一種離體牙齒保存液的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種用于離體組織的保存液，尤其涉及一種離體牙齒保存液。
【背景技術】
[0002] 由于各種原因導致的牙體缺損和牙齒缺失已成為危害口腔乃至人體健康的主要 疾病。目前主要是借助于各種牙科材料充填來應對牙齒缺損疾病，雖然在一定程度上能阻 止病變的繼續發展，但不能解決根本問題。對于牙齒缺失盡管解決途徑很多，但最有效和最 根本的辦法還是牙齒生物性再生。
[0003] 隨著組織再生醫學的快速發展，為牙體缺損和牙齒缺失的有效治療帶來了希望。 目前已有許多研宄利用牙源性上皮和牙源性間充質的相互作用再生出牙齒組織。常用的牙 源性間充質包括牙乳頭細胞和牙髓細胞。由于牙乳頭細胞在臨床難以獲得，因此，目前用于 牙體及牙齒再生的種子細胞首選是牙髓來源的細胞，其中最重要的是牙髓干細胞。
[0004] 2000年首次發現了牙髓干細胞，Gronthos等發現在離體的乳牙和智齒中都存在 牙髓干細胞。這是一類具有高增殖能力、高度自我更新能力、多項分化能力的細胞。已有研 宄利用該細胞成功地構建牙髓、牙本質以及牙齒組織。
[0005] 成功從離體的牙齒中提取出足夠量符合標準的牙髓干細胞，首先遇到的問題就是 離體牙齒保存的問題。口腔環境較其他組織環境不同，口腔內的細菌數量很多，種類相當 繁雜，離體牙齒保存不當極易發生染菌，且牙齒內細胞量較少，離體牙齒保存不當也極易發 生牙髓干細胞提取失敗的情況。
【發明內容】
[0006] 本發明提供了一種離體牙齒保存液，實驗表明這種保存液可以有效的保存離體牙 齒，保持細胞活性且避免污染的發生。
[0007] 本發明提供的一種離體牙齒保存液，其特征在于，每IL保存液中有以下重量配比 成分組成：
[0008] 青霉素 0. 3-0. 6g 鏈霉素 0. 5-lg 甲硝唑 0.02-0.04g 兩性霉素 B 0.015-0. 025g 羥甲基纖維素 5-10g， 胰島素 50-100ug MEM 余量
[0009] 本發明所述離體牙齒保存液所含成分中，青霉素可以有效的抑制及殺滅革蘭氏 陽性菌；鏈霉素可以有效的抑制及殺滅革蘭氏陰性菌；甲硝唑可以有效的抑制及殺滅厭氧 菌；兩性霉素 B可以有效的抑制及殺滅真菌；羥甲基纖維素為惰性物質，能夠降低細胞的代 謝活動，降低不良因素對細胞活性的影響，保持細胞活性；胰島素能顯著提高細胞利用葡萄 糖的效率，維持細胞的營養供應。常用于細胞培養的MEM作為保存液的基礎成分，MEM中的 磷酸鹽及碳酸鹽緩沖體系可以有效的保持細胞環境的穩定，且MEM中富含細胞代謝必需的 無機鹽離子，氨基酸，糖分，維生素等重要成分，可以有效的保持細胞的活性。
[0010]另外本發明所述離體牙齒保存液中可以加入普朗尼克F68和葡聚糖硫酸酯，來增 加保存液粘稠度，可以減少離體牙齒在運輸過程中因震動或搖晃引起的液體對組織和細胞 的損傷。
【具體實施方式】
[0011] 為了使本發明的目的、技術方案及優點更加清楚明白，以下結合實施例，對本發明 進行進一步詳細說明。
[0012] 實施例1 :
[0013] 配制IL離體牙齒保存液，在無菌條件下，取0. 5L的MEM溶液，加入青霉素 0. 5g、鏈 霉素0. 8g、甲硝唑0. 03g、兩性霉素 B 0. 02g、羥甲基纖維素8g、胰島素80ug，攪拌溶解，加入 MEM至IL定容，攪拌均勻，將制得的溶液無菌分裝至已滅菌的采集瓶內，每瓶25ml。
[0014] 實施例2 :
[0015] 配制IL離體牙齒保存液，在無菌條件下，取0. 5L的MEM溶液，加入青霉素 0. 5g、鏈 霉素0. 8g、甲硝唑0. 03g、兩性霉素 B 0. 02g、普朗尼克F6840g、葡聚糖硫酸酯7g、羥甲基纖 維素8g、胰島素80ug、攪拌溶解，加入MEM至IL定容，攪拌均勾，將制得的溶液無菌分裝至 己滅菌的采集瓶內，每瓶25ml。
[0016] 使用效果實例：
[0017] 將20離體健康牙齒分別放于保存液中，2-8度保存120小時后取出，無菌操作下提 取牙髓干細胞，實驗結果發現20顆牙齒皆可以成功提取出牙髓干細胞。
[0018] 以上所述僅為本發明的較佳實施例而已，并不用以限制本發明，凡在本發明的精 神和原則之內所作的任何修改、等同替換和改進等，均應包含在本發明的保護范圍之內。
【主權項】
1. 一種離體牙齒保存液，其特征在于，每IL保存液中有以下重量配比成分組成：
2. 根據權利要求1所述的牙齒保存液，其特征在于，所述保存液還可以加入普朗尼克 F68 30-50g和葡聚糖硫酸酯5-10g。
【專利摘要】本發明提供了一種離體牙齒保存液，用于儲存牙齒離體后保證牙齒細胞的活性，其具體組成為，每1L保存液中各組分的含量如下：青霉素0.3-0.6g、鏈霉素0.5-1g、甲硝唑0.02-0.04g、兩性霉素B0.015-0.025g、羥甲基纖維素5-10g、胰島素50-100ug、余量為MEM。該保存液可以提供牙齒離體后所需營養物質和低菌環境，有效保持細胞活性，用于離體牙齒的長期保存。
【IPC分類】A01N1-02
【公開號】CN104705289
【申請號】CN201510095451
【發明人】董成友, 張路軍, 王穎
【申請人】安徽新生命干細胞科技有限公司
【公開日】2015年6月17日
【申請日】2015年3月1日