微囊及含微囊的經(jīng)口組合物的制作方法

專利名稱：微囊及含微囊的經(jīng)口組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種在微生物菌體內(nèi)包含外源性物質(zhì)的微囊。更詳細(xì)地說，涉及一種能夠控制包含于微生物菌體內(nèi)的外源性物質(zhì)的釋放速度、強(qiáng)度或持續(xù)性微囊。本發(fā)明進(jìn)一步涉及該微囊的制造方法及含有微囊的經(jīng)口組合物。
背景技術(shù)：
眾所周知，現(xiàn)有的控制所需成分的釋放時間或速度，提高該成分持續(xù)性的方法有所謂的微囊法，其中將該成分封入天然或合成高分子構(gòu)成的直徑大約數(shù)～數(shù)百μm的微粒子容器(微囊)中。作為微囊的制造方法，雖然已知有利用明膠的凝聚法(例如，美國專利第2800457號、2800458號公報)，由外相(水相)形成膜的原位法(例如特公昭36-9168號、47-23165號、特開昭48-57892號、51-9079號、54-25277號)；及利用內(nèi)相和外相間的成膜反應(yīng)的界面聚合法等，但是近年來利用酵母等微生物的細(xì)胞壁作為膠囊包膜的微生物微囊法也廣為人知。
使用微生物的微囊制造方法例如有如下方法，如特開昭61-88871號、特開昭62-186937號、特開昭63-88033號、WO94/22572、WO96/36433、特開昭58-107189號、及EP0242135B1等公報中所述，不除去酵母菌體的內(nèi)含成分，直接使其內(nèi)含香料等所需外源性物質(zhì)的方法；以及如特開平4-4033號、特開平4-63127號、特開平4-117245號、特開平5-15770號、及特開平8-243378號等公報中所述，除去酵母菌體中的內(nèi)源性成分之后，使該菌體內(nèi)含有希望的外源性物質(zhì)的方法。后一方法有利之處在于，除去酵母菌體中的內(nèi)源性成分越多，可以使其更多地內(nèi)含希望的外源性物質(zhì)，結(jié)果可以更多地得到該外源性物質(zhì)的效果。
但是，在食品領(lǐng)域，口香糖是要求口味或香味具有顯現(xiàn)速度或持續(xù)性的商品之一，滿足要求非常困難，一般地開始咬發(fā)出強(qiáng)烈的味道或香味，但是在嚼的過程中該口味或香味快速地消失。因此，長期以來一直開發(fā)使口香糖具有盡可能長的嚼咬時間，而且使其香味持續(xù)的方法。其中在特開平5-192085號公報中提出，在微生物的菌體內(nèi)封入香料，將其用作調(diào)味劑，制備口香糖。通過這樣制作可以用少的香料得到具有強(qiáng)烈味道和持續(xù)性的口香糖。
但是，香料或呈味料(例如甜味料等)等封入微生物菌體內(nèi)的外源性物質(zhì)(內(nèi)含成分)的顯現(xiàn)速度、強(qiáng)度或其持續(xù)性仍然不充分，需要進(jìn)一步改進(jìn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于，對于微生物菌體內(nèi)含有外源性物質(zhì)的微囊，提供使該內(nèi)含的外源性物質(zhì)(內(nèi)容成分)的釋放速度、強(qiáng)度或持續(xù)性提高的方法，及改善所述形成內(nèi)容成分釋放特性的微囊。而且本發(fā)明通過使用該微囊，提供可以得到以更少的量有效內(nèi)含的外源性物質(zhì)效果的經(jīng)口組合物，或者提供以更少量內(nèi)含的外源性物質(zhì)的持續(xù)性優(yōu)良的經(jīng)口組合物。
本發(fā)明者為解決上述問題進(jìn)行反復(fù)研究發(fā)現(xiàn)，對于微生物的菌體內(nèi)包含外源性物質(zhì)的所謂的微生物微囊，通過用選自糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類及多元醇組成的組中的至少一種包敷該微生物(微囊)表面的一部分或全部，可以防止該外源性物質(zhì)劣化，進(jìn)一步改善釋放速度、強(qiáng)度或其持續(xù)性。而且結(jié)果表明通過使用預(yù)先除去微生物的內(nèi)源性菌體內(nèi)成分的微生物作為內(nèi)含外源性物質(zhì)的微生物，可以得到更加顯著的效果。本發(fā)明是在所述發(fā)現(xiàn)基礎(chǔ)上完成的。
也就是，本發(fā)明涉及如下述1～9項(xiàng)所述的微囊。
1項(xiàng)、一種微囊，其中在菌體內(nèi)包含外源性物質(zhì)的微生物的表面上，附著有選自由糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類及多元醇組成的組中的至少一種。
2項(xiàng)、如1項(xiàng)所述的微囊，其中在菌體內(nèi)包含外源性物質(zhì)的微生物是內(nèi)源性的菌體內(nèi)成分溶出的微生物。
3項(xiàng)、如1項(xiàng)或2項(xiàng)所述的微囊，其中，微生物為酵母。
4項(xiàng)、如1項(xiàng)至3項(xiàng)任何一項(xiàng)所述的微囊，其中，糖類是選自由單糖類、二糖類、三糖類、四糖類、低聚糖、多糖類及糖醇組成的組中的至少一種。
5項(xiàng)、如1項(xiàng)至3項(xiàng)任何一項(xiàng)所述的微囊，其特征在于，在微生物的表面附著有選自由乳糖、麥芽酮糖(マルチロ一ス)、海藻糖、還原帕拉金糖(パラチニット)、糊精、甘油、丙二醇、聚甘油、及聚丙二醇組成的組中的至少一種。
6項(xiàng)、如1項(xiàng)至5項(xiàng)任何一項(xiàng)所述的微囊，其中，在微生物的菌體內(nèi)包含的外源性物質(zhì)為疏水性物質(zhì)。
7項(xiàng)、如1項(xiàng)至6項(xiàng)任何一項(xiàng)所述的微囊，其中，包含于微生物的菌體內(nèi)的外源性物質(zhì)為選自由香料、著色料、苦味料、酸味料、調(diào)味料、香辛料、甜味料、脂質(zhì)、脂肪酸、氨基酸類、酶、維生素類、動植物提取物及生理活性物質(zhì)組成的組中的至少一種。
8項(xiàng)、如1項(xiàng)至7項(xiàng)任何一項(xiàng)所述的微囊，其可以作為食品、醫(yī)藥品、準(zhǔn)醫(yī)藥品、化妝品或飼料的成分使用。
9項(xiàng)、如1項(xiàng)至8項(xiàng)任何一項(xiàng)所述的微囊，其中，在菌體內(nèi)包含外源性物質(zhì)的微生物的表面被選自由糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類及多元醇組成的組中的至少一種包敷。
另外該微囊包括下述形態(tài)(a)作為香料使用的1項(xiàng)至9項(xiàng)任何一項(xiàng)所述的微囊，其中，在微生物的菌體內(nèi)包含的外源性物質(zhì)至少是香料。
(b)作為甜味料使用的1項(xiàng)至9項(xiàng)任何一項(xiàng)所述的微囊，其中，在微生物的菌體內(nèi)包含的外源性物質(zhì)至少是甜味料。
(c)作為著色料使用的1項(xiàng)至9項(xiàng)任何一項(xiàng)所述的微囊，其中，在微生物的菌體內(nèi)包含的外源性物質(zhì)至少是著色料。
(d)作為調(diào)味料使用的1項(xiàng)至9項(xiàng)任何一項(xiàng)所述的微囊，其中，在微生物的菌體內(nèi)包含的外源性物質(zhì)至少是調(diào)味料。
(e)作為酸味料使用的1項(xiàng)至9項(xiàng)任何一項(xiàng)所述的微囊，其中，在微生物的菌體內(nèi)包含的外源性物質(zhì)至少是酸味料。
(f)作為苦味料使用的1項(xiàng)至9項(xiàng)任何一項(xiàng)所述的微囊，其中，在微生物的菌體內(nèi)包含的外源性物質(zhì)至少是苦味料。
(g)作為香辛料使用的1項(xiàng)至9項(xiàng)任何一項(xiàng)所述的微囊，其中，在微生物的菌體內(nèi)包含的外源性物質(zhì)至少是香辛料。
而且，本發(fā)明涉及下述10～11項(xiàng)所列的上述微囊的制造方法。
10項(xiàng)、一種微囊的制造方法，包括(1)使微生物的菌體內(nèi)包含外源性物質(zhì)的工序，(2)使工序(1)得到的微生物的表面上附著選自糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類和多元醇組成的組中的至少一種的工序。
11項(xiàng)、如10項(xiàng)所述的微囊的制造方法，其中(1)的工序是使用內(nèi)源性菌體內(nèi)成分被溶出的微生物，使該微生物的菌體內(nèi)包含外源性物質(zhì)的工序。
另外，該微囊的制造方法包含下述形態(tài)(a)如10項(xiàng)或11項(xiàng)所述的微囊的制造方法，其中使用酵母作為微生物。
(b)如10項(xiàng)或11項(xiàng)所述的微囊的制造方法，其中使微生物表面附著的糖類為選自由單糖類、二糖類、三糖類、四糖類、低聚糖、多糖類及糖醇組成的組中的至少一種。
(c)如10項(xiàng)或11項(xiàng)所述的微囊的制造方法，其中使微生物的表面附著選自由乳糖、麥芽酮糖、海藻糖、還原帕拉金糖、糊精、甘油、丙二醇、聚甘油、及聚丙二醇組成的組中的至少一種。
(d)如10項(xiàng)或11項(xiàng)所述的微囊的制造方法，其中在微生物的菌體內(nèi)包含的外源性物質(zhì)為疏水性物質(zhì)。
(e)如10項(xiàng)或11項(xiàng)所述的微囊的制造方法，其中包含于微生物的菌體內(nèi)的外源性物質(zhì)為選自由香料、著色料、苦味料、酸味料、調(diào)味料、香辛料、甜味料、脂質(zhì)、脂肪酸、氨基酸類、酶、維生素類、動植物提取物及生理活性物質(zhì)組成的組中的至少一種。
(f)如10項(xiàng)或11項(xiàng)所述的微囊的制造方法，其中(2)的工序是用選自由糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類及多元醇組成的組中的至少一種包敷微生物表面的工序。
另外，本發(fā)明涉及含有上述1或9任何一項(xiàng)所述的微囊的經(jīng)口組合物。所述的經(jīng)口組合物包括食品、經(jīng)口醫(yī)藥品、及經(jīng)口準(zhǔn)醫(yī)藥品等可食用組合物及潔齒劑等口腔內(nèi)組合物的任何一種。優(yōu)選食品。其中適合的經(jīng)口組合物，例如有象口香糖等膠類、粘糖或牛軋?zhí)堑溶浱枪⒒蚓捉绖┑饶菢?，在口腔?nèi)長時間保持的物質(zhì)，優(yōu)選在口腔內(nèi)長期咀嚼使用的物質(zhì)。
12項(xiàng)、一種經(jīng)口組合物，其中含有如1至9任何一項(xiàng)所述的微囊。
13項(xiàng)、如12項(xiàng)所述的經(jīng)口組合物，其含有1項(xiàng)至9項(xiàng)任何一項(xiàng)所述的微囊作為香料、著色料、調(diào)味料、酸味料、苦味料、香辛料及甜味料組成的組中的至少一種。
14項(xiàng)、如12項(xiàng)或13項(xiàng)所述的經(jīng)口組合物，其是一種在口腔內(nèi)長期保持，或者在口腔內(nèi)長期咀嚼的物質(zhì)。
15項(xiàng)、如12項(xiàng)或14項(xiàng)任一項(xiàng)所述的經(jīng)口組合物，其為口香糖。
而且本發(fā)明涉及下述16～20項(xiàng)所列的控制包含于微囊中的外源性物質(zhì)的釋放的方法。
16項(xiàng)、一種控制在微生物的菌體內(nèi)包含外源性物質(zhì)的微囊的外源性物質(zhì)的釋放速度、強(qiáng)度或持續(xù)性的方法，其特征在于，使所述微囊的表面上附著選自由糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類及多元醇組成的組中的至少一種。
17項(xiàng)、如16項(xiàng)所述的方法，其為控制在微生物的菌體內(nèi)包含香味成分的微囊的香味的顯現(xiàn)速度、強(qiáng)度或持續(xù)性的方法。
18項(xiàng)、如17項(xiàng)所述的方法，其中在微生物的菌體內(nèi)包含香味成分的微囊是在內(nèi)源性的菌體內(nèi)成分被溶出的微生物的菌體內(nèi)包含有香味成分的微囊。
19項(xiàng)、如17項(xiàng)或18項(xiàng)所述的方法，其為提高香味的顯現(xiàn)速度、強(qiáng)度或持續(xù)性的方法。
20項(xiàng)、如17或19任何一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，微囊的表面用選自由糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類及多元醇組成的組中的至少一種包敷。
另外該微囊的控制方法包含下述形態(tài)(a)如16項(xiàng)至20項(xiàng)任何一項(xiàng)所述的方法，其中使用酵母作為微生物。
(b)如16項(xiàng)或20項(xiàng)任何一項(xiàng)所述的方法，其中微生物表面附著的糖類為選自由單糖類、二糖類、三糖類、四糖類、低聚糖、多糖類及糖醇組成的組中的至少一種。
(c)如16項(xiàng)或20項(xiàng)任何一項(xiàng)所述的方法，其為使微生物的表面附著選自由乳糖、麥芽酮糖、海藻糖、還原帕拉金糖、糊精、甘油、丙二醇、聚甘油、及聚丙二醇組成的組中的至少一種的方法。
(d)如16項(xiàng)或20項(xiàng)任何一項(xiàng)所述的方法，其中，在微生物的菌體內(nèi)包含的外源性物質(zhì)為疏水性物質(zhì)。
(e)如16項(xiàng)或20項(xiàng)任何一項(xiàng)所述的方法，其中，包含于微生物的菌體內(nèi)的外源性物質(zhì)為選自由香料、著色料、苦味料、酸味料、調(diào)味料、香辛料、甜味料、脂質(zhì)、脂肪酸、氨基酸類、酶、維生素類、動植物提取物及生理活性物質(zhì)組成的組中的至少一種。
另外，本發(fā)明涉及下述21項(xiàng)～25項(xiàng)所列的控制經(jīng)口組合物的所需成分的顯現(xiàn)速度、強(qiáng)度或持續(xù)性的方法。
21項(xiàng)、一種控制經(jīng)口組合物的外源性物質(zhì)的顯現(xiàn)速度、強(qiáng)度或持續(xù)性的方法，包括步驟將在菌體內(nèi)包含外源性物質(zhì)的微生物的表面上附著有選自由糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類及多元醇組成的組中的至少一種的微囊，配合于經(jīng)口組合物。
22項(xiàng)、一種控制經(jīng)口組合物的香味的顯現(xiàn)、強(qiáng)度或持續(xù)性的方法，包括步驟步驟將在菌體內(nèi)包含有香味成分的微生物的表面上附著有選自由糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類及多元醇組成的組中的至少一種的微囊，配合于經(jīng)口組合物中。
23項(xiàng)、如21項(xiàng)或22項(xiàng)所述的方法，其中在菌體內(nèi)包含外源性物質(zhì)、特別是香味成分的微生物是內(nèi)源性菌體內(nèi)成分被溶出的微生物。
24項(xiàng)、如21項(xiàng)或23項(xiàng)任何一項(xiàng)所述的方法，其為對于經(jīng)口組合物而言，提高經(jīng)口組合物的外源性物質(zhì)特別是香味的顯現(xiàn)速度、強(qiáng)度或持續(xù)性的方法。
25項(xiàng)、如21或24任何一項(xiàng)所述的方法，其中，作為微囊，是用選自由糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類及多元醇組成的組中的至少一種包敷微生物的表面的微囊。
另外該方法包含下述形態(tài)(a)如21項(xiàng)至25項(xiàng)任何一項(xiàng)所述的方法，其中使用酵母作為微生物。
(b)如21項(xiàng)或25項(xiàng)任何一項(xiàng)所述的方法，其中微生物表面附著的糖類為選自由單糖類、二糖類、三糖類、四糖類、低聚糖、多糖類及糖醇組成的組中的至少一種。
(c)如21項(xiàng)或25項(xiàng)任何一項(xiàng)所述的方法，其為使微生物的表面附著選自由乳糖、麥芽酮糖、海藻糖、還原帕拉金糖、糊精、甘油、丙二醇、聚甘油、及聚丙二醇組成的組中的至少一種的方法。
(d)如21項(xiàng)或25項(xiàng)任何一項(xiàng)所述的方法，其中，在微生物的菌體內(nèi)包含的外源性物質(zhì)，特別是香味成分，為疏水性物質(zhì)。
(e)如21項(xiàng)所述的方法，其中，包含于微生物的菌體內(nèi)的外源性物質(zhì)為選自由香料、著色料、苦味料、酸味料、調(diào)味料、香辛料、甜味料、脂質(zhì)、脂肪酸、氨基酸類、酶、維生素類、動植物提取物及生理活性物質(zhì)組成的組中的至少一種。
(f)如22項(xiàng)至25項(xiàng)任何一項(xiàng)所述的方法，其中，包含于微生物的菌體內(nèi)的香味成分為選自由香料、苦味料、酸味料、調(diào)味料、香辛料、甜味料、脂質(zhì)、脂肪酸、氨基酸類、酶、維生素類、動植物提取物及生理活性物質(zhì)組成的組中的至少一種。
另外，本發(fā)明包含下述形態(tài)。
26項(xiàng)、在菌體內(nèi)包含外源性物質(zhì)的微生物表面上附著有選自由糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類及多元醇組成的組中的至少一種的微囊作為香料、甜味料、著色料、調(diào)味料、苦味料、香辛料或酸味料的應(yīng)用。
27項(xiàng)、在菌體內(nèi)包含有香味成分的微生物表面上附著有選自由糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類及多元醇組成的組中的至少一種的微囊在制備香味的顯現(xiàn)速度、強(qiáng)度或持續(xù)性得到改善的香料、甜味料、調(diào)味料、苦味料、香辛料或酸味料任何一種中的應(yīng)用。
28項(xiàng)、在菌體內(nèi)包含外源性物質(zhì)的微生物表面上附著有選自由糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類及多元醇組成的組中的至少一種的微囊在制備經(jīng)口組合物中的應(yīng)用。
29項(xiàng)、在菌體內(nèi)包含有香味成分的微生物表面上附著有選自由糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類及多元醇組成的組中的至少一種微囊在制備香味的顯現(xiàn)速度、強(qiáng)度或持續(xù)性得到改善的經(jīng)口組合物中的應(yīng)用。
30項(xiàng)、在菌體內(nèi)包含有香味成分的微生物表面上附著有選自由糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類及多元醇組成的組中的至少一種的微囊在提高經(jīng)口組合物的香味顯現(xiàn)速度、強(qiáng)度或持續(xù)性中的應(yīng)用。
發(fā)明實(shí)施方式(1)微囊本發(fā)明的微囊特征在于，在菌體內(nèi)包含有外源性物質(zhì)的微生物表面上，附著有選自由糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類及多元醇組成的組中的至少一種。
作為本發(fā)明中用于將外源性物質(zhì)包含在菌體內(nèi)的微生物，只要包含細(xì)胞壁，并且可以確保人體的安全，不管藻類、酵母、真菌類、或細(xì)菌等的種類，可以使用任何一種微生物。優(yōu)選酵母。在此所述酵母可以任意使用麥酒酵母菌、發(fā)面酵母菌、及圓酵母等適合人體攝取的酵母。具體地例如有釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、醬膠酵母菌(Saccharomyces rouxii)、以及卡氏酵母菌(Saccharomyces carlsbergensis)等屬于酵母菌屬的酵母菌；產(chǎn)朊假絲酵母(Candida flaveri)、熱帶假絲酵母(Candida tropicalis)、解脂假絲酵母(Candida lipolytica)、Candidaflaveri等屬于假絲酵母的酵母菌。這些微生物可以單獨(dú)使用，也可以2種以上任意混合使用。另外，這些微生物沒有特別限定，優(yōu)選直徑范圍為1μm～20μm的那些。
這些微生物在內(nèi)含外源性物質(zhì)時，不考慮生菌還是死菌類、或者濕潤和干燥狀態(tài)、以及有無溶出除去內(nèi)源性的菌體內(nèi)成分的差別等，可以使用任意狀態(tài)的。特別適合采用預(yù)先使內(nèi)源性的菌體內(nèi)成分溶到菌體外的微生物。另外，在此作為內(nèi)源性菌體內(nèi)成分例如有氨基酸、肽、蛋白質(zhì)(包括酶)、糖質(zhì)、核酸、以及脂質(zhì)等。通過這樣地處理，可以將更多的外源性物質(zhì)添入微生物的菌體內(nèi)，而且可以顯著防止內(nèi)源性菌體內(nèi)成分由來的不希望的味道或氣味產(chǎn)生，或者由內(nèi)源性菌體內(nèi)成分產(chǎn)生的內(nèi)包的外源性物質(zhì)的分解或變質(zhì)等。
將內(nèi)源性菌體內(nèi)成分(內(nèi)源性成分)溶出至菌體外的方法沒有特別限定，可以任意選用通常的方法或?qū)黹_發(fā)的方法。例如通常的方法有加溫處理，pH處理和細(xì)胞壁破碎處理等物理處理法；溶出促進(jìn)劑添加法等化學(xué)處理法；使用菌體內(nèi)成分溶出酶或細(xì)胞壁溶解酶等的酶的酶處理法；或者這些方法的組合(參照特開平4-4033號等)。
這里，可以通過將目標(biāo)微生物的懸濁液通常升溫至30～100℃，優(yōu)選升溫至30～60℃，攪拌數(shù)分鐘到數(shù)小時，進(jìn)行加溫處理。這時為了更加有效地溶出菌體內(nèi)成分，也可以并用溶出促進(jìn)劑添加法。這里使用的溶出促進(jìn)劑例如有乙醇或丙醇等低級醇、醋酸乙酯及丙酮等極性有機(jī)溶劑；無機(jī)鹽類、糖類、季銨鹽、各種防菌·抗菌·殺菌劑、以及氫氧化鈉或氫氧化鉀等堿類等。例如具體的方法是在微生物的水分散液中添加丙酮等溶劑，在溫度40℃左右的條件下振蕩24小時左右。
可以通過使用超聲波粉碎機(jī)或磨機(jī)等破壞細(xì)胞壁進(jìn)行細(xì)胞壁破碎處理。例如具體的方法是用珠磨機(jī)處理微生物的水分散液10分鐘。
另外，菌體內(nèi)成分溶出酶處理法中，包括利用微生物具有自消化酶的方法(Babayan，T.L.和Bezrukov，M.G.，1 Acta Biotechnol.0，5，129-136(1985))和酶處理法，該酶處理法通過單獨(dú)使用蛋白酶，或?qū)⒑怂崦浮ⅵ?葡聚糖酶、酯酶或脂肪酶中的至少一種和蛋白酶組合，處理酵母?？梢酝ㄟ^使具有自消化酶的微生物的水分散液或添加有上述酶的微生物的水分散液，在30～60℃的溫度下溫育1～48小時予以實(shí)施。
細(xì)胞壁溶解酶處理法包括如下方法，使用分解微生物細(xì)胞壁構(gòu)成成分(葡聚糖或甘露聚糖等多糖類、這些多糖類和蛋白質(zhì)的復(fù)合體、甲殼質(zhì)等)的酶，例如葡聚糖酶(β-1，3葡聚糖酶)、甘露聚糖酶或甲殼質(zhì)酶中的至少一種酶處理酵母的方法。具體地可以在通常pH4～9的條件下、30～60℃的溫度范圍內(nèi)將添加了上述酶的微生物的水分散液溫育數(shù)分鐘～10小時左右，進(jìn)行細(xì)胞壁溶解酶處理。
如上得到的處理物再利用離心分離除去上清液，根據(jù)需要對得到的殘?jiān)?菌體)進(jìn)行洗凈、加熱、pH調(diào)整處理，由此可以得到除去菌體內(nèi)成分的微生物菌體。
另外，使本發(fā)明中使用的內(nèi)源性菌體內(nèi)成分溶出的微生物不受上述所列的溶出方法或溶出程度的限制，廣泛地包括溶出除去了菌體內(nèi)成分的微生物。優(yōu)選溶出成分的絕對干燥重量相對于未處理微生物的絕對干燥重量100重量％的比例(溶出率)為10～80重量％，優(yōu)選30～70重量％這樣將內(nèi)源性菌體內(nèi)成分溶出的微生物。
另外，除去了涉及的內(nèi)源性菌體內(nèi)成分(內(nèi)源性成分)的微生物菌體，可以使用商業(yè)上容易簡便得到的那些。其沒有限制，例如從東方酵母工業(yè)株式會社、田邊制藥株式會社、アサヒフ一ドアンドヘルスケア株式會社及キリンビ -ル等株式會社(都是日本公司)等出售的酵母細(xì)胞壁。
除去了該內(nèi)源性菌體內(nèi)成分的微生物(菌體殘?jiān)?為了盡可能多地在該菌體內(nèi)部封入外源性物質(zhì)，在上述處理的基礎(chǔ)上，也可以再進(jìn)行酸性處理(特開平8-2433378號公報)、堿性處理(特公平7-32871號公報)、醇處理(特公平8-29246號公報)等任意處理。所述方法都是公知的方法，以制備的微生物的細(xì)胞壁具有作為微囊的膜所容許的化學(xué)和物理性質(zhì)為限度，不限于所述的方法。
具體地，作為酸性處理方法，可以列出將由酶處理法等上述處理法得到的菌體殘?jiān)鼞覞嵊邴}酸、磷酸或硫酸等無機(jī)酸、或乳酸、檸檬酸、醋酸或抗壞血酸等有機(jī)酸等的酸性水溶液(優(yōu)選pH不高于2)中，在規(guī)定時間內(nèi)邊攪拌邊加熱(優(yōu)選50～100℃)的方法。
另外，可以在堿性水溶液、優(yōu)選pH9～13，特別優(yōu)選pH10～12的水溶液中，用數(shù)分到數(shù)小時攪拌由酶處理法等上述處理法得到的菌體殘?jiān)?，進(jìn)行堿處理。該水溶液的溫度沒有特別限定，通常使用范圍為20～100℃，優(yōu)選30～100℃，特別優(yōu)選50～80℃的加熱狀態(tài)。另外為調(diào)整堿性水溶液，可以使用氫氧化鈉、氫氧化鈣、氫氧化鉀或硅酸鈉等無機(jī)鹽；或者氨、單乙醇二胺、乙二胺、或二乙撐三胺水溶液等有機(jī)氮系化合物。
可以在通過酶處理法等上述處理法得到的菌體殘?jiān)刑砑永缫辉嫉却碱惢蚝?，通過數(shù)分到數(shù)小時的攪拌，進(jìn)行醇處理。該處理溶液的溫度只要醇不揮發(fā)就可以，沒有特別限定。通常使用范圍為20～80℃。優(yōu)選30～60℃，特別優(yōu)選在40～50℃加熱狀態(tài)下進(jìn)行攪拌。這里一元醇例如有甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丁醇、己醇等碳數(shù)1～6的低級醇。優(yōu)選使用乙醇。
內(nèi)含于微生物菌體內(nèi)部的外源性物質(zhì)只要是液狀就可以，不管親水性、疏水性和兩親性。優(yōu)選疏水性物質(zhì)。另外所述的外源性物質(zhì)是指需要封入微生物的菌體內(nèi)的人為添加的物質(zhì)。包含例如以下兩種，即不是微生物成分(內(nèi)源性成分)由來的物質(zhì)；以及即使本來是微生物由來的，一旦濃縮從微生物取出的物質(zhì)，或者與其它成分混合等，就可以人為地進(jìn)行任何處理的物質(zhì)。在所述限度內(nèi)，人為處理的物質(zhì)即使再混入菌體內(nèi)，也相當(dāng)于本發(fā)明所述的外源性物質(zhì)。
例如，作為前者實(shí)例，廣泛涉及的有食品添加劑、食品組合物、醫(yī)藥組合物、醫(yī)藥品添加劑、準(zhǔn)醫(yī)藥組合物、及化妝品組合物等。后者實(shí)例例如有酵母提取物等微生物提取物，或者由微生物由來的(或由微生物產(chǎn)生的)生理活性物質(zhì)制備的例如抗生物質(zhì)和免疫抑制劑等。優(yōu)選食品添加劑、食品組合物(含食品材料)、經(jīng)口的醫(yī)藥組合物、及經(jīng)口用醫(yī)藥添加劑等可食性物質(zhì)。
外源性物質(zhì)具體地例如有香料(包括香料成分)、著色料(包括色素、顏料、染料)、甜味料(包括糖類)、酸味料、調(diào)味料、苦味料、香辛料、脂質(zhì)、脂肪酸、氨基酸類、酶、維生素類、動植物提取物、生理活性物質(zhì)等。優(yōu)選香料、甜味料、酸味料、調(diào)味料、苦味料、香辛料、脂質(zhì)、氨基酸類、維生素類、及動植物提取物等可形成香味的成分(香味成分)、著色料、維生素類以及生理活性物質(zhì)。更優(yōu)選香味成分，特別是香料、甜味料、酸味料、調(diào)味料、苦味料、及香辛料。
關(guān)于所述的外源性物質(zhì)，外源性物質(zhì)本身(有效成分)可以是本來具有親水性、疏水性或兩親性的任意性狀、優(yōu)選具有疏水性的那些，也可以是通過加熱、或者和其它的溶劑等物質(zhì)混合，制備成具有上述性狀、優(yōu)選具有疏水性的調(diào)制物。
所述香料例如有在食品或醫(yī)藥領(lǐng)域、以及化妝品領(lǐng)域一般使用的香料，優(yōu)選食品等可食性制品中適用的香料。所述香料具體有橙、檸檬、酸橙、柚、桔、以及橘等柑橘系香料；蘋果、香蕉、櫻桃、葡萄、瓜、桃、鳳梨、李子、覆盆子、草莓等水果系香料；香草、咖啡、可可、以及巧克力等ビンズ系香料；薄荷油、綠薄荷等薄荷系香料；多香果粉、肉桂、肉豆蔻等調(diào)味品系香料；杏仁、花生、以及胡桃等堅(jiān)果系香料；螃蟹、蝦、以及其它的魚類等水產(chǎn)系香料；其它的蔬菜、谷物、海草等的各種香料。另外香料成分例如有薄荷醇、d1-薄荷醇、薄荷酮、香子蘭醛、乙基香子蘭醛、桂皮酸、胡椒醛、d-冰片、麥芽醇、乙基麥芽醇、樟腦、氨茴酸甲酯、桂皮酸甲酯、肉桂醇、N-甲基氨茴酸甲酯、甲基β-萘酮、萜二烯、沉香醇、以及異硫氰酸烯丙酯等。另外上述物質(zhì)可以單獨(dú)使用，也可以2種以上任意進(jìn)行混合后使用。
著色料可以使用任何天然色素和合成色素。優(yōu)選使用食品等可食性制品中使用的色素。天然色素例如有類胡蘿卜素色素、辣椒色素、胭脂樹橙色素、橙色素、白薯色素、金盞花橙黃色素、等類胡蘿卜素色素；紫甘薯色素、紅卷心菜色素、接骨木莓、色素、葡萄果汁色素、葡萄果皮色素、紫玉米色素、紅蘿卜色素、蘇紫色素、紅米色素、越橘色素、醋栗色素、酸果蔓色素、粉紅色素、スイムグル一ベリ一色素、草莓色素、暗甜櫻桃色素、櫻桃色素、芙蓉屬色素、黑果越桔色素、紅醋栗色素、黑莓色素、越橘色素、梅紅色素、歐洲越桔色素、博伊森樹莓色素、深紫色色素、紫山藥色素、樹梅色素、紅葡萄色素、及羅甘梅色素等花色苷系色素、胭脂紅色素、光榮花色素、茜草色素、以及蟲膠色素等醌系色素；羅望子果色素、ク一ロ一色素、高粱色素、紫檀色素、洋蔥色素、羅望子色素、牡蠣色素、カロブ色素、甘草色素、蘇木色素、花生色素、美洲山核桃色素、紅花紅色素、紅花黃色素等類黃酮系色素；紅曲色素、紅曲紅色素等的アザフイロン色素；并且其它的色素例如有紅曲黃色素、醬色、姜莞屬色素、草紅色素、梔子蘭色素、梔子黃色素、梔子紅色素、葉綠酸、葉綠素、以及螺旋藻屬蘭色素等。另外合成類的焦油色素例如有食用紅色2號、食用紅色3號、食用紅色40號、食用紅色102號、食用紅色104號、食用紅色105號、食用紅色106號、食用黃色4號、食用黃色5號、食用蘭色1號、食用蘭色2號及食用綠色3號等。而且天然色素衍生物有降胭脂樹素鈉、降胭脂樹素鉀、銅葉綠素、銅葉綠素鈉及鐵葉綠素鈉等；合成天然色素有β-胡蘿卜素、蘆丁、蝦青素、雞油菌素、核黃素、核黃素鉻酸酯及核黃素5’-磷酸酯鈉等。其中，優(yōu)選β-胡蘿卜素、類胡蘿卜素色素、辣椒紅色素、胭脂樹色素、茜草色素、橙色素、梔子色素(梔子蘭色素、梔子黃色素、梔子紅色素)、葉綠素、紫色素、食用紅色3號、食用黃色4號、洋蔥色素、西紅柿色素、橙黃色素、葉黃色素等。
甜味料(包括糖類)例如有單糖類、二糖類、低聚糖、糖醇類、高甜度甜味料。具體的例如有阿戊糖、半乳糖、木糖、葡萄糖、山梨糖、果糖、鼠李糖、核糖、異性化液糖、N-乙酰氨基葡萄糖等單糖類；異海藻糖、蔗糖、トレハルロ-ス、海藻糖、新海藻糖、帕拉金糖、麥芽糖、蜜二糖、二蔗酮糖、乳糖等二糖類；α-環(huán)糊精、β-環(huán)糊精、低聚異麥芽糖(異麥芽糖、異麥芽三糖、6-α-葡萄糖基麥芽糖等)、低聚-N-乙酰氨基葡糖胺、半乳糖蔗糖、半乳糖乳糖、吡喃半乳基(β1-3)吡喃半乳基(β1-4)吡喃葡萄糖、吡喃半乳基(β1-3)吡喃葡萄糖、吡喃半乳基(β1-6)吡喃半乳基(β1-4)吡喃葡萄糖、吡喃半乳基(β1-6)吡喃葡萄糖、低聚木糖(木三糖、木二糖)、低聚龍膽糖(龍膽二糖、龍膽三糖、龍膽四糖)、木蘇四糖、テアンデオリゴ、低聚黑曲霉糖(黑曲霉糖)、低聚帕拉金糖、帕拉金糖糖漿、巖藻糖、低聚果糖(蔗果三糖、蔗果四糖(ニスト一ス)等)、呋喃果糖基蔗果四糖、葡聚糖、麥芽糖基β-環(huán)糊精、低聚麥芽糖(麥芽三糖、四糖、五糖、六糖、七糖等)、棉子糖、蔗糖結(jié)合的糖稀(偶合糖)、大豆低聚糖、轉(zhuǎn)化糖、糖稀等的低聚糖類；異麥芽糖醇、赤藻糖醇、木糖醇、甘油、山梨醇、還原帕拉金糖、麥芽糖醇、麥芽四糖醇、麥芽三糖醇、甘露醇、乳糖醇、還原低聚異麥芽糖、還原低聚木糖、還原低聚龍膽糖、還原麥芽糖稀、還原糖稀等的糖醇；α-葡糖基轉(zhuǎn)移酶處理的甜菊、阿斯巴甜、安賽蜜、阿力甜、甘草提取物(甘草甜素)、甘草酸三銨、甘草酸三鉀、甘草酸三鈉、甘草酸二銨、甘草酸二鉀、甘草酸二鈉、仙茅甜蛋白、糖精、糖精鈉、環(huán)己磺酸鹽、三氯蔗糖、甜菊提取物、甜菊末、甜精、索馬甜、甜葉懸鉤子提取物、ナイゼリアベリ一提取物、新甜(ネオテ一ム)、新橙皮二氫查耳酮、果糖基轉(zhuǎn)移酶處理的甜菊、巴西甜草提取物、神秘果提取物、羅漢果提取物、酶處理的甘草、酶分解的甘草等的高甜度甜味料；其他蜂蜜、果汁、果汁濃縮物等。
脂質(zhì)例如有大豆油、玉米油、米糠油、紅花油、棉籽油、橄欖油、蓖麻油、魚油、豬油、牛油、羊油、馬油、及卵磷脂等。
脂肪酸例如有二十二碳六烯酸、二十碳五烯酸、亞油酸、亞麻酸、十六烷酸、及油酸等。
維生素類例如有維生素A、維生素B群(維生素B1、B2、B6、B12、、B13、BC及BT等)、維生素C、維生素D、維生素E、維生素H、維生素K、維生素M、維生素P、維生素U及它們的衍生物。
動植物提取物一般可廣泛列舉在食品或醫(yī)藥品領(lǐng)域、及化妝品領(lǐng)域使用的動植物提取物，優(yōu)選可在食品等可食用性制品中使用的那些。例如小麥提取物、香草提取物、皂樹提取物、巴巴多蘆薈提取物、甘茶提取物、麥芽提取物、土當(dāng)歸提取物、野茉莉提取物、塔花屬植物提取物、魔芋提取物、桉樹葉提取物、金雞納樹皮提取物、酸橙提取物、黃金槍魚提取物、龍膽提取物、葡萄種子提取物、茶提取物等植物提取物；牛肉提取物、雞肉提取物、豬肉提取物、蟹提取物、鰹提取物、牡蠣提取物、動物膠、骨膠原、酵母提取物等動物提取物。另外，這些動植物提取物也包括象鰹節(jié)提取物等動植物的加工處理物的提取物、以及明膠加水分解物等的動植物提取物的再處理產(chǎn)物。
生理活性物質(zhì)一般可廣泛列舉在食品或醫(yī)藥品領(lǐng)域、及化妝品領(lǐng)域使用的生理活性物質(zhì)，優(yōu)選可適用于食品或口服用藥品等這樣的可食用性制品的物質(zhì)。例如乙柳酰胺、水楊酸鈉、乙酰氨基苯、布洛芬、非那西訂、丁子香粉、安替比林、兒茶酸、皂角苷類、硫酸軟骨素以及等神經(jīng)酰胺等的磷脂質(zhì)等。
香辛料一般可廣泛列舉在食品或醫(yī)藥品領(lǐng)域、及化妝品領(lǐng)域使用的香辛料，優(yōu)選可適用于食品或口服用藥品等這樣的可食用性制品的物質(zhì)。沒有限制，例如大蒜制劑、洋蔥、檸檬草、香菜、龍藁、月桂、迷迭香、歐洲甜羅勒、辣椒屬、百里香、肉桂、桂皮、牛至、姜黃屬、球狀物、胡椒屬、及芫荽等。
在上述各種同類組(例如著色料或甜味料等組)中所有的成分可以單獨(dú)使用，也可以2種以上任意混合使用。
上述各種類的外源性物質(zhì)可以單獨(dú)使用1種，也可以2種以上任意混合使用。而且也可以在上述列出的外源性物質(zhì)中配合分散劑、抗氧劑、防腐劑、矯味劑、乳化劑或強(qiáng)化劑等。例如使菌體內(nèi)部包含外源性物質(zhì)的香味成分，特別是含有香料時，可以在該香味成分中，混合使用選自提取的維生素E、d1-α維生素E、d-α-維生素E、d1-γ-維生素E、混合維生素E、迷失香提取物、楊梅提取物、蘆丁提取物、蘆丁酶分解物、茶提取物和生育三烯酚組成的組中的至少1種抗氧劑。
上述外源性物質(zhì)通過與所述微生物菌體(菌體殘?jiān)?混合，可以使其內(nèi)包于菌體內(nèi)。具體的是在所述微生物菌體(菌體殘?jiān)?的分散液中添加外源性物質(zhì)，根據(jù)需要調(diào)整pH或溫度，攪拌規(guī)定的時間，可以使外源性物質(zhì)內(nèi)包于菌體內(nèi)。pH沒有特別限定，通?？梢栽趐H5～9的范圍內(nèi)進(jìn)行適當(dāng)選擇，優(yōu)選在Ph6～8的范圍內(nèi)進(jìn)行適當(dāng)選擇。另外，溫度沒有特別限定，通?？梢栽?0～80℃范圍內(nèi)進(jìn)行適當(dāng)?shù)剡x擇，優(yōu)選在50～70℃的范圍內(nèi)適當(dāng)選擇。
另外，是否攪拌也沒有特別限定。攪拌時，可以使用具有攪拌翼的混合機(jī)、乳化機(jī)、分散劑、或勻質(zhì)器等各種攪拌裝置，使外源性物質(zhì)更加有效地內(nèi)包于微生物菌體內(nèi)。這時，攪拌速度或攪拌旋轉(zhuǎn)數(shù)等也沒有特別限定，通?？梢栽?,000～10,000rpm的范圍進(jìn)行適當(dāng)?shù)剡x擇調(diào)整。
另外在使外源性物質(zhì)和所述微生物菌體(菌體殘?jiān)?混合時，也可以在混合有外源性物質(zhì)和微生物菌體的體系中配合硬膜劑、抗氧劑、穩(wěn)定劑、分散劑、乳化劑、pH調(diào)整劑、防腐劑、或防劣化劑等。
本發(fā)明這樣處理得到的物質(zhì)，其特征在于，在微生物菌體內(nèi)部包含外源性物質(zhì)的微囊(內(nèi)含外源性物質(zhì)的微生物)的至少表面上，附著糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類以及多元醇。
在此使用的糖類有阿拉伯糖、半乳糖、木糖、葡萄糖、山梨糖、果糖、鼠李糖、鼠李糖、核糖、異性化液糖、N-乙酰氨基葡萄糖等單糖類；異海藻糖、蔗糖、麥芽酮糖、海藻糖、新海藻糖、帕拉金糖、麥芽糖、蜜二糖、二蔗酮糖、乳糖等二糖類；麥芽三糖等三糖類；麥芽四糖等四糖類；α-環(huán)糊精、β-環(huán)糊精、低聚異麥芽糖/麥異芽低聚物糖(異麥芽糖、異麥芽三糖、6-α-葡萄糖基麥芽糖等)、低聚-N-乙酰氨基葡萄糖、半乳糖蔗糖、半乳糖乳糖、吡喃半乳基(β1-3)吡喃半乳基(β1-4)吡喃葡萄糖、吡喃半乳基(β1-3)吡喃葡萄糖、吡喃半乳基(β1-6)吡喃半乳基(β1-4)吡喃葡萄糖、吡喃半乳基(β1-6)吡喃葡萄糖、低聚木糖(木三糖、木二糖)、低聚龍膽糖(龍膽二糖、龍膽三糖、龍膽四糖)、木蘇四糖、テアンデオリゴ、低聚黑曲霉糖(黑曲霉糖)、低聚帕拉金糖、帕拉金糖糖漿、巖藻糖、低聚果糖(蔗果三糖、蔗果四糖等)、呋喃果糖基蔗果四糖、葡聚糖、麥芽糖基β-環(huán)糊精、低聚麥芽糖(麥芽三糖、四糖、五糖、六糖、七糖等)、棉子糖、蔗糖結(jié)合的糖稀(偶合糖)、大豆低聚糖、轉(zhuǎn)化糖、糖稀、糊精、阿拉伯樹膠、黃原膠、瓜爾膠粉、角叉菜膠、熱凝多糖(カ一ドラン)、羅望子膠、結(jié)冷膠(ジエランガム)、淀粉、改性淀粉等的低聚糖類及多糖類；異麥芽糖醇、赤藻糖醇、木糖醇、甘油、山梨醇、還原帕拉金糖、麥芽糖醇、麥芽四糖醇、麥芽三糖醇、甘露醇、乳糖醇、還原低聚異麥芽糖、還原低聚木糖、還原低聚龍膽糖、還原麥芽糖稀、還原糖稀等的糖醇。優(yōu)選葡萄糖、核糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖、果糖等的單糖類；麥芽糖、乳糖、蔗糖、海藻糖等的二糖類；麥芽三糖等的三糖類；麥芽四糖等的四糖類；低聚麥芽糖等的低聚糖；糊精、阿拉伯樹膠、黃原膠、瓜爾膠粉、結(jié)冷膠、淀粉、改性淀粉、及環(huán)糊精等的多糖類；還原帕拉金糖、山梨糖醇、木糖醇、麥芽糖醇、乳糖醇、及赤蘚糖醇等的糖醇。更優(yōu)選乳糖、海藻糖等的二糖類。另外，這些糖類可以單獨(dú)使用，或者兩種以上任意組合使用。
高甜度甜味料例如有α-葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶處理的甜菊、阿斯巴甜、安賽蜜、阿力甜、甘草提取物(甘草甜素)、甘草酸三銨、甘草酸三鉀、甘草酸三鈉、甘草酸二銨、甘草酸二鉀、甘草酸二鈉、仙茅甜蛋白、糖精、糖精鈉、環(huán)己磺酸鹽、三氯蔗糖、甜菊提取物、甜菊末、甜精、索馬甜、甜葉懸鉤子提取物、ナイゼリアベリ一提取物、新甜(ネオテ一ム)、新橙皮二氫查耳酮、果糖基轉(zhuǎn)移酶處理的甜菊、巴西甜草提取物、神秘果提取物、羅漢果提取物、酶處理的甘草、酶分解的甘草等的高甜度甜味料；優(yōu)選阿斯巴短甜、三氯蔗糖、安賽蜜、索馬甜、甜菊、阿力甜、新甜、及木糖醇。另外，這些高甜度甜味料可以單獨(dú)使用一種或者兩種以上任意組合使用。
蛋白質(zhì)類例如有明膠、明膠加水分解物、玉米蛋白質(zhì)、酪蛋白、酪素鈉、膠原。特別優(yōu)選明膠、玉米蛋白質(zhì)、酪素鈉。這些多元醇可以單獨(dú)使用1種，也可以2種以上任意混合使用。
多元醇例如有丙三醇、丙二醇、及作為這些聚合物的聚丙二醇及聚丙三醇。優(yōu)選丙二醇、丙三醇。另外，這些多元醇可以單獨(dú)使用1種，也可以2種以上任意混合使用。
這些糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類、及多元醇可以單獨(dú)使用也可以2種以上任意混合使用。
對上述微囊上附著高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類和多元醇(下面也統(tǒng)稱其為“糖類等”)的方法沒有特別限定。例如有如下方法，即通過噴霧干燥機(jī)等使采用所述方法制備的微囊(內(nèi)包外源性物質(zhì)的微生物)干燥，利用流動層造粒機(jī)等使“糖類等”溶解或分散于水等的溶劑的溶液或分散液噴霧的方法；向附著“糖類等”的床(流化床)噴霧微囊(內(nèi)包外源性物質(zhì)的微生物)的分散液滴，然后分別取由“糖類等”覆蓋表面的微囊的分散液滴，進(jìn)行干燥的方法；向微囊(內(nèi)含外源性物質(zhì)的微生物)的分散液中添加“糖類等”，使其均勻地溶解，之后進(jìn)行冷凍干燥的方法；利用噴霧干燥等使微囊(內(nèi)含外源性物質(zhì)的微生物)進(jìn)行干燥，用高速攪拌混合機(jī)等向其中粉體混合“糖類等”的方法；以及在微囊(內(nèi)含外源性物質(zhì)的微生物)的分散液中添加“糖類等”，使其均勻溶解之后，噴霧干燥該分散液的方法等。優(yōu)選向微囊(內(nèi)含外源性物質(zhì)的微生物)的分散液中添加“糖類等”，使其均勻地溶解，之后噴霧該分散液進(jìn)行干燥的方法。
這里所述微囊(內(nèi)含外源性物質(zhì)的微生物)和“糖類等”(糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類和多元醇)的比例，例如為以干燥固體成分的重量比計算，相對于100重量份微囊(內(nèi)含外源性物質(zhì)的微生物)“糖類等”為1～90重量份，優(yōu)選10～50重量份，特別優(yōu)選20～40重量份。
所述方法中，在微囊(內(nèi)含外源性物質(zhì)的微生物)分散/懸濁于溶液的狀態(tài)下使用時，該分散液/懸濁液中的微囊的配合比例為5～80重量％、優(yōu)選10～50重量％、特別優(yōu)選20～40重量％，另外在“糖類等”處于溶解液或分散液/懸濁液的狀態(tài)下使用時該溶液中的配合比例為1～60重量％、優(yōu)選10～50重量％、特別優(yōu)選30～40重量％。
如上所述得到的微囊在至少一部分表面上附著有“糖類等”(糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類和多元醇)。優(yōu)選在微囊的表面上部分或全部地包敷(覆蓋)“糖類等”。另外只要是在表面的至少一部分附著“糖類等”，也可以在微囊的膜中(細(xì)胞壁中)或微囊內(nèi)部浸透侵入“糖類等”。
所述的“糖類等”附著于表面的微囊優(yōu)選用“糖類等”包敷表面的微囊(本發(fā)明的微囊)可以作為食品、醫(yī)藥品、準(zhǔn)醫(yī)藥品、化妝品、或飼料的成分使用。理想的是，本發(fā)明的膠囊可以作為經(jīng)口使用的經(jīng)口組合物(食品組合物、經(jīng)口用的醫(yī)藥或準(zhǔn)醫(yī)藥組合物、及飼料組合物)的成分使用。另外，經(jīng)口組合物中包含所有的可攝食體內(nèi)的可食性組合物和無論是否攝食，但在口腔內(nèi)使用的口腔用組合物。
本發(fā)明的微囊[“糖類等”附著(包敷)的微囊]根據(jù)其中內(nèi)含的成分的種類，可以有各種用途。分別進(jìn)行如下制備，例如內(nèi)含香料的微囊作為香料(微囊化香料)、內(nèi)含甜味料的微囊作為甜味料(微囊化甜味料)、內(nèi)含調(diào)味料的微囊作為調(diào)味料(微囊化調(diào)味料)、內(nèi)含酸味料的微囊作為酸味料(微囊化酸味料)、內(nèi)含苦味料的微囊作為苦味料(微囊化苦味料)、內(nèi)含香辛料的微囊作為香辛料(微囊化香辛料)、內(nèi)含著色料的微囊作為著色料(微囊化著色料)，可以有各種用途。
本發(fā)明的微囊適合作為以在口腔內(nèi)保持，或在口腔內(nèi)咀嚼攝取的形態(tài)的經(jīng)口組合物的配合成分。涉及的經(jīng)口組合物例如有口香糖、粘糖或牛軋?zhí)堑溶浱枪取⑼ㄟ^咀嚼而攝取的點(diǎn)心或嗜好品(食品組合物)、以及象咀嚼錠、咀嚼劑、顆粒劑、糖錠、口腔錠、以及潔齒劑等一樣，在口腔內(nèi)長時間保持，或者邊咀嚼邊攝取的醫(yī)藥組合物和準(zhǔn)醫(yī)藥組合物。優(yōu)選象口香糖一樣通過在口腔內(nèi)長時間咀嚼而攝取。另外所述的口香糖的概念包括屬于廣泛所指口腔內(nèi)咀嚼攝取的糖的球糖。
本發(fā)明提供一種含有所述的表面包敷“糖類等”的微囊(“糖類等”附著(包敷)的微囊本發(fā)明的微囊)的經(jīng)口組合物。如前所述，本發(fā)明綜合在口腔內(nèi)使用的物質(zhì)(口腔內(nèi)組合物)以及經(jīng)口攝入體內(nèi)(攝食)的物質(zhì)，稱作經(jīng)口組合物，其中包含食品組合物、經(jīng)口用醫(yī)藥或準(zhǔn)醫(yī)藥組合物，以及飼料組合物。
同樣具體的經(jīng)口組合物例如有如前所述的口香糖、粘糖或牛軋?zhí)堑溶洝疤枪取?，通過在口腔內(nèi)長時間咀嚼而攝取的點(diǎn)心或嗜好品(食品組合物)、以及象咀嚼錠、咀嚼劑、顆粒劑、糖錠、口腔錠、以及潔齒劑等一樣，不管是否咀嚼，在口腔內(nèi)長時間保持的醫(yī)藥組合物或準(zhǔn)醫(yī)藥組合物等。優(yōu)選食品組合物，特別優(yōu)選口香糖。
本發(fā)明的經(jīng)口組合物特別是食品組合物，尤其是口香糖，除含有上述“糖類等”附著(包敷)的微囊作為成分這點(diǎn)之外，可以包括公知的經(jīng)口組合物、特別是食品組合物，尤其是口香糖的成分，或可以利用公知的制造方法進(jìn)行制造。
最終得到的口香糖100重量％中所含的本發(fā)明的微囊(“糖類等”附著(包敷)的微囊)的比例沒有限制，通常為0.05～10重量％、優(yōu)選0.1～5重量％、特別優(yōu)選0.5～3重量％。
配合于口香糖等經(jīng)口組合物中的本發(fā)明的微囊對其用途沒有特別限定，優(yōu)選其內(nèi)部含有香料、甜味料(含糖)、著色料、酸味料、維生素類、香辛料、動植物提取物、生理活性物質(zhì)、調(diào)味料、苦味料、脂質(zhì)、脂肪酸、氨基酸類、或酶中的至少一種。對于口香糖來說，特別優(yōu)選的是可形成香味的成分(香味成分)、特別是香料、甜味料、酸味料、調(diào)味料或苦味料。內(nèi)部含有這些香料、甜味料、酸味料、調(diào)味料或苦味料的本發(fā)明的微囊(經(jīng)口組合物)可以分別作為微囊化香辣、微囊化甜味料、微囊化酸味料、微囊化調(diào)味料或微囊化苦味料，配合于口香糖(經(jīng)口組合物)中。
這些外源性物質(zhì)(香料、甜味料、著色料等)的具體成分例如有同樣所述的物質(zhì)，但是沒有特別限定。例如，對于香料也可以使用上述例舉的成分之外的香料成分。
在口香糖中配合的本發(fā)明的微囊以外的成分例如有膠基、甜味料(包括糖類)、色素、增稠劑、酸味料、軟化劑。通常在口香糖中含有的膠基的比例為10～35％，優(yōu)選20～30％重量％。另外甜味劑例如有蔗糖、果糖、液糖、葡萄糖、以及低聚糖等糖類；阿斯巴甜、三氯蔗糖、安賽蜜、索馬甜、甜菊、阿力甜、新甜、木糖醇、糖精鹽、以及甘草甜素等高甜度甜味料。
另外，口香糖的制備按照[膠基和膠產(chǎn)品技術(shù)(Gum Base andProducts Technology)以及美國口香糖大手冊(The Great AmericanChewing Gum Book)](ロバ一ト·ヘンドリクソン著、カフオサ·ガムS/A公司發(fā)行(1974年))所述的方法和操作進(jìn)行。這種情況，本發(fā)明的微囊的各成分可以任何工序進(jìn)行配合，該微囊在內(nèi)包象香料成分(特別是香料)或著色料等一樣容易受熱影響的外源性物質(zhì)時，特別是為了防止加熱導(dǎo)致的外源性物質(zhì)變質(zhì)(例如香味或顏色消失、劣化等)，優(yōu)選在制造工序接近結(jié)束時配合。
(2)微囊的制造方法本發(fā)明涉及前述的本發(fā)明的微囊[“糖類等”附著(包敷)的微囊]的制造方法。該方法基本含有下述工序。
1)在微生物的菌體內(nèi)加入外源性物質(zhì)的工序在得到的菌體內(nèi)含外源性物質(zhì)的微生物的表面，附著選自由糖、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類和多元醇構(gòu)成的組中的至少一種的工序。
根據(jù)需要，在上述工序1)和2)之間，也可以包含微生物的分離、洗凈、脫水、或干燥等任何處理工序，使菌體內(nèi)含有外源性物質(zhì)。
在上述1)工序中使用的微生物也可以使用預(yù)先從微生物的菌體內(nèi)溶出內(nèi)源性菌體內(nèi)成分的物質(zhì)。
在上述制造方法中使用的微生物、外源性物質(zhì)、糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類和多元醇的種類、以及從微生物的菌體內(nèi)溶出內(nèi)源性菌體內(nèi)成分的方法、向菌體內(nèi)添加外源性物質(zhì)的方法、在微生物表面附著糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類和多元醇的方法在前述(1)項(xiàng)中有記載，按照所述方法進(jìn)行。
(2)香味顯現(xiàn)的控制方法本發(fā)明涉及一種控制微生物菌體內(nèi)含有外源性物質(zhì)的微囊(內(nèi)含外源性物質(zhì)的微囊)中其外源性物質(zhì)的釋放速度、強(qiáng)度或持續(xù)性的方法，特別是提高外源性物質(zhì)的釋放速度、強(qiáng)度或持續(xù)性的方法。
所述方法基本上是通過在菌體內(nèi)包含有外源性物質(zhì)的微生物的表面上，附著選自由糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類和多元醇組成的組中的至少一種而實(shí)現(xiàn)的，在此用于包含外源性物質(zhì)的微生物例如有所述的藻類、酵母、菌類或細(xì)菌，優(yōu)選酵母。特別優(yōu)選預(yù)先內(nèi)源性菌體內(nèi)成分被溶出的酵母。
上述方法中使用的酵母、外源性物質(zhì)、糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類和多元醇的種類、以及使內(nèi)源性成分從微生物的菌體內(nèi)溶出的方法、向菌體內(nèi)添加外源性物質(zhì)的方法、在微生物表面附著糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類和多元醇的方法都在前述(1)項(xiàng)中有記載，本發(fā)明也按照所述方法進(jìn)行。另外，糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類和多元醇(“糖類等”)的附著程度沒有特別限定，可以在內(nèi)含外源性物質(zhì)的微生物的一部分表面上附著也可以在整體上覆蓋。另外，這種情況下，對“糖類等”侵入或浸潤微生物的細(xì)胞壁或菌體內(nèi)部的程度沒有任何限制。在內(nèi)含外源性物質(zhì)的微生物的表面上附著(包敷)的“糖類等”的比例沒有特別限定。以干燥固體成分的重量比計算，相對于包含外源性物質(zhì)的微生物100重量份，“糖類等”為1～90重量份，優(yōu)選10～50重量份，特別優(yōu)選20～40重量份的比例。通過這樣得到的微囊[“糖類等”附著(包敷)的微囊]可以控制內(nèi)部所含的外源性物質(zhì)的釋放速度、強(qiáng)度或持續(xù)性。特別是[“糖類等”附著(包敷)的微囊]在水存在下，特別是通過置于口腔內(nèi)充分顯現(xiàn)所述的效果。因此本發(fā)明的方法適用于控制口腔內(nèi)的香味顯現(xiàn)速度、強(qiáng)度或持續(xù)性。
因而本發(fā)明提供一種適當(dāng)?shù)乜刂莆⑸锞w內(nèi)含有外源性物質(zhì)的微囊(內(nèi)含香味成分的微囊)中，其香味的顯現(xiàn)速度、強(qiáng)度或持續(xù)性的方法，特別是提高香味的顯現(xiàn)速度、強(qiáng)度或持續(xù)性的方法。
所述香味成分只要是可以形成香味(香氣或氣味)的物質(zhì)就可以，沒有限制，具體例如香料、甜味料(包括糖類)、酸味料、調(diào)味料、苦味料、香辛料、脂質(zhì)、維生素、氨基酸類、及動植物提取物等。優(yōu)選使用香料、甜味料(包括糖類)、酸味料、調(diào)味料、苦味料、及香辛料，特別優(yōu)選使用香料、甜味料，更優(yōu)選香料。所述成分優(yōu)選適合食品使用的任何可食性的成分。特別優(yōu)選疏水性香料等的疏水性成分。
使內(nèi)含香味成分的維生素(微囊)的表面上，附著“糖類等”而得到的[“糖類等”附著(包敷)的微囊]比內(nèi)含香味成分的微囊本身，具有在口腔內(nèi)香味顯現(xiàn)速度快、并且適當(dāng)強(qiáng)度的香味持續(xù)時間長的效果。
本發(fā)明的方法用于控制包在微囊(微生物菌體)的香味成分從膠囊釋放，也就是本發(fā)明的方法作為提高香味成分(香料、甜味料、酸味料、調(diào)味料、苦味料、香辛料、脂質(zhì)、維生素、氨基酸類、及動植物提取物等)的香味顯現(xiàn)速度、強(qiáng)度及持續(xù)性的技術(shù)是有用的。
在此使用的本發(fā)明的微囊[“糖類等”附著(包敷)的微囊]，作為香味成分(例如香料、甜味料、酸味料、調(diào)味料、苦味料、香辛料、脂質(zhì)、維生素、氨基酸類、及動植物提取物等)配合于食品等經(jīng)口組合物中，由此可以控制該經(jīng)口組合物中的香味顯現(xiàn)速度、強(qiáng)度及持續(xù)性。
因此本發(fā)明提供一種控制食品等經(jīng)口組合物的香味顯現(xiàn)速度、強(qiáng)度或持續(xù)性的方法，特別是提高香味顯現(xiàn)速度、強(qiáng)度或持續(xù)性的方法。在此所述的適合經(jīng)口組合物例如是在口腔內(nèi)長期保持，或者在口腔內(nèi)長期咀嚼使用的組成物、例如口香糖或軟糖等食品組成物、或者咀嚼片、咀嚼劑、口腔錠或潔齒劑等醫(yī)藥組成物或醫(yī)藥外部組成物。優(yōu)選口香糖。制造方法是使用上述[“糖類等”附著(包敷)的微囊]作為選定的經(jīng)口組合物的成分，換言之使用[“糖類等”附著(包敷)的微囊]作為1個成分，制備特定的經(jīng)口組合物的。經(jīng)口組合物、特別是口香糖的制備方法、以及制備中使用的[“糖類等”附著(包敷)的微囊]的比例等都在所述(1)項(xiàng)中有記載，按照所述方法進(jìn)行。
實(shí)施例下面，利用實(shí)施例、比較例和試驗(yàn)例具體說明本發(fā)明的內(nèi)容。但本發(fā)明不限于此。另外只要沒有特別說明，下述所述的方法的單位中，份是指重量份，％是重量％。
實(shí)施例1～6內(nèi)包有香料的糖類附著(包敷)的微囊[除去了菌體內(nèi)成分]<微囊化香料>
(1)酵母菌體內(nèi)的內(nèi)源性成分的除去向啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)100g分散于水的泥狀液2000g中添加蛋白酶2g，之后在溫度50℃下振蕩20小時，使菌體內(nèi)成分溶至菌體外。得到的漿液以8000轉(zhuǎn)旋轉(zhuǎn)30分鐘，離心分離，除去上清液，得到酵母菌殘?jiān)?50g(干燥固體成分20％)。在其中添加水930g和濃鹽酸120g，攪拌下在80℃加熱10分鐘(酸處理)，之后冷卻。然后以8000轉(zhuǎn)旋轉(zhuǎn)30分鐘，離心分離，除去上清液，得到酸處理酵母菌殘?jiān)?00g(干燥固體成分10％)。然后，在其中添加水500g，以8000轉(zhuǎn)旋轉(zhuǎn)30分鐘，離心分離，除去上清液，向得到的殘?jiān)?00g(干燥固體成分10％)中添加10％氫氧化鈉水溶液，調(diào)整pH為7.0。
(2)向酵母菌體內(nèi)封入香料將如上制備的、含有除去了菌體內(nèi)的內(nèi)源性物質(zhì)的酵母的水分散液(干燥固體成分10％)450g加熱至70℃，向其中添加25g薄荷醇，以5000rpm攪拌2小時，使該酵母菌體內(nèi)封入香料(薄荷醇)(內(nèi)包香料的酵母)。
(3)向酵母菌體表面附著糖類(包敷)準(zhǔn)備6種含有如上制備的內(nèi)包香料的酵母的水溶液475g，分別向其中添加混合升溫至60℃的含50％乳糖的水溶液60g(實(shí)施例1)、含50％糊精(DE＝10)的水溶液60g(實(shí)施例2)、含50％麥芽糖的水溶液60g(實(shí)施例3)、含50％還原帕拉金糖的水溶液60g(實(shí)施例4)、含25％明膠的水溶液120g(實(shí)施例5)、以及含有15％明膠和15％乳糖的水溶液100g(實(shí)施例6)。然后將這些混合溶液添加至噴霧干燥機(jī)中，在進(jìn)口溫度150℃，出口溫度90℃的條件下進(jìn)行干燥噴霧，得到粉末狀的[糖類附著/內(nèi)包香料的微囊[除去了菌體內(nèi)成分]](實(shí)施例1～6)各90g。
實(shí)施例7內(nèi)包有香料的糖類附著(包敷)的微囊[含有菌體內(nèi)成分]<微囊化香料>
取代上述實(shí)施例1中使用的除去菌體內(nèi)的內(nèi)源性成分的酵母，使用含有內(nèi)源性成分的啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)，其余和實(shí)施例相同，(使用50％乳糖的水溶液)，得到粉末狀的糖類附著/內(nèi)包有香料的微囊[含有菌體內(nèi)成分](實(shí)施例7)。
具體地按照上述實(shí)施例1中(2)的方法，將含有啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)45g的水溶液450g升溫至70℃，向其中添加薄荷醇25g，以5000rpm攪拌2小時，向該酵母菌體內(nèi)加入香料(薄荷醇)(內(nèi)包香料的酵母)。按照上述實(shí)施例1中(3)的方法，添加混合升溫至60℃的含50％乳糖的水溶液30g。然后將該混合溶液添加至噴霧干燥機(jī)中，在進(jìn)口溫度150℃，出口溫度90℃的條件下進(jìn)行干燥噴霧，得到粉末狀的[糖類附著/內(nèi)包香料微囊[含有菌體內(nèi)成分](實(shí)施例7)90g。
實(shí)施例8～14口香糖用實(shí)施例1～7制備的內(nèi)包香料的微囊作為香料成分(微囊化香料)，按照以下配方分別制備口香糖(實(shí)施例8～14)。另外利用通常的方法制備口香糖。
口香糖配方膠基 25份砂糖 62份玉米糖漿 10份甘油 1份微囊化香料2份合計 100份實(shí)施例15內(nèi)包有香料的糖類附著(包敷)的微囊[除去菌體內(nèi)成分]<微囊化香料>
將根據(jù)實(shí)施例1(1)的方法制備的除去了菌體內(nèi)的內(nèi)源性成分的酵母懸濁在水中制備了酵母溶液(干燥固體成分10％)，將該酵母溶液450g加熱到70℃，在其中添加橙皮油25g并以5000rpm攪拌2小時。然后，在其中添加加熱到60℃的含有50％乳糖的水溶液60g并混合，然后，將該混合溶液置于噴霧干燥機(jī)中，在入口溫度150℃、出口溫度90℃條件下進(jìn)行噴霧干燥，得到“粉末狀的糖類附著/包敷的微囊[除去了菌體內(nèi)成分]”(實(shí)施例15)90g。
比較例1內(nèi)包香料的微囊[除去了菌體內(nèi)成分]根據(jù)與實(shí)施例1(1)的方法同樣制備的、除去了菌體內(nèi)的內(nèi)源性成分的酵母懸濁在水中制備了酵母溶液(干燥固體成分10％)643g。將其加熱到70℃，加入36g薄荷醇并在5000rpm攪拌2小時。然后，將該混合溶液置于噴霧干燥機(jī)中，在入口溫度150℃、出口溫度90℃條件下進(jìn)行噴霧干燥，得到粉末狀微囊(內(nèi)包香料的微囊[除去了菌體內(nèi)成分])(比較例1)90g。
比較例2內(nèi)包香料的微囊[除去了菌體內(nèi)成分]與乳糖的混合組合物在比較例1制備的粉末狀微囊(內(nèi)包香料的微囊[除去了菌體內(nèi)成分])70g中配合30g粉末狀乳糖并混合，得到了含有粉末狀的微囊的組合物(內(nèi)包香料的微囊[除去了菌體內(nèi)成分]+乳糖)98g(比較例2)。
比較例3內(nèi)包香料的微囊[含有菌體內(nèi)成分]
將啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)75g懸濁在水中制備了酵母溶液(干燥固體成分10％)750g。將其加熱到70℃，添加薄荷醇25g并在5000rpm攪拌2小時。然后，將該混合溶液置于噴霧干燥機(jī)中，在入口溫度150℃、出口溫度90℃條件下進(jìn)行噴霧干燥，得到粉末狀微囊(內(nèi)包香料的微囊[含有菌體內(nèi)成分])(比較例3)90g。
比較例4～6口香糖使用比較例1～3制備的微囊作為香料成分(微囊化香料)，與上述實(shí)施例8～14同樣地制備了口香糖(比較例4～6)。
比較例7內(nèi)包香料的微囊[除去了菌體內(nèi)成分]將與實(shí)施例1的1(1)的方法同樣制備的除去了菌體內(nèi)的內(nèi)源性成分的酵母懸濁在水中制備了酵母溶液(干燥固體成分10％)750g。將其加熱到70℃，添加薄荷醇25g并在5000rpm攪拌2小時。然后，將該混合溶液置于噴霧干燥機(jī)中，在入口溫度150℃、出口溫度90℃條件下進(jìn)行噴霧干燥，得到粉末狀微囊(內(nèi)包香料的微囊[除去了菌體內(nèi)成分])(比較例7)90g。
比較例8微囊化香料(非微生物)將阿拉伯樹膠30g和乳糖30g溶解于水中，制備了溶液(干燥固體成分30％)，將該溶液250g加熱到50℃，添加薄荷醇25g并在5000rpm攪拌2小時。然后，將該混合溶液置于噴霧干燥機(jī)中，在入口溫度150℃、出口溫度90℃條件下進(jìn)行噴霧干燥，得到粉末狀的微囊化香料90g。
實(shí)驗(yàn)例1對于實(shí)施例1和比較例2制備的內(nèi)包香料的微囊(微囊化香料)，評價了香味的顯現(xiàn)和持續(xù)性(實(shí)施例1乳糖附著/內(nèi)包香料的微囊[除去了菌體內(nèi)成分]，比較例2內(nèi)包香料的微囊[除去了菌體內(nèi)成分]+乳糖)。具體地，對于使用微囊化的香料(實(shí)施例1、比較例2)作為香料成分制備的口香糖(實(shí)施例8，比較例5)，由6名專門參與者以每分鐘75次的頻率進(jìn)行咀嚼。作為對照，同樣地對使用比較例1的微囊(微囊化的香料內(nèi)包香料的微囊[除去了菌體內(nèi)成分])作為香料成分制備的口香糖(比較例4)進(jìn)行咀嚼，與此時的香味的顯現(xiàn)速度、強(qiáng)度及持續(xù)性相比，評價了其香味的顯現(xiàn)速度、強(qiáng)度和持續(xù)性。另外，評價是以對照口香糖(比較例4)的香味的顯現(xiàn)速度、強(qiáng)度和持續(xù)性作為3，根據(jù)表1所示的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。
<表1>

<表2>

*表中，例如“實(shí)施例1/8”和“比較例2/5”分別表示實(shí)施例1和實(shí)施例8雙方、比較例2和比較例5雙方。下表同。
如實(shí)施例8的口香糖的結(jié)果所示，通過使用在內(nèi)包香料的酵母(除去了菌體內(nèi)成分)的表面包敷乳糖的微囊化香料(實(shí)施例1)作為香料成分，可以制備香味顯現(xiàn)快、香味強(qiáng)、和香味持續(xù)性長的口香糖(實(shí)施例8)另外，僅將內(nèi)包香料的酵母(除去了菌體內(nèi)成分)與乳糖混合而制備的微囊化香料(比較例2)用作香料成分制造的口香糖(比較例5)的香味顯現(xiàn)速度、強(qiáng)度和持續(xù)性均與對照口香糖(香味的顯現(xiàn)速度、強(qiáng)度和持續(xù)性3.0)沒有大的差別，比本發(fā)明實(shí)施例8的口香糖差得多。由此可以看出，通過在內(nèi)包香料的酵母的表面附著或者包敷乳糖，與僅將該酵母與乳糖混合相比，可以得到本發(fā)明特有的效果。
實(shí)驗(yàn)例2對于未除去酵母菌體的內(nèi)源性的菌體內(nèi)成分制備的實(shí)施例7和比較例3的微囊化香料(實(shí)施例7乳糖附著/香料內(nèi)包的微囊[含有菌體內(nèi)成分]，比較例3香料內(nèi)包的微囊[含有菌體內(nèi)成分])，使用其作為香料成分制備了口香糖(實(shí)施例12和比較例6)，使用該口香糖，與實(shí)施例1同樣地評價了香味的顯現(xiàn)速度、強(qiáng)度和持續(xù)性。結(jié)果如表3所示。
<表3>

從該結(jié)果可以看出，使用未除去酵母菌體內(nèi)的內(nèi)源性成分而內(nèi)包香料、并在該表面上附著乳糖而制作的微囊化的香料(使用實(shí)施例7乳糖附著/香料內(nèi)包的微囊[含有菌體內(nèi)成分])制備的口香糖(實(shí)施例14)與使用未附著糖類而制作的微囊化香料(比較例3內(nèi)包香料的微囊[含有菌體內(nèi)成分])制備的口香糖(比較例6)相比，顯現(xiàn)速度、強(qiáng)度和持續(xù)性均顯著優(yōu)良。
實(shí)驗(yàn)例3使用糊精(DE10)(實(shí)施例2)、麥芽糖(實(shí)施例3)、或者還原帕拉金糖(實(shí)施例4)代替乳糖作為酵母表面的包敷成分，制備了微囊化香料(實(shí)施例2糊精附著/香料內(nèi)包的微囊[除去了菌體內(nèi)成分]，實(shí)施例3麥芽糖附著/香料內(nèi)包的微囊[除去了菌體內(nèi)成分]，實(shí)施例4還原帕拉金糖/香料內(nèi)包的微囊[除去了菌體內(nèi)成分])，使用這些微囊化香料，與實(shí)施例8同樣地制備了口香糖(實(shí)施例9～11)。對于這些口香糖，與實(shí)施例1同樣地評價了香味的顯現(xiàn)(速度、強(qiáng)度)和持續(xù)性。結(jié)果與實(shí)施例8的口香糖(使用乳糖)的結(jié)果一并示于表4中。
<表4>

從實(shí)施例9和10的結(jié)果可以看出，表面包敷糊精(DE10)和麥芽糖的微囊化香料其香味顯現(xiàn)的強(qiáng)度與對照(比較例4)相比幾乎沒有變化，但是香味的持續(xù)性顯著提高。另外，從實(shí)施例11的結(jié)果可以看出，表面包敷還原帕拉金糖的微囊化香料，其香味顯現(xiàn)的強(qiáng)度顯著提高。
另外，實(shí)施例12和13的結(jié)果可以看出，表面包敷明膠+乳糖的微囊化香料其香味的顯現(xiàn)強(qiáng)度比對照(比較例4)弱，但香味的持續(xù)性顯著提高。
實(shí)驗(yàn)例4對于實(shí)施例15及比較例7、8的微囊，評價了其香味的強(qiáng)度、持續(xù)性(實(shí)施例15糖類附著/香料內(nèi)包的微囊[除去了菌體內(nèi)成分]，比較例7香料內(nèi)包的微囊[除去了菌體內(nèi)成分]，比較例8微囊化的香料(非微生物))。
具體地，將上述得到的微囊各50g裝入聚合物袋中密封，在50℃保存1個月。為調(diào)查微囊內(nèi)包的香料的持續(xù)性，測定了保存1個月后的微囊的萜二烯的含量，以保存前的萜二烯含量為100％進(jìn)行計算，求出了萜二烯(橙皮香料)的殘存率。另外，實(shí)施例15和比較例7、8制備的微囊(保存前)中所含的萜二烯對于每100％微囊均為23％。
另外，為調(diào)查保存引起的香料變質(zhì)，將在50℃保存1個月前與保存后的微囊各自制作了0.1％水溶液，由專門的參與者6名對于該香料的0.1％水溶液的香味進(jìn)行了評價。結(jié)果如表5所示。
<表5>

從這些結(jié)果可以看出，通過用糖類包敷內(nèi)包香料的酵母(微囊)(實(shí)施例15)，香味的持續(xù)性可以提高，并且可以顯著防止內(nèi)包的香料的變質(zhì)。
工業(yè)實(shí)用性根據(jù)本發(fā)明，對于在菌體內(nèi)包含外源性物質(zhì)的微生物(微囊)而言，可以控制該外源性物質(zhì)的釋放速度、強(qiáng)度、或者持續(xù)性。該外源性物質(zhì)的釋放速度、強(qiáng)度、或持續(xù)性被控制、改善的微囊，根據(jù)其中包含的外源性物質(zhì)，可以應(yīng)用于食品、醫(yī)藥品、準(zhǔn)醫(yī)藥品、化妝品、日用雜貨等的各種制品中。例如，含有可食性香料的本發(fā)明的微囊，可以用作例如口香糖的香料成分，使用該微囊作為香料制備的口香糖，根據(jù)附著的糖類和多元醇的種類，可以發(fā)揮在口腔內(nèi)迅速顯現(xiàn)香味、在口腔內(nèi)顯現(xiàn)強(qiáng)的香味、或者香味長時間持續(xù)的效果。
權(quán)利要求
1.一種微囊，其中在菌體內(nèi)包含外源性物質(zhì)的微生物的表面上，附著有選自由糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類及多元醇組成的組中的至少一種。
2.如權(quán)利要求1所述的微囊，其中在菌體內(nèi)包含外源性物質(zhì)的微生物是內(nèi)源性的菌體內(nèi)成分被溶出的微生物。
3.如權(quán)利要求1或2所述的微囊，其中，微生物為酵母。
4.如權(quán)利要求1～3任何一項(xiàng)所述的微囊，其中，糖類是選自由單糖類、二糖類、三糖類、四糖類、低聚糖、多糖類及糖醇組成的組中的至少一種。
5.如權(quán)利要求1所述的微囊，其特征在于，在微生物的表面附著有選自由乳糖、麥芽酮糖、海藻糖、還原帕拉金糖、糊精、甘油、丙二醇、聚甘油、及聚丙二醇組成的組中的至少一種。
6.如權(quán)利要求1所述的微囊，其中，在微生物的菌體內(nèi)包含的外源性物質(zhì)為疏水性物質(zhì)。
7.如權(quán)利要求1所述的微囊，其中，包含于微生物的菌體內(nèi)的外源性物質(zhì)為選自由香料、著色料、酸味料、調(diào)味料、苦味料、香辛料、甜味料、脂質(zhì)、脂肪酸、氨基酸類、酶、維生素類、動植物提取物及生理活性物質(zhì)組成的組中的至少一種。
8.如權(quán)利要求1所述的微囊，其可以作為食品、醫(yī)藥品、準(zhǔn)醫(yī)藥品、化妝品或飼料的成分使用。
9.一種微囊的制造方法，包括(1)使微生物的菌體內(nèi)包含外源性物質(zhì)的工序，(2)使工序(1)得到的微生物的表面上附著選自由糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類和多元醇組成的組中的至少一種的工序。
10.如權(quán)利要求9所述的微囊的制造方法，其中(1)的工序是使用內(nèi)源性菌體內(nèi)成分被溶出的微生物，使該微生物的菌體內(nèi)包含外源性物質(zhì)的工序。
11.一種經(jīng)口組合物，其中含有如權(quán)利要求1所述的微囊。
12.如權(quán)利要求11所述的經(jīng)口組合物，其含有權(quán)利要求1所述的微囊作為香料、著色料、調(diào)味料、酸味料、苦味料、香辛料或甜味料。
13.如權(quán)利要求11所述的經(jīng)口組合物，其是一種在口腔內(nèi)長期保持，或者在口腔內(nèi)長期咀嚼的物質(zhì)。
14.如權(quán)利要求11所述的經(jīng)口組合物，其為口香糖。
15.一種控制在微生物的菌體內(nèi)包含外源性物質(zhì)的微囊的外源性物質(zhì)的釋放速度、強(qiáng)度或持續(xù)性的方法，其特征在于，使所述微囊的表面上附著選自由糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類及多元醇組成的組中的至少一種。
16.如權(quán)利要求15所述的方法，其為控制在微生物的菌體內(nèi)包含香味成分的微囊的香味的顯現(xiàn)速度、強(qiáng)度或持續(xù)性的方法。
17.如權(quán)利要求16所述的方法，其中在微生物的菌體內(nèi)包含香味成分的微囊是在內(nèi)源性的菌體內(nèi)成分被溶出的微生物的菌體內(nèi)包含有香味成分的微囊。
18.如權(quán)利要求15所述的方法，其為提高香味的顯現(xiàn)速度、強(qiáng)度或持續(xù)性的方法。
19.一種控制經(jīng)口組合物的香味的顯現(xiàn)速度、強(qiáng)度或持續(xù)性的方法，包括步驟將在菌體內(nèi)包含香味成分的微生物的表面上附著有選自由糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類及多元醇組成的組中的至少一種的微囊，配合于經(jīng)口組合物中。
20.如權(quán)利要求19所述的方法，其中在菌體內(nèi)包含香味成分的微生物是內(nèi)源性菌體內(nèi)成分被溶出的微生物。
21.如權(quán)利要求19所述的方法，其為提高經(jīng)口組合物的香味的顯現(xiàn)速度、強(qiáng)度或持續(xù)性的方法。
22.在菌體內(nèi)包含外源性物質(zhì)的微生物表面上附著有選自由糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類及多元醇組成的組中的至少一種的微囊作為香料、甜味料、著色料、調(diào)味料、酸味料、香辛料或苦味料的應(yīng)用。
23.在菌體內(nèi)包含有香味成分的微生物表面上附著有選自由糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類及多元醇組成的組中的至少一種的微囊在制備經(jīng)口組合物中的應(yīng)用。
24.在菌體內(nèi)包含香味成分的微生物表面上附著有選自由糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類及多元醇組成的組中的至少一種的微囊在制備香味的顯現(xiàn)速度、強(qiáng)度或持續(xù)性得到改善的經(jīng)口組合物中的應(yīng)用。
25.在菌體內(nèi)包含香味成分的微生物表面上附著有選自由糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類及多元醇組成的組中的至少一種的微囊在提高經(jīng)口組合物的香味顯現(xiàn)速度、強(qiáng)度或持續(xù)性中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明提供微生物的菌體內(nèi)包含的外源性物質(zhì)的釋放速度、強(qiáng)度或持續(xù)性優(yōu)良的微囊。另外，提供該微囊的制造方法、或者含有該微囊的經(jīng)口組合物。通過使菌體內(nèi)包含外源性物質(zhì)的微生物的表面上附著選自由糖類、高甜度甜味料、蛋白質(zhì)類及多元醇組成的組中的至少一種可以實(shí)施。
文檔編號A23G4/00GK1589106SQ0282276
公開日2005年3月2日 申請日期2002年11月15日 優(yōu)先權(quán)日2001年11月15日
發(fā)明者佐佐木泰司, 折越英介, 林英生, 前田榮彰 申請人:三榮源有限公司