新型植物病害抗生劑及其制備方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬于應用生物發酵工程技術和生化工程技術的現代中藥制造技術領域，特 別涉及以中藥材為原料的新型植物病害抗生劑及其制備方法。
【背景技術】
[0002] 新型植物病害抗生劑具有安全、高效、快速的特點，還具有能同時抗殺多種引起植 物病害的真菌、細菌和病毒等致病微生物的功能。可廣泛用于抗殺植物組織培養，細胞培 養和大棚栽培經濟價值高的中藥材和反季果蔬的植物病害。它優于目前在組織培養，細胞 培養和大棚中使用的抗菌農藥與制劑。且殺菌功效也優于目前廣泛使用的用于植物組織培 養，細胞培養及美國PPM抗殺劑產品。
[0003] 新型植物病害抗生劑具有以下的優勢：①用量小；②對植物外植體、愈傷組織和 細胞的損傷小；③無殘留。
【發明內容】
[0004] 本發明的目的是提供一種新型植物病害抗生劑及制備方法。以求用該抗生劑替代 市場上現有的用于植物抗菌素，來抗殺引起植物病害的真菌、細菌和病毒等致病微生物，并 對植物細胞工程培養中的外植體和細胞以及大棚中的作物幼苗和外植體均無危害作用。
[0005] 本發明的具體工藝制備步驟是這樣的：
[0006] 步驟一，先將清洗好的主原料三七、龍膽草、銀柴胡分別放入蒸煮器里浸泡、煮沸， 之后將三種所得藥液經過濾、滅菌后按1 : 4 : 2重量比例混合均勻制成培養液，然后在培 養液中按特定"容積/重量"配比加入（NH4)2HPCV KH2P04、1^047!120、恥(：1、？650 47!120、蔗糖 和葡萄糖；再將培養液進行接種培養發酵，從而產生能殺滅致病微生物的核心抗生液，再對 該抗生液進行滅菌處理獲得主原料提取液一"生物發酵抗生液"；
[0007] 生物發酵抗生液的發酵菌種為："米曲霉Aspergillus oryzae"。
[0008] 在該步驟所述的接種培養發酵操作中，每1000ml培養液加入（NH4) 2HPO4O. 5g~ lg，KH2PO4O. 3g ~0· 8g，MgSO40.0 3g ~0· 08g，NaClO. 5g ~I. 5g，FeSO40.0 2g ~0· 05g，蔗糖 2g~6g和葡萄糖(λ 5g~L 5g ;培養溫度30±1°C，培養時間7~14天。
[0009] 步驟二，將清洗好的輔原料苦參、大黃、升麻、蒲公英，分別放入蒸煮器里浸泡、煮 沸，之后過濾、滅菌處理獲得四種輔料提取液。
[0010] 步驟三，將步驟一和步驟二所獲得的生物發酵抗生液、苦參、大黃、升麻、蒲公英提 取液按3:2:2:I:1的重量配比混合均勻。
[0011] 由上述制備方法制成的"新型植物病害抗生劑"，是以中藥材為原料，應用生物發 酵工程技術及生化工程技術制備的一種多功效植物病害抗生劑，能同時有效抗殺引起植物 病害的真菌、細菌和病毒等致病微生物，且對植物細胞工程培養中的外植體和細胞以及大 棚中的作物幼苗和外植體的生長均無危害作用，安全可靠。而且無論在生產及使用過程中， 均無污染物產生。是目前在組織培養和細胞培養中廣泛使用的同類藥物制劑的理想替代產 品。
[0012] 本發明具有效果好，無毒副作用的特點。能安全、高效、快速、廣泛地殺滅由致病微 生物引起的植物、中藥材、反季果蔬的植物病害，是國家社會種植業急需的新型植物病害抗 生劑產品，市場前景非常廣闊。
【附圖說明】
[0013] 圖1為本發明實施例的工藝流程圖
【具體實施方式】
[0014] 下面結合附圖對本發明的實施例進行說明：
[0015] 參考附圖1，在本發明實施例中，首先將主原料三七、龍膽草、銀柴胡分別洗滌、浸 泡24小時后，放入蒸煮器里按10 %的原材料加入90 %的純凈水煮沸，之后將三種所得藥 液經過濾、滅菌后按1 : 4 : 2重量比例混合均勻制成培養液，然后在每1000 ml培養液中 加入（NH4)2HPO 4O. 8g，KH2PO4O. 5g，MgSO40.0 5g，NaCl lg，FeSO40.0 3g，蔗糖 3g 和葡萄糖 lg。 分裝在5瓶500ml三角瓶中，每瓶200ml。高壓滅菌，冷卻后，再接種"米曲霉Aspergillus oryzae"并培養發酵，培養溫度30±1°C，培養時間12天。從而產生能殺滅致病微生物的核 心抗生液，再對該抗生液進行滅菌處理獲得主原料提取液一"生物發酵抗生液"；
[0016] 然后，將輔原料苦參、大黃、升麻、蒲公英分別洗滌、浸泡24小時，放入蒸煮器里浸 泡、煮沸，之后過濾、滅菌處理獲得四種輔料提取液。最后，再將所獲得的生物發酵抗生液、 苦參、大黃、升麻、蒲公英提取液按3 : 2 : 2 : I : 1的重量配比混合均勻，滅菌后獲得新 型植物病害抗生劑。
[0017] 本發明的實施例是應用生物發酵工程技術及生化工程技術汲取三七、龍膽草、銀 柴胡、苦參、大黃、升麻、蒲公英等中藥原料中的有效成分，所配制成的這種多功效新型植物 病害抗生劑，能同時有效抗殺引起植物病害的真菌、細菌和病毒等致病微生物，但對植物細 胞工程培養中的外植體和細胞以及大棚中的作物幼苗和外植體均無危害作用。對由致病微 生物引起的植物、中藥材、反季果蔬的植物病害，能安全、高效、快速、廣泛地予以殺滅，是當 前種植業急需的新抗生劑產品，也是目前在組織培養和細胞培養中廣泛使用的同類藥物制 劑的理想替代產品。
[0018] 本發明的實施例已經用于植物組培和細胞培養，如豆科植物、蘭科植物、木蘭科植 物和樺木科類植物等的植物病害處理。用于三七，鐵皮石斛，反季黃瓜，西紅柿，彩椒等反季 果蔬及名貴中藥材等。
[0019] 以下是三個具體應用案例：
[0020] 1.種子消毒
[0021] 植物種子消毒采用雙因素處理，濃度梯度為1%，2%，3%，時間采用分別消毒 3min，5min，8min，12min，20min尋找最優消毒濃度及時間。該藥現配現用，需用無菌水配，每 次種子消毒后都要用無菌水浸泡洗滌三次，不要使抗生劑殘留。種子消毒標準既要徹底，又 不影響其發芽率，只有看種子萌發后是否染菌，才能辨別。
[0022] 具體設計表格如下：
[0023]
【主權項】
1. 新型植物病害抗生劑的制備方法，其特征在于該方法包括以下步驟： 步驟一，先將清洗好的主原料三七、龍膽草、銀柴胡分別放入蒸煮器里浸泡、煮沸，之后 將三種所得藥液經過濾、滅菌后按規定的重量比例混合均勻制成培養液，然后在培養液中 按特定"容積/重量"配比加入（NH4)2HP04、KH2P04、MgS04、NaCl、FeS04、蔗糖和葡萄糖；并將 培養液進行接種培養發酵，從而產生能殺滅致病微生物的核心抗菌液，再對該抗菌液進行 滅菌處理獲得主原料提取液一"生物發酵抗生液"； 步驟二，將清洗好的輔原料苦參、大黃、升麻、蒲公英，分別放入蒸煮器里浸泡、煮沸，之 后過濾、滅菌處理獲得四種輔料提取液； 步驟三，將步驟一和步驟二所獲得的主、輔原料提取液按重量配比混合均勻。
2. 根據權利要求1所述的新型植物病害抗生劑制備方法，其特征在于：步驟一所述制 成培養液的三七、龍膽草、銀柴胡三種提取液按重量混合比例為三七1份、龍膽草4份、銀柴 胡2份。
3. 根據權利要求1所述的新型植物病害抗生劑制備方法，其特征在于：在步驟一接種 培養發酵操作中，每1000 ml培養液加入（NH4)2HPO4 0. 5g~lg，KH2PO4 0. 3g~0. 8g，MgSO4 0? 03g~0? 08g，NaCl0? 5g~I. 5g，FeSO4 0? 02g~0? 05g，鹿糖 2g~6g和葡萄糖 0? 5g~ I. 5g;培養溫度30±I°C，培養時間7~14天。
4. 根據權利要求1所述制備方法制成的新型植物病害抗生劑，其特征在于，該抗生劑 由下列原料按重量配比混合制成：生物發酵抗生液3份、苦參提取液2份、大黃提取液2份、 升麻提取液1份、蒲公英提取液1份。
5. 根據權利要求4所述的新型植物病害抗生劑，其特征在于：生物發酵抗生液的發酵 菌種為："米曲霉Aspergillusoryzae"。
【專利摘要】新型植物病害抗生劑及其制備方法，是應用生物發酵工程技術及生化工程技術汲取三七、龍膽草、銀柴胡、苦參、大黃、升麻、蒲公英等中藥原料中的有效成分，并按特定工藝和配方配制成的一種新型多功效植物病害抗生劑。該抗生劑能同時有效抗殺引起植物病害的真菌、細菌和病毒等致病微生物，但對植物組織培養、細胞工程培養中的外植體和細胞以及大棚中的作物幼苗和外植體的生長均無危害作用。而且無論在生產還是使用過程中，均無污染物產生。是目前在組織培養和細胞培養中廣泛使用的同類藥物制劑的理想替代產品。本發明具有效果好，無毒副作用的特點。能安全、高效、快速、廣泛地殺滅由致病微生物引起的植物、中藥材、反季果蔬的植物病害，是國家社會種植業急需的新型植物病害抗生劑產品，市場前景非常廣闊。
【IPC分類】A01P1-00, A01P3-00, A01N65-32
【公開號】CN104782675
【申請號】CN201510116696
【發明人】周應揆, 周汝敏, 周礞, 周諾
【申請人】云南明侍達生物科技有限責任公司
【公開日】2015年7月22日
【申請日】2015年3月18日