一種蘋果砧木m9的組培快速育苗方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種蘋果砧木M9的組培快速育苗方法。
【背景技術】
[0002]蘋果是落葉喬木，葉子是橢圓形，有鋸齒，花白色帶有紅暈。果實圓形，味道甜或略酸，是常見水果，具有豐富營養成分，有食療、輔助治療功能，是世界四大水果之一。蘋果原產于歐洲、中亞、西亞和土耳其一帶，于十九世紀傳入中國。中國是世界最大的蘋果生產國，在東北、華北、華東、西北和四川、云南等地均有栽培。蘋果富含豐富的維生素營養，是世界四大水果之冠。
傳統的蘋果苗通常采用插插、嫁接、分株、壓條等繁殖，這些方法都可能攜帶一種甚至多種病毒或類病毒，對苗木的生產及產品質量都會產生不良影。采用組織培養技術可以快速繁殖作物新品種，加快新品種的推廣速度，同時植物組織培養培育的組培苗，遺傳基因高度一致，生產穩定，苗木品質性能好，能為產業化生產提供優質的苗木。目前，蘋果組培工廠化育苗的技術問題還沒完全解決，采用MS培養基蘋果組培苗繼代增殖培養時，常出現組培苗生長勢弱、增殖系數低、節間伸長生長慢等問題。
【發明內容】
[0003]本發明的目的是提供一種蘋果砧木M9的組培快速育苗方法，解決組培階段種蘋果節間伸長生長慢、增殖系數低的問題。
[0004]本發明解決其技術問題所采用的技術方案是:
一種蘋果砧木M9的組培快速育苗方法，其特征在于，包括以下步驟:
(1)獲取無菌材料:
于春季剪取蘋果新萌發的小芽，用65-75%的乙醇浸泡10-25s清洗材料后，在純凈水中浸泡10-12分鐘后于超凈工作臺上，再用吸水紙吸小芽體干表面水分；
(2)蘋果的初代培養:
取小芽基部，切成0.5-lcm長的小段，接種到小芽誘導培養上，所述的小芽誘導培養基的成分為:MN+2.6mg/L 6-BA+0.45 mg/L 2，4_D +0.15 mg/L NAA+ 6g/L 瓊脂，小芽接種于小芽誘導培養基15-20天后，進行繼代增殖培養；
(3)蘋果的增殖培養:
將帶有愈傷組織的芽接種于pH值為5.5-6.3的不定芽增殖培養基上進行增殖培養，所述的增殖培養基的成分為硝酸鉀0.36mg/L+磷酸二氫鉀0.13mg/L+硫酸鎂0.18mg/L+碘化鉀0.25mg/L硫酸鋅0.21mg/L+鉬酸鈉0.14mg/L+硫酸亞鐵0.55mg/L+鹽酸[!比卩多醇0.25mg/L+煙酸 0.15mg/L+吲哚乙酸 0.25mg/L +6-BA1.0-3.0mg/L + 瓊脂 4_6g/L，其中，先進行暗處理10天，再給予每日光照15-20h，增殖培養的培養溫度為22-25°C ;
(4)生根壯苗培養:
在不定芽增殖培養基中誘導出叢生芽后，將叢生芽分成小叢或單芽并接種于pH值為5.3-6.1的生根壯苗培養基中，所述的生根壯苗培養基的成分為0.22mg/LIBA+NAA0.55-1.5mg/L+IBA2.0-6.0mg/L+ 蔗糖 23g/L+ 瓊脂 5_6g/L，進行生根和壯苗培養;
(5)馴化移栽:
當根長為l_3cm時，進行馴化移栽，將培養瓶移至大棚內煉苗7-12天，洗去培養基，將根部浸泡5.5%高錳酸鉀溶液進行消毒，移栽入穴盤中，10天后除去薄膜，給予全光照，進行肥水管理。
[0005]有益效果:本發明由于采用在M9培養基的基礎上，通過調整大量元素的種類和濃度以及優化激素調控瓊脂濃度等，為蘋果組培苗繼代增殖提供了均衡合理的營養需求，生根系數得到提高，有效的促進了節間伸長。
【具體實施方式】
[0006]實施例:
一種蘋果砧木M9的組培快速育苗方法，其特征在于，包括以下步驟:
(1)獲取無菌材料:
在春季剪取蘋果新萌發的小芽，用75%的乙醇浸泡20-30s清洗材料后，在純凈水中浸泡15-20分鐘后放于超凈工作臺上，再用吸水紙吸小芽體干表面水分；
(2)蘋果的初代培養:
取小芽基部，切成Icm長的小段，接種至小芽誘導培養上，所述的小芽誘導培養基的成分為:MN+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2，4_D +0.2 mg/L NM+ 30 g/L 白糖+ 6g/L 瓊脂粉，小芽接種于小芽誘導培養基19天后，進行繼代增殖培養；
(3)蘋果的增殖培養:
將帶有愈傷組織的芽接種于pH值為5.8-6.2的不定芽增殖培養基上進行增殖培養，所述的增殖培養基的成分為0.3mg/L+磷酸二氫鉀0.lmg/L+硫酸鎂0.2mg/L+碘化鉀0.2mg/L硫酸鋅0.3mg/L+鉬酸鈉0.lmg/L+硫酸亞鐵0.5mg/L+鹽酸卩比卩多醇0.2mg/L+煙酸0.lmg/L+吲噪乙酸 0.2mg/L +6-BA1.0-3.0mg/L+ 鹿糖 30g/L+ 瓊脂 6g/L，其中，先進行暗處理I周，再給予每日光照16h，增殖培養的培養溫度為24-26°C ;
(4)生根壯苗培養:
在不定芽增殖培養基中誘導出叢生芽后，將叢生芽分成小叢或單芽并接種于PH值為5.8-6.2的生根壯苗培養基中，所述的生根壯苗培養基的成分為0.2mg/LIBA+NAA0.5-1.0mg/L+IBA2.0-6.0mg/L+ 蔗糖 30g/L+ 瓊脂 6g/L，進行生根和壯苗培養；
(5)馴化移栽:
當根長為2-4cm時，進行馴化移栽，將培養瓶移至大棚內煉苗6-10天，洗去培養基，將根部浸泡5%高錳酸鉀溶液進行消毒，移栽入穴盤中，I周后除去薄膜，給予全光照，進行肥水管理。
[0007]由于采用在M9培養基的基礎上，通過調整大量元素的種類和濃度與優化激素調控瓊脂濃度等，為蘋果組培苗繼代增殖提供了均衡合理的營養需求，保證了其快速、高效、健壯生長，生根系數高，有效的促進了節間伸長，提高了增殖系數。
[0008]以上的實施例僅僅是對本發明的優選實施方式進行描述，并非對本發明的范圍進行限定，在不脫離本發明設計精神的前提下，本領域普通工程技術人員對本發明的技術方案做出的各種變形和改進，均應落入本發明的權利要求書確定的保護范圍內。
[0009]本發明未涉及部分均與現有技術相同或可采用現有技術加以實現。
【主權項】
1.一種蘋果砧木M9的組培快速育苗方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)獲取無菌材料: 選擇在春季剪取蘋果新萌發的小芽，用65-75%的乙醇浸泡10-25s清洗材料后，在純凈水中浸泡10-12分鐘后于超凈工作臺上，再用吸水紙吸小芽體干表面水分； (2)蘋果的初代培養: 取小芽基部，切成0.5-lcm長的小段，接種到小芽誘導培養上，所述的小芽誘導培養基的成分為:MN+2.6mg/L 6-BA+0.45 mg/L 2，4_D +0.15 mg/L NAA+ 6g/L 瓊脂，小芽接種于小芽誘導培養基15-20天后，進行繼代增殖培養； (3)蘋果的增殖培養: 將帶有愈傷組織的芽接種于pH值為5.5-6.3的不定芽增殖培養基上進行增殖培養，所述的增殖培養基的成分為硝酸鉀0.36mg/L+磷酸二氫鉀0.13mg/L+硫酸鎂0.18mg/L+碘化鉀0.25mg/L硫酸鋅0.21mg/L+鉬酸鈉0.14mg/L+硫酸亞鐵0.55mg/L+鹽酸[!比卩多醇.0.25mg/L+煙酸 0.15mg/L+吲哚乙酸 0.25mg/L +6-BA1.0-3.0mg/L + 瓊脂 4_6g/L，其中，先進行暗處理10天，再給予每日光照15-20h，增殖培養的培養溫度為22-25°C ; (4)生根壯苗培養: 在不定芽增殖培養基中誘導出叢生芽后，將叢生芽分成小叢或單芽并接種于PH值為5.3-6.1的生根壯苗培養基中，所述的生根壯苗培養基的成分為0.22mg/LIBA+NAA0.55-1.5mg/L+IBA2.0-6.0mg/L+ 蔗糖 23g/L+ 瓊脂 5_6g/L，進行生根和壯苗培養; (5)馴化移栽: 當根長為l_3cm時，進行馴化移栽，將培養瓶移至大棚內煉苗7-12天，洗去培養基，將根部浸泡5.5%高錳酸鉀溶液進行消毒，移栽入穴盤中，10天后除去薄膜，給予全光照，進行肥水管理。
【專利摘要】本發明公開了一種蘋果砧木M9的組培快速育苗方法，其特征在于，包括以下步驟：(1)獲取無菌材料、(2)蘋果的初代培養、(3)蘋果的增殖培養、(4)生根壯苗培養、(5)馴化移栽。有益效果：本發明由于采用在M9培養基的基礎上，通過調整大量元素的種類和濃度以及優化激素調控瓊脂濃度等，為蘋果組培苗繼代增殖提供了均衡合理的營養需求，生根系數得到提高，有效的促進了節間伸長。
【IPC分類】A01H4-00
【公開號】CN104737920
【申請號】CN201510200028
【發明人】汪錫文
【申請人】蕪湖東源新農村開發股份有限公司
【公開日】2015年7月1日
【申請日】2015年4月26日