一種綠色的防治玉米根腐病的生物方法
【專利摘要】本發明公開了一種綠色的防治玉米根腐病的生物方法，屬于生物防治植物病害技術領域。該方法通過利用滅活的病原真菌立枯絲核菌誘導液誘導玉米抗性，從而達到防治玉米根腐病的目的。其特征在于：1）利用滅活的立枯絲核菌誘導液進行生物防治玉米根腐病；2）誘導液接種到玉米莖稈傷口上，或直接施加誘導液于玉米小苗根部周圍，從而達到提高玉米抗性。本發明是一種效果好，無二次污染、無殘留，且成本很低的綠色防治玉米根腐病的生物方法。
【專利說明】
一種綠色的防治玉米根腐病的生物方法
技術領域
[0001] 本發明涉及玉米種植技術領域，涉及到一種玉米根腐病的防治方法。 技術背景
[0002] 玉米是一種重要的糧食作物及飼料來源，目前是全世界產量最高的糧食作物。玉 米根腐病是玉米種植幼苗期重要的病害之一，可導致大量玉米幼苗死亡，造成巨大的經濟 損失。有研究發現，導致玉米苗期根腐病的主要病原菌之一為立枯絲核菌（仙 。目前有作物輪作管理、化學藥劑、選擇抗病品種等方法進行作物病害的防治。但 是，其中作物輪作方法需耗費大量時間且不能及時達到防治根腐病的目的；噴施化學藥劑 的防治方法則會在土壤及作物上殘留化學物質，對動物及人類健康造成危害;選用抗病品 種則經濟成本較高，且抗病品種的育種工作需要較高的技術手段。而生物防治方法則具有 高效、安全、綠色、操作簡易的特點，從而達到有效防治病害的目的。
[0003]
【發明內容】
[0004] 本發明的目的是提供一種環境友好的綠色防治玉米根腐病的方法。
[0005] 本發明是通過以下技術方法實現的，一種綠色的防治玉米根腐病的生物方法，按 照下述步驟進行： (l)PDA固體培養基培養好的立枯絲核菌(7?Aizocio/3ia so^a/ji)，用打孔器打成直徑5 mm的菌塊，接種到PDA液體培養基中，搖床震蕩培養3-5 d，搖床穩定為25-30°C，轉速為180 r/min〇
[0006] (2)將培養好的菌液渦旋均勻，經高壓滅菌鍋121°C滅活30 min，制成誘導物，冷卻 待用。
[0007] (3)用誘導物誘導玉米產生誘導抗性。
[0008] 其中步驟（1)中roA固體培養基配方如下：200 g/L 土豆切絲煮沸，用紗布過濾， 棄土豆渣，取土豆液加入鹿糖20g/L、瓊脂粉20g/L，混合均勾，高溫121°C滅菌30 min，倒入 培養皿，冷卻備用。
[0009] 其中步驟(1)中PDA液體培養基配方如下:200 g/L 土豆切絲煮沸，用紗布過濾，棄 土豆渣，取土豆液加入蔗糖20g/L。混合均勻，并分裝到200 mL的三角瓶中，每瓶50 mL，高溫 121°C滅菌30 min，冷卻備用。
[0010] 其中步驟(3)中所述的用誘導物誘導玉米產生誘導抗性具體方法為 a.用小刀在玉米小苗靠近根部的莖桿上劃傷2 mm寬的傷口，用無菌棉球浸濕滅活誘 導物包扎傷口，并用保鮮膜包好，24 h-48 h取下棉球； 或者b.取滅活誘導物5-10 ml，均勻澆施在玉米小苗根部周圍。
[0011]本發明提供的防治玉米根腐病的方法是一種具有高效性、強針對性，并且絕對環 保、無毒、無二次污染、無殘留的防治玉米根腐病的方法，是創造綠色生態農業的重要保障， 并且經濟成本很低，適合廣大農民用戶使用。
[0012]本發明提供的防治玉米根腐病的方法，效果顯著，能有效減少玉米根腐病的發生。 通過實驗驗證，利用本發明方法，顯著抑制玉米根腐病達87%以上。
【具體實施方式】
[0014] 下面通過具體實施例對本發明進行詳細描述： 實施例1 一種綠色的防治玉米根腐病的生物方法，包括以下步驟： (l)PDA固體培養基培養好的立枯絲核菌（中國農業微生物菌種保藏管理中心，編號 ACCC30374)，用打孔器打成直徑5 mm的菌塊，接種到TOA液體培養基中，搖床震蕩培養3 d， 搖床穩定為30°C，轉速為180 r/min。
[0015] (2)將培養好的菌液渦旋均勻，經高壓滅菌鍋121°C滅活30 min，制成誘導物，冷卻 待用。
[0016] (3)用誘導物誘導玉米產生誘導抗性：用小刀在玉米小苗靠近根部的莖桿上劃傷2 mm寬的傷口，用無菌棉球浸濕滅活誘導物包扎傷口，并用保鮮膜包好，24 h取下棉球。
[0017] 實施例2 一種綠色的防治玉米根腐病的生物方法，包括以下步驟： (l)PDA固體培養基培養好的立枯絲核菌（中國農業微生物菌種保藏管理中心，編號 ACCC30374)，用打孔器打成直徑5 mm的菌塊，接種到TOA液體培養基中，搖床震蕩培養4 d， 搖床穩定為28°C，轉速為180 r/min。
[0018] (2)將培養好的菌液渦旋均勻，經高壓滅菌鍋121°C滅活30 min，制成誘導物，冷卻 待用。
[0019] (3)用誘導物誘導玉米產生誘導抗性：用小刀在玉米小苗靠近根部的莖桿上劃傷2 mm寬的傷口，用無菌棉球浸濕滅活誘導物包扎傷口，并用保鮮膜包好，48 h取下棉球。
[0020] 實施例3 一種綠色的防治玉米根腐病的生物方法，包括以下步驟： (l)PDA固體培養基培養好的立枯絲核菌（中國農業微生物菌種保藏管理中心，編號 ACCC30374)，用打孔器打成直徑5 mm的菌塊，接種到TOA液體培養基中，搖床震蕩培養3 d， 搖床穩定為25°C，轉速為180 r/min。
[0021] (2)將培養好的菌液渦旋均勻，經高壓滅菌鍋121°C滅活30 min，制成誘導物，冷卻 待用。
[0022] (3)用誘導物誘導玉米產生誘導抗性:取滅活誘導物5 ml，均勻澆施在玉米小苗根 部周圍。
[0023] 實施例4 一種綠色的防治玉米根腐病的生物方法，包括以下步驟： (l)PDA固體培養基培養好的立枯絲核菌（中國農業微生物菌種保藏管理中心，編號 ACCC30374)，用打孔器打成直徑5 mm的菌塊，接種到TOA液體培養基中，搖床震蕩培養5 d， 搖床穩定為30°C，轉速為180 r/min。
[0024] (2)將培養好的菌液渦旋均勻，經高壓滅菌鍋121°C滅活30 min，制成誘導物，冷卻 待用。
[0025] (3)用誘導物誘導玉米產生誘導抗性:取滅活誘導物10 ml，均勻澆施在玉米小苗 根部周圍。
【主權項】
1. 一種綠色的防治玉米根腐病的生物方法，其特征在于按照下述步驟進行： (1)PDA固體培養基培養好的立枯絲核菌io/3ia soJa/ji)，用打孔器打成直徑5 mm的菌塊，接種到PDA液體培養基中，搖床震蕩培養3-5 d，搖床穩定為25-30°C，轉速為180 r/min;(2)將培養好的菌液渦旋均勻，經高壓滅菌鍋121°C滅活30 min，制成誘導物，冷卻待 用； (3)用誘導物誘導玉米產生誘導抗性。2. 根據權利要求1所述的一種綠色的防治玉米根腐病的生物方法，其特征在于其中步 驟（1)中F1DA固體培養基配方如下：200 g/L 土豆切絲煮沸，用紗布過濾，棄土豆渣，取土豆 液加入蔗糖20g/L、瓊脂粉20g/L，混合均勻，高溫121°C滅菌30 min，倒入培養皿，冷卻備用。3. 根據權利要求1所述的一種綠色的防治玉米根腐病的生物方法，其特征在于其中步 驟（1)中PDA液體培養基配方如下：200 g/L 土豆切絲煮沸，用紗布過濾，棄土豆渣，取土豆 液加入蔗糖20g/L; 混合均勻，并分裝到200 mL的三角瓶中，每瓶50 mL，高溫121°C滅菌30 min，冷卻備用。4. 根據權利要求1所述的一種綠色的防治玉米根腐病的生物方法，其特征在于其中步 驟(3)中所述的用誘導物誘導玉米產生誘導抗性具體方法為 a.用小刀在玉米小苗靠近根部的莖桿上劃傷2 mm寬的傷口，用無菌棉球浸濕滅活誘 導物包扎傷口，并用保鮮膜包好，24 h-48 h取下棉球;或者b.取滅活誘導物5-10 ml，均 勻澆施在玉米小苗根部周圍。
【文檔編號】A01G1/00GK105900653SQ201610256305
【公開日】2016年8月31日
【申請日】2016年4月25日
【發明人】祁珊珊, 戴志聰, 陳琪, 王寧, 宋由頁, 黃凱, 杜道林
【申請人】江蘇大學