駝背鱸與鞍帶石斑魚的工廠化雜交育苗方法

駝背鱸與鞍帶石斑魚的工廠化雜交育苗方法
【專利摘要】本發(fā)明是一種駝背鱸與鞍帶石斑魚的工廠化雜交育苗方法，通過駝背鱸與鞍帶石斑魚雜交，獲得種間雜交品種；魚苗過程中通過溫度調(diào)控和營養(yǎng)強(qiáng)化實(shí)現(xiàn)對(duì)親魚性腺成熟的調(diào)控；進(jìn)一步通過精子超低溫冷凍保存、雌性親本催產(chǎn)、人工授精、受精卵消毒孵化和仔魚培育獲得雜交新品種“鼠龍斑”。實(shí)現(xiàn)了高緯度地區(qū)駝背鱸、鞍帶石斑魚的生殖調(diào)控；并使雜交品種仔稚魚成活率大幅度提高。本發(fā)明還實(shí)現(xiàn)了培育池的內(nèi)部水質(zhì)循環(huán)和過濾、生化、消毒處理，降低了循環(huán)水系統(tǒng)工藝成本，保障了親本培育環(huán)境水質(zhì)。
【專利說明】
駝背鱸與鞍帶石斑魚的工廠化雜交育苗方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]
本發(fā)明涉及駝背鱸與鞍帶石斑魚的工廠化雜交育苗方法。
【背景技術(shù)】
[0002]
馬它背^(Chromileptes altivelis)，俗稱老鼠斑，為暖水性海洋底層魚類，主要分布于印度太平洋的炎熱海域。該魚幼年時(shí)體表雪白，布滿黑點(diǎn)，體上斑紋清晰，色彩靚麗，具有非常高的觀賞價(jià)值，可作為觀賞魚，成年后味道鮮美，為非常高級(jí)的食用魚，屬于高級(jí)名貴的經(jīng)濟(jì)魚類。由于駝背鱸資源稀少，捕獲量有限，加上生活在珊瑚礁區(qū)水域，人工獲取苗種進(jìn)行養(yǎng)殖的難度較大。
[0003]鞍帶石斑魚(Epinephelus Ianceolatus)，俗名龍膽石斑，又稱巨石斑，為暖水性海洋底層魚類，是石斑魚類中體型最大的種類之一，有斑王之稱，主要產(chǎn)地是東南亞、澳洲水域以及我國南海(南沙群島)、臺(tái)灣附近海域。鞍帶石斑魚種苗來源稀少，市場(chǎng)售價(jià)昂貴。另外，鞍帶石斑魚的人工繁殖技術(shù)難度大，苗種畸形率高并且生長速度慢。
[0004]因此，無論從市場(chǎng)角度還是技術(shù)角度，目前需要一種駝背鱸和鞍帶石斑魚的種間雜交品種。
[0005]另一方面，現(xiàn)有的親本培育池一般為流水養(yǎng)殖系統(tǒng)，由于這類系統(tǒng)耗水量、生物耗材量、能源消耗量和污水處理放量難度均較大，所以養(yǎng)殖企業(yè)從控制成本的角度出發(fā)，往往會(huì)人為降低單位時(shí)間內(nèi)的換水量以控制工藝成本，其后果是難于保證長達(dá)半年之久的育苗水質(zhì)始終處于新鮮狀態(tài)，從而影響了魚苗品質(zhì)和雜交育苗成活率。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明旨在提供一種駝背鱸與鞍帶石斑魚的工廠化雜交育苗方法，所要解決的技術(shù)問題是:第一、通過駝背鱸與鞍帶石斑魚雜交，獲得種間雜交品種;第二、實(shí)現(xiàn)培育池的內(nèi)部水質(zhì)循環(huán)和過濾、生化、消毒處理，以降低循環(huán)水系統(tǒng)工藝成本，保障親本培育環(huán)境水質(zhì)。
[0007]本發(fā)明的技術(shù)方案如下:
駝背鱸與鞍帶石斑魚的工廠化雜交育苗方法，其特征在于包括以下步驟:
(1)、親本選擇與親本培育:選擇3齡以上健康駝背鱸作雌性親本，并選擇6齡以上健康鞍帶石斑魚作雄性親本;雌雄親本分別放于不同培育池內(nèi)，駝背鱸養(yǎng)殖水溫保持在20?33°C，鞍帶石斑魚養(yǎng)殖水溫保持在20?29°C ;親本培育過程中，通過調(diào)節(jié)親魚培育水溫和營養(yǎng)強(qiáng)化，實(shí)現(xiàn)對(duì)親魚性腺成熟的調(diào)控；
(2)、精子超低溫冷凍保存與雌性親本催產(chǎn)
通過鏡檢的方式確定雄魚發(fā)育及精子質(zhì)量情況，選擇發(fā)育成熟、成活率達(dá)到95%以上的精子加入冷凍稀釋液中進(jìn)行冷凍保存；
并對(duì)駝背鱸雌魚進(jìn)行鏡檢，挑選腹部明顯膨脹，性腺輪廓明顯，卵巢發(fā)育至卵巢呈青灰色并帶棕黃色，卵粒明顯，放置于固定液中可游離脫落狀態(tài)的雌魚放養(yǎng)在催產(chǎn)培育池內(nèi)，維持水溫25?26°C ;對(duì)駝背鱸雌魚進(jìn)行藥物注射催產(chǎn);對(duì)催產(chǎn)后腹部柔軟輕壓有透明卵流出的駝背鱸雌魚，進(jìn)行人工擠卵，使用玻璃或塑料容器接收；
(3)、人工授精
將鞍帶石斑魚冷凍精液在38?40 °C水浴中快速復(fù)溫解凍，解凍后的精液按照質(zhì)量比1:8?12比例加入到28?29°C海水進(jìn)行稀釋，然后按照精、卵數(shù)量比1:800?1200的比例混合均勻，干法授精，靜置8?15 min后，加入新鮮海水，過濾，洗凈多余精液和黏液，分離出上浮卵，并除去下沉卵;將上浮受精卵分離出來，倒入孵化容器桶中，孵化20?25小時(shí)，收集上浮卵；
(4)、受精卵消毒孵化
等到收集的上浮卵發(fā)育至肌肉效應(yīng)期，用海水沖洗2?3次，用聚維酮碘進(jìn)行消毒；
(5)、仔魚培育:仔魚采用充氣靜水培育，從仔魚孵化第3天開始向池中添加小球藻；育苗前6天內(nèi)不換水;6天后開始換水。
[0008]步驟(I)中調(diào)節(jié)親魚培育水溫的措施為:駝背鱸親魚從第一年的10月份開始培育，培育水溫從25°C逐步降低至20°C再逐步升溫至23°C，升溫和降溫頻率控制在每7?10天升高或降低1°C，至第二年4月份達(dá)到性成熟;鞍帶石斑魚親魚從第一年的10月份開始培育，培育水溫從29°C逐步降低到20°C再逐步升溫至26°C，升溫和降溫頻率控制在每7?10天升高或降低TC，至第二年4月份準(zhǔn)備產(chǎn)卵時(shí)，按照每3天升高TC的頻率，從26°C升高到28?290C，此時(shí)鞍帶石斑魚達(dá)到性成熟。
[0009]其中步驟(2)中冷凍稀釋液的配比是:每升含葡萄糖24g，氯化鈉Sg，碳酸氫鈉
0.08g，二甲基亞砜10mL，胎牛血清10mL，余量為去離子水，定容至I升。
[0010]其中步驟(2)中注射所用催產(chǎn)藥物制備方法是:取500?800IU/kg魚體重的HCG和2?3ug/kg魚體重的LRH-A3，混合后加0.65%的生理鹽5ml/條魚溶解。
[0011]步驟所述的培育池包括設(shè)在培育池中心位置并具有生物凈化池壁的生物凈化池，生物凈化池的池底與培育池基礎(chǔ)底板之間具有培育池底部空間；生物凈化池的中心位置設(shè)有具有圓筒形分離井壁的分離井，分離井壁的下端與生物凈化池的池底相連接;分離井的中心位置設(shè)有具有圓筒形循環(huán)栗井壁的循環(huán)栗井，該循環(huán)栗井壁下端高于分離井壁的下端;循環(huán)栗井中安裝有提升栗;分離井具有環(huán)形的分離井底板，所述分離井底板內(nèi)側(cè)與循環(huán)栗井壁的下端相連，外側(cè)與分離井壁的下端相連;所述培育池還包括設(shè)置在生物凈化池壁外側(cè)的紫外線消毒井，紫外線消毒井與生物凈化池共用部分墻壁，并在該共用墻壁下端開設(shè)有消毒井進(jìn)水口；所述培育池還包括位于培育池基礎(chǔ)底板下方的預(yù)埋出水橫管，該預(yù)埋出水橫管的內(nèi)端連接有出水內(nèi)縱管，外端連接有出水外縱管；出水內(nèi)縱管的上端口位于消毒井中，出水外縱管的出水口位于培育池邊沿部位液面以下；分離井和培育池底部空間之間安裝有分離井排污管;培育池基礎(chǔ)底板中心位置設(shè)有集污坑，集污坑連接有排污管。
[0012]所述培育池還包括穿過生物凈化池的池底并靠近生物凈化池壁的回流及排空管。
[0013]所述的出水內(nèi)縱管的上端口連接有出水水位調(diào)節(jié)管，該出水水位調(diào)節(jié)管由兩節(jié)以上管路首尾套接而成。
[0014]所述培育池還包括內(nèi)端與預(yù)埋出水橫管相連接的冷水管，內(nèi)端與預(yù)埋出水橫管相連接的熱水管，設(shè)置在出水外縱管內(nèi)的溫度傳感器以及設(shè)置在培育池不同位置的若干個(gè)溫度傳感器;所述冷水管和熱水管分別連接冷、熱水源。
[0015]本發(fā)明的積極效果在于:
一、駝背鱸為暖水性品種，鞍帶石斑魚生長速度快、抗逆性強(qiáng)，通過兩者雜交，獲得一個(gè)雜交品種暫定名為“鼠龍斑”，本發(fā)明“鼠龍斑”克服了畸形率高和生長速度慢等問題，并具備優(yōu)勢(shì)性狀。另外，在工廠化循環(huán)水親魚培育方面，通過對(duì)水溫、營養(yǎng)的綜合控制，實(shí)現(xiàn)了高瑋度地區(qū)駝背鱸、鞍帶石斑魚的生殖調(diào)控;通過鞍帶石斑魚精子超低溫冷凍保存，解決了鞍帶石斑魚雄魚與駝背鱸雌魚性成熟時(shí)間不一致的難題，實(shí)現(xiàn)了工廠化雜交育苗;通過受精卵碘消毒方法，對(duì)雜交魚受精卵進(jìn)行消毒處理，降低了細(xì)菌、病毒性疾病從受精卵到苗種的垂直傳播的幾率，使雜交品種仔稚魚成活率大幅度提高。
[0016]第二、本發(fā)明水處理池設(shè)于魚苗用的培育池中部，在魚苗培育池池內(nèi)完成循環(huán)水過濾、生物凈化和紫外線消毒處理，僅在過濾之前的提升過程需要水栗動(dòng)力，其他循環(huán)過程不需要?jiǎng)恿?，從而達(dá)到降低動(dòng)力消耗并提高水處理效率的目的；本發(fā)明通過預(yù)埋出水橫管將消毒處理的水輸送到培育池邊沿部位，盡量遠(yuǎn)離循環(huán)回水。出水內(nèi)縱管連接有出水水位調(diào)節(jié)管，能夠根據(jù)培育池水位不同調(diào)節(jié)出水管進(jìn)水口高度，使該高度能夠滿足低于培育池水位以確保暢通排水的要求，并使該進(jìn)水口高度盡量較高，以確保排出的水經(jīng)過了盡量充分的紫外線消毒處理。
【附圖說明】
[0017]圖1是本發(fā)明親本培育池水處理系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)和工作原理示意圖。
[0018]圖2是本發(fā)明親本培育池水處理系統(tǒng)之紫外線消毒子系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)和工作原理示意圖。
【具體實(shí)施方式】
[0019]
下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明。
[0020]一、親本選擇與親本培育
選擇優(yōu)良親本是實(shí)現(xiàn)雜交育苗技術(shù)的基礎(chǔ)和關(guān)鍵，一般來說，駝背鱸作為雌性親本，要求選擇3齡以上健康、體型正常、無病毒攜帶的雌魚。鞍帶石斑魚作為雄性親本，一般選擇6齡以上，體色靚麗，體型正常，無病毒攜帶的雄魚。
[0021 ]將雌雄親本分別放于不同培育池內(nèi)。駝背鱸養(yǎng)殖水溫保持在20?30°C，鞍帶石斑魚養(yǎng)殖水溫保持在20?29°C。親本投喂餌料為鮐魚、鲅魚的任一種或者兩種的任意比例混合投喂，水溫2 24 0C時(shí)每天投喂I次，水溫20?23 0C時(shí)兩天投喂I次，每次投喂量占魚體體重的3%?4%。
[0022]親本培育期間的溫度控制:通過調(diào)節(jié)親魚培育水溫模擬親魚在自然環(huán)境下的發(fā)育過程，從而控制親魚在4月份達(dá)到完全性成熟。
[0023]具體措施為:駝背鱸親魚從第一年的10月份開始，培育水溫從25°C逐步降低至20°C再逐步升溫至23°C不再升高，升溫(降溫)頻率控制在每7?10天升高或降低1°C，至第二年4月份可達(dá)到性成熟;鞍帶石斑魚親魚從第一年的10月份開始，培育水溫從29°C逐步降低到20°C再逐步升溫至26°C，升溫和降溫頻率控制在每7?10天升高或降低1°C，至第二年4月份準(zhǔn)備產(chǎn)卵時(shí)，按照每3天升高1°C的頻率，從26 °C升高到28?29°C，此時(shí)鞍帶石斑魚可達(dá)性成熟。
[0024]親本培育期間的營養(yǎng)強(qiáng)化:營養(yǎng)強(qiáng)化選擇在親魚培育水溫由最低值開始升溫時(shí)進(jìn)行，一般在第二年I月份，營養(yǎng)強(qiáng)化包括增加魷魚、維生素C、維生素E和裂壺藻。
[0025]二、精子超低溫冷凍保存與雌性親本催產(chǎn)
第二年4月份開始進(jìn)行鞍帶石斑魚精子超低溫冷凍保存。通過鏡檢的方式確定雄魚發(fā)育及精子質(zhì)量情況，選擇發(fā)育成熟、成活率達(dá)到95%以上的精子進(jìn)行超低溫冷凍保存。按照精子與冷凍稀釋液體積比1:1將精子加入到冷凍稀釋液中，一并置于液氮中保存?zhèn)溆谩Ｆ渲欣鋬鱿♂屢旱呐浔仁?以IL溶液為例，需葡萄糖24g，氯化鈉Sg，碳酸氫鈉0.08g，二甲基亞砜(DMSO)lOmL，胎牛血清(FBS)lOmL，用去離子水定容至1L。
[0026]第二年4月份開始對(duì)駝背鱸雌魚進(jìn)行鏡檢，挑選腹部明顯膨脹，性腺輪廓明顯，卵巢發(fā)育至IV期(IV期特征:卵巢呈青灰色稍帶棕黃色，卵粒明顯，放置固定液中可游離脫落)的雌魚放養(yǎng)在尺寸6mX6mX Im的催產(chǎn)培育池內(nèi)，水溫維持25?26°C。對(duì)駝背鱸雌魚進(jìn)行藥物注射催產(chǎn)。注射所用催產(chǎn)劑制備方法:取人絨毛膜促性腺激素(HCG ) 500?800 IU/kg魚體重和促排卵素3號(hào)(LRH-A3)(促排卵素3號(hào)屬于促黃體生成素釋放激素類似物)2?3ug/kg魚體重，混合后0.65%的生理鹽水5ml/條魚溶解，配置成催產(chǎn)劑。將催產(chǎn)劑一次性進(jìn)行魚體注射，注射部位為背部肌肉。注射后效應(yīng)時(shí)間約為44?52小時(shí)。對(duì)催產(chǎn)后腹部柔軟輕壓有透明卵流出的駝背鱸雌魚，進(jìn)行人工擠卵，使用玻璃或塑料容器接收。
[0027]三、人工授精
將鞍帶石斑魚冷凍精液在38?40°C水浴中快速復(fù)溫解凍，解凍后的精液按照1:10比例加入28?29°C海水進(jìn)行稀釋，然后按照精、卵數(shù)量比1:1000的比例混合均勻，干法授精，靜置10 min后，加入新鮮海水，用篩絹過濾，洗凈多余精液和黏液，用2000 ml量筒分離出上浮卵，除去下沉卵。將上浮受精卵分離出來，倒入I m3孵化桶中，水溫25-26°C、鹽度30、微充氣條件下進(jìn)行孵化，孵化20?25小時(shí)左右，收集上浮卵。
[0028]四、受精卵消毒孵化
收集的上浮卵(受精卵)發(fā)育至肌肉效應(yīng)期，此時(shí)對(duì)外界環(huán)境耐受性最強(qiáng)，收集后的上浮卵用海水沖洗2?3次，用50ppm的聚維酮碘進(jìn)行消毒。消毒方式為:每1L消毒液每次消毒不超過500ml受精卵，消毒時(shí)間5?10分鐘，然后布池。將發(fā)育良好的受精卵計(jì)數(shù)、撈入苗種培育池中開始培育，使用尺寸為6 mX6mX I m的方形水泥池。池中受精卵密度為2.5 g/m3，培育水溫在22-26°C之間，鹽度29-31，溶解氧2 5 mg/L。
[0029]五、仔魚培育:仔魚采用微充氣靜水培育，從仔魚孵化第3天開始向池中添加小球藻(Chlorella)。育苗前6d不換水，根據(jù)水色變化每天適量補(bǔ)充小球藻并添加少量經(jīng)過處理的新鮮海水。6d后開始換水，換水量和充氣量逐漸增大。水位達(dá)0.8 m后開始流水培育。仔魚的開口t耳料采用S型圓型臂尾輪蟲(Brach1nus rotundiformis)，投喂2 d后過渡到經(jīng)裂壺藻(Schizochytrium)強(qiáng)化的L型裙皺臂尾輪蟲(Brach1nus plicatilis)，隨著仔魚的生長，交叉投喂鹵蟲(Artemiasp.)無節(jié)幼體、成體及配合飼料。
[0030]如圖1所示，本發(fā)明的親本培育池為具有內(nèi)置處理池的循環(huán)水養(yǎng)殖培育池，其實(shí)施例包括設(shè)在培育池中心位置并具有生物凈化池壁6的生物凈化池8，生物凈化池8的池底與培育池基礎(chǔ)底板I之間具有培育池底部空間15，在該培育池底部空間15中設(shè)置有混凝土支架用于支撐生物凈化池8的池底。生物凈化池壁6的外邊沿與培育池基礎(chǔ)底板I之間設(shè)有防逃網(wǎng)14用于防止種魚進(jìn)入排污系統(tǒng)。
[0031]生物凈化池8的中心位置設(shè)有具有圓筒形的分離井壁9的分離井10，分離井壁9的下端與生物凈化池8的池底相連接。使用時(shí)生物凈化池8內(nèi)水位低于分離井壁9上端。分離井10的中心位置設(shè)有具有圓筒形循環(huán)栗井壁11的循環(huán)栗井12，該循環(huán)栗井壁11下端高于分離井壁9的下端。該循環(huán)栗井12中安裝有提升栗。分離井10具有環(huán)形的分離井底板13，所述分離井底板13內(nèi)側(cè)與循環(huán)栗井壁11的下端相連，外側(cè)與分離井壁9的下端相連。
[0032]本發(fā)明的親本培育池實(shí)施例還包括設(shè)置在生物凈化池壁6外側(cè)的紫外線消毒井16，如圖2所示，紫外線消毒井16具有消毒井壁17，所述紫外線消毒井16與生物凈化池8共用同一池底且共用部分墻壁，并在該共用墻壁下端開設(shè)有消毒井進(jìn)水口 7。本發(fā)明的親本培育池實(shí)施例還包括位于培育池基礎(chǔ)底板I下方的預(yù)埋出水橫管18，該預(yù)埋出水橫管18的內(nèi)端連接有出水內(nèi)縱管19，外端連接有出水外縱管20。出水內(nèi)縱管19的上端口位于消毒井16中。出水外縱管20的出水口位于培育池外邊沿部位液面以下。
[0033]消毒井16內(nèi)設(shè)紫外線消毒模塊，比如紫外線消毒燈。消毒井16的上方設(shè)防雨通風(fēng)罩。通過紫外線消毒解決循環(huán)水養(yǎng)殖回水因重復(fù)利用病害預(yù)防問題，防止有害細(xì)菌和病毒在循環(huán)水中擴(kuò)散而造成交叉感染，用以提高循環(huán)水水質(zhì)。
[0034]由于消毒井16內(nèi)水流方向?yàn)橄逻M(jìn)上出，處于較高位置的水經(jīng)過了更加充分的紫外線消毒處理，因此排水口的位置應(yīng)當(dāng)盡量高，但又需要低于培育池水位線一定距離以確保暢通排水。為了解決這一矛盾，本發(fā)明的出水內(nèi)縱管19的上端口連接有出水水位調(diào)節(jié)管21，該出水水位調(diào)節(jié)管21由兩節(jié)以上管路首尾套接而成，增加或者減少節(jié)數(shù)用以調(diào)整消毒井出水口高度。
[0035]本發(fā)明的親本培育池實(shí)施例還包括穿過生物凈化池8的池底并靠近生物凈化池壁6的回流及排空管5，該回流及排空管5上端低于分離井壁9的上邊沿(使用時(shí)該上端低于生物凈化池8運(yùn)行水位)，下端與培育池底部空間15相通?；亓骷芭趴展?具有三個(gè)作用，第一、通過調(diào)節(jié)回流及排空管5上端與生物凈化池8運(yùn)行水位之間的高差，能夠調(diào)整生物凈化池8中的水向培育池底部空間15中的回流速度，用以平衡生物凈化池8中的總水量;第二、便于將生物凈化池8表面的漂浮雜質(zhì)從回流及排空管5上方排出。第三、需清洗生物凈化池8時(shí)，拔掉該回流及排空管5即可快速排凈。
[0036]仍如圖1，分離井10和培育池底部空間15之間安裝有分離井排污管2。培育池基礎(chǔ)底板I中心位置設(shè)有集污坑3，集污坑3連接有排污管4。
[0037]在提升栗作用下，培育池中部的回水經(jīng)循環(huán)栗井12提升至上端并揚(yáng)水至分離井10中，在分離井10中較大的顆粒雜質(zhì)經(jīng)分離井排污管2進(jìn)入集污坑3與培育池沉積的顆粒雜質(zhì)一并進(jìn)入排污管4排出。分離井10中的水從分離井壁9上端溢流至生物凈化池8中，經(jīng)過生物凈化后的水經(jīng)消毒井進(jìn)水口 7進(jìn)入消毒井16中，經(jīng)過紫外線消毒后依次經(jīng)出水水位調(diào)節(jié)管21、出水內(nèi)縱管19、預(yù)埋出水橫管18和出水外縱管20，最后從出水口排至培育池邊沿部位。
[0038]本發(fā)明親本培育池的水溫調(diào)控子系統(tǒng)包括內(nèi)端與預(yù)埋出水橫管18相連接的冷水管和熱水管，還包括設(shè)置在出水外縱管20內(nèi)的溫度傳感器以及設(shè)置在培育池不同位置的若干個(gè)溫度傳感器。所述冷水管和熱水管分別用于接入冷熱水源。
[0039]設(shè)置在出水外縱管20內(nèi)的溫度傳感器用于監(jiān)測(cè)出水外縱管20的出水溫度，設(shè)置在培育池不同位置的若干個(gè)溫度傳感器用于監(jiān)測(cè)培育池中水溫。所述溫度傳感器以及作為冷熱水源栗入動(dòng)力的水栗電機(jī)分別連接控制器。通過控制器對(duì)本發(fā)明親本培育池的水溫實(shí)施調(diào)控。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.駝背鱸與鞍帶石斑魚的工廠化雜交育苗方法，其特征在于包括以下步驟: (1)、親本選擇與親本培育:選擇3齡以上健康駝背鱸作雌性親本，并選擇6齡以上健康鞍帶石斑魚作雄性親本;雌雄親本分別放于不同培育池內(nèi)，駝背鱸養(yǎng)殖水溫保持在20?33°C，鞍帶石斑魚養(yǎng)殖水溫保持在20?29°C ;親本培育過程中，通過調(diào)節(jié)親魚培育水溫和營養(yǎng)強(qiáng)化，實(shí)現(xiàn)對(duì)親魚性腺成熟的調(diào)控； (2)、精子超低溫冷凍保存與雌性親本催產(chǎn) 通過鏡檢的方式確定雄魚發(fā)育及精子質(zhì)量情況，選擇發(fā)育成熟、成活率達(dá)到95%以上的精子加入冷凍稀釋液中進(jìn)行冷凍保存； 并對(duì)駝背鱸雌魚進(jìn)行鏡檢，挑選腹部明顯膨脹，性腺輪廓明顯，卵巢發(fā)育至卵巢呈青灰色并帶棕黃色，卵粒明顯，放置于固定液中可游離脫落狀態(tài)的雌魚放養(yǎng)在催產(chǎn)培育池內(nèi)，維持水溫25?26°C ;對(duì)駝背鱸雌魚進(jìn)行藥物注射催產(chǎn);對(duì)催產(chǎn)后腹部柔軟輕壓有透明卵流出的駝背鱸雌魚，進(jìn)行人工擠卵，使用玻璃或塑料容器接收； (3)、人工授精 將鞍帶石斑魚冷凍精液在38?40 °C水浴中快速復(fù)溫解凍，解凍后的精液按照質(zhì)量比1:8?12比例加入到28?29°C海水進(jìn)行稀釋，然后按照精、卵數(shù)量比1:800?1200的比例混合均勻，干法授精，靜置8?15 min后，加入新鮮海水，過濾，洗凈多余精液和黏液，分離出上浮卵，并除去下沉卵;將上浮受精卵分離出來，倒入孵化容器桶中，孵化20?25小時(shí)，收集上浮卵； (4)、受精卵消毒孵化 等到收集的上浮卵發(fā)育至肌肉效應(yīng)期，用海水沖洗2?3次，用聚維酮碘進(jìn)行消毒； (5)、仔魚培育:仔魚采用充氣靜水培育，從仔魚孵化第3天開始向池中添加小球藻；育苗前6天內(nèi)不換水;6天后開始換水。2.如權(quán)利要求1所述的駝背鱸與鞍帶石斑魚的工廠化雜交育苗方法，其特征在于:步驟(I)中調(diào)節(jié)親魚培育水溫的措施為:駝背鱸親魚從第一年的10月份開始培育，培育水溫從25°C逐步降低至20°C再逐步升溫至23°C，升溫和降溫頻率控制在每7?10天升高或降低1°C，至第二年4月份達(dá)到性成熟;鞍帶石斑魚親魚從第一年的10月份開始培育，培育水溫從29°C逐步降低到20°C再逐步升溫至26°C，升溫和降溫頻率控制在每7?10天升高或降低1°C，至第二年4月份準(zhǔn)備產(chǎn)卵時(shí)，按照每3天升高10C的頻率，從26°C升高到28?29 V，此時(shí)鞍帶石斑魚達(dá)到性成熟。3.如權(quán)利要求1所述的駝背鱸與鞍帶石斑魚的工廠化雜交育苗方法，其特征在于:其中步驟(2)中冷凍稀釋液的配比是:每升含葡萄糖24g，氯化鈉Sg，碳酸氫鈉0.08g，二甲基亞砜1mL，胎牛血清1mL，余量為去離子水，定容至I升。4.如權(quán)利要求1所述的駝背鱸與鞍帶石斑魚的工廠化雜交育苗方法，其特征在于其中步驟(2)中注射所用催產(chǎn)藥物制備方法是:取500?800IU/kg魚體重的HCG和2?3ug/kg魚體重的LRH-A3，混合后加0.65%的生理鹽5ml/條魚溶解。5.如權(quán)利要求1或2或3或4所述的駝背鱸與鞍帶石斑魚的工廠化雜交育苗方法，其特征在于:步驟(I)所述的培育池包括設(shè)在培育池中心位置并具有生物凈化池壁(6)的生物凈化池(8)，生物凈化池(8)的池底與培育池基礎(chǔ)底板(I)之間具有培育池底部空間(15);生物凈化池(8)的中心位置設(shè)有具有圓筒形分離井壁(9)的分離井(10)，分離井壁(9)的下端與生物凈化池(8)的池底相連接;分離井(10)的中心位置設(shè)有具有圓筒形循環(huán)栗井壁(11)的循環(huán)栗井(12)，該循環(huán)栗井壁(11)下端高于分離井壁(9)的下端;循環(huán)栗井(12)中安裝有提升栗;分離井(10)具有環(huán)形的分離井底板(13)，所述分離井底板(13)內(nèi)側(cè)與循環(huán)栗井壁(11)的下端相連，外側(cè)與分離井壁(9)的下端相連;所述培育池還包括設(shè)置在生物凈化池壁(6)外側(cè)的紫外線消毒井(16)，紫外線消毒井(16)與生物凈化池(8)共用部分墻壁，并在該共用墻壁下端開設(shè)有消毒井進(jìn)水口(7);所述培育池還包括位于培育池基礎(chǔ)底板(I)下方的預(yù)埋出水橫管(18)，該預(yù)埋出水橫管(18)的內(nèi)端連接有出水內(nèi)縱管(19)，外端連接有出水外縱管(20);出水內(nèi)縱管(19)的上端口位于消毒井(16)中，出水外縱管(20)的出水口位于培育池邊沿部位液面以下;分離井(10)和培育池底部空間(15)之間安裝有分離井排污管(2);培育池基礎(chǔ)底板(I)中心位置設(shè)有集污坑(3)，集污坑(3)連接有排污管(4)。6.如權(quán)利要求5所述的駝背鱸與鞍帶石斑魚的工廠化雜交育苗方法，其特征在于:所述培育池還包括穿過生物凈化池(8)的池底并靠近生物凈化池壁(6)的回流及排空管(5)。7.如權(quán)利要求5所述的駝背鱸與鞍帶石斑魚的工廠化雜交育苗方法，其特征在于:所述的出水內(nèi)縱管(19)的上端口連接有出水水位調(diào)節(jié)管(21)，該出水水位調(diào)節(jié)管(21)由兩節(jié)以上管路首尾套接而成。8.如權(quán)利要求5所述的駝背鱸與鞍帶石斑魚的工廠化雜交育苗方法，其特征在于:所述培育池還包括內(nèi)端與預(yù)埋出水橫管(18)相連接的冷水管，內(nèi)端與預(yù)埋出水橫管(18)相連接的熱水管，設(shè)置在出水外縱管(20)內(nèi)的溫度傳感器以及設(shè)置在培育池不同位置的若干個(gè)溫度傳感器;所述冷水管和熱水管分別連接冷、熱水源。
【文檔編號(hào)】A01K63/04GK105850814SQ201610332683
【公開日】2016年8月17日
【申請(qǐng)日】2016年5月19日
【發(fā)明人】馬文輝, 李文升, 龐尊方, 劉江春, 孫禮娟, 邵光彬, 孫芳芳, 林好蔚, 張君華, 姜燕, 王曉梅, 翟介明, 李波
【申請(qǐng)人】萊州明波水產(chǎn)有限公司