一種藍莓繼代培養基及其配制方法
【專利摘要】本發明公開了一種藍莓繼代培養基，包含大量元素母液、微量元素母液、鐵鹽母液、鈣鹽母液、有機物母液和激素母液；每1L藍莓培養基中所述有機物母液包括肌醇100 mg/L、煙酸1 mg/L、維生素B11 mg/L、維生素B62mg/L、維生素C2mg/L，所述激素包括玉米素4 mg/L。本發明培養基中加入了植物生長激素玉米素，能夠使藍莓組織培養的植株長勢良好，分株多，并且容易生根，有利于藍莓培養后移栽進入田間，提高藍莓在田間的成活率；同時輔以維生素C的用量配合，既能夠消除玉米素對藍莓造成的玻璃化影響，又能夠促進藍莓植株更好的生長，培苗生長的更加健壯，不容易褐化死亡，葉色更綠，葉片平展。
【專利說明】
一種藍莓繼代培養基及其配制方法
技術領域
[0001] 本發明涉及一種培養基，具體涉及一種繼代培養基。
【背景技術】
[0002] 藍莓是一種營養價值非常高的水果，果肉內富含豐富的維生素、蛋白質、膳食纖 維、脂肪和礦物質等營養元素，遠高于其他水果富含的營養，其中藍莓中獨特的花青苷色素 在眾水果中比重是非常的高。而在藍莓的栽培中，對土壤的要求比較高，土壤有機質含量和 pH值是藍莓是否栽培成活的重要因素，一般要求有機質含量5%，且pH值4.0~5.5的土壤。 目前藍莓種苗大量繁育都使用組織培養的方法，同樣在組織培養中，藍莓對培養基的要求 也是比較高的，要求高有機質含量和弱酸性的pH值。
[0003] 植物組織培養中常用的培養基是MS培養基，而MS培養基特點是無機鹽和離子濃度 較高，是較穩定的離子平衡溶液。WPM培養基是在目前在木本植物培養時經常使用的培養 基。但是在藍莓的組織培養中，無論用MS還是WPM培養基，效果都不是很好。雖然目前報道的 許多藍莓培養使用的是WPM培養基，但是都是針對某一個藍莓品種而言，因此，已報道的培 養基配方在多數藍莓品種中都不通用。
[0004] 玉米素一般用于組織培養過程中促進細胞分裂，促進植株進行分株，但是玉米素 使用的濃度過高，或者是在繼代過程中玉米素使用次數太平繁，容易造成藍莓植株的玻璃 化，呈現玻璃化的藍莓苗，其莖、葉表面無蠟質，體內的極性化合物水平較高，細胞持水力 差，蒸騰作用強，無法進行正常移栽，造成人力、物力、財力的極大浪費，是目前藍莓組織培 養中組培苗生產的最大障礙。而在不使用玉米素或者是玉米素濃度過低的情況下，藍莓植 株是不能夠正常生長的，更嚴重時會使藍莓植株死亡。因此通過降低玉米素濃度或者不加 玉米素來解決藍莓的玻璃化現象是不可行的。
【發明內容】
[0005] 發明目的：本發明的目的在于為了克服現有技術的不足，提供一種藍莓繼代培養 基及其配制方法，以適應不同藍莓品種的培育需要，保證生長良好。
[0006] 技術方案：本發明所述的一種藍莓繼代培養基，包含大量元素母液、微量元素母 液、鐵鹽母液、鈣鹽母液、有機物母液和激素母液;每1L藍莓培養基中所述有機物母液包括 肌醇l〇〇mg/L、煙酸lmg/L、維生素 Bdmg/L、維生素 B62mg/L、維生素 C2mg/L，所述激素包括玉 米素4mg/L。
[0007] 進一步，所述大量元素母液包括硝酸鉀400mg/L、硫酸鉀900mg/L、七水合硫酸鎂 370mg/L、磷酸二氫鉀170mg/L，微量元素包括四水合硫酸錳20mg/L、七水合硫酸鋅8 · 6mg/L、 硼酸6 · 2mg/L、五水合硫酸銅0 · 05mg/L、二水合鉬酸鈉0 · 25mg/L。
[0008] 進一步，所述鐵鹽母液包括乙二胺鄰二羥基乙酸鐵l〇mg/L。
[0009] 進一步，所述|丐鹽母液包括水合氯化lilOOmg/L、四水硝酸|丐60〇11^/1。
[0010] 進一步，將每一種母液濃縮配制成濃縮液，冷藏備用，配置培養基時每升培養基添 加蔗糖30克，瓊脂粉6克，pH值調節至5.2。
[0011]有益效果：1、本發明培養基中加入了植物生長激素玉米素，能夠使藍莓組織培養 的植株長勢良好，分株多，并且容易生根，有利于藍莓培養后移栽進入田間，提高藍莓在田 間的成活率；同時輔以維生素 C的用量配合，既能夠消除玉米素對藍莓造成的玻璃化影響， 又能夠促進藍莓植株更好的生長，培苗生長的更加健壯，不容易褐化死亡，葉色更綠，葉片 平展；
[0012] 2、配方不使用硝酸銨，使用目前容易購買到的硫酸銨和尿素來替代，解決了硝酸 銨購買難的問題；
[0013] 3、由于使用了硫酸銨，因此硫酸根的濃度增加，因此將傳統MS培養基中的硫酸亞 鐵和乙二胺四乙酸二鈉配制的鐵鹽換成Fe-EDDHA乙二胺鄰二羥基乙酸鐵，試驗效果證明植 物生長更好；
[0014] 4、去掉了MS培養基中的氯化鈷和硫酸銅，因為這兩個物質用量及其少，配制過程 中由于不好稱量，常常需要先配置這兩個物質的濃縮液，在按照一定濃度添加到母液中，費 時費力，實驗發現增加兩個物質對植物生長沒有影響，因此去掉，簡化配制流程。
【具體實施方式】
[0015] 下面對本發明技術方案進行詳細說明，但是本發明的保護范圍不局限于所述實施 例。
[0016] 實施例：以配置1升的藍莓繼代培養基為例：
[0017] 第一步，配置1升大量元素，配置成25倍的濃縮溶液，為母液一。
[0018]稱取:KN〇3硝酸鉀 10g、K2S〇4硫酸鉀22.5g、MgS〇4 · 7H20七水合硫酸鎂9.25g、KH2P〇4 磷酸二氫鉀4.25g，溶解于1升蒸餾水中。
[0019]第二步，配置200豪升微量元素，配置成1000倍的濃縮溶液，為母液二。
[0020] 稱取:MnS〇4 · 4H20四水合硫酸錳4g、ZnS〇4 · 7H20七水合硫酸鋅1.72g、H3B03硼酸 1.24g、CuS〇4 · 5H20五水合硫酸銅0.01g、NaMo〇4 · 2H20二水合鉬酸鈉0.05g，溶解于200豪升 蒸餾水中。
[0021] 第三步，配置500豪升鐵鹽，配置成200倍的濃縮溶液，為母液三。
[0022] 稱取:Fe-EDDHA乙二胺鄰二羥基乙酸鐵lg，溶解于500豪升蒸餾水中。
[0023] 第四步，配置500豪升鈣鹽，配置成50倍的濃縮溶液，為母液四。
[0024] 稱取:CaCl2 · 2H20二水合氯化鈣2.5g，Ca(N03)2 · 4H20四水硝酸鈣15g，溶解于500 豪升蒸餾水中。
[0025] 第五步，配置500豪升有機溶液，配置成200倍的濃縮溶液，為母液五。
[0026] 稱取:肌醇10g、煙酸O.lg、維生素 m O.lg、維生素 B6 0.2g、維生素 C0.2g溶解于500 豪升蒸餾水中。
[0027] 第六步，配制100mL濃度為lmg/L的玉米素溶液，為母液六。
[0028] 稱取:0. lg玉米素，溶解于100mL蒸餾水中。
[0029]母液配好后放4度冰箱保存備用。配置培養基時，每一升培養基加母液一 50mL，母 液二lmL，母液三5mL，母液四20mL，母液五5mL，母液六4mL。
[0030]上述培養基的配制方法為，將每種母液混勻后添加6g瓊脂粉和30g蔗糖混勻，pH值 調節至5.2，定容至一升，分裝到培養基適用容器中備用。
[0031] 下表是不同藍莓品種在不同培養基中生長30天以后的生長狀態統計：
[0032]
[0033]從表中能夠看出，無論是MS培養基還是WPM培養基培養的藍莓，在6個不同品種中， 株高、增值系數、以及成活率都明顯低于本發明的培養基。因此，本發明的培養基能夠促進 藍莓生長，而且在多個品種中都有良好的作用。
[0034] 另外，本實施例的玉米素與維生素C的濃度能夠有效抑制藍莓苗的玻璃化，將本實 施例的濃度配比與其他濃度配比進行比較，如下表所示，可發現本發明玉米素和維生素 C的 用量配合能夠在促進植株生長的同時，完全杜絕藍莓的玻璃化現象，故培苗更加健壯。
[0035]
【主權項】
1. 一種藍莓繼代培養基，其特征在于:包含大量元素母液、微量元素母液、鐵鹽母液、鈣 鹽母液、有機物母液和激素母液;每1L藍莓培養基中所述有機物母液包括肌醇100 mg/L、煙 酸1 mg/L、維生素 Bd mg/L、維生素 B62mg/L、維生素 C2mg/L，所述激素包括玉米素4 mg/L。2. 根據權利要求1所述的藍莓繼代培養基，其特征在于:所述大量元素母液包括硝酸鉀 400 mg/L、硫酸鉀900 mg/L、七水合硫酸鎂370 mg/L、磷酸二氫鉀170 mg/L。3. 根據權利要求1所述的藍莓繼代培養基，其特征在于:所述微量元素母液包括四水合 硫酸猛20 mg/L、七水合硫酸鋅8.6 mg/L、硼酸6.2 mg/L、五水合硫酸銅0.05 mg/L、二水合 鉬酸鈉0.25 mg/L。4. 根據權利要求1所述的藍莓繼代培養基，其特征在于:所述鐵鹽母液包括乙二胺鄰二 羥基乙酸鐵10 mg/L。5. 根據權利要求1所述的藍莓繼代培養基，其特征在于:所述鈣鹽母液包括水合氯化鈣 100 mg/L、四水硝酸|丐600 mg/L。6. 如權利要求1所述的藍莓繼代培養基的制備方法，其特征在于:將每一種母液濃縮配 制成濃縮液，冷藏備用，配置培養基時每升培養基添加蔗糖30克，瓊脂粉6克，pH值調節至 5.2〇
【文檔編號】A01H4/00GK106035084SQ201610393651
【公開日】2016年10月26日
【申請日】2016年6月3日
【發明人】王媛花, 顏志明, 馮英娜, 王全智
【申請人】江蘇農林職業技術學院