多次剪切后的甘薯脫毒苗母株的再利用方法
【專利摘要】本發明公開了多次剪切后的甘薯脫毒苗母株的再利用方法，是將剪切過兩次或兩次以上的甘薯脫毒試管苗母株通過灌入15?20ml液體培養基培養的方法或將剪切后的試管苗母株連同根部一同夾入灌有20ml固體培養基的培養瓶中培養的方法對其進行再利用。本發明的有益效果為：本發明提供的多次剪切后的甘薯脫毒苗母株的再利用方法，省工省時，減少消耗，提高了工作效率和經濟效益，實踐證明，經處理的母株生長周期為15?20天，擴繁倍數可達6?8倍，污染率可有效控制在3%以內，瓶苗生長勢健壯，適用于工廠化繁育甘薯脫毒試管苗。
【專利說明】
[0001] 多次剪切后的甘薯脫毒苗母株的再利用方法
技術領域
[0002] 本發明涉及農業組培快繁技術領域，具體涉及多次剪切后的甘薯脫毒苗母株的再 利用方法。
【背景技術】
[0003] 據統計，我國的甘薯總種植面積保持在620萬公頃左右，總產量穩定在1億噸以上， 分別占全世界的70%和80%。我國己成為世界上最大的甘薯生產國。在全國的農作物生產中， 甘薯僅次于水稻、小麥和玉米，居第4位。我國甘薯分布很廣，南起南海諸島，北至內蒙古，西 北達陜西、隴南和新疆一帶，東北經遼寧、吉林己延展到黑龍江南都，西南抵減南和云貴高 原。
[0004] 病毒病是影響農作物產量和品質的主要病害之一，尤其對于以無性繁殖方式進行 繁育的作物，如馬鈴薯、甘薯、草莓及果樹花卉等，經多代無性繁殖會使植物體內病毒大量 積累，造成種性退化、生長抑制、產量下降及品質變劣，而利用莖尖培養輔以化學或高溫處 理，可以較好地起到植物脫病毒而獲得脫毒苗的效果。隨著脫毒技術的推廣應用，甘薯的脫 毒組培生產也以前所未有的速度迅猛發展，但在快繁生產中繁殖系數低，甘薯脫毒試管苗 生產成本居高不下，嚴重制約了脫毒甘薯原原種生產及甘薯脫毒種薯的普及面積。
【發明內容】
[0005] 本發明的目的就是針對上述現有技術中的缺陷，提供了多次剪切后的甘薯脫毒苗 母株的再利用方法。
[0006] 為了實現上述目的，本發明提供的技術方案為：多次剪切后的甘薯脫毒苗母株的 再利用方法，包括以下步驟： 1) 培養基的配置： 普通MS培養基添加30%的蔗糖； 2) 母株處理： 在超凈工作臺上無菌條件下接種時，剪刀在基礎苗瓶內剪切后茬高在l-2cm之間，即 留有1-2個莖節，得到剪切后的試管苗母株，將剪切后的試管苗母株采用處理一或處理二的 方法進行處理，處理一的方法為直接向培養瓶中灌入l〇-15ml液體培養基進行再次培養，處 理二的方法為將剪切后的試管苗母株連同根部一同夾入灌有20ml固體培養基的培養瓶中 培養； 3) 擴繁或移栽： 將經過處理二處理的母株培養20-25天后，進行再次擴繁，繁殖系數可達到6-8倍;或將 經過處理一處理的母株生長15-20天后直接移栽到防蟲網室內生產甘薯原原種。
[0007] 本發明的有益效果為：本發明提供的多次剪切后的甘薯脫毒苗母株的再利用方 法，省工省時，減少消耗，提高了工作效率和經濟效益，實踐證明，經處理二處理過的母株生 長周期為15-20天，擴繁倍數可達6-8倍，污染率可有效控制在3%以內，經處理一處理過的母 株，瓶苗生長勢健壯，生長周期短移栽成活率可達90%以上，適用于工廠化繁育甘薯脫毒試 管苗。
【具體實施方式】
[0008] 實施例1: 甘薯脫毒苗母株再利用的生產方法，包括如下步驟： 1) 培養基的配置:普通MS培養基添加30%的蔗糖； 2) 母株處理:在超凈工作臺上無菌條件下接種時，剪刀在基礎苗瓶內剪切后茬高在 l-2cm之間，即留有1-2個莖節，處理一：向培養瓶中灌入10-15ml液體培養基;處理二:將 其連同根部一同夾入灌有20ml固體培養基的培養瓶中培養； 3) 擴繁:將處理二處理過的母株生長20-25天后再次進行擴繁； 4) 移栽:將處理一處理過的母株生長15-20天后直接移栽到防蟲網室內生產甘薯原原 種。
[0009] 具體步驟： 將剪切過兩次或多次母株瓶苗的莖基部連同根部一同夾入灌有15ml固體培養基的培 養瓶中培養，培養20-25天后進行再次剪切，擴繁倍數可達6-8倍。
[0010] 將剪切過兩次或多次母株瓶苗的莖基部灌入10-15 ml液體培養基，培養15-20天 后直接進行移栽，移栽成活率可達90%以上，與普通瓶苗相當. 優點:在甘薯脫毒苗工廠化生產過程中，初次剪切的瓶苗在培養25-30日后方可進行再 次擴繁，其繁殖系數可以達到6-8倍，經剪切后留下的母株再次培養35-45日后，擴繁系數可 達到2-3倍，再將剪切后的母株進行第二次留茬，擴繁系數僅能達到1-1.5倍，再次剪切后的 母株進行第三次留茬，如不經任何處理，其再次利用率只有10%甚至更低，其他90%以上均要 被淘汰，在實際生產中，基本上是將母株剪切兩次后便不能再利用，無形中增加了甘薯脫毒 試管苗生產成本，因此本發明直接將二次剪切后母株連同剩余的固體培養基保留做母株， 并將其連同根部一同夾入灌有20ml固體培養基的培養瓶中培養，并將經多次剪切后的母株 灌入15-20ml液體培養基進行再次培養，實踐證明，經處理二處理的瓶苗生長周期短，一般 培養20-25天后便可進行再次擴繁且繁殖系數可以達到6-8倍，污染率有效控制在3%以內； 經處理二處理過的經多次剪切后的母株，培養15-20天后，直接移栽到溫室生產原原種，其 移栽成活率可以達到90%。
[0011]目前在甘薯脫毒苗生產過程中，試管苗剪切后的母株不進行再利用直接淘汰，或 利用一次便進行淘汰，本發明根據生產中的實際情況，對多次剪切后的母株進行不同處理， 采用將多次剪切后的試管苗母株通過灌入10-15 ml液體培養基或直接連同根部一起夾入 20ml固體培養基上進行再培養的方法，對甘薯脫毒試管苗剪切后的母株進行不同途徑的再 利用，可有效提高甘薯脫毒試管苗繁殖倍數，降低甘薯脫毒苗生產成本。在生產實踐中，通 過使用該方法，可以使繁殖倍數由5倍以上提高至6倍以上，同時，切繁3次后，母株不進行再 利用的10瓶可繁殖6250瓶，而將母株進行再利用后，可繁殖11710瓶，如表1所示為利用與不 利用試管苗母株的繁殖倍數比較，可多繁殖5460瓶，效率提高了87.36%。從生產成本考慮， 固體培養基生產成本為0.051元/瓶，每瓶裝40ml固體培養基，人工轉接費為0.6元/瓶，母株 不進行再利用，10瓶轉借接四次可以繁殖6250瓶左右的瓶苗，累計需要固體培養基7810瓶， 人工轉接費用為7810X0.6元=4686元，繁殖6250瓶苗平均每瓶的人工及培養基成本為 (0.051 X7810+7810 X 0.6)/6250=0.81元/瓶;母株進行再利用，10瓶轉接四次可以繁殖 11710瓶左右的瓶苗，累計需要固體培養基13980瓶，（13980X0.051 + 13980X0.6)/1170= 0.79元/瓶;兩者相比生產成本利用母株較不利用母株降低了（0.81-0.79)/0.81=2.5%。
[0012] 表1
[0013] 將剪切過的根茬試管苗直接夾入20ml固體培養基內作為基礎苗進行擴繁，可達到 如下效果：提高繁殖倍數1倍多，有效加快了繁殖速度，甘薯脫毒苗繁殖效率提高了 87.36%，縮短了繁育周期，成本有效降低了 2.5%;將在剪切過的根茬試管苗內直接添加10-15ml液體培養基作為下地苗，可達到如下效果，瓶苗生長周期由45天縮短到15-20天，轉接 用工費用為0.2元/瓶，較新接種的瓶苗降低0.4元/瓶，移栽成活率有效控制在90%以上。 [0014]最后應說明的是：以上所述僅為本發明的優選實施例而已，并不用于限制本發明， 盡管參照前述實施例對本發明進行了詳細的說明，對于本領域的技術人員來說，其依然可 以對前述各實施例所記載的技術方案進行修改，或者對其中部分技術特征進行等同替換。 凡在本發明的精神和原則之內，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本發明的 保護范圍之內。
【主權項】
1.多次剪切后的甘薯脫毒苗母株的再利用方法，其特征在于，包括以下步驟： 1) 培養基的配置： 普通MS培養基添加30%的蔗糖； 2) 母株處理： 在超凈工作臺上無菌條件下接種時，剪刀在基礎苗瓶內剪切后茬高在l-2cm之間，即 留有1-2個莖節，得到剪切后的試管苗母株，將剪切后的試管苗母株采用處理一或處理二的 方法進行處理，處理一的方法為直接向培養瓶中灌入l〇-15ml液體培養基進行再次培養，處 理二的方法為將剪切后的試管苗母株連同根部一同夾入灌有20ml固體培養基的培養瓶中 培養； 3) 擴繁或移栽： 將經過處理二處理的母株培養20-25天后，進行再次擴繁，繁殖系數可達到6-8倍;或將 經過處理一處理的母株生長15-20天后直接移栽到防蟲網室內生產甘薯原原種。
【文檔編號】A01H4/00GK105993934SQ201610267714
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年4月27日
【發明人】劉江娜, 張愛萍, 李東方, 趙亮, 張西英
【申請人】新疆生產建設兵團第六師農業科學研究所