一種黃花貍藻的快速繁殖方法
【技術領域】
[0001 ]本發明涉及一種植物繁殖方法，特別是一種黃花貍藻的快速繁殖方法。
【背景技術】
[0002]黃花貍藻(Utricularia aurea Lour.)為貍藻科，一年生草本植物。多生長在水田中或靜水池塘的淺水地方。在大型水體上設置立體綠化或水面綠化的區域種植，可增加水體的景觀多樣性。但其栽培較難，要求水質清潔，無污染。為了防止黃花貍藻野生資源滅絕，保證黃花貍藻資源的可持續利用，需要對黃花貍藻進行種苗繁育技術研究，以保障充足的種苗為園林水體景觀大規模使用。現有技術中未見黃花貍的組織培養技術報到。
【發明內容】
[0003]本發明的目的是提供一種黃花貍藻的快速繁殖方法，能夠有效快速地生產黃花貍藻種苗，實現黃花貍藻種苗的工廠化育苗，以滿足生產上的需要。
[0004]本發明通過以下技術方案達到上述目的:一種黃花貍藻組培苗的快速繁殖方法，包括以下步驟:
[0005](1)外植體的選擇與消毒:取黃花貍藻的枝葉作為外植體，依次用2￥八％洗潔精水溶液浸泡5min、線狀自來水沖洗15-30min、添加了 2_3滴吐溫-20的100毫升0.lv/v%升汞消毒8-10min、無菌水沖洗3-5次，最后用消毒濾紙除去表面水分，得到外植體，其中無菌水為經高溫高壓滅菌的蒸餾水，
[0006](2)獲得無菌試管苗步驟(1)得到的外植體在超凈工作臺上接種到MS+1.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAA培養基中，在培養溫度為23-27°C，光照強度15001ux，光照時間為8-10小時/天的條件下培養30天，后獲得無菌試管苗，其中培養基中添加30g//L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養基的pH值為5.8，
[0007](3)試管苗快速繁殖培養:將步驟(2)中得到的無菌試管苗置于MS繁殖培養基中，在培養溫度為23-27°C，光照強度15001ux，光照時間為8-10小時/天的條件下培養30天得到試管苗，其中MS繁殖培養基中添加1.0-3.0mg/L的芐基腺嘌呤6-BA、0.1-0.5mg/L的吲哚乙酸ΙΑΑ、0.3-1.0mg/L的激動素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養基的pH值為5.8。
[0008](4)煉苗與移栽:步驟(3)獲得的試管苗，在室溫為20_30°C的室內打開瓶蓋，在瓶中加入自來水至容積的2/3，煉苗2-4天，洗凈培養基，移植至水草水簇箱。
[0009]本發明的突出優點在于:
[0010](1)采用組織培養技術繁育黃花貍藻種苗具有繁殖速度快、種苗質量均一，且不受時間、空間、季節限制等突出優點，縮短了種苗繁育周期，提高了種苗質量，實現規模化生產，滿足生產上的需要。
[0011](2)采用本發明所述的培養方法得到的黃花貍藻試管苗繁殖系數達到30-50倍，移植至水草水簇箱成活率達到95-98 %。
【具體實施方式】
[0012]下面結合實施例對本發明的技術方案進一步說明。
[0013]實施例1
[0014]本發明所述黃花貍藻的快速繁殖方法的一個實例，包括以下步驟:
[0015](1)外植體的選擇與消毒:取黃花貍藻的枝葉作為外植體，依次用27八％洗潔精水溶液浸泡5min、線狀自來水沖洗15-30min、添加了 2_3滴吐溫-20的100毫升0.lv/v%升汞消毒8-10min、無菌水沖洗3-5次，最后用消毒濾紙除去表面水分，得到外植體，其中無菌水為經高溫高壓滅菌的蒸餾水，
[0016](2)獲得無菌試管苗步驟(1)得到的外植體在超凈工作臺上接種到MS+1.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAA培養基中，在培養溫度為23-27°C，光照強度15001ux，光照時間為8-10小時/天的條件下培養30天，后獲得無菌試管苗，其中培養基中添加30g//L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養基的pH值為5.8，
[0017](3)試管苗快速繁殖培養:將步驟(2)中得到的無菌試管苗置于MS繁殖培養基中，在培養溫度23-27°C，光照強度15001ux，光照時間為8-10小時/天的條件下培養30天得到試管苗，其繁殖系數達到30倍，其中MS繁殖培養基中添加1.0mg/L的芐基腺嘌呤6-BA、0.1mg/L的吲哚乙酸IAA、0.3mg/L的激動素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養基的pH值為5.8。
[0018](4)煉苗與移栽:步驟(3)獲得的試管苗，在室溫為20_30°C的室內打開瓶蓋，在瓶中加入自來水至容積的2/3，煉苗2-4天，洗凈培養基，移植至水草水簇箱，成活率達到95 %。
[0019]實施例2
[0020]本發明所述黃花貍藻的快速繁殖方法的一個實例，包括以下步驟:
[0021](1)外植體的選擇與消毒:取黃花貍藻的枝葉作為外植體，依次用27八％洗潔精水溶液浸泡5min、線狀自來水沖洗15-30min、添加了 2_3滴吐溫-20的100毫升0 Λν/ν%升汞消毒8-10min、無菌水沖洗3-5次，最后用消毒濾紙除去表面水分，得到外植體，其中無菌水為經高溫高壓滅菌的蒸餾水，
[0022](2)獲得無菌試管苗步驟(1)得到的外植體在超凈工作臺上接種到MS+1.0mg/L6_BA+0.5mg/LNAA培養基中，在培養溫度為23-27°C，光照強度15001ux，光照時間為8-10小時/天的條件下培養30天，后獲得無菌試管苗，其中培養基中添加30g//L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養基的pH值為5.8，
[0023](3)試管苗快速繁殖培養:將步驟(2)中得到的無菌試管苗置于MS繁殖培養基中，在培養溫度為23-27°C，光照強度15001ux，光照時間為8-10小時/天的條件下培養30天得到試管苗，其繁殖系數達到50倍，其中MS繁殖培養基中添加2.0mg/L的芐基腺嘌呤6-BA、
0.3mg/L的吲哚乙酸ΙΑΑ、0.5mg/L的激動素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養基的pH值為
5.8ο
[0024](4)煉苗與移栽:步驟(3)獲得的試管苗，在室溫為20_30°C的室內打開瓶蓋，在瓶中加入自來水至容積的2/3，煉苗2-4天，洗凈培養基，移植至水草水簇箱，成活率達到98 %。
[0025]實施例3
[0026]本發明所述黃花貍藻的快速繁殖方法的一個實例，包括以下步驟:
[0027](1)外植體的選擇與消毒:取黃花貍藻的枝葉作為外植體，依次用2￥八％洗潔精水溶液浸泡5min、線狀自來水沖洗15-30min、添加了 2_3滴吐溫-20的100毫升Ο.lv/v%升汞消毒8-10min、無菌水沖洗3-5次，最后用消毒濾紙除去表面水分，得到外植體，其中無菌水為經高溫高壓滅菌的蒸餾水，
[0028](2)獲得無菌試管苗步驟(1)得到的外植體在超凈工作臺上接種到MS+1.0mg/L6_BA+0.5mg/LNAA培養基中，在培養溫度為23-27°C，光照強度15001ux，光照時間為8-10小時/天的條件下培養30天，后獲得無菌試管苗，其中培養基中添加30g//L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養基的pH值為5.8，
[0029](3)試管苗快速繁殖培養:將步驟(2)中得到的無菌試管苗置于MS繁殖培養基中，在培養溫度23-27°C，光照強度15001ux，光照時間為8-10小時/天的條件下培養30天得到試管苗，其繁殖系數達到43倍，其中MS繁殖培養基中添加2.0mg/L的芐基腺嘌呤6-BA、0.5mg/L的吲哚乙酸ΙΑΑ、1.0mg/L的激動素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養基的pH值為5.8。
[0030](4)煉苗與移栽:步驟(3)獲得的試管苗，在室溫為20_30°C的室內打開瓶蓋，在瓶中加入自來水至容積的2/3，煉苗2-4天，洗凈培養基，移植至水草水簇箱，成活率達到97 %。[0031 ] 實施例4
[0032]本發明所述黃花貍藻的快速繁殖方法的一個實例，包括以下步驟:
[0033](1)外植體的選擇與消毒:取黃花貍藻的枝葉作為外植體，依次用27八％洗潔精水溶液浸泡5min、線狀自來水沖洗15-30min、添加了 2_3滴吐溫-20的100毫升0 Λν/ν%升汞消毒8-10min、無菌水沖洗3-5次，最后用消毒濾紙除去表面水分，得到外植體，其中無菌水為經高溫高壓滅菌的蒸餾水，
[0034](2)獲得無菌試管苗步驟(1)得到的外植體在超凈工作臺上接種到MS+1.0mg/L6_BA+0.5mg/LNAA培養基中，在培養溫度為23-27°C，光照強度15001ux，光照時間為8-10小時/天的條件下培養30天，后獲得無菌試管苗，其中培養基中添加30g//L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養基的pH值為5.8，
[0035](3)試管苗快速繁殖培養:將步驟(2)中得到的無菌試管苗置于MS繁殖培養基中，在培養溫度為23-27°C，光照強度15001ux，光照時間為8-10小時/天的條件下培養30天得到試管苗，其繁殖系數達到39倍，其中MS繁殖培養基中添加3.0mg/L的芐基腺嘌呤6-BA、
0.5mg/L的吲哚乙酸IAA、1.0mg/L的激動素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養基的pH值為
5.8ο
[0036](4)煉苗與移栽:步驟(3)獲得的試管苗，在室溫為20_30°C的室內打開瓶蓋，在瓶中加入自來水至容積的2/3，煉苗2-4天，洗凈培養基，移植至水草水簇箱，成活率達到96.3%。
【主權項】
1.一種黃花貍藻的快速繁殖方法，其特征在于:該方法包括以下步驟: (1)外植體的選擇與消毒:取黃花貍藻的枝葉作為外植體，依次用2v/v%洗潔精水溶液浸泡5min、線狀自來水沖洗15-30min、添加了 2-3滴吐溫-20的100毫升0.1￥八％升汞消毒8-lOmin、無菌水沖洗3-5次，最后用消毒濾紙除去表面水分，得到外植體，其中無菌水為經高溫高壓滅菌的蒸餾水， (2)獲得無菌試管苗步驟(1)得到的外植體在超凈工作臺上接種到MS+1.0mg/L6-BA+.0.5mg/LNAA培養基中，在培養溫度為23-27°C，光照強度15001ux，光照時間為8-10小時/天的條件下培養30天，獲得無菌試管苗，其中培養基中添加30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養基的pH值為5.8， (3)試管苗快速繁殖培養:將步驟(2)中得到的無菌試管苗置于MS繁殖培養基中，在培養溫度為23-27°C，光照強度15001ux，光照時間為8-10小時/天的條件下培養30天得到試管苗，其中MS繁殖培養基中添加1.0-3.011^/1的芐基腺嘌呤6-84、0.1-0.511^/1的吲哚乙酸ΙΑΑ、0.3-1.0mg/L的激動素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養基的pH值為5.8， (4)煉苗與移栽:步驟(3)獲得的試管苗，在室溫為20-30°C的室內打開瓶蓋，在瓶中加入自來水至容積的2/3，煉苗2-4天，洗凈培養基，移植至水草水簇箱。
【專利摘要】一種黃花貍藻的快速繁殖方法，包括如下步驟：(1)取黃花貍藻枝葉為外植體進行消毒；(2)將消毒后的外植體接種到MS+1.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAA培養基上誘導發芽得到無菌試管苗；(3)將所述無菌試管苗分株置于繁殖培養基中進行試管苗快速繁殖培養獲得大量試管苗；(4)將試管苗進行煉苗后移植至水草水簇箱。采用本發明所述的繁殖方法黃花貍藻試管苗繁殖系數達到30-50倍，移植至水草水簇箱成活率達到95-98％，有效解決了黃花貍藻的規模化育苗問題。
【IPC分類】A01H4/00
【公開號】CN105475134
【申請號】CN201510860634
【發明人】李林軒, 韋坤華, 韋范, 繆劍華, 李翠, 韋瑩, 王一諾, 肖東
【申請人】廣西壯族自治區藥用植物園
【公開日】2016年4月13日
【申請日】2015年11月30日