一種茶樹內調控促生劑及在大田茶樹新芽催生中的應用方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及的是植物新生芽內調控促生劑，特別是一種應用內生草螺菌促進大田茶樹新芽側芽生長的方法。
【背景技術】
[0002]茶樹是我國重要的經濟作物，在我國南方各省都有栽培。茶葉采摘后經過一定的工藝可制作成綠茶、白茶、黃茶、紅茶和黑茶，而茶枝可制作莖茶。除作為飲品外，茶葉有效成分還可用于醫藥、食品、化工等。茶樹是以采收幼嫩芽葉為主要對象的多年生經濟作物，每年可多次從茶樹上采摘新生的綠色營養嫩梢。根據采摘的季節不同，通常有春茶、夏茶和秋茶之分。多次采摘必然要耗費茶樹大量的營養。如何維持樹體的繁茂和繼續擴大再生長，滿足茶樹健壯生長，使之優質、穩產高產是茶園田間管理面臨的一個重要任務。為了提高茶葉產量，除了日常管理外，主要通過合理施肥以滿足茶樹營養需要。此外，使用赤霉素、三十烷醇、復硝酚鈉、6-芐氨基嘌呤、蕓苔素內酯、4-碘苯氧基乙酸(增產靈)等植物激素類物質促進茶芽生長以提高茶葉產量。人工合成的植物激素雖具有成本低、促生作用快的優點，但它們功效單一、作用不特久、使用濃度要求嚴格且具有土壤殘留風險、不滿足綠色生態環保要求的缺點。另外，人工合成的植物激素大多剌激植物細胞的分裂和伸長。如果茶樹營養未跟上，反復多次使用人工合成的植物激素有可能影響新生茶葉細胞內營養成分的積累。
[0003]茶樹內生草螺菌是一種茶樹共生專一性強的內生細菌。它通過傷口定殖于茶樹體內，調控并促進茶樹生長。文獻“兩株茶樹內生草螺菌的微生物學特性”(王婷等，微生物學報2014第4期，2014.04.04，P424-432)詳細敘述了茶樹內生草螺菌的篩選和微生物學特性，但未涉及茶樹內生草螺菌的應用。
【發明內容】
[0004]本發明的目的是提出一種茶樹內調控促生劑的制備與應用方法。用該促生劑處理切割后的茶樹枝條，能有效促進茶樹枝條側芽生長，提高茶葉采摘量。
[0005]本發明是這樣實現的。其步驟為
[0006]1、茶樹內調控促生劑的制備
[0007]取-800C保存的茶樹內生草螺菌菌種，接種5mL營養肉湯培養基(1g胰蛋白胨，3g牛肉粉，5g NaCl，10yg/mL壯觀霉素，5yg/mL氨芐青霉素，加水至1000ml)，每分鐘150轉搖動，37°C培養過夜。將活化后的菌液以1:100比例接入新鮮的LB液體培養基(1g胰蛋白胨，5g酵母提取物，1g NaCl，10yg/mL壯觀霉素，5yg/mL氨芐青霉素，加水至1000ml，pH7.2-7.4)中放大培養，培養條件為:搖床轉速每分鐘200轉，溫度為28_37°C。待細菌培養6-8小時、OD6。。值為1.0-1.2時收集全部的細菌培養液，加入I %甘油后存放于4°C備用或直接使用。
[0008]2、工作液的配制
[0009]使用時，將放大培養好的茶樹內生草螺菌菌液按0.5-2:1比例用清水稀釋即為工作液。
[0010]上述稀釋后的細菌培養液即為本發明茶樹內調控促生劑。
[0011]所述促生劑的應用:
[0012]1、茶樹枝條處理:按常規茶樹修剪辦法，用電動切割機將大田栽培的茶樹頂部修剪切割，使茶樹枝條上端產生切口。
[0013]2、用噴霧器將茶樹生長內調控促進劑噴灑在茶樹頂部。其用量為50-100ml/平方米。
[0014]3、噴灑完成后按常規田間管理方法進行管理。
[0015]本發明的作用過程是這樣的，茶樹內生草螺菌是茶科植物的內生菌，僅通過創口進入茶樹體內，細胞外共生。大田茶樹剪切后，茶樹內生草螺菌在噴灑時可通過茶枝上端切口進入茶樹枝條并定殖其中。定殖后，茶樹內生草螺菌與茶樹共生并提供細菌因子如IAA、NH/等活性物質促進茶樹新芽或側芽的生長。茶樹內生草螺菌是天然的茶樹內生菌，不侵染其它農作物，無病害作用，通常僅在較老的枝條或葉片中定殖，新生的嫩枝嫩葉中無細菌，符合綠色環保和食品安全要求。
[0016]本發明具有獨特的優點:
[0017]1、充分利用了茶樹內生草螺菌的生物學特點。茶樹內生草螺菌是山茶屬植物專一性強的內生細菌，與茶樹互惠共生無公害。它能有效地產生促進植物生長發育的iaa、nh4+、嗜鐵載體等活性物質。IAA能剌激茶樹細胞生長，MV能為茶樹提供氮源，嗜鐵載體能為茶樹吸附鐵離子、提高茶樹抗病能力，與IAA、NH4+—起協同促進茶樹生長發育。使用茶樹內生草螺菌噴灑茶樹枝條可實現內生細菌代謝產物的高效利用，成本低廉、操作方便、安全環保。
[0018]2、克服了植物激素功能單一、作用不持久、不能有效促進新芽后續生長發育的缺點。茶樹內生草螺菌進入茶樹枝條后定殖在茶枝內，可持續發揮作用，不需多次噴酒。它不僅促進新生芽的快速生長，并有望改善茶樹的品質。
【附圖說明】
[0019]圖1為本發明實施例2-4中新生茶枝的平均長度，
[0020]圖2為本發明實施例2-4中100株新生茶枝的重量，
[0021]其中對照組為清水處理。
【具體實施方式】
[0022]下面結合實施例對本發明進一步說明。
[0023]實施例1:
[0024]取-800C保存的茶樹內生草螺菌菌種，接種5mL營養肉湯培養基(1g胰蛋白胨，3g牛肉粉，5g NaCl，10yg/mL壯觀霉素，5yg/mL氨芐青霉素，加水至1000ml)，每分鐘150轉搖動，37°C培養過夜。將活化后的菌液以1:100比例接入新鮮的LB液體培養基(1g胰蛋白胨，5g酵母提取物，1g NaCl，10yg/mL壯觀霉素，5yg/mL氨芐青霉素，加水至1000ml，pH7.2-7.4)中放大培養，培養條件為:搖床轉速每分鐘200轉，溫度為28_37°C。待細菌培養6-8小時、OD6。。值為1.0-1.2時收集全部的細菌培養液，加入I %甘油后，存放于4°C備用或直接使用。使用時，將放大培養好的茶樹內生草螺菌菌液按0.5-2:1比例用清水稀釋即為促生劑。
[0025]實施例2:將1:2稀釋的3000mL茶樹內調控促生劑液噴灑50平方米切割后鄂茶I號茶樹，60天后的茶樹新芽長勢良好、葉片深綠，新生芽平均長度比對照組增加3.6cm, 100新枝重量比對照組增加14.6克。(見圖1和2)。
[0026]實施例3:將1:1稀釋的3000mL茶樹內調控促生劑液噴灑50平方米切割后鄂茶I號茶樹，60天后的茶樹新芽長勢良好、葉片深綠，新生芽平均長度比對照組增加5.1cm, 100新枝重量比對照組增加19.7克。(見圖1和2)。
[0027]實施例4:將2:1稀釋的3000mL茶樹內調控促生劑液噴灑50平方米切割后鄂茶I號茶樹，60天后的茶樹新芽長勢良好、葉片深綠，新生芽平均長度比對照組增加5cm，100新枝重量比對照組增加19克。(見圖1和2)。
【主權項】
1.一種茶樹內調控促生劑的制備，其特征在于其步驟為: I)、茶樹內生草螺菌的培養及促生劑的制備 取-80°C保存的茶樹內生草螺菌菌種，接種5mL營養肉湯培養基，每分鐘150轉搖動，37°C培養過夜，將活化后的菌液以1:100比例接入新鮮的LB液體培養基中放大培養，培養條件為:搖床轉速每分鐘200轉，溫度為28-37°C，待細菌培養6-8小時、OD6。。值為1.0-1.2時收集全部的細菌培養液，加入I %甘油后，存放于4 °C備用或直接使用，該茶樹內生草螺菌菌液即為茶樹內調控促生劑； 上述細菌培養液經稀釋后即為本發明茶樹內調控促生劑； 所述營養肉湯培養基為1g胰蛋白胨，3g牛肉粉，5g NaCl，加水至1000ml，10 μ g/mL壯觀霉素，5 μ g/mL氨芐青霉素； 所述LB液體培養基為1g胰蛋白胨，5g酵母提取物，1g NaCl，加水至1000ml，10 μ g/mL壯觀霉素，5 μ g/mL氨芐青霉素。2.一種茶樹生長內調控促進劑的應用方法，其特征在于其步驟為: 1)、將茶樹內調控促生劑按0.5-2:1比例用清水稀釋； 2)、茶樹枝條處理:按常規茶樹修剪辦法，用電動切割機將大田栽培的茶樹頂部修剪切害J，使茶樹枝條上端產生切口 ； 3)、用噴霧器將清水稀釋的茶樹內調控促生劑液噴灑在茶樹頂部。其用量為50-100ml/平方米； 4)、噴灑完成后按常規田間管理方法進行管理。
【專利摘要】本發明提出了一種茶樹內調控促生劑的制備與應用方法。它利用茶樹內生草螺菌的生物學特點，用其發酵制備茶樹內生草螺菌培養液，并按一定配比稀釋后噴灑修剪過的茶樹枝條。促生劑內的細菌進入茶樹枝條內共生并分泌代謝活性物質，促進茶樹新生芽的快速生長。處理后的茶樹新生芽生長旺盛，葉片深綠，新生芽的長度和重量明顯增加。本發明的技術方法成本低、操作簡單、綠色安全、功效多、作用持久。
【IPC分類】A01N63/02, A01G7/06, A01P21/00
【公開號】CN105028485
【申請號】CN201510411184
【發明人】王行國, 占桂婷, 李亞東, 程偉, 丁坤明, 饒輝福
【申請人】湖北大學
【公開日】2015年11月11日
【申請日】2015年7月14日