一種提高藏紅花素含量的藏紅花培養基的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬于植物組織培養技術領域，特別涉及一種提高藏紅花素含量的藏紅花培 養基。
【背景技術】
[0002] 藏紅花是一種名貴的中草藥，由于其只是柱頭入藥，產量極低，同時又因為其資源 極其有限，但用途廣泛，致使其價格昂貴，一直被譽為"植物黃金"，所以對藏紅花的快速繁 殖研究極其重要。
[0003] 藏紅花的主要活性成分是藏紅花素，但是活體藏紅花植株僅能在柱頭中提煉到少 量藏紅花素，難以滿足市場的需求，為此需要提供一種可以從藏紅花愈傷組織中提取藏紅 花素的技術，然而目前的組織培養技術中愈傷組織中藏紅花素含量極低。
【發明內容】
[0004] 基于現有技術存在上述問題，本發明提供一種提高藏紅花素含量的藏紅花培養 基，其以MS培養基為基礎培養基，并添加有6-BA(6-芐基腺嘌呤）、2，4-D(2，4-二氯苯氧乙 酸）、硝酸鑭和蔗糖，本發明提供是培養基是液體培養基，并添加了稀土元素，利用稀土元素 對植物的調節特性，提高了藏紅花愈傷組織中的藏紅花含量。
[0005] -種提高藏紅花素含量的藏紅花培養基，其以MS培養基為基礎培養基，并添加有 6-BA(6-芐基腺嘌呤）、2，4-D(2，4-二氯苯氧乙酸）、硝酸鑭和蔗糖。
[0006] 6-BA(6-芐基腺嘌呤）的濃度為0.5-211^/1、2,4-0(2,4-二氯苯氧乙酸）的濃度為 0.5-4mg/L、硝酸鑭的濃度為200-500mg/L、瓊脂粉的濃度為8-12g/L、蔗糖的濃度為40-80g/ L〇
[0007] 6-BA(6-芐基腺嘌呤）的濃度為0.75-1.25mg/L、2,4-D(2，4-二氯苯氧乙酸）的濃度 為l-3mg/L、硝酸鑭的濃度為350-450mg/L、瓊脂粉的濃度為9-llg/L、蔗糖的濃度為50-70g/ L〇
[0008] 所述的硝酸鑭還可以是氯化鑭和氧化鑭。
[0009] 所述的快速誘導人參愈傷組織培養基的pH值為5.5-6.5。
[0010] 所述的快速誘導人參愈傷組織培養基的pH值為6.0。
[0011] 本發明的有益效果是:將一般組織培養使用的固體培養基改為液體培養基，液體 環境更適合合成藏紅花素;在培養基中添加了稀土元素鑭，鑭可以調節藏紅花的生理狀態， 提高藏紅花愈傷組織的酶的活性，促進藏紅花素的合成，提高藏紅花素的含量。
【具體實施方式】
[0012] 下面結合具體實施例對本發明作進一步的描述。
[0013] 實施例一:配制提高藏紅花素含量的藏紅花培養基。
[0014]根據表1所示的MS培養基成分和用量以及表2所示的提高藏紅花素含量的藏紅花 培養基成分和用量，配制本發明所述的提高藏紅花素含量的藏紅花培養基。
[0015] 用天平稱取MS培養基中的各成分以及6-BA(6-芐基腺嘌呤）、2,4-D(2,4-二氯苯氧 乙酸）、硝酸鑭和蔗糖，置于三角瓶中，加入適量蒸餾水，攪拌溶解，并用HCL和Κ0Η調節pH值 至6.0,定容至1000mL。將三角瓶封口，置于高壓滅菌鍋中，于121°C滅菌20min，然后置于超 凈工作臺中自然冷卻，備用。
[0016] 將冷卻到50_60°C時將培養基分裝至組織培養瓶中，晾涼，將組織培養瓶封口，備 用。
[0017]表1 MS培養基的成分和用量。
[0018]表2提高藏紅花素含量的藏紅花培養基成分及用量
實施例二:提高藏紅花素含量的藏紅花培養基的測試。
[0019] 按實施例一所述的方法配制提高藏紅花素含量的藏紅花培養基，備用。
[0020] 在超凈工作臺中，從增值培養基中取出生長正常健康、無褐化、無玻璃化的藏紅花 愈傷組織，并將藏紅花愈傷組織用無菌手術刀〇. 5-1厘米的小塊，并接種于配制好的提高藏 紅花素含量的藏紅花培養基中，接種生物量為6g\L，并放于人工氣候箱中進行培養，培養環 境條件是，光照/黑暗時間：14/10小時，培養溫度是23°C。
[0021 ]培養到30天的后取出愈傷組織，并提取愈傷組織中的藏紅花素的含量，達到1.02 g\L，比對照組的愈傷組織含量0.72 g\L提高了0.3 g\L，提高了超過了 30%，使用本發明的 提高藏紅花素含量的藏紅花培養基可以提高藏紅花愈傷組織中的藏紅花素含量。
【主權項】
1. 一種提高藏紅花素含量的藏紅花培養基，其特征在于，其以MS培養基為基礎培養基， 并添加有6-BA(6-芐基腺嘌呤）、2，4-D(2，4-二氯苯氧乙酸）、硝酸鑭和蔗糖。2. 根據權利要求1所述的一種提高藏紅花素含量的藏紅花培養基，其特征在于，6-BA (6-芐基腺嘌呤）的濃度為0.5-21^/1、2,4-0(2,4-二氯苯氧乙酸）的濃度為0.5-411^/1、硝酸 鑭的濃度為200_500mg/L、瓊脂粉的濃度為8-12g/L、蔗糖的濃度為40-80g/L。3. 根據權利要求2所述的一種提高藏紅花素含量的藏紅花培養基，其特征在于，6-BA (6-芐基腺嘌呤）的濃度為0.75-1.251^/1、2,4-0(2,4-二氯苯氧乙酸）的濃度為1-311^/1、硝 酸鑭的濃度為350-450mg/L、瓊脂粉的濃度為9-llg/L、蔗糖的濃度為50-70g/L。4. 根據權利要求1至3其中之一所述的一種提高藏紅花素含量的藏紅花培養基，其特征 在于，所述的硝酸鑭還可以是氯化鑭和氧化鑭。5. 根據權利要求1至3其中之一所述的一種提高藏紅花素含量的藏紅花培養基，其特征 在于，所述的快速誘導人參愈傷組織培養基的pH值為5.5-6.5。6. 根據權利要求1至3其中之一所述的一種提高藏紅花素含量的藏紅花培養基，其特征 在于，所述的快速誘導人參愈傷組織培養基的pH值為6.0。
【專利摘要】本發明提供一種提高藏紅花素含量的藏紅花培養基，屬于植物組織培養技術領域，其以MS培養基為基礎培養基，并添加有6-BA（6-芐基腺嘌呤）、2,4-D（2,4-二氯苯氧乙酸）、硝酸鑭和蔗糖，本發明提供是培養基是液體培養基，并添加了稀土元素，利用稀土元素對植物的調節特性，提高了藏紅花愈傷組織中的藏紅花含量。
【IPC分類】A01H4/00
【公開號】CN105532461
【申請號】CN201610010908
【發明人】何志鏗
【申請人】佛山市金藍領教育科技有限公司
【公開日】2016年5月4日
【申請日】2016年1月9日