例11中同樣加工，最終獲得加工過的人參提取物的粉末。
實施例16將10g白參和10g香橙如實施例11中同樣加工，最終獲得加工過的人參提取物的粉末。
實施例17
將10g白參和10g枳殼如實施例11中同樣加工，最終獲得加工過的人參提取物的粉末。
實施例18將10g紅參和10g五味子如實施例11中同樣加工，最終獲得加工過的人參提取物的粉末。
實施例19將50g從實施例1獲得的加工過的人參提取物溶解在350mL水中，然后用350mL二氯甲烷提取2次。用350mL水飽和的丁醇提取水層3次，并將所得提取物合并在一起。然后，將合并的提取物用350mL水洗滌。將丁醇層真空濃縮從而最終獲得加工過的人參提取物皂苷部分。
實施例20將50g從實施例2獲得的加工過的人參提取物溶解在350mL水中，然后用350mL二氯甲烷提取2次。用350mL水飽和的丁醇提取水層3次，并將所得提取物合并在一起。然后，將合并的提取物用350mL水洗滌。將丁醇層真空濃縮從而最終獲得加工過的人參提取物皂苷部分。
實施例21將5.1g從實施例11獲得的加工過的人參提取物溶解在50mL水中，然后用50mL二氯甲烷提取2次。用50mL水飽和的丁醇提取水層3次，并將所得提取物合并在一起。然后，將合并的提取物用50mL水洗滌。將丁醇層真空濃縮從而最終獲得加工過的人參提取物皂苷部分。
實施例22將5.4g從實施例12獲得的加工過的人參提取物按照與實施例21中相同方法加工，從而最終獲得加工過的人參提取物皂苷部分。
實施例23將5g從實施例13獲得的加工過的人參提取物按照與實施例21中相同方法加工，從而最終獲得加工過的人參提取物皂苷部分。
實施例24將5.5g從實施例14獲得的加工過的人參提取物按照與實施例21中相同方法加工，從而最終獲得加工過的人參提取物皂苷部分。
實施例25將4.8g從實施例15獲得的加工過的人參提取物按照與實施例21中相同方法加工，從而最終獲得加工過的人參提取物皂苷部分。
實施例26將4.9g從實施例16獲得的加工過的人參提取物按照與實施例21中相同方法加工，從而最終獲得加工過的人參提取物皂苷部分。
實施例27將5.1g從實施例17獲得的加工過的人參提取物按照與實施例21中相同方法加工，從而最終獲得加工過的人參提取物皂苷部分。
實施例28將5.2g從實施例18獲得的加工過的人參提取物按照與實施例21中相同方法加工，從而最終獲得加工過的人參提取物皂苷部分。
實施例29將15g白參、5g山楂和5g五味子與250mL水混合，并煮沸5小時。將該混合物冷卻至室溫并過濾。將濾液真空濃縮從而最終獲得加工過的人參提取物。
實施例30將15g白參、4g山茱萸、3g山楂和3g五味子按照與實施例29中相同方法加工，從而最終獲得加工過的人參提取物。
參照實施例1片劑制備將從實施例1獲得的500g加工過的人參提取物粉末、196g結晶纖維素和4g硬脂酸鎂徹底混合，根據常規制片方法制造700mg片劑。
參照實施例2片劑制備將從實施例2獲得的500g加工過的人參提取物粉末、196g結晶纖維素和4g硬脂酸鎂徹底混合，根據常規制片方法制造700mg片劑。
參照實施例3硬膠囊劑制備將從實施例1獲得的100g加工過的人參提取物粉末、95g結晶纖維素和5g二氧化硅(SiO2)徹底混合，根據常規方法制造400mg硬膠囊劑。
參照實施例4軟膠囊劑制備將從實施例1獲得的200g加工過的人參提取物粉末、280g豆油、15g卵磷脂和5g黃蠟徹底混合，根據常規方法制造500mg軟膠囊劑。
參照實施例5顆粒劑制備將從實施例2獲得的500g加工過的人參提取物粉末、196g玉米淀粉、4g硬脂酸鎂徹底混合，根據常規方法制造顆粒劑。
參照實施例6丸劑制備將從實施例2獲得的300g加工過的人參提取物粉末、100g玉米淀粉、50g結晶纖維素和150g蜂蜜徹底混合，根據常規方法制造100mg丸劑。
參照實施例7液體制備將從實施例1獲得的100g加工過的人參提取物粉末、20g濃縮紅參提取物(人參皂苷140mg/g)、100g冬蟲夏草、50g棗濃縮物(brix55)、2g維生素B1鹽酸鹽、1g維生素B2、2g維生素B6鹽酸鹽、200g糖溶解在純水中至終末體積2L，最終制成液體制劑。
參照實施例8飲料制備將從實施例1獲得的10g加工過的人參提取物粉末、1g檸檬酸、1g阿拉伯膠、5g糖溶解在純水中至終末體積100mL。將上述混合物在95℃滅菌15秒鐘，并冷卻從而最終制成飲料。
對比實施例1通過分別用2kg紅參、5kg白參、5kg五味子和5kg山楂按照與實施例3中相同方法獲得提取物粉末。
對比實施例2將10g白參與200mL水混合并煮沸1小時。在蒸發100mL水后，將所得混合物煮沸3小時并通過蒸餾除去保留的水。然后，將該混合物加400mL甲醇并加熱回流1小時，冷卻，過濾從而最終獲得加工過的人參提取物。
對比實施例3將10g紅參按照在對比實施例2中相同的方法加工，從而最終獲得紅參提取物。
對比實施例4將3.4g從對比實施例2中獲得的加工過的人參提取物溶解在50mL水中，然后用50mL二氯甲烷提取2次。用50mL水飽和丁醇提取水層3次，并將所得提取物合并在一起。然后，將所合并的提取物用50mL水洗滌。將丁醇層真空干燥，從而最終獲得加工過的人參提取物的皂苷部分。
對比實施例5將3.4g從對比實施例3中獲得的加工過的紅參提取物按照對比實施例4中相同的方法加工，從而最終獲得加工過的人參提取物的皂苷部分。
對比實施例6曬參的制備(Korean Pat.No.192678)將加有5g白參和5mL水的40mL無菌容器放置在高壓滅菌器中并在120℃加熱2小時。收集5g加工過的人參，然后用100mL甲醇相應地提取3次。將所獲提取物濃縮，懸浮在水中，然后用100mL乙醚相應地提取3次。將殘余的水相用100mL丁醇相應地提取3次。將丁醇餾分濃縮，從而最終獲得曬參提取物的皂苷部分。
對比實施例7曬參的制備(Korean Pat.No.192678)將加有5g白參和5mL水的40mL無菌容器放置在高壓滅菌器中并在130℃加熱2小時。收集5g加工過的人參，然后用100mL甲醇相應地提取3次。將所獲提取物濃縮，懸浮在水中，然后用100mL乙醚相應地提取3次。將殘余的水相用100mL丁醇相應地提取3次。將丁醇餾分濃縮，從而最終獲得曬參提取物的皂苷部分。
對比實施例8通過用100mL甲醇加熱回流3小時相應地將5g紅參提取3次。將提取物濃縮，懸浮在水中，然后用100mL乙醚相應地提取3次。將水相用100mL丁醇相應地提取3次。將提取物合并，濃縮，從而最終獲得紅參提取物的皂苷部分。
參照對比實施例1將350g白參提取物粉末、從對比實施例1中獲得的210g五味子提取物、136g結晶纖維素和4g硬脂酸鎂徹底混合，按照常規制片方法制造700mg片劑。
參照對比實施例2將350g白參提取物粉末、從對比實施例1中獲得的210g山楂提取物、136g結晶纖維素和4g硬脂酸鎂徹底混合，按照常規制片方法制造700mg片劑。
參照對比實施例3將從對比實施例1中獲得的350g紅參提取物粉末、246g結晶纖維素、100g玉米淀粉和4g硬脂酸鎂徹底混合，按照常規制片方法制造700mg片劑。
實驗實施例1將從實施例21-28和對比實施例4-5中獲得的皂苷部分提取物用薄層色譜(展開溶劑；氯仿∶甲醇∶水＝15∶10∶2.5/彩色顯影劑；在用10％硫酸噴霧后加熱)(圖1和2)。高效液相色譜(HPLC)優選使用Capcell pak MG C18(4.6×250mm)，在203nm檢測。通過使用溶劑(A)10％乙腈/水和(B)90％乙腈/水梯度洗脫實施分離，結果顯示于圖3。
如圖1和2所顯示，在對比實施例4和5中人參糖苷沒有改變。不過，大多數人參糖苷變成在實施例21-28中有較少極性的糖苷。
如圖3所顯示，在對比實施例4(如PG-Q所示)中大多數人參糖苷變成在實施例21和22中的Rg3、Rg5、Rk1、Rf2、Rh1和F4(GS-1實施例22，GC-1實施例21)。峰1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13相應代表Rg1、Re、Rb 1、Rc、Rb2、Rd、Rg2、Rh1、F4、(20S)-Rg3、(20R)-Rg3、Rk1、Rg5。
將從實施例19-28和對比實施例4-7獲得的皂苷部分提取物通過HPLC分析，且根據每個成分的峰值相關面積分析人參糖苷(ginsenoside)(Rg3+Rg5)/(Rb1+Rb2+Rc+Rd)的比率，結果顯示于下面表1中。
表1皂苷部分提取物峰值相關面積比較
如上述表1所顯示，按照本發明制備的加工過的人參提取物人參糖苷(ginsenoside)(Rg3+Rg5)/(Rb1+Rb2+Rc+Rd)的比率范圍為10-45，這遠高于在對比實施例6和7中獲得的那些皂苷，其中的比率范圍為1.03-2.43。此外，盡管通過使用與實施例21和22相同草藥獲得在實施例19和20中制備的加工過的人參皂苷，在實施例19和20中制備的加工過的人參皂苷的人參糖苷(ginsenoside)(Rg3+Rg5)/(Rb1+Rb2+Rc+Rd)的比率與在實施例21和22中獲得的比率相比得到很大的增加，即使因為批量過程較大規模上也是如此。
實驗實施例2改善勃起功能障礙作用將40名45-60歲勃起功能障礙的男性分成5組以致每組由8名男性組成。給他們服用在上述參照實施例1和2、參照對比實施例1、2和3制備的藥物30天，每天3次，每次2片。給藥的作用顯示于表2中。
表2加工過的人參提取物對改善勃起功能障礙的作用
如表2所顯示，施用了根據本發明如參照實施例1和2中獲得的加工過的人參提取物的男性顯示勃起功能障礙的改善為87.5％，同時在參照對比實施例1和2中獲得的提取物無明顯作用。還已知紅參提取物(參照對比實施例3)有改善勃起功能障礙的治療作用，不過，根據本發明制備的加工過的人參提取物在改善勃起功能障礙方面比常規人參提取物顯示更好的作用。
實驗實施例3改善外周血循環作用將40名45-60歲伴隨輕微神經病癥的男性糖尿病患者分成5組，使每組由8名男患者組成。給他們施用6片在上述參照實施例1和2、參照對比實施例1和2中制備的制劑，并相應在給藥前、給藥后的45和90分鐘用激光多普勒血流儀(Laser Doppler Flowmetry)測量每個受試者右足的血流。安慰劑組給予通過用相同數量玉米淀粉制備的片劑。給藥的作用顯示于表3中。
表3加工過的人參提取物改善血液循環的作用(單位血流mL/min/100g細織)
如表3所顯示，在實施例1和2的受試者中的血液循環分別明顯增加51.2％和68.2％，同時在參照對比實施例1和2中的血液循環的增加相應只有15％和19％，因而說明根據本發明制備的加工過的人參提取物在促進血液循環方面的較好的作用。
實驗實施例4血管舒張作用比較從SD大鼠分離胸主動脈并切割成2-3mm寬的環，極度小心以保持內皮完整。將動脈制備物懸于在有機浴中的線鉤之間，所述有機浴含20ml Krebs’碳酸氫鹽緩沖液(mMNaCl，118；KCl，4.7；CaCl2，2.5；NaHCO3，25；MgSO4，1.2；KH2PO4，1.2；和葡萄糖，11.0)，用氣體混合物(95％O2，5％CO2)吹泡并于37℃保持。在2克的靜止拉力下將動脈制備物進行平衡60分鐘。用力移位換能器(Grass FT03，GrassIns.，Quincy，MA，USA)測量等張收縮反應，并顯示在圖表記錄器上(Multicorder MC 6625，Hugo Sachs Electronic，March，Germany)。將動脈制備物用苯腎上腺素(PE，300nM)極限下預收縮。在收縮穩定后，加入乙酰膽堿(1μM)以確定內皮存在。然后，將動脈制備物洗滌3次45分鐘，并以PE再激發。在PE后，反應達到穩定高度，全部化合物(1μM-1mM)累積加入到組織浴中。所用樣品為在實施例21和22中和對比實施例4中獲得的皂苷部分提取物。
如在圖4所顯示，根據本發明加工過的人參的皂苷部分提取物的血管舒張作用比對比實施例4中的高。例如，在實施例21(以黑圈表示)和實施例22(以空圈表示)中加工過的人參的皂苷部分提取物的血管舒張作用相應高于對比實施例4(以黑三角表示)的皂苷部分提取物的作用65倍和97倍。根據本發明制備的加工過的人參顯示比在Korean專利第192678號和J.of Nature Products 63，1702，2000中公開的加工過的人參更好的藥物作用。
實驗實施例5對高血壓的作用將患高血壓的45-60歲的21名男性分成10人和11人的2組。一組給予在參照實施例2中制備的片劑30天，每次服用2片，每天3次；同時另一組給予在參照對比實施例2中制備的片劑，并測量血壓。血壓的測量結果顯示于表4中。
表4加工過的人參的降血壓作用
如在表4中所顯示，當對他們用藥一個月的時候根據本發明的加工過的人參提取物降低90.9％高血壓患者的收縮壓，且導致的血壓減少量為-14～-36mmHg，然而給予山楂提取物和常規人參提取物的混合物的患者顯示只有20％的血壓下降，同時剩余的80％沒有顯著改變，因而說明本發明加工過的人參提取物在降低收縮壓方面的優越性。
實驗實施例6抗血小板凝集的作用將從健康男性的鰓樣靜脈采集的血液(15％檸檬酸-檸檬酸鹽-葡萄糖用作抗凝劑)于120×g離心15分鐘以分離血漿。將所獲血漿在500×g離心10分鐘以獲得血小板。將血小板懸浮為200百萬個血小板/mL以獲得洗滌血小板。加工過的人參提取物對由膠原誘導的血小板凝集的作用按與人參研究雜志(Journal of Ginseng Research)(vol.21，132，1997)相一致的方法測量，結果顯示于表5中。
表5加工過的人參提取物對膠原誘導的血小板凝集的抑制作用
如表5所示，比較了50％抑制濃度(IC50)，在對血小板凝集抑制作用方面，本發明的加工過的人參提取物顯示比常規人參提取物(對比實施例4)的效能相應地高52倍和42倍，因而期望其成為治療高血壓、動脈硬化、腦中風等的強的候選者。
實驗實施例7對減輕抗癌藥副作用的作用測定本發明的加工過的人參提取物的皂苷部分對減輕由施用抗癌藥順鉑導致的副作用，特別是降低腎功能方面的作用。將30只重約200g的SD大鼠分成5組使每組由6只大鼠組成，除對照組注射鹽水之外，腹膜內注射5mg/kg/mL順鉑溶液。分別地，將在實施例22和對比實施例4中獲得的300mg/kg皂苷部分提取物在順鉑給藥前72、48、24、12小時腹膜內注射(治療前組)，在順鉑給藥后12、24、48、72小時同樣腹膜內注射(治療后組)。在第4天，從鼠采集血液并制備血清。
用血尿素氮(BUN)檢測試劑盒測定腎毒性指標血尿素氮。將0.02mL由0.1mL最初的尿素酶濃縮物和20mL緩沖溶液組成的混合物，加與從上述鼠血液制備的血清和0.02mL尿素標準溶液，在37℃培養15分鐘，加2mL顯影試劑，在37℃培養5分鐘，于570nm測定光學密度。
用肌酐檢測試劑盒測定腎毒性指標肌酐。
將0.5mL從上述鼠制備的血清加4mL鎢酸鹽溶液，劇烈振蕩，然后在1500×g離心10分鐘。回收上清液，與3mL肌酐標準溶液(對照組加3mL蒸餾水)、1mL苦味酸鹽溶液和0.5mL 1.4M NaOH溶液混合，且徹底混合。15分鐘后，于515測定nm測定光學密度。
表6皂苷部分提取物對改善由抗癌藥引起腎臟毒性的作用
如表6中所示，實施例22中獲得的皂苷部分提取物治療后組顯示尿素氮和肌酐值恢復到接近正常狀態。
實驗實施例8測定腦神經元保護作用為研究本發明加工過的人參的皂苷部分對治療和預防腦中風的作用，用與J.Neurosci.Res.53，426(1998)中一致的方法測定皂苷部分對過度谷氨酸鹽引起腦神經元死亡的作用，結果顯示于表7中。
表7皂苷部分對過度谷氨酸鹽引起腦神經元死亡的保護作用
如表7中所示，實施例20中獲得的皂苷部分提取物與對比實施例4中的提取物比較，在對抗由谷氨酸鹽引起的神經毒性方面顯示更好的預防作用。
實驗實施例9抗腫瘤活性將人癌細胞接種于小牛血清培養基并培養48小時，然后在96孔培養物次代培養1天。用加工過的人參提取物處理48小時后，將培養物加MTT溶液并形成不溶的formazine。離心后，將沉淀加二甲亞砜溶解formazine并在570nm用自動平板讀數器測定光學密度。計算50％細胞存活的濃度，結果顯示在表8中。
表8加工過的人參的皂苷部分提取物對人癌細胞生長的抑制作用(MTT法)
如表8所示，本發明加工過的人參皂苷部分提取物(實施例21和22)與白參常規提取物相比(對比實施例4)顯示更強抗癌活性。
實驗實施例10改善腦功能的比較將20名患有記憶損失病癥的61-70歲的老年人(男性和女性各10人)分成2組，每組中男性和女性人數相等，相應給予在參照實施例2、參照對比實施例2中制備的片劑3個月，每次2片，每天2次。通過調查表觀察記憶改善的程度，結果顯示于表9中。
在表9中，當將“改善”和“顯著改善”合并作為有效，參照實施例2中本發明加工過的人參提取物與常規人參提取物的30％的有效率相比顯示80％的有效率，因而說明本發明加工過的人參提取物通過改善記憶損失病癥在改善腦功能方面的優越性。
表9腦功能改善水平
實驗實施例11毒性實驗將加工過的人參提取物的毒性實驗進行如下。將在實施例1和2中獲得的加工過的人參提取物溶解在0.2％土溫80溶液中，以每千克體重5g提取物對體重約20g的ICR小鼠經口給藥(每組20只小鼠)。觀察小鼠7天，未觀察到小鼠死亡。
工業實用性如前所述，在本發明中所使用的方法，其中將人參與至少一種選自由諸如五味子、山楂、山茱萸、木瓜、烏梅、香橙、枳殼、蘋果、石榴和檸檬組成的組中的草藥混合并在水中煮沸，能夠產生比單純人參提取物或在人參和草藥單獨加工后將人參提取物和一種或多種草藥簡單混合更有效力的協同藥物作用。這是因為在本發明中制備的加工過的人參提取物中含大量在白參中不含且紅參中含少量的諸如Rg3、Rg5、Rk1等的人參糖苷，其中人參糖苷(Rg3+Rg5)/(Rb1+Rb2+Rc+Rd)的比率為10-45。在本發明中制備的加工過的人參提取物顯示作為對改善勃起功能障礙、血液循環、緩解疲勞、高血壓、動脈硬化、血栓形成、腦功能、腦中風的預防和治療劑，和作為健康補充食品或藥物性癌癥輔助治療劑的實用性。本發明中制備的加工過的人參提取物能夠以諸如液體、片劑、顆粒劑、丸劑、硬膠囊劑或軟膠囊劑的形式方便地制造和施用。
權利要求
1.加工過的人參提取物，其中人參糖苷(Rg3+Rg5)/(Rb1+Rb2+Rc+Rd)的比率為10-45。
2.權利要求1的加工過的人參提取物，其中人參糖苷(Rg3+Rg5)/(Rb1+Rb2+Rc+Rd)的比率為20-45。
3.加工過的人參皂苷部分提取物，其中人參糖苷(Rg3+Rg5)/(Rb1+Rb2+Rc+Rd)的比率為10-45。
4.權利要求3的加工過的人參皂苷部分提取物，其中人參糖苷(Rg3+Rg5)/(Rb1+Rb2+Rc+Rd)的比率為20-45。
5.通過熱提取加工人參的方法，包括以下步驟(i)加4-10倍重量的水到所獲混合物中，該混合物由100份人參和10-1000份至少一種選自下組的草藥所組成，所述組由五味子、山楂、山茱萸、木瓜、烏梅、香橙、枳殼、蘋果、石榴和檸檬組成，并且在70-120℃加熱1-6小時；(ii)冷卻所述混合物至室溫，并進行過濾所述混合物；和(iii)濃縮所述濾液以制備成浸膏或粉末形式。
6.權利要求5的加工人參的方法，其中所述方法進一步在步驟(i)之后含熱提取步驟，其中將所述水蒸發，并在乙醇或甲醇存在下將保留的混合物加熱1-3小時。
7.權利要求5或6中任何一項的加工人參的方法，其中所述人參選自由白參、鮮人參、須參、紅參、人參葉、西洋參、三七和Panaxjaponicus組成的組。
8.含權利要求1加工過的人參提取物或所述人參的皂苷部分提取物作為活性成分的藥物組合物。
9.權利要求8的藥物組合物，其中所述藥物組合物在改善血液循環、勃起功能障礙、高血壓、動脈硬化、抗血栓形成、腦功能、緩解疲勞和治療及預防腦中風方面是有效的。
10.權利要求8的藥物組合物，其中所述藥物組合物在預防和/或治療癌癥和減輕抗癌藥的副作用方面是有效的。
11.權利要求8、9或10中任何一項的藥物組合物，其中將所述藥物組合物制備成選自由液體制劑、片劑、顆粒劑、丸劑、硬膠囊劑或軟膠囊劑組成的組中的形式。
12.含權利要求1加工過的人參提取物或所述人參的皂苷部分提取物作為活性成分的食品添加劑。
13.含權利要求1加工過的人參提取物或所述人參的皂苷部分提取物作為活性成分的健康輔助食品。
全文摘要
本發明涉及加工人參的方法和加工過的人參提取物的用途。更具體地，本發明涉及加工過的人參的提取物，其提高人參糖苷(Rg3+Rg5)/(Rb1+Rb2+Rc+Rd)的比率為10－45是由于通過將人參與下列草藥混合而起到的協同作用諸如五味子、山楂、山茱萸、木瓜、烏梅、香橙、枳殼、蘋果、石榴和檸檬，和通過在70－120℃的溫度加熱含人參和前述草藥成分的混合物加工人參的方法。
文檔編號A23F3/00GK1545382SQ03800811
公開日2004年11月10日 申請日期2003年1月2日 優先權日2002年1月5日
發明者樸明煥 申請人:Lotte制果株式會社, 樸明煥