一種羊肚菌子實體的培養方法
【專利摘要】本發明公開了一種羊肚菌子實體的培養方法，包括以下步驟：菌種準備、菌種培養、土壤處理、播種、覆蓋保溫、菌絲生長期間的管理、催菇處理、出菇期間的管理、采收；本發明免去了傳統技術必須從菌種瓶或袋中掏菌種、菌種水合、土壤表面擺放大量營養料袋等操作環節，使羊肚菌大田或室內栽培技術更加簡便，減少3/4以上的營養料袋成本，較大降低了羊肚菌栽培的生成成本，使羊肚菌栽培的技術難度大大降低，經濟效益大為提高。
【專利說明】
_種羊肚菌子實體的培養方法
技術領域
[0001]本發明屬于食藥用菌栽培技術領域，具體地說，涉及一種羊肚菌子實體的培養方法。
【背景技術】
[0002]羊肚菌是羊肚菌科羊肚菌屬(Morchella)所有物種的統稱，不直接指一個具體的物種。栽培的羊肚菌種類屬于梯棱羊肚菌M.importuna M.Kuo , O ‘Donne 11 &T.J.Volk,Mycologia 104(5): 1172(2012)、七妹羊肚菌Morchella septimelata M.Kuo , in Kuo ,Dewsbury,0'Donne11,Carter,Rehner,Moore,Moncalvo,Canfield, Stephenson,Methven&VolkjMycologia 104(5): 1159-1177(2012);六妹羊肚菌Morchella sextelata M.Kuo, inKuo, Dewsbury,0’ DonnelI, Carter,Rehner,Moore,Moncalvo, Canfield, Stephenson,Methven&Volk,Mycologia 104(5): 1159-1177(2012)。該屬的其他物種栽培成功的還很少有報道。
[0003]羊肚菌商業化栽培技術在國內得到了快速發展，近5年來全國栽培面積已經由近1000畝發展到了2015/2016年的近25000畝，我國已經成為世界最大的羊肚菌大田栽培國，干羊肚菌產量達到了 120t以上。這些栽培技術的最重要的關鍵技術是播種10-25d以后必須在土壤表面擺放營養料袋，一般的密度為3-5個/m2，每667m2需要的數量為1600-2200個，構成了羊肚菌栽培的主要成本；營養料袋的大小為12-25 X 20-30cm，裝干料的質量為200?600g/袋甚至更多，濕料重量為200-2000g/袋，配方以麥粒為主，添加了不同數量的木肩、草粉、生土、谷殼等成分；由于營養料袋體積大，滅菌成本大大提高；營養料袋體積大，常常導致滅菌不徹底，擺放到大田中帶來大量污染，導致羊肚菌減產或絕收；營養料袋需要擺放40-140d，長期裸露在土面，容易生長多種害蟲，這些害蟲最后危害羊肚菌子實體，導致子實體產量下降或絕收。
[0004]專利一種小麥套作羊肚菌人工仿生栽培的方法(公開號:CN103141308A，發明日:2013-04-03)涉及一種小麥套作羊肚菌人工仿生栽培的方法，包括:I)制種;2)做畦;3)接種與覆土; 4)發菌管理；5)補充營養液;6)出菇管理。專利一種羊肚菌的栽培方法(公開號:CN103202177A，發明日:2013-04-15)涉及一種羊肚菌的栽培方法:包括:田間準備:間隔隆廂和挖溝，廂面寬90-110cm，溝寬30-40cm、溝深20-30cm;羊肚菌和小麥播種:撒播75-50kg/畝羊肚菌菌種在廂面，再覆蓋一層土;澆水后施用復合肥;施復合肥1-1Od后再在廂面上撒播2-5kg/畝小麥，覆蓋遮陽網，2-3d/次澆水;施入羊肚菌生長促進劑:小麥播種后35-45d，廂面施入羊肚菌生長促進劑;羊肚菌出菇采菇田間管理:遮陰、澆水，廂面濕度60%-80%;小麥田間管理:除草、追肥。專利粗腿羊肚菌的林下栽培方法(公開號:CN 103190292A，發明日:2013-04-27)涉及一種粗腿羊肚菌的林下栽培方法:其林下栽培方法是利用空閑林地生產粗腿羊肚菌的一種栽培方法，所述栽培方法為:選擇適合粗腿羊肚菌生長的林地作為待栽培林地;在播種前對待栽培林地進行整地;將粗腿羊肚菌固體栽培菌種散播于已進行整地的待栽培林地;播種后實施林地管理至粗腿羊肚菌采收。專利一種羊肚菌的栽培新方法(公開號:CN 102823429A，發明日:2012-09-03)涉及一種羊肚菌的栽培新方法:是將野生羊肚菌通過組織分離等方法獲得菌種，再將菌種制作成母種、原種、栽培種等菌種。涉及栽培中羊肚菌的菌種原料與配方及制作方法;栽培工藝流程及栽培新方法。專利梯棱羊肚菌的栽培方法(公開號:CN 103168622A，發明日:2013-04-03)涉及梯棱羊肚菌(MorchelIaimportuna)的栽培方法，包括梯棱羊肚菌菌種制作、栽培料制作、水合處理和管護等步驟。栽培種經過水合處理后，撒播于整好地的廂面上、覆土，制作并添加栽培料和田間常規管理80-120天，即可獲得子實體。
[0005]專利利用生料栽培羊肚菌的方法(公開號:CN 103583240A，發明日:2013-11-24)涉及一種利用生料栽培羊肚菌的方法。在土質疏松及潮濕、排水良好的地方構建可營造三分陽七分陰環境的菇房；用玉米芯、木肩、麩皮、谷殼、豆粉、草木灰、磷肥、石膏、糖為原料；在菇房內挖栽培坑，然后在栽培坑內鋪兩層料及施撒兩層菌種，再進行覆土;最后將菇房的空氣濕度保持在85%?95%，溫度在5?16°C，在這樣的環境下一個月左右就可出子實體。專利羊肚菌培養料配方及羊肚菌天然栽培方法(公開號:CN 101628834，發明日:2009-08-20)公開了兩種羊肚菌天然栽培方法。第一種方法是將羊肚菌栽培種與羊肚菌培養料和土壤混合均勻形成羊肚菌栽培種-培養料-土壤混合物，然后將上述含羊肚菌栽培種的混合物播入土地中，蓋土厚度為0.5厘米?2.5厘米;所用羊肚菌培養料配方包括牧草類草本植物、農作物秸桿、麩皮及KH2P04、MgS04和尿素等營養物質。第二種方法是將羊肚菌栽培種直接穴播于土地中，蓋土厚度為0.5厘米?2.5厘米。上述兩種方法，當菌絲成熟時均至少進行一次營養補充，所用營養補充液由草灰浸出液、KH2P04、MgS04和尿素配制而成。專利一種尖頂羊肚菌生態栽培方法(公開號:CN 101283658，發明日:2008-06-02)提供了一種尖頂羊肚菌生態栽培方法，包括尖頂羊肚菌菌種準備、圓葉楊培育、圓葉楊接種菌種前處理、尖頂羊肚菌菌種接種于圓葉楊、圓葉楊被接尖頂羊肚菌菌種后移栽和管護步驟，其特征是圓葉楊根部進行機械損傷10-80%并消毒后，移至尖頂羊肚菌菌種中培養10-120天。專利一種羊肚菌培養料及其栽培技術(公開號:CN 103583232A，發明日:2013-11-08)公開了一種羊肚菌培養料及其栽培技術，菌種配方中加入了有特效的原料牡丹根;技術處理中也加入了突破性的技術手段:①找出了與牡丹根的共生關系，在配方中添加適量的牡丹根顆粒;②栽培過程中對出菇場地適時漫水浸泡;③利用給人輸液的原理，給羊肚菌原基提供水溫10°C_22°C的清水。專利羊肚菌的室內栽培方法及其所用溫室(公開號:CN 101926262A，發明日:2010-04-16)公開了一種羊肚菌的室內栽培方法及其所用溫室，包括如下步驟:(I)制備栽培料；(2)填裝:取等體積的栽培料和土壤填裝入經過消毒的袋或罐中；(3)消毒；(4)接種:將帶有羊肚菌中的瓊脂置于步驟(2)所述土壤層上，接種菌核；(5)菌核生長:避光，保持溫度和相對空氣濕度；(6)培養基的制備:將菌核均勻夾入上下兩層各I?3cm厚的土壤中間，保持室內溫度和相對空氣濕度；(7)澆水:向所述培養基澆水，使其完全被水滲透；(8)均勻通風；(9)成蘑:保持培養基濕度，同時保持室內溫度和相對空氣濕度，至羊肚菌成熟。采用上述方法能夠實現具有高營養價值的羊肚菌的室內栽培，可大規模生產，產量高。專利羊肚菌擴繁方法(公開號:CN 1860842，發明日:2006-06-15)涉及一種羊肚菌的擴繁方法。該發明的技術方案為:(I)選擇適合羊肚菌擴繁的林地、采伐地、空地等:(2)清林；(3)播種；(4)日常管理；
(5)采集。專利羊肚菌大田商業化栽培新方法(公開號:CN 1860842，發明日:2006-06-15)涉及一種羊肚菌的栽培新方法，通過克隆技術進行組織細胞分離、培養、獲得母種。將水稻田耕作后，播上羊肚菌的菌種，蓋上塑料薄膜保溫，保濕，蔭度70 %?90%，溫度5?200C，土壤含水量60%?65%，空氣相對濕度80%?95%，通過這些方法至出菇收獲。發明號00112812.4無權，羊肚菌的栽培方法:是在一定的溫度條件下，用80%?90%的泥土、混入10 % -18 %的植物有機物，再播入10 %的菌種，經一定時期的控溫控濕培養至出菌收獲。
[0006]在現有技術中，羊肚菌實體的培養方法中存在著以下問題和缺點。主要是每畝需要1600?2000個營養料袋或稱為二次營養袋、外源營養袋，單袋裝料質量干重為250?1500g，每畝使用的營養料袋滅菌后的濕料重量達到I?2噸，需要大規模的滅菌設備進行滅菌，成本在1000?1500元，為栽培原料的一個主要成本;大量使用營養料袋，需要大規模的滅菌設備，限制了羊肚菌的栽培面積的擴大;大量使用營養料袋，無法遠距離運輸，或者遠距離運輸的成本很高;營養料袋長時間裸露擺放在土面，導致土面大面積的雜菌污染，同時滋生各種害蟲，這些病蟲害會導致羊肚菌子實體無法生長發育或減產。其次是羊肚菌栽培過程中的菌種全部是均勻地撒布在土面或溝內，混淆了子實體形成的邊緣效應，導致減產。
【發明內容】
[0007]為了解決上述技術問題，本發明公開了一種羊肚菌子實體的培養方法，該方法是一種在土壤表面直接擺放菌種直接出菇的方法，免去了傳統技術必須從菌種瓶或袋中掏菌種、菌種水合、土壤表面擺放大量營養料袋等操作環節，使羊肚菌大田或室內栽培技術更加簡便，減少3/4以上的營養料袋成本，較大降低了羊肚菌栽培的生成成本，使羊肚菌栽培的技術難度大大降低，經濟效益大為提高。
[0008]本發明所采用的技術方案是:一種羊肚菌子實體的培養方法，包括以下步驟:
[0009]I)菌種準備:羊肚菌菌種購買或自行從栽培或野生子實體上進行分離得到；
[0010]2)菌種培養:通過母種制作、原種培養以及栽培種培養制備得到栽培種；
[0011]3) 土壤處理；
[0012]4)播種:把塑料瓶裝或菌袋裝的栽培種從中央切成2段;在畦面上每I?1.5m2打I個直徑為15?20cm的孔洞，孔洞的深度為5?1cm;將切開的菌種瓶或菌種袋露出菌種的一端放入孔洞中，稍壓實，使菌種培養料與土壤接觸緊密，菌種瓶或菌種袋四周用土壓嚴實；
[0013]5)覆蓋保溫:畦面用一層黑色農膜覆蓋，四周有土塊壓住;或用長竹片起拱，拱高20?25cm，在竹片上覆蓋白色農膜；
[0014]6)菌絲生長期間的管理:保持土壤含水量不低于16%，干燥時適當噴水；
[0015]7)催菇處理:在播種后第70?80d開始使用催菇液，用量為0.3?0.4kg/m2;揭開農膜，用噴霧器均勻噴灑，噴后通風30?50min，再遮蓋農膜；
[0016]8)出菇期間的管理:羊肚菌子實體原基形成的溫度為5?15°C，子實體生長的溫度為10?18°C，羊肚菌的出菇期在南方地區一般從2月初到4月初，北方地區為4月到6月初;子實體原基形成以后繼續蓋膜，當子實體長到2?3cm高時，揭開農膜;保持土壤含水量在18%?20%之間；適當通風;子實體從原基形成到最后成熟的生長時間為15?25d;注意防治高溫，土面溫度一般控制不要超過20°C ;
[0017]9)采收:當子實體總高度達到7?12cm時就要及時采收，從地面I?2cm處切斷菌柄，基部留在土壤表面。
[0018]進一步地，步驟2)中菌種培養具體為:
[0019]2.1)母種制作:制備母種培養基，在無菌狀態下接種，22-23°C恒溫培養箱內避光培養3?5d，使斜面長滿菌絲，繼續培養7?1d;菌絲體為黃褐色、灰褐色，在瓊脂培養基表面或試管壁上形成大量黃色菌核，備用；
[0020]2.2)原種培養:制備原種培養基，在無菌狀態下接入母種，22-23°C恒溫培養箱內避光培養15?20d，使菌種瓶長滿菌絲，繼續培養7?10d，在培養料的表面大量形成菌核，備用；
[0021 ] 2.3)栽培種培養:制備栽培種培養基，無菌狀態下接入原種，22-23°C恒溫培養箱內避光培養15?20d，使菌種瓶長滿菌絲，繼續培養7?1d，在培養料的表面大量形成菌核，備用。
[0022]進一步地，母種培養基的配方為:麩皮25?30g，玉米粉或黃豆粉2?3g，干松針20?50g，10?23g葡萄糖或蔗糖或麥芽糖，I?2g蛋白胨或酵母粉，瓊脂18?22g。
[0023]進一步地，母種培養基通過以下制備方法獲得:稱量:麩皮25?30g，玉米粉或黃豆粉2?3g，干松針20?50g，10?23g葡萄糖或蔗糖或麥芽糖，I?2g蛋白胨或酵母粉，瓊脂18?22g;在玻璃或金屬容器內，按照配方稱取麩皮、玉米粉或黃豆粉、干松針，加1200mL水，煮沸20min，用4層紗布進行過濾并洗滌，得到濾液lOOOmL。在濾液中加入瓊脂，加熱到全部瓊脂融化，再把葡萄糖或蔗糖或麥芽糖其中任一、蛋白胨或酵母粉中任一加入溶解。然后分裝到試管中，試管塞上棉塞或乳膠塞。在高壓鍋內0.1MPa滅菌15-20min，冷卻后從高壓鍋內取出擺成斜面培養基;放置5-7天，使斜面上的水珠全部散盡后使用。
[0024]進一步地，以干重計，原種培養基按照質量百分比由以下組分構成:80%?85%小麥或水稻或高粱或小米或燕麥其中任一，5 %?1 %稻殼或木肩，5 %?1 %熟土。
[0025]進一步地，原種培養基通過以下步驟獲得:以干重計，按照質量百分比稱量以下組分:80%?85%小麥或水稻或高粱或小米或燕麥其中任一，5%?10%稻殼或木肩，5%?10%熟土;將稱量好的小麥或水稻或高粱或小米或燕麥其中任一裝入尼龍袋中，每袋裝入總體積I /3?I /2的固體物，放入質量分數為1%?2%的石灰水中浸泡16?24h，撈起后袋內沒有線狀水流出即可倒在地面上進行拌料;稻殼或木肩直接在清水中浸泡24?48h，撈起后稻殼中沒有線狀水流出即可倒在地面上進行拌料;熟土直接敲碎后拌入上述原料中；拌勻后裝入菌種瓶中，聚丙烯膜用橡皮筋封口，高壓鍋內0.13?0.14MPa滅菌60-80min，冷卻后取出。
[0026]進一步地，栽培種培養基通過以下步驟制備得到:以干重計，按照質量百分比稱量以下組分:40%?50%小麥或水稻或高粱或小米或燕麥其中任一，30%?40%木肩，5%?10%稻殼，5%?10%熟土;將稱量好的小麥或水稻或高粱或小米或燕麥其中任一裝入尼龍袋中，每袋裝入總體積I/3?I/2的固體物，放入質量分數為I %?2%的石灰水中浸泡16?24h，撈起后袋內沒有線狀水流出即可倒在地面上進行拌料；稻殼直接在清水中浸泡24?48h，撈起后稻殼中沒有線狀水流出即可倒在地面上進行拌料;木肩加1:1的清水拌料;熟土直接敲碎后拌入上述原料中；拌勻后裝入750mL塑料菌種瓶或12?15 X 20?25cm的聚乙烯或聚丙烯菌種袋中，菌種瓶用透氣蓋封口，菌種袋用口圈加透氣蓋封口，高壓鍋內0.13?0.14MPa滅菌120-130min，冷卻后取出。
[0027]進一步地，步驟3)中土壤處理具體為:
[0028]3.1)選地:選擇靠近自然水源，地勢平坦的旱地或水田進行羊肚菌的栽培；
[0029]3.2)大田預處理:播種前3?4個月，每667m2耕地加入細木肩200?250kg，稻麥草粉200?250kg，樹葉100?120kg，均勻撒在土壤表面；用旋耕機耕地，將前述原料均勻地混合在土壤表層10?20cm內，灌一次透水，用薄膜覆蓋土壤閑置一季；
[0030]3.3)整地:當年11月初開始整地，用旋耕機翻地、耙細土壤，大土粒的直徑不超過5cm；
[OO31 ] 3.4)放線開畦:按照畦面寬度為60?80cm、走道寬為50?60cm進行放線，用石灰粉劃線；將走道內的土壤翻到畦面上，使走道的深度達到20?25cm;平整畦面，用圓形金屬筒碾壓畦面，使其平整；
[0032]3.5)搭建雙層遮陽網棚架:用竹竿、木桿、鋼管材料搭棚，棚架的高度為1.8?2.5m,用6針密度的遮陽網遮蓋頂層，頂層下再搭一層遮陽網，一般每5?10畝搭建一個獨立的遮陽網棚架；四周圍嚴實，外面用途壓實;澆灌I次大水，使土壤含水量達到18%?20%;土壤含水量的計算方法如下:土壤含水量=[(濕土重量-烘干土重)/濕土重量X 100% ]。
[0033]進一步地，催菇液通過以下步驟制備得到:按照質量百分比稱量以下組分:葡萄糖或蔗糖0.5 %?1.0 %，硫酸鎂0.01%,磷酸二氫鉀0.01%,硫酸亞鐵0.001%,余量為水，先將葡萄糖或蔗糖、磷酸二氫鉀溶于水中，再加入硫酸鎂溶解，最后才加入硫酸亞鐵，攪拌均勻兌成水溶液，制備得到催菇液。
[0034]與現有技術相比，本發明可以獲得包括以下技術效果:
[0035]不用把菌種與土壤成分混合，不需要覆土，不需要擺放營養料袋，有益的效果是操作簡便、生產成本降低、適應范圍廣，不容易帶來雜菌和蟲害。
[0036]當然，實施本發明的任一產品必不一定需要同時達到以上所述的所有技術效果。
【附圖說明】
[0037]此處所說明的附圖用來提供對本發明的進一步理解，構成本發明的一部分，本發明的示意性實施例及其說明用于解釋本發明，并不構成對本發明的不當限定。在附圖中:
[0038]圖1是本發明羊肚菌子實體培養接種方式；
[0039]圖2是本發明羊肚菌原基形成情況；
[0040]圖3是本發明羊肚菌子實體形成和生長情況。
【具體實施方式】
[0041]以下將配合實施例來詳細說明本發明的實施方式，藉此對本發明如何應用技術手段來解決技術問題并達成技術功效的實現過程能充分理解并據以實施。
[0042]實施例1:室內正常季節栽培
[0043]本發明的目的是提供一種羊肚菌子實體的培養方法，具體而言，自然溫度室內栽培的其步驟包括:
[0044]栽培季節可以是正常的季節，每年11月10日-12月30日前播種；
[0045]I)羊肚菌菌種購買或自行從栽培或野生子實體上進行分離得到；
[0046]2)菌種培養:通過母種制作、原種培養以及栽培種培養制備得到栽培種；
[0047]2.1)母種制作:培養基配方:麩皮25?30g，玉米粉或黃豆粉2?3g，干松針20?50g，10?23g葡萄糖或蔗糖或麥芽糖，I?2g蛋白胨或酵母粉，瓊脂18?22g。方法:稱取所用的麩皮、玉米粉或黃豆粉、干松針，在玻璃或金屬容器內，加1200mL水，煮沸20min，用4層紗布進行過濾并洗滌，得到濾液lOOOmL，在濾液中加入瓊脂，加熱到全部瓊脂融化，再將葡萄糖或蔗糖或麥芽糖其中任一、蛋白胨或酵母粉中任一等加入溶解，然后分裝到試管中，試管塞上棉塞或乳膠塞，在高壓鍋內0.1MPa滅菌15-20min，冷卻后從高壓鍋內取出擺成斜面培養基;放置5-7d，使斜面上的水珠全部散盡后使用;無菌狀態下接種，22-23 °C恒溫培養箱內避光培養3?5d，使斜面長滿菌絲，繼續培養7?1d;菌絲體為黃褐色、灰褐色，在瓊脂培養基表面或試管壁上形成大量黃色菌核，備用；
[0048]2.2)原種培養:培養基配方:風干原料質量百分比為80 %?85 %小麥或水稻或高粱或小米或燕麥其中任一，5 %?10 %稻殼或木肩，5 %?10 %熟土。方法:按照配方稱取小麥或水稻或高粱或小米或燕麥其中任一裝入尼龍袋中，每袋裝入總體積1/3?1/2的固體物，放入質量分數為1%?2%的石灰水中浸泡16?24h，撈起后袋內沒有線狀水流出即可倒在地面上進行拌料;稻殼或木肩直接在清水中浸泡24?48h，撈起后稻殼中沒有線狀水流出即可倒在地面上進行拌料;熟土直接敲碎后拌入上述原料中；拌勻后裝入菌種瓶中，聚丙烯膜用橡皮筋封口，高壓鍋內0.13?0.1410^滅菌60-801^11，冷卻后取出。無菌狀態下接入母種，22-23 °C恒溫培養箱內避光培養15?20d，使菌種瓶長滿菌絲，繼續培養7?1d，在培養料的表面大量形成菌核，備用；
[0049]2.3)栽培種培養:培養基配方:方法:40 %?50 %小麥或水稻或高粱或小米或燕麥其中任一，30%?40%木肩，5%?10%稻殼，5%?10%熟土。方法:小麥等、稻殼的處理方法同原種;木肩加1:1的清水拌料;熟土直接敲碎后拌入上述原料中；拌勻后裝入750mL塑料菌種瓶或12?15X20?25cm的聚乙烯或聚丙烯菌種袋中，菌種瓶用透氣蓋封口，菌種袋用口圈加透氣蓋封口，高壓鍋內0.13?0.1410^滅菌120-13011^11，冷卻后取出。無菌狀態下接入原種，22-23 °C恒溫培養箱內避光培養15?20d，使菌種瓶長滿菌絲，繼續培養7?1d，在培養料的表面大量形成菌核，備用；
[0050]3) 土壤處理:
[0051 ] 3.1)容器處理:各種規格的塑料筐、塑料盆，清洗干凈，常規消毒液噴灑，晾干；
[0052]3.2)土壤處理:取普通稻田土或旱地土壤，拌入一定量的木肩、草粉、樹葉，加水淹沒，薄膜密封處理3-4個月。栽培前用常規殺蟲劑拌土，薄膜覆蓋，用氣霧消毒劑熏蒸，密閉處理24h;土壤水分調節到18%?20% ；
[0053]3.3)裝土:容器內裝入12?15cm厚的上述處理后的土壤，稍壓實壓平；中央挖一個孔洞，直徑12-15011，深度3-5011;
[0054]4)播種:將菌種瓶或袋切成2段，將有菌種露出的一端直接插入挖好的空洞內，四周用土壤壓實；
[0055]5)覆蓋保溫:用黑色農膜覆蓋住容器頂部;再用雙層6針遮遮陽網遮蓋；
[0056]6)菌絲生長期間的管理:每3-5天揭開農膜通風10-20min;冬天自然溫度培養;保持土壤含水量不低于16%，干燥時適當噴水；
[0057]7)催菇處理:按照質量百分比稱量以下組分:葡萄糖或蔗糖0.5 %?1.0 %，硫酸鎂0.01%,磷酸二氫鉀0.01%,硫酸亞鐵0.001%,余量為水，先將葡萄糖或蔗糖、磷酸二氫鉀溶于水中，再加入硫酸鎂溶解，最后才加入硫酸亞鐵，攪拌均勻兌成水溶液，制備得到催菇液，播種50-60d后噴灑催菇液，用量為0.1?0.3kg/m2;
[0058]8)出菇期間的管理:春天的2-3月開始形成子實體，保持空氣相對濕度達到80%?90%，土壤含水量為18%?21%，原基形成的溫度為5?15°C，原基形成以后到子實體高度達到2cm前，不宜直接在子實體上噴水;子實體長高以后可以適當噴水；
[0059]9)采收:大的子實體長到7-12cm高以后可采收，從土面l-2cm高剪下菌柄和菌蓋，菌柄基部留在土內。
[0060]實施例2:室內反季節栽培
[0061]本發明的目的是提供一種羊肚菌子實體的培養方法，具體而言，夏秋季節反季節室內栽培的其步驟包括:
[0062]反季節栽培在有控溫條件的培養室內進行，室內溫度可以控制在10?22°C。
[0063]菌絲生長期間的管理:每3-5天揭開農膜通風10-20min;冬天自然溫度培養;室內溫度控制在15_22°C，空氣相對濕度控制在60%?70% ；
[0064]出菇管理:菌絲培養40?60d后室內溫度降低到12-15°C，保持空氣相對濕度達到80%?90%，土壤含水量為18%?21%; 10-15d后開始形成子實體原基;原基形成以后到子實體高度達到2cm前，不宜直接在子實體上噴水;子實體長高以后可以適當噴水；
[0065]容器處理、土壤處理、裝土、播種、覆蓋、催菇處理、采收步驟同實施例1。
[0066]實施例3:大田正常季節栽培
[0067]I)準備菌種:羊肚菌菌種可以購買或自行從栽培或野生子實體上進行分離得到；
[0068]2)菌種培養
[0069]2.1)母種制作:培養基配方:麩皮25?30g，玉米粉或黃豆粉2?3g，干松針20?50g，10?23g葡萄糖或蔗糖或麥芽糖，I?2g蛋白胨或酵母粉，瓊脂18?22g。方法:稱取所用的麩皮、玉米粉或黃豆粉、干松針，在玻璃或金屬容器內，加1200mL水，煮沸20min，用4層紗布進行過濾并洗滌，得到濾液lOOOmL，在濾液中加入瓊脂，加熱到全部瓊脂融化，再將葡萄糖或蔗糖或麥芽糖其中任一、蛋白胨或酵母粉中任一等加入溶解，然后分裝到試管中，試管塞上棉塞或乳膠塞，在高壓鍋內0.1MPa滅菌15-20min，冷卻后從高壓鍋內取出擺成斜面培養基;放置5-7d，使斜面上的水珠全部散盡后使用;無菌狀態下接種，22-23 °C恒溫培養箱內避光培養3?5d，使斜面長滿菌絲，繼續培養7?1d;菌絲體為黃褐色、灰褐色，在瓊脂培養基表面或試管壁上形成大量黃色菌核，備用；
[0070]2.2)原種培養:培養基配方:風干原料質量百分比為80 %?85 %小麥或水稻或高粱或小米或燕麥其中任一，5 %?10 %稻殼或木肩，5 %?10 %熟土。方法:按照配方稱取小麥或水稻或高粱或小米或燕麥其中任一裝入尼龍袋中，每袋裝入總體積1/3?1/2的固體物，放入質量分數為1%?2%的石灰水中浸泡16?24h，撈起后袋內沒有線狀水流出即可倒在地面上進行拌料;稻殼或木肩直接在清水中浸泡24?48h，撈起后稻殼中沒有線狀水流出即可倒在地面上進行拌料;土壤直接敲碎后拌入上述原料中；拌勻后裝入菌種瓶中，聚丙烯膜用橡皮筋封口，高壓鍋內0.13?0.1410^滅菌60-801^11，冷卻后取出。無菌狀態下接入母種，22-23 °C恒溫培養箱內避光培養15?20d，使菌種瓶長滿菌絲，繼續培養7?1d，在培養料的表面大量形成菌核，備用；
[0071]2.3)栽培種培養:培養基配方:方法:風干原料質量百分比為40%?50%小麥或水稻或高粱或小米或燕麥其中任一，30 %?40 %木肩，5 %?10 %稻殼，5 %?10 %熟土。方法:小麥等、稻殼的處理方法同原種;木肩加1:1的清水拌料;熟土直接敲碎后拌入上述原料中；拌勻后裝入750mL塑料菌種瓶或12?15 X 20?25cm的聚乙烯或聚丙烯菌種袋中，菌種瓶用透氣蓋封口，菌種袋用口圈加透氣蓋封口，高壓鍋內0.13?0.1410^滅菌120-13011^11，冷卻后取出。無菌狀態下接入原種，22-23°C恒溫培養箱內避光培養15?20d，使菌種瓶長滿菌絲，繼續培養7?1d，在培養料的表面大量形成菌核，備用；
[0072]3) 土壤處理
[0073]3.1)選擇靠近自然水源，地勢平坦的旱地或水田進行羊肚菌的栽培；
[0074]3.2)大田預處理:播種前3?4個月，每667m2耕地地加入細木肩200?250kg，稻麥草粉200?250kg，樹葉100?120kg，均勻撒在土壤表面；用旋耕機耕地，將前述原料均勻地混合在土壤表層10?20cm內，灌一次透水，用薄膜覆蓋土壤閑置一季；
[0075]3.3)整地:當年11月初開始整地，用旋耕機翻地、耙細土壤，大土粒的直徑不超過5cm；
[0076]3.4)放線開畦:按照畦面寬度為60?80cm、走道寬為50?60cm進行放線，用石灰粉劃線；將走道內的土壤翻到畦面上，使走道的深度達到20?25cm;平整畦面，用圓形金屬筒碾壓畦面，使其平整；
[0077]3.5)搭建雙層遮陽網棚架:用竹竿、木桿、鋼管等材料搭棚，棚架的高度為1.8?2.5m,用6針密度的遮陽網遮蓋頂層，頂層下再搭一層遮陽網，一般每5?10畝搭建一個獨立的遮陽網棚架；四周圍嚴實，外面用途壓實;澆灌I次大水，使土壤含水量[(濕土重量-烘干土重)/濕土重量X 100%]達到18%?20% ；
[0078]4)播種:把塑料瓶裝或菌袋裝的栽培種從中央切成2段;在畦面上每I?1.5m2打I個直徑為15?20cm的孔洞，孔洞的深度為5?1cm;將切開的菌種瓶或菌種袋露出菌種的一端放入孔洞中，稍壓實，使菌種培養料與土壤接觸緊密，菌種瓶或菌種袋四周用土壓嚴實；
[0079]5)覆蓋保溫:畦面用一層黑色農膜覆蓋，四周有土塊壓住;或用長竹片起拱，拱高20?25cm，在竹片上覆蓋白色農膜；
[0080]6)菌絲生長期間的管理:保持土壤含水量不低于16%，干燥時適當噴水；
[0081 ] 7)催菇液:按照質量百分比稱量以下組分:葡萄糖或蔗糖0.5 %?1.0 %，硫酸鎂
0.01%,磷酸二氫鉀0.01%,硫酸亞鐵0.001%,余量為水，先將葡萄糖或蔗糖、磷酸二氫鉀溶于水中，再加入硫酸鎂溶解，最后才加入硫酸亞鐵，攪拌均勻兌成水溶液，制備得到催菇液;在播種后第70?80d開始使用，用量為0.3?0.4kg/m2 ；揭開農膜，用噴霧器均勻噴灑;噴后通風30?50min ；再遮蓋農膜；
[0082]8)出菇期間的管理:羊肚菌子實體原基形成的溫度為5?15°C，子實體生長的溫度為10?18°C，羊肚菌的出菇期在南方地區一般從2月初到4月初，北方地區為4月到6月初。子實體原基形成以后繼續蓋膜，當子實體長到2?3cm高時，揭開農膜;保持土壤含水量在18%?20%之間；適當通風。子實體從原基形成到最后成熟的生長時間為15?25d。注意防治高溫，土面溫度一般控制不要超過20°C，
[0083]9)采收:當子實體總高度達到7?12cm時就要及時采收，從地面I?2cm處切斷菌柄，基部留在土壤表面。
[0084]羊肚菌子實體的生長情況如圖1至圖3所示，采用本發明的栽培方法，出菇效果可以得到50-130個子實體/m2，單位面積鮮菇產量為150-200kg/667m2。
[0085]上述說明示出并描述了發明的若干優選實施例，但如前所述，應當理解發明并非局限于本文所披露的形式，不應看作是對其他實施例的排除，而可用于各種其他組合、修改和環境，并能夠在本文所述發明構想范圍內，通過上述教導或相關領域的技術或知識進行改動。而本領域人員所進行的改動和變化不脫離發明的精神和范圍，則都應在發明所附權利要求的保護范圍內。
【主權項】
1.一種羊肚菌子實體的培養方法，其特征在于，包括以下步驟: .1)菌種準備:羊肚菌菌種購買或自行從栽培或野生子實體上進行分離得到； .2)菌種培養:通過母種制作、原種培養以及栽培種培養制備得到栽培種； .3)土壤處理； .4)播種:把塑料瓶裝或菌袋裝的栽培種從中央切成2段;在畦面上每I?1.5m2打I個直徑為15?20cm的孔洞，孔洞的深度為5?1cm;將切開的菌種瓶或菌種袋露出菌種的一端放入孔洞中，稍壓實，使菌種培養料與土壤接觸緊密，菌種瓶或菌種袋四周用土壓嚴實； .5)覆蓋保溫:畦面用一層黑色農膜覆蓋，四周有土塊壓住;或用長竹片起拱，拱高20?25cm，在竹片上覆蓋白色農膜； .6)菌絲生長期間的管理:保持土壤含水量不低于16%，干燥時適當噴水； .7)催菇處理:在播種后第70?80d開始使用催菇液，用量為0.3?0.4kg/m2;揭開農膜，用噴霧器均勻噴灑，噴后通風30?50min，再遮蓋農膜； .8)出菇期間的管理:羊肚菌子實體原基形成的溫度為5?15°C，子實體生長的溫度為10?18°C，羊肚菌的出菇期在南方地區一般從2月初到4月初，北方地區為4月到6月初;子實體原基形成以后繼續蓋膜，當子實體長到2?3cm高時，揭開農膜;保持土壤含水量在18%?20%之間；適當通風;子實體從原基形成到最后成熟的生長時間為15?25d;注意防治高溫，土面溫度一般控制不要超過20°C ; 9)采收:當子實體總高度達到7?12cm時就要及時采收，從地面I?2cm處切斷菌柄，基部留在土壤表面。2.根據權利要求1所述的羊肚菌子實體的培養方法，其特征在于，所述步驟2)中菌種培養具體為: 2.1)母種制作:制備母種培養基，在無菌狀態下接種，22-23°C恒溫培養箱內避光培養3?5d，使斜面長滿菌絲，繼續培養7?1d;菌絲體為黃褐色、灰褐色，在瓊脂培養基表面或試管壁上形成大量黃色菌核，備用； 2.2)原種培養:制備原種培養基，在無菌狀態下接入母種，22-23°C恒溫培養箱內避光培養15?20d，使菌種瓶長滿菌絲，繼續培養7?10d，在培養料的表面大量形成菌核，備用； 2.3)栽培種培養:制備栽培種培養基，無菌狀態下接入原種，22-23°C恒溫培養箱內避光培養15?20d，使菌種瓶長滿菌絲，繼續培養7?10d，在培養料的表面大量形成菌核，備用。3.根據權利要求2所述的羊肚菌子實體的培養方法，其特征在于，所述母種培養基的配方為:麩皮25?30g，玉米粉或黃豆粉2?3g，干松針20?50g，10?23g葡萄糖或蔗糖或麥芽糖，I?2g蛋白胨或酵母粉，瓊脂18?22g。4.根據權利要求3所述的羊肚菌子實體的培養方法，其特征在于，所述母種培養基通過以下制備方法獲得:稱量:麩皮25?30g，玉米粉或黃豆粉2?3g，干松針20?50g，10?23g葡萄糖或蔗糖或麥芽糖，I?2g蛋白胨或酵母粉，瓊脂18?22g;在玻璃或金屬容器內，按照配方稱取麩皮、玉米粉或黃豆粉、干松針，加1200mL水，煮沸20min，用4層紗布進行過濾并洗滌，得到濾液lOOOmL，在濾液中加入瓊脂，加熱到全部瓊脂融化，再把葡萄糖或蔗糖或麥芽糖其中任一、蛋白胨或酵母粉中任一加入溶解。然后分裝到試管中，試管塞上棉塞或乳膠塞，在高壓鍋內0.1MPa滅菌15-20min，冷卻后從高壓鍋內取出擺成斜面培養基;放置5_7d，使斜面上的水珠全部散盡后使用。5.根據權利要求2所述的羊肚菌子實體的培養方法，其特征在于，以干重計，所述原種培養基按照質量百分比由以下組分構成:80%?85%小麥或水稻或高粱或小米或燕麥其中任一，5%?10%稻殼或木肩，5%?10%熟土。6.根據權利要求5所述的羊肚菌子實體的培養方法，其特征在于，所述原種培養基通過以下步驟獲得:以干重計，按照質量百分比稱量以下組分:80%?85%小麥或水稻或高粱或小米或燕麥其中任一，5%?10%稻殼或木肩，5 %?10 %熟土;將稱量好的小麥或水稻或高粱或小米或燕麥其中任一裝入尼龍袋中，每袋裝入總體積1/3?1/2的固體物，放入質量分數為I %?2%的石灰水中浸泡16?24h，撈起后袋內沒有線狀水流出即倒在地面上進行拌料;稻殼或木肩直接在清水中浸泡24?48h，撈起后稻殼中沒有線狀水流出即倒在地面上進行拌料;熟土直接敲碎后拌入上述原料中；拌勻后裝入菌種瓶中，聚丙烯膜用橡皮筋封口，高壓鍋內0.13?0.14MPa滅菌60_80min，冷卻后取出。7.根據權利要求2所述的羊肚菌子實體的培養方法，其特征在于，所述栽培種培養基通過以下步驟制備得到:以干重計，按照質量百分比稱量以下組分:40%?50%小麥或水稻或高粱或小米或燕麥其中任一，30 %?40 %木肩，5 %?10 %稻殼，5 %?10 %熟土;將稱量好的小麥或水稻或高粱或小米或燕麥其中任一裝入尼龍袋中，每袋裝入總體積1/3?1/2的固體物，放入質量分數為I %?2 %的石灰水中浸泡16?24h，撈起后袋內沒有線狀水流出即倒在地面上進行拌料;稻殼直接在清水中浸泡24?48h，撈起后稻殼中沒有線狀水流出即倒在地面上進行拌料；木肩加1:1的清水拌料；熟土直接敲碎后拌入上述原料中；拌勻后裝入750mL塑料菌種瓶或12?15X20?25cm的聚乙烯或聚丙烯菌種袋中，菌種瓶用透氣蓋封口，菌種袋用口圈加透氣蓋封口，高壓鍋內0.13?0.1410^滅菌120-13011^11，冷卻后取出。8.根據權利要求1所述的羊肚菌子實體的培養方法，其特征在于，所述步驟3)中土壤處理具體為: 3.1)選地:選擇靠近自然水源，地勢平坦的旱地或水田進行羊肚菌的栽培； 3.2)大田預處理:播種前3?4個月，每667m2耕地加入細木肩200?250kg，稻麥草粉200?250kg，樹葉100?120kg，均勻撒在土壤表面；用旋耕機耕地，將前述原料均勻地混合在土壤表層10?20cm內，灌一次透水，用薄膜覆蓋土壤閑置一季； 3.3)整地:當年11月初開始整地，用旋耕機翻地、把細土壤，大土粒的直徑不超過5cm ； 3.4)放線開畦:按照畦面寬度為60?80cm、走道寬為50?60cm進行放線，用石灰粉劃線；將走道內的土壤翻到畦面上，使走道的深度達到20?25cm;平整畦面，用圓形金屬筒碾壓畦面，使其平整； 3.5)搭建雙層遮陽網棚架:用竹竿、木桿、鋼管材料搭棚，棚架的高度為1.8?2.5m，用6針密度的遮陽網遮蓋頂層，頂層下再搭一層遮陽網，一般每5?10畝搭建一個獨立的遮陽網棚架；四周圍嚴實，外面用途壓實;澆灌I次大水，使土壤含水量達到18%?20%;土壤含水量的計算方法如下:土壤含水量=[(濕土重量-烘干土重)/濕土重量X 100% ]。9.根據權利要求1所述的羊肚菌子實體的培養方法，其特征在于，所述催菇液通過以下步驟制備得到:按照質量百分比稱量以下組分:葡萄糖或蔗糖0.5%?1.0%，硫酸鎂.0.01%,磷酸二氫鉀0.01%,硫酸亞鐵0.001%,余量為水，先將葡萄糖或蔗糖、磷酸二氫鉀溶于水中，再加入硫酸鎂溶解，最后才加入硫酸亞鐵，攪拌均勻兌成水溶液，制備得到催菇 液。
【文檔編號】A01G1/04GK105993590SQ201610334688
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年5月19日
【發明人】賀新生, 趙苗, 張能, 謝敬宜, 王銀, 袁小紅, 陳波, 黃毅
【申請人】西南科技大學