專利名稱：試管固載類直線核酸鏈標本及其制作方法
技術領域：
本發明涉及一種核酸鏈標本和制作方法，特別是一種試管固載類直線核酸鏈標本及其制作方法，屬于基因工程產品技術領域。
自然界中，核酸鏈的構象通常為線團狀或曲線態。在現有的分離DNA與檢測基因的場合，往往采用電泳處理和基因芯片的方法。實踐證明，這兩種方法存在很大的局限性。電泳處理方法的局限在于一是其分離DNA的分子量限于10000kb以下；二是其分離的DNA分子的構象不一致，不確定。基因芯片方法的局限在于一是其檢測的基因序列(一個印點)限于100kb以下；二是其工藝復雜，誤差率高。為了增大DNA分離的分子量，提高基因檢測的效率，需要有一種試管固載類直線核酸鏈標本及其制作方法。目前，國際上尚無此種專用的試管固載類直線核酸鏈標本及其制作方法。
本發明是要提供一種試管固載類直線核酸鏈標本及其制作方法，它可以彌補上述的不足。試管固載類直線核酸鏈標本，顧名思義，就是裝在試管里的貼在固態載體上的類直線核酸鏈標本。之所以將類直線核酸鏈貼在固態載體上，是為了方便人們利用電鏡等工具進行觀察、檢測。之所以將貼在固態載體上的類直線核酸鏈裝在試管里，是為了方便生產、保管、運輸等。裝在試管里的貼在固態載體上的核酸鏈不受來源、長度(堿基數量)、體標特征和組合形式的限制。它，可以是生物的核酸鏈，也可以是人類的核酸鏈，還可以是人工合成的核酸鏈；可以是一個細胞內的一段核酸鏈，也可以是一條染色體的全部核酸鏈，還可以是一個基因組的全部核酸鏈；可以是無標記核酸鏈，也可以是有標記核酸鏈，還可以是經過雜交反應的有示記核酸鏈；可以是單鏈核酸鏈，也可以是雙鏈核酸鏈，還可以是多鏈核酸鏈。試管固載類直線核酸鏈標本的一個重要特點是核酸鏈的類直線構象，一個重要特點是類直線構象的核酸鏈貼在固態載體上，兩個特點是通過一種特定的步驟加工出來的，這種特定的步驟就是制作試管固載類直線核酸鏈標本的方法。該方法是利用核酸的分子雜交規律和電荷效應規律，制備相應的接口核酸片段，被加工核酸鏈、試管、蓋帽、固態載體、蘸劑針蓋帽、電泳槽、黏合劑等，用以完成制作試管固載類直線核酸鏈標本的特定技術指標。這樣，比現有的電泳分離處理DNA和基因芯片檢測基因的方法應用的范圍大、效率高。
本實用發明的目的是這樣實現的一種試管固載類直線核酸鏈標本，它包括下列主要組成部分1、試管；2、蓋帽；3、固態載體；4、類直線核酸鏈；5、蘸劑針蓋帽。其特征在于試管壁是透明的材料構成的，試管的一端扣有蓋帽，試管的另一端扣有蘸劑針蓋帽，試管內裝有固態載體與核酸鏈，固態載體的一端安連在蓋帽上，核酸鏈呈類直線構象附貼在固態載體上。
為了實施生產試管固載類直線核酸鏈標本，因此而相應設計了試管固載類直線核酸鏈標本的制作方法，它包括以下步驟1、制備試管、蓋帽、固態載體、蘸劑針蓋帽、接口核酸片段、被加工核酸鏈、雜交介質、電泳介質、電泳槽、黏合劑等。
2、在蘸劑針蓋帽的針端蘸劑，粘附若干接口核酸片斷。
3、在蘸劑針蓋帽上添加適當雜交介質。
4、將被加工核酸鏈置于蘸劑針蓋帽上的雜交介質內。
5、使蘸劑針蓋帽上的介質升溫，直至處于介質內的核酸變性。
6、使蘸劑針蓋帽上的介質降溫，直至被加工核酸鏈的一端與接口核酸片斷發生雜交。
7、在蘸劑針蓋帽上安裝好試管，并向試管內填充適宜的電泳介質。
8、將固態載體進行表面涂劑處理安連在蓋帽上裝入試管。
9、將試管安置在裝有電泳介質的電泳槽內。
10、接通電源，使電泳槽和試管的介質產生電場。
11、持續相應的時間，使試管內的被加工核酸鏈泳成類直線構象。
12、調整試管的坐標和介質，使試管內的類直線構象的核酸鏈附貼到固態載體上。
13、切斷電源，從電泳槽內取出試管。
14、使蓋帽連同固態載體脫離試管，再使固態載體脫離蓋帽。
15、對固態載體上的類直線構象的核酸鏈進行基因檢測，檢測完畢后，將固態載體安連在蓋帽上裝入試管。
16、重復步驟1-15，滿足大批量生產試管固載類直線核酸鏈標本的需求。
附圖
試管固載類直線核酸鏈標本整體結構示意圖。
下面結合附圖及實施例對本發明作進一步描述參見圖，一種試管固載類直線核酸鏈標本，它包括下列主要組成部分，試管(1)，蓋帽(2)，固態載體(3)，類直線核酸鏈(4)，蘸劑針蓋帽(5)。其特征在于試管(1)的壁是透明材料構成的，試管(1)的一端扣有蓋帽(2)，試管(1)的另一端扣有蘸劑針蓋帽(5)，試管(1)內裝有固態載體(3)與類直線核酸鏈(4)，固態載體(3)的一端安連在蓋帽(2)上，類直線核酸鏈(4)附貼在固態載體(3)上。
在實施例中，制備的接口核酸片段要有合理的長度，保障其與被加工核酸鏈一端堿基互補的特異性，防止其在變復性過程中與被加工核酸鏈的其它部位發生雜交。
在實施例中，蘸劑針蓋帽(5)的針端蘸劑粘附接口核酸片段后，要在確定黏合劑完全凝固的情況下，再進行其后步驟，防止被加工核酸鏈受到粘附。
在實施例中，試管(1)里填充的電泳介質盡可能具備合理小的密度，這樣，既利于被加工核酸鏈在定向電泳的過程中減少機械損傷，又便于類直線核酸鏈(4)往固態載體(3)上附貼。
本發明與現有技術相比，具有下列優點1、能使上億堿基的核酸鏈呈類直線構象，現有技術做不到。
2、能使上億堿基的呈類直線構象的核酸鏈附貼在固態載體上裝在透明試管中，現有技術做不到。
3、能使上億堿基的呈類直線構象的核酸鏈附貼在固態載體上，供人們直接性地進行觀察檢測，現有技術做不到。
4、填補了國際上的一項試管固載類直線核酸標本及其制作方法的技術空白。
附圖標記1、試管；2、蓋帽；3、固態載體；4、類直線核酸鏈；5、蘸劑針蓋帽。
權利要求
1.一種試管固載類直線核酸鏈標本，它包括下列主要組成部分，試管(1)，蓋帽(2)，固態載體(3)，類直線核酸鏈(4)，蘸劑針蓋帽(5)。其特征在于；試管(1)的壁是透明材料構成的，試管(1)的一端扣有蓋帽(2)，試管(1)的另一端扣有蘸劑針蓋帽(5)，試管(1)內裝有固態載體(3)與類直線核酸鏈(4)，固態載體(3)的一端安連在蓋帽(2)上，類直線核酸鏈(4)附貼在固態載體(3)上。
2.一種試管固載類直線核酸鏈標本的制作方法，它包括以下步驟1、制備試管(1)、蓋帽(2)、固態載體(3)、蘸劑針蓋帽(5)、接口核酸片段、被加工核酸鏈、雜交介質、電泳介質、電泳槽、黏合劑等。2、在蘸劑針蓋帽(5)的針端蘸劑，粘附若干接口核酸片段。3、在蘸劑針蓋帽(5)上添加適當雜交介質。4、將被加工核酸置于蘸劑針蓋帽(5)上的雜交介質內。5、使蘸劑針蓋帽(5)上的介質升溫，直至處于介質內的核酸變性。6、使蘸劑針蓋帽(5)上的介質降溫，直至被加工核酸鏈的一端與接口核酸片段發生雜交。7、在蘸劑針蓋帽(5)上安裝好試管，并向試管內填充適宜的電泳介質。8、將固態載體(3)進行表面涂劑處理后，安連在蓋帽(2)上裝入試管。9、將試管(1)安置在裝有電泳介質的電泳槽內。10、接通電源，使電泳槽和試管(1)的介質產生電場。11、持續相應的時間，使試管(1)內的被加工核酸鏈泳成類直線構象。12、調整試管(1)坐標和介制質，使試管(1)內的類直線構象的核酸鏈(4)附貼到固態載體(3)上。13、切斷電源，從電泳槽內取出試管。14、使蓋帽(2)連同固態載體(3)脫離試管(1)，再使固態載體(3)脫離蓋帽(2)。15、對固態載體(3)上的類直線構象的核酸鏈(4)進行基因檢測，檢測完畢后，將固態載體安連在蓋帽(2)上裝入試管(1)。16、重復步驟1-15，滿足大批量生產試管固載類直線核酸標本的需求。
全文摘要
本發明涉及一種試管固載類直線核酸鏈標本及其制作方法，屬于基因工程技術領導域。其技術核心在于利用核酸的電荷效應和分子雜交規律，結合電場的作用力，在試管里將大分子量的核酸鏈加工成類直線構象，附貼在固態載體上，供人們直接性地進行檢測。與現有技術相比，其優點在于一次性處理核酸的信息量大，標準性強，方便觀察、檢測、對比、儲運，應用的范圍廣，效率高。
文檔編號C12Q1/68GK1465710SQ0212298
公開日2004年1月7日 申請日期2002年6月15日 優先權日2002年6月15日
發明者閻道原 申請人:閻道原