茶多酚誘導小麥幼苗抗鹽的新用途及浸種液、抗鹽方法
【專利摘要】本發明公開了茶多酚誘導小麥幼苗抗鹽的新用途及浸種液、抗鹽方法，在鹽漬化環境中，小麥幼苗生長至10cm時，利用浸種液對小麥幼苗進行澆灌；抗鹽方法：1)將小麥種子消毒；2)將消毒后的小麥種子在蒸餾水中反復沖洗干凈；3)對小麥種子進行催芽；4)在小麥幼苗生長至10cm高度時，用浸種液連續三天對小麥幼苗進行澆灌；所述浸種液中含有茶多酚，茶多酚的含量為10～40μg/mL；茶多酚能夠明顯延緩鹽脅迫下小麥幼苗葉片葉綠素的降解，提高CAT、POD活性和脯氨酸含量，降低膜脂過氧化產物MDA的積累，最終有效地提高小麥幼苗的抗鹽脅迫能力。
【專利說明】
茶多酚誘導小麥幼苗抗鹽的新用途及浸種液、抗鹽方法
技術領域
[0001]本發明涉及一種茶多酚誘導小麥幼苗抗鹽的新用途。本發明還涉及含有茶多酚的浸種液，以及采用上述浸種液誘導小麥幼苗抗鹽的方法。【背景技術】
[0002]茶多酚又名茶單寧、茶鞣質，是茶葉中所含的一類多羥基酚類化合物的總稱，簡稱為TP。其主要成分包括兒茶素類、黃酮、黃酮醇類、花青素類、酚酸及縮酚酸類，其中兒茶素類約占茶多酚總量的65 %_80%，包括四種形式的兒茶素:表沒食子兒茶素沒食子酸酯 (EGCG)、表沒食子兒茶素(EGC)、表兒茶素沒食子酸酯(ECG)、表兒茶素(EC)，兒茶素類化合物在B環和C環上的酸性酚羥基具有很強的供氫能力，能中斷自動氧化成氫過氧化物的連鎖反應，從而阻斷氧化過程。體外試驗證明茶多酚能清除0-2和? 0H等自由基[1]，具有較強的抗氧化活性，能提高小鼠體內超氧化物歧化酶(S0D)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH2PX)活力， 降低過氧化脂質(LP0)和脂褐素含量，并能延長家蠅壽命。茶多酚在動物體上的研究成為科學界的一大熱點，但其在植物體上的應用卻很少。
【發明內容】
[0003]本發明的目的是提供茶多酚的一種新用途，具體是茶多酚誘導小麥幼苗抗鹽的新用途。同時，還提供含有茶多酚的浸種液，以及采用上述浸種液誘導小麥幼苗抗鹽的方法。 [〇〇〇4]為了達到上述的技術目的，本發明的技術方案是:
[0005]茶多酚誘導小麥幼苗抗鹽的新用途，在鹽漬化環境中，小麥幼苗生長至10cm時，利用浸種液對小麥幼苗進行澆灌，浸種液中含有茶多酚，茶多酚的含量為10?40yg/mL。
[0006]—種促進小麥幼苗抗鹽的浸種液，所述浸種液中含有茶多酚，茶多酚的含量為10 ?40iig/mL〇
[0007]—種利用茶多酚誘導小麥幼苗抗鹽的方法，包括以下步驟:[00〇8](1)將小麥種子消毒；
[0009](2)將消毒后的小麥種子在蒸餾水中反復沖洗干凈；
[0010](3)對小麥種子進行催芽；
[0011](4)在小麥幼苗生長至10cm高度時，用浸種液連續三天對小麥幼苗進行澆灌;所述浸種液中含有茶多酸，茶多酸的含量為10?40lig/mL。
[0012]所述浸種液中茶多酚的含量優選為20yg/mL。
[0013]本發明中，茶多酚能夠明顯延緩鹽脅迫下小麥幼苗葉片葉綠素的降解，提高CAT、 POD活性和脯氨酸含量，降低膜脂過氧化產物MDA的積累，最終有效地提高小麥幼苗的抗鹽脅迫能力。
[0014]但是，在沒有(或含量很低時)鹽脅迫的情況下，加入茶多酚會降低蛋白濃度以及抗氧化酶(S0D、P0D和CAT)的活性，對小麥幼苗造成一定的影響。為了解決這個問題，浸種液中加入聚二甲基硅氧烷和十三烷醇聚醚-6,所述聚二甲基硅氧烷含量占浸種液的4?6%(以浸種液質量為基準)，十三烷醇聚醚-6含量占浸種液的1?2% (以浸種液質量為基準)。 十三烷醇聚醚-6可適當改變PH值，聚二甲基硅氧烷則利用其疏水等特性，在沒有鉻脅迫的情況下，消除茶多酚的影響，不會降低蛋白濃度以及抗氧化酶(SOD、POD和CAT)的活性。【附圖說明】
[0015]圖1為茶多酚(TP)對鹽脅迫下小麥幼苗葉綠素含量的影響。
[0016]圖2為TP對鹽脅迫下小麥幼苗脯氨酸含量的影響。[〇〇17]圖3為TP對鹽脅迫下小麥幼苗丙二醛含量含量的影響。[〇〇18]圖4為TP對鹽脅迫下小麥幼苗超氧陰離子含量的影響。[〇〇19]圖5為TP對鹽脅迫下小麥幼苗過氧化氫酶活力影響。[〇〇2〇]圖6為TP對鹽脅迫下小麥幼苗過氧化物酶活力影響。【具體實施方式】[〇〇21]下面結合附圖和【具體實施方式】對本發明作進一步詳細的說明。
[0022] 小麥(Triticumaestivum L.)為早紅1號。茶多?KTP)由無錫太陽綠寶科技有限公司提供，含量>98 %。聚二甲基硅氧烷含量和十三烷醇聚醚-6由上海麥克林生化科技有限公司提供。[〇〇23] 實施例1[〇〇24](1)選取飽滿、整齊一致的種子用0.1 %高錳酸鉀消毒20min，
[0025](2)將消毒后的小麥種子在蒸餾水中反復沖洗干凈；[0〇26](3)將小麥種子在培養皿中，在溫度25°C，自然光照下對小麥種子進行催芽；
[0027](4)在小麥幼苗生長至10cm高度時，用蒸餾水連續三天對小麥幼苗進行饒灌。[〇〇28]實施例2[〇〇29](1)選取飽滿、整齊一致的種子用0.1 %高錳酸鉀消毒20min，[〇〇3〇](2)將消毒后的小麥種子在蒸餾水中反復沖洗干凈；
[0031](3)將小麥種子在培養皿中，在溫度25°C，自然光照下對小麥種子進行催芽；[0〇32](4)在小麥幼苗生長至10cm高度時，用浸種液連續三天對小麥幼苗進行饒灌;所述浸種液中含有200mm〇l/L NaCl。
[0033]實施例3[〇〇34](1)選取飽滿、整齊一致的種子用0.1 %高錳酸鉀消毒20min，
[0035](2)將消毒后的小麥種子在蒸餾水中反復沖洗干凈；
[0036](3)將小麥種子在培養皿中，在溫度25°C，自然光照下對小麥種子進行催芽；[0〇37](4)在小麥幼苗生長至10cm高度時，用浸種液連續三天對小麥幼苗進行饒灌;所述浸種液中含有200mmol/L NaCl，以NaCl為基準，浸種液中含有10yg/ml茶多酚。
[0038]實施例4[〇〇39](1)選取飽滿、整齊一致的種子用0.1 %高錳酸鉀消毒20min，[〇〇4〇](2)將消毒后的小麥種子在蒸餾水中反復沖洗干凈；
[0041](3)將小麥種子在培養皿中，在溫度25°C，自然光照下對小麥種子進行催芽；[0〇42](4)在小麥幼苗生長至10cm高度時，用浸種液連續三天對小麥幼苗進行饒灌;所述浸種液中含有200mmol/L NaCl，以NaCl為基準，浸種液中含有20yg/ml茶多酚。
[0043]實施例5[〇〇44](1)選取飽滿、整齊一致的種子用0.1 %高錳酸鉀消毒20min，
[0045](2)將消毒后的小麥種子在蒸餾水中反復沖洗干凈；
[0046](3)將小麥種子在培養皿中，在溫度25°C，自然光照下對小麥種子進行催芽；[0〇47](4)在小麥幼苗生長至10cm高度時，用浸種液連續三天對小麥幼苗進行饒灌;所述浸種液中含有200mmol/L NaCl，以NaCl為基準，浸種液中含有40yg/ml茶多酚。
[0048]實施例6[〇〇49](1)選取飽滿、整齊一致的種子用0.1 %高錳酸鉀消毒20min，[〇〇5〇](2)將消毒后的小麥種子在蒸餾水中反復沖洗干凈；
[0051](3)將小麥種子在培養皿中，在溫度25°C，自然光照下對小麥種子進行催芽；[0〇52](4)在小麥幼苗生長至10cm高度時，用浸種液連續三天對小麥幼苗進行饒灌;所述浸種液中含有200mmol/L NaCl，以NaCl為基準，浸種液中含有100yg/ml茶多酚。
[0053]實施例7[〇〇54](1)選取飽滿、整齊一致的種子用0.1 %高錳酸鉀消毒20min，
[0055](2)將消毒后的小麥種子在蒸餾水中反復沖洗干凈；
[0056](3)將小麥種子在培養皿中，在溫度25°C，自然光照下對小麥種子進行催芽；[0〇57](4)在小麥幼苗生長至10cm高度時，用浸種液連續三天對小麥幼苗進行饒灌;所述浸種液中含有40yg/ml茶多酚。
[0058]實施例8[〇〇59](1)選取飽滿、整齊一致的種子用0.1 %高錳酸鉀消毒20min，[〇〇6〇](2)將消毒后的小麥種子在蒸餾水中反復沖洗干凈；
[0061](3)將小麥種子在培養皿中，在溫度25°C，自然光照下對小麥種子進行催芽；[0〇62](4)在小麥幼苗生長至10cm高度時，用浸種液連續三天對小麥幼苗進行饒灌;所述浸種液中含有20yg/ml茶多酚，浸種液中還加入聚二甲基硅氧烷和十三烷醇聚醚-6,聚二甲基硅氧烷含量占浸種液的4 % (以浸種液質量為基準)，十三烷醇聚醚-6含量占浸種液的2 % (以浸種液質量為基準)。
[0063]實施例9[〇〇64](1)選取飽滿、整齊一致的種子用0.1 %高錳酸鉀消毒20min，
[0065](2)將消毒后的小麥種子在蒸餾水中反復沖洗干凈；
[0066](3)將小麥種子在培養皿中，在溫度25°C，自然光照下對小麥種子進行催芽；[0〇67](4)在小麥幼苗生長至10cm高度時，用浸種液連續三天對小麥幼苗進行饒灌;所述浸種液中含有20yg/ml茶多酚，浸種液中還加入聚二甲基硅氧烷和十三烷醇聚醚-6,聚二甲基硅氧烷含量占浸種液的6 % (以浸種液質量為基準)，十三烷醇聚醚-6含量占浸種液的1 % (以浸種液質量為基準)。[〇〇68]實施例1是在正常狀態下，即沒有鹽脅迫情況下，對應說明書附圖中的CK1。實施例 2為無茶多酚誘導下的鹽脅迫狀態，對應說明書附圖中的CK2。實施例3-6為在茶多酚誘導下的鹽脅迫狀態。實施例7為存在茶多酚誘導，但無鹽脅迫狀態。實施例8、9為浸種液中含有聚二甲基硅氧烷、十三烷醇聚醚-6、茶多酚誘導，但無鹽脅迫狀態。[0〇69 ]上述實施例獲得幼苗測定方法:
[0070]葉綠素含量測定按張志良等的方法測定。
[0071]蛋白質含量測定按張志良等的方法測定。
[0072]脯氨酸含量的測定采用茚三酮比色法。[〇〇73] 丙二醛含量的測定采用硫代巴比妥酸顯色法。
[0074]從圖1可以看出，茶多酚抑制鹽脅迫下葉綠素降解。實施例7中存在茶多酚誘導，但無鹽脅迫狀態下，葉綠素降解正常，在實施例8、9狀態下，葉綠素降解也無差別。
[0075]從圖2可以看出，茶多酚可以促進鹽脅迫下小麥幼苗中脯氨酸的生成。實施例7中存在茶多酚誘導，但無鹽脅迫狀態下，脯氨酸含量下降12%，但在實施例8、9狀態下，脯氨酸含量趨于正常狀態，基本上無差別。[〇〇76]從圖3可以看出，茶多酚處理明顯降低小麥幼苗中丙二醛的含量。實施例7中存在茶多酚誘導，但無鹽脅迫狀態下，丙二醛的含量正常，在實施例8、9狀態下，丙二醛的含量也趨于正常狀態。
[0077]從圖4可以看出，茶多酚對清除植物體內超氧陰離子的含量有良好的效果。實施例 7中存在茶多酚誘導，但無鹽脅迫狀態下，超氧陰離子的含量與正常狀態下相比較提高4%， 在實施例8、9狀態下，超氧陰離子的含量趨于正常狀態。
[0078]從圖5、6可以看出，茶多酚能提高鹽脅迫條件下小麥幼苗葉片過氧化氫酶和過氧化物酶活力。實施例7中存在茶多酚誘導，但無鹽脅迫狀態下，過氧化氫酶和過氧化物酶活性與正常狀態下相比較，分別下降了 13%和17%，在實施例8、9狀態下，過氧化氫酶和過氧化物酶活性趨于正常狀態。
[0079]上述實施例不以任何方式限制本發明，凡是采用等同替換或等效變換的方式獲得的技術方案均落在本發明的保護范圍內。
【主權項】
1.茶多酚誘導小麥幼苗抗鹽的新用途，其特征在于:在鹽漬化環境中，小麥幼苗生長至 10cm時，利用浸種液對小麥幼苗進行饒灌，浸種液中含有茶多酸，茶多酸的含量為10?40y g/mL〇2.根據權利要求1所述的茶多酚誘導小麥幼苗抗鹽的新用途，其特征在于:所述浸種液 中茶多酚的含量為20yg/mL。3.根據權利要求1或2所述的茶多酚誘導小麥幼苗抗鹽的新用途，其特征在于:所述浸 種液中含有聚二甲基硅氧烷和十三烷醇聚醚-6,所述聚二甲基硅氧烷含量占浸種液的4? 6%，十三烷醇聚醚-6含量占浸種液的1?2%。4.一種促進小麥幼苗抗鹽的浸種液，其特征在于:所述浸種液中含有茶多酚，茶多酚的 含量為10?40yg/mL。5.根據權利要求4所述的一種促進小麥幼苗抗鹽的浸種液，其特征在于:所述浸種液中 茶多酚的含量為20yg/mL。6.根據權利要求4或5所述的一種促進小麥幼苗抗鹽的浸種液，其特征在于:所述浸種 液中含有聚二甲基硅氧烷和十三烷醇聚醚-6,所述聚二甲基硅氧烷含量占浸種液的4? 6%，十三烷醇聚醚-6含量占浸種液的1?2%。7.—種利用茶多酚誘導小麥幼苗抗鹽的方法，其特征在于包括以下步驟:(1)將小麥種子消毒；(2)將消毒后的小麥種子在蒸餾水中反復沖洗干凈；(3)對小麥種子進行催芽；(4)在小麥幼苗生長至10cm高度時，用浸種液連續三天對小麥幼苗進行澆灌;所述浸種 液中含有茶多酚，茶多酚的含量為10?4〇yg/mL。8.根據權利要求7所述的一種利用茶多酚誘導小麥幼苗抗鹽的方法，其特征在于:所述 浸種液中茶多酚的含量為20yg/mL。9.根據權利要求7或8所述的一種利用茶多酚誘導小麥幼苗抗鹽的方法，其特征在于: 所述浸種液中含有聚二甲基硅氧烷和十三烷醇聚醚-6,所述聚二甲基硅氧烷含量占浸種液 的4?6%，十三烷醇聚醚-6含量占浸種液的1?2%。
【文檔編號】A01N25/32GK105941400SQ201610334754
【公開日】2016年9月21日
【申請日】2016年5月19日
【發明人】羅兵, 孫海燕, 湯俊, 孫惠娟
【申請人】常熟理工學院