蛇床子素和噻呋酰胺的復配組合物及其應用
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種應用于防治小麥紋枯病的殺菌劑，具體的說，是一種應用于防治 小麥紋枯病的蛇床子素、噻呋酰胺復配殺菌劑。
【背景技術】
[0002] 小麥紋枯病又稱尖眼點病（wheat sharp eyespot)，是一種在小麥上普遍發生、危 害嚴重的土傳真菌病害。1934年在國外首次被報道，我國于1955年在江陰縣發現有麥苗大 面積枯死的現象，但當時稱其為小麥立枯病，并未受到重視。直到1973年，小麥紋枯病才再 次被認識。近幾年來，由于感病品種的大面積種植、水肥施用不合理等因素，導致紋枯病菌 大量積累，該病發生地域迅速擴大，在我國近20個省市都有不同程度的發生，尤其以江蘇、 安徽、山東、河南、河北等省麥區發生普遍且危害日趨嚴重，對小麥的產量和品質造成了直 接的威脅，輕者產量損失5%~10%重者減產20%~40%，甚至造成枯孕穗、枯白穗、顆粒 無收。紋枯病已成為小麥增產的重要制約因素。在可預見的未來，化學殺菌劑仍是防治小 麥病害的主要手段，但化學農藥長期大量不合理地使用導致了防治成本增大、環境污染、抗 藥性發生發展等問題。選用植物源殺菌劑以及合理田間桶混化學農藥是解決當前農藥不科 學合理使用的重要途徑。
[0003] 作為植物源殺菌劑的蛇床子素，化學名稱為7-甲氧基-8-(3' -甲基-2' - 丁 烯基）-1-二氫苯并吡喃酮-2,是一種來源于傘形科一年生草本植物蛇床（Cnidium monnieric(L. )Cuss.)的植物提取物，也存在于歐前胡、圓當歸、毛當歸、栓翅序的根、根莖 中，有多種成熟的提取方法，起初應用在醫學上，后來在農業上可作為殺蟲殺菌劑應用，但 蛇床子素和噻呋酰胺的復配組合物在防治小麥紋枯病方面還未見報道。噻呋酰胺又叫噻 氟菌胺，屬于噻唑酰胺類殺菌劑，具有強內吸傳導性和長持效性。噻呋酰胺對絲核菌屬、柄 銹菌屬、黑粉菌屬、腥黑粉菌屬、伏革菌屬、核腔菌屬等致病真菌均有活性；噻呋酰胺是琥珀 酸酯脫氫酶抑制劑，其作用機理是抑制病菌三羧酸循環中琥珀酸去氫酶，導致菌體死亡。
【發明內容】
[0004] 為了有效防控小麥重要病害，減少化學殺菌劑的田間用量，本發明在已有技術的 基礎上，通過深入研究蛇床子素和噻呋酰胺復配組合物在農業領域中的應用，尤其是針對 小麥紋枯病的防治研究，提供了一種防治小麥紋枯病的蛇床子素、噻呋酰胺單劑及其復配 組合物；該復配組合物是將蛇床子素與噻呋酰胺進行復配，經室內外試驗，篩選出了復配殺 菌劑的最佳配比，增效顯著，有利于實現減少環境污染、控制致病菌抗性發生發展的目的。
[0005] 蛇床子素和噻呋酰胺的復配組合物，特殊之處在于，其有效成分蛇床子素和噻呋 酰胺的重量配比為1 :1~1 :32 ;
[0006] 進一步的，蛇床子素和噻呋酰胺的增效重量配比為1 :8~1 :16 ;
[0007] 更進一步的，蛇床子素和噻呋酰胺的最佳重量比例為1:8，最佳復配比例時增效系 數為2. 04。
[0008] 蛇床子素、噻呋酰胺兩種殺菌劑對紋枯病菌表現出良好的抑制作用，蛇床子素和 噻呋酰胺復配應用防治紋枯病表現出明顯的增效作用。具有以下幾個優勢：
[0009] 1、具有增效作用。
[0010] 室內毒力測定結果表明，蛇床子素、噻呋酰胺對小麥紋枯病菌兩者在1:8至1:16 范圍內呈現增效作用，其中以1:8的增效作用最為顯著，增效系數達2. 04。
[0011] 2、最佳配比田間桶混防效突出，且減少了制劑用量。
[0012] 我院制成9%蛇床子素?噻呋酰胺復配組合物45、54g/ha在田間防治小麥紋枯病 的藥效試驗中表現突出，優于或相當于單劑、對照藥劑的防治效果。同時，大幅減少藥劑有 效成分用量，同直接按照標簽濃度桶混相比，復配組合物45、54g/ha分別減少有效成分用 量 40. 79%、28. 95%。
[0013] 3、高安全性。
[0014] 蛇床子素、噻呋酰胺對人畜毒性低，我院制得的復配組合物低于市場單劑有效成 分的含量，對作物、環境和食用者更為安全。
[0015] 4、降低了致病菌抗藥性產生的風險。
[0016] 如優勢2、3所述，復配組合物蛇床子素和噻呋酰胺的用量明顯低于市銷單劑產 品，且田間使用量明顯減少，這可大幅降低小麥紋枯病致病菌對這兩種殺菌劑的選擇壓力。 此外，蛇床子素、噻呋酰胺作用機理不同，桶混使用更不易使致病菌產生抗藥性。
【具體實施方式】
[0017] 本發明用以下具體實例進行詳細說明，但絕非對本發明的限制。所有配比中百分 比均為重量百分比。
[0018] 實施例1
[0019] 室內毒力測定與復配比例篩選 [0020] 1. 1供試藥劑
[0021] 94. 7%蛇床子素原藥，江蘇省農科院食品質量安全研究所提供。
[0022] 96%噻呋酰胺原藥，山東省招遠三聯遠東化學有限公司產品。
[0023] 1. 2供試菌株
[0024] 試驗革E標為小麥紋枯病（Rhizoctonia cerealis Vander Hoeven)病菌菌株樣本 自田間病根莖上分離獲得，培養純化得到的第一代菌株，4 °C冰箱內保存備用。
[0025]1. 3儀器設備
[0026] 主要有電子天平、超凈工作臺、生物培養箱、培養皿、微量移液器等。
[0027] 1. 4實驗方法
[0028] 米用FA0推薦的菌體生長速率法（Mycelium growth rate test)。
[0029] 1. 4. 1藥劑復配
[0030] 表1蛇床子素和噻呋酰胺復配比例
[0031]
[0032] 表2復配藥劑稀釋濃度梯度
[0033]
[0034] 1.4. 2含藥平板的制備
[0035] 按照1. 4. 1設定的藥劑濃度梯度，將藥劑加入定量溶化的PDA培養基中，制成含藥 平板，以不含藥平板為空白對照，每濃度重復3次。
[0036] 1. 4. 3接菌培養
[0037] 用直徑0. 6 cm打孔器沿培養好的菌落邊緣打取菌盤，用消毒接種針將菌盤反轉移 植到平板上，置于25°C條件下恒溫培養5天。
[0038] 1.4. 4結果調查
[0039] 以直尺交叉測量法測量菌落擴展直徑，與不施藥對照菌盤擴展直徑相比，計算出 藥劑對菌絲生長的抑制率。
[0040]
[0041] 1.5統計分析
[0042] 根據各藥劑濃度對數值及對應的菌絲生長抑制率幾率值作回歸分析，計算各藥劑 毒力回歸方程、相關系數（r)和EC5。。
[0043] 進行藥劑聯合毒力測定時，根據Wadley法計算復配組合物的增效系數（SR)，評價 復配組合物的聯合作用類型。根據增效系數（SR)來評價藥劑復配的增效作用，即SR〈0. 5 為拮抗作用，〇. 5 < SR < 1. 5為相加作用，SR>1. 5為增效作用。增效系數（SR)按式（1)、 (2)計算：
[0044]
:(.1>
[0045]式中：
[0046] Xj----復配組合物EC5。理論值，單位為mg/L ;
[0047] PA復配組合物中A的百分含量，單位為百分率（％ );
[0048]PB復配組合物中B的百分含量，單位為百分率（％ );
[0049] A--A的EC5。值，單位為mg/L ;
[0050]B--B的EC5。值，單位為mg/L。
[0051]
(2)
[0052]式中：
[0053] SR--復配組合物的增效系數；
[0054] Xj----復配組合物EC5。理論值，單位為mg/L ;
[0055] X2--復配組合物EC5。實測值，單位為mg/L。
[0056] 1. 6結果分析
[0057] 室內最佳復配比例實驗結果表明，蛇床子素、噻呋酰胺兩者1: 2、1:4、1:32具有相 加作用，1: 8、1:16具有增效作用，其中1:8的增效作用最為顯著，增效系數為2. 04,為最佳 復配比例。
[0058] 表3蛇床子素和噻呋酰胺抑制小麥紋枯病菌最佳復配比例篩選
[0059]
[0060] 實施例2
[0061] 田間小區試驗
[0062] 根據室內復配比例篩選實驗篩選出蛇床子素：噻呋酰胺=1:8為最佳配比，我們 配制了 9%蛇床子素?噻呋酰胺復配組合物。按照農業部農藥檢定所主編的《農藥田間藥 效試驗準則（二）》第13、121、181部分設計9%蛇床子素?噻呋酰胺復配組合物對小麥紋 枯病的田間藥效試驗。
[0063] 2. 1供試藥劑
[0064] 240克/升噻咲酰胺懸浮劑54g/ha，日本日產化學工業株式會社；
[0065]1%蛇床子素水乳劑22g/ha，成都綠金生物科技有限責任公司。
[0066] 9%蛇床子素?噻咲酰胺36、45、54g/ha，煙臺農科院配制。
[0067]2. 2對照藥劑
[0068]250克/升丙環唑乳油150g/ha，瑞士先正達作物保護有限公司產品。
[0069] 2. 3小區設計
[0070] 試驗共設7個處理，每處理4個重復，共設28個小區，每小區50m 2。各小區隨機排 列。施藥器械采用MATABI SuperGreen 16型背負式噴霧器，噴孔直徑0? 8mm，工作壓力2. 0 巴。噴霧時使葉片正反面均勻著藥，滴水為止。
[0071] 2. 4調查方法
[0072] 0級：無病；
[0073] 1級：葉鞘發病但莖桿不發病；
[0074] 3級：葉鞘發病，并侵入莖，但莖桿病斑環莖不足1/2 ;
[0075] 5級：莖桿病斑環莖超過1/2,但不倒伏或折斷；
[0076] 7級：枯死、倒伏、枯白穗。
[0077] 2. 5藥效計算方法
[0078]
[0080] 2. 6試驗結果
[0081] 9%蛇床子素?噻呋酰胺復配組合物36、45、54g/ha防效分別為72. 26%、75. 80%、 81. 44%，顯著高于1%蛇床子素水乳劑22g/ha的防效，9%蛇床子素?噻呋酰胺復配組合物 54g/ha防效與240g/L噻咲酰胺懸浮劑54g/ha無顯著差異；對照藥劑250克/升丙環唑乳 油150g/ha的防效與9%蛇床子素?噻咲酰胺復配組合物45g/ha的防效相當，但顯著低于 54g/ha和240g/L噻咲酰胺懸浮劑54g/ha的防效。
[0082] 表4 9%蛇床子素?噻呋酰胺復配組合物防治小麥紋枯病田間藥效
[0083]
[0084] 實施例3
[0085] 安全性試驗
[0086] 復配組合物中蛇床子素和噻呋酰胺含量小于市售產品的含量，因此其對人畜的毒 性與作物的安全性是符合要求的。復配殺菌劑經認定機構毒性試驗結果表明屬于微毒類農 藥：
[0087]大鼠急性經 口毒性LD50.〔f>5000mg/kg,早>5000mg/kg;
[0088] 大鼠急性經皮毒性LD5(H'>20000mg/kg，早 >20000mg/kg。
【主權項】
1. 蛇床子素和噻呋酰胺的復配組合物，特征在于 其有效成分蛇床子素和噻呋酰胺的重量配比為1 :1~1 :32。2. 如權利要求1所述蛇床子素和噻呋酰胺的復配組合物，特征在于 蛇床子素和噻呋酰胺的增效重量配比為1 :8~1 :16。3. 如權利要求2所述蛇床子素和噻呋酰胺的復配組合物，特征在于 蛇床子素和噻呋酰胺的最佳重量比例為1: 8。4. 權利要求1-3任一權利要求所述蛇床子素和噻呋酰胺的復配組合物應用于防治防 治小麥紋枯病的用途。5. 如權利要求4所述的用途，其特征在于，制成9%蛇床子素?噻呋酰胺復配組合物防 治小麥紋枯病。
【專利摘要】本發明涉及一種與環境兼容性好，高效、低毒、低殘留、由蛇床子素和噻呋酰胺組成的復配殺菌劑，尤其用于小麥紋枯病的應用研究。復配組合物中蛇床子素和噻呋酰胺兩種有效成分的相加作用比例為1：1～1:32，它在應用防治小麥紋枯病方面表現突出。
【IPC分類】A01N43/16, A01N47/02, A01P3/00
【公開號】CN105052959
【申請號】CN201510464215
【發明人】張偉, 王英姿, 王鵬, 劉保友, 劉潔
【申請人】山東省煙臺市農業科學研究院
【公開日】2015年11月18日
【申請日】2015年7月31日