一種南酸棗的組織培養方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及植物無性繁殖領域，具體為一種南酸棗的組織培養方法。
【背景技術】
[0002]南酸棗是我國南方優良速生用材樹種，其木材結構略粗，心材寬，淡紅褐色，邊材狹，白色至淺紅褐色，花紋美觀，刨面光滑。材質柔韌，收縮率小，可加工成工藝品。果實甜酸，可生食、釀酒和加工酸棗糕；果核可做活性炭原料；樹葉可做綠肥；樹皮還可作為鞣料和栲膠的原料。分布于浙江、福建、湖北、湖南、廣東、廣西、云南、貴州等處。南酸棗果實營養豐富，含糖量多，并含有鈣、蛋白質、脂肪鐵、磷、鈣及維生素等，尤其是維生素C和P每100克鮮果分別高達1200毫克和2000毫克，比山楂高12.4倍，比獼猴桃高2倍，比蘋果高幾十倍。
[0003]由于南酸棗的經濟價值高，現在有大量的地區開始發展南酸棗的種植，使得南酸棗的樹苗供應緊張。南酸棗為雌雄異株，這就使得自然種植繁殖時，雌雄樹木的數量難以控制，造成結果的南酸棗比例偏低，不利于南酸棗作為果樹來種植；因此發展現代科技育苗技術運用在南酸棗育苗上大有可為。現代育苗技術中，組織培養運用是很好的選擇，組織培養是在無菌的條件下將活器官、組織或細胞放置在適宜的培養基內，并放在適宜的環境中，進行培養而重新形成的細胞、組織或個體。還可以控制該技術已廣泛應用于農業生產、醫藥開發等研究。
【發明內容】
[0004]本發明的目的是提供一種南酸棗的組織培養方法。
[0005]本發明的目的是通過以下技術方案來實現的:
[0006]本發明的一種南酸棗的組織培養方法，包括以下步驟:
[0007](I)取3月份的南酸棗腋芽，標記樹木的性別，外表面消毒，剝外層芽孢，取基部和內皮，放入已滅菌的裝有MS培養基的廣口培養瓶內，黑暗培養5天，棄去感染的腋芽，余下為消毒腋芽；
[0008](2)將南酸棗果消毒腋芽放入誘導培養基中培養，培養條件:溫度10-12°C、光照1800LX、8h/d ;培養 6 周；
[0009]所述誘導培養基為MS培養基加入1.5mg/L的6_BA、0.03mg/L的TDZ、0.3mg/L的IBA、1%的蔗糖、2.0g/L的瓊脂，調整PH值6.0，培養基121°C滅菌15min ;
[0010](3)將步驟(2)中誘導培養后的腋芽轉入繼代培養基中培養，培養條件:溫度15-20°C、光照 2000LX、8h/d ;培養 4 周；
[0011]所述繼代培養基為MS培養基加入1.0mg/L的6_BA、0.01mg/L的TDZ、0.4mg/L的IBA,0.02%。的活性炭、0.01 %。的Vc、2 %的蔗糖、2.5g/L的瓊脂，調整PH值6.0，培養基121°C 滅菌 15min ；
[0012](4)將步驟(3)中繼代培養基中培養的腋芽轉入生根培養基中培養，培養條件??溫度 15-20°C、光照 2500LX、10h/d ;培養 4 周；
[0013]所述生根培養基為1/2MS培養基加入1.0mg/L的6_BA、0.0lmg/L的TDZ、0.6mg/L的IBA,0.5%。的活性炭、0.01%。的Vc、3%的蔗糖、2.5g/L的瓊脂，調整PH值6.0，培養基121°C 滅菌 15min ；
[0014]優選的，步驟(I)中的南酸棗腋芽外表面消毒是先用無菌水沖洗20min，再分別用75%的乙醇和0.1 %的氯化汞浸泡1min。
[0015]本發明的南酸棗桑的組織培養方法的優點:
[0016]1.本發明的南酸棗的組織培養方法，可以通過記錄采集母本的性別，來定向控制培育南酸棗苗木的性別。
[0017]2.本發明的南酸棗的組織培養方法，不受季節的限制，可以最大程度的保留原植株的生物學特性。繁殖速度快，生根率在98%以上。
[0018]3.本發明的南酸棗的組織培養方法，在繼代培養基和生根培養基中添加0.5%。的活性炭、0.01%。的Vc可以很好防止在培養的過程中發生褐化。
【具體實施方式】
[0019]以下結合具體實施例對本發明作進一步說明:
[0020]實施例
[0021]配制各步驟的培養基:
[0022]誘導培養基:量取MS培養基，按比例加入L 5mg/L的6-BA、0.03mg/L的TDZ、
0.3mg/L的IBA、1%的蔗糖、2.0g/L的瓊脂，調整PH值6.0，培養基121°C滅菌15min ;
[0023]繼代培養基:量取MS培養基，按比例加入1.0mg/L的6_BA、0.01mg/L的TDZ、
0.4mg/L的ΙΒΑ、0.02%。的活性炭、0.01%。的Vc、2%的蔗糖、2.5g/L的瓊脂，調整PH值6.0，培養基121。。滅菌15min ；
[0024]生根培養基:量取1/2MS培養基，按比例加入1.0mg/L的6_BA、0.01mg/L的TDZ、
0.6mg/L的ΙΒΑ、0.5%。的活性炭、0.01%。的Vc、3%的蔗糖、2.5g/L的瓊脂，調整PH值6.0，培養基121°C滅菌15min ；
[0025]實驗操作:
[0026](I)取3月份的南酸棗腋芽，標記樹木的性別，外表面消毒，剝外層芽孢，取基部和內皮，放入已滅菌的裝有MS培養基的廣口培養瓶內，黑暗培養5天，棄去感染的腋芽，余下為消毒腋芽；
[0027](2)將南酸棗果消毒腋芽放入誘導培養基中培養，培養條件:溫度10-12°C、光照1800LX、8h/d ;培養 6 周；
[0028](3)將步驟(2)中誘導培養后的腋芽轉入繼代培養基中培養，培養條件:溫度15-20°C、光照 2000LX、8h/d ;培養 4 周；
[0029](4)將步驟(3)中繼代培養基中培養的腋芽轉入生根培養基中培養，培養條件:溫度 15-20°C、光照 2500LX、10h/d ;培養 4 周。
【主權項】
1.一種南酸棗的組織培養方法，其特征在于:包括以下步驟: (1)取3月份的南酸棗腋芽，標記樹木的性別，外表面消毒，剝外層芽孢，取基部和內皮，放入已滅菌的裝有MS培養基的廣口培養瓶內，黑暗培養5天，棄去感染的腋芽，余下為消毒腋芽； (2)將南酸棗果消毒腋芽放入誘導培養基中培養，培養條件:溫度10-12°C、光照1800LX、8h/d ;培養 6 周； 所述誘導培養基為MS培養基加入1.5mg/L的6-BA、0.03mg/L的TDZ、0.3mg/L的IBA、I %的蔗糖、2.0g/L的瓊脂，調整PH值6.0，培養基121°C滅菌15min ; (3)將步驟(2)中誘導培養后的腋芽轉入繼代培養基中培養，培養條件:溫度15-20°C、光照2000LX、8h/d ;培養4周； 所述繼代培養基為MS培養基加入1.0mg/L的6-BA、0.01mg/L的TDZ、0.4mg/L的IBA、0.02%。的活性炭、0.01%。的Vc、2%的蔗糖、2.5g/L的瓊脂，調整PH值6.0，培養基121。。滅菌 15min ； (4)將步驟(3)中繼代培養基中培養的腋芽轉入生根培養基中培養，培養條件:溫度15-20°C、光照 2500LX、10h/d ;培養 4 周； 所述生根培養基為1/2MS培養基加入1.0mg/L的6_BA、0.01mg/L的TDZ、0.6mg/L的IBA,0.5%。的活性炭、0.01%。的Vc、3%的蔗糖、2.5g/L的瓊脂，調整PH值6.0，培養基121。。滅菌15min02.根據權利要求1所述的南酸棗的組織培養方法，其特征在于:所述步驟(I)中的南酸棗腋芽外表面消毒是先用無菌水沖洗20min，再分別用75%的乙醇和0.1 %的氯化汞浸泡 1min0
【專利摘要】本發明公開了一種南酸棗的組織培養方法，包括：取南酸棗腋芽，外表面消毒，MS培養基培養，篩選消毒腋芽；將消毒腋芽放入誘導培養基中培養，培養條件：溫度10-12℃、光照1800LX、8h/d；培養6周；轉入繼代培養基中培養，繼續增殖，培養4周；轉入生根培養基中培養，生根培養，培養4周；該組織培養方法可以通過記錄采集母本的性別，來定向控制培育南酸棗苗木的性別，不受季節的限制，最大程度的保留原植株的生物學特性，繁殖速度快，生根率在98％以上，可以很好防止在培養的過程中發生褐化。
【IPC分類】A01H4/00
【公開號】CN104996300
【申請號】CN201510456557
【發明人】孟祥松, 王雨艨
【申請人】合肥一諾生物科技有限公司
【公開日】2015年10月28日
【申請日】2015年7月27日