一種基于led光源的花燭組織培養(yǎng)方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種基于LED光源的花燭組織培養(yǎng)方法，屬于植物組織培養(yǎng)技術領 域。
【背景技術】
[0002] 花燭又名花燭，為天南星科花燭屬多年生常綠草本植物?；T花色艷麗，花莖挺 拔，其葉型翠綠美觀，是世界著名的切花和盆栽花卉之一。花燭的繁殖方式主要有扦插、分 株、人工種子和組織培養(yǎng)等。但由于分株繁殖難以擴大生產，播種繁殖需經人工授粉才能獲 得種子，故組織培養(yǎng)是目前花燭種苗生產的主要途徑和有效方法。雖然，組織培養(yǎng)的應用 大大降低了花燭種苗生產成本，但在花燭的組織培養(yǎng)及快速繁殖過程中仍存在繁殖系數偏 低、培養(yǎng)周期偏長等突出問題。
[0003] 在植物的組織培養(yǎng)過程中，光照是十分重要的環(huán)境因子。不同波長的光質對再生 體系建立的影響不同。一些學者研究了光質對草莓、菊花、番木瓜、馬鈴薯愈傷組織分化的 影響，證實了光質對組培植物的生物學效應。本研究采用LED精確調制光譜能量分布，研究 光質對花燭愈傷組織分化、試管苗和移栽苗生長的影響，得出了相關結果。
【發(fā)明內容】
[0004] 本發(fā)明的目的在于在花燭愈傷組織不定芽分化至移栽馴化期間采用LED光源的 光質處理，以縮短花燭組織培養(yǎng)繁殖時間，獲得高質量的花燭組培苗。
[0005] 為了達到上述目的，本發(fā)明是通過以下技術方案來實現的： 一種基于LED光源的花燭組織培養(yǎng)方法，包括以下步驟： (1)外植體的選擇和消毒：選擇完全展開的花燭幼嫩葉片(保留中脈)，先置75%乙醇中 30s，無菌水洗5次，再置于5%次氯酸鈉中滅菌15min，無菌水洗5次，用無菌吸水紙吸干水 分； (2) 愈傷組織的誘導：取滅菌的葉片，切割成lcm2方塊，接種于愈傷組織誘導培養(yǎng)基中， 每個培養(yǎng)皿接種4個葉片外植體，封口膜封口，置于黑暗培養(yǎng)； (3) 愈傷組織不定芽分化：將葉片誘導生成的愈傷組織接種于培養(yǎng)皿中，每瓶接種愈傷 組織0. 3g左右。然后將接種后的培養(yǎng)皿置于LED紅/藍（1:1)光下處理； (4) 不定芽生根壯苗：將誘導出的不定芽接種至不定芽增殖培養(yǎng)基中置于日光燈下進 行復壯培養(yǎng)，然后將進行過復壯培養(yǎng)的花燭接種至生根壯苗培養(yǎng)基中，每瓶4株，置于LED 光源紅/藍（1:1)光下培養(yǎng)； (5)馴化移栽：將生根的花燭苗移栽到水苔基質中，附加營養(yǎng)液為1/2 MS。在熒光燈培 養(yǎng)箱內預培養(yǎng)3天后，置于LED光源紅/藍（7:1)光下培養(yǎng)。
[0006] 本發(fā)明提出的花燭組織培養(yǎng)技術，利用LED光源在花燭愈傷不定芽分化、生根壯 苗和馴化移栽階段采用不同光質LED光源照射，操作簡單，形成的愈傷組織不定芽分化率 高、移栽的花燭苗環(huán)境適應能力強、成活率高。
【具體實施方式】
[0007]以下結合具體實施例對本發(fā)明作具體的介紹，所用方法如無特別說明均為常規(guī)方 法。
[0008]-種基于LED光源的花燭組織培養(yǎng)方法： (1)外植體的選擇和消毒：選擇完全展開的花燭幼嫩葉片(保留中脈)，先置75%乙醇中 30s，無菌水洗5次，再置于5%次氯酸鈉中滅菌15min，無菌水洗5次，用無菌吸水紙吸干水 分； (2) 愈傷組織的誘導：取滅菌的葉片，切割成1 cm2方塊，接種于愈傷組織誘導培養(yǎng)基 中，每個培養(yǎng)皿接種4個葉片外植體，Parafilm封口，置于黑暗培養(yǎng)； (3) 愈傷組織不定芽分化：將葉片誘導生成的愈傷組織接種于培養(yǎng)皿中，每瓶接種 愈傷組織〇.3g左右，然后將接種后的培養(yǎng)皿置于熒光燈（F)、紅光（R)、藍光（B)、紅/藍 (1:1)下培養(yǎng)28天，記錄愈傷組織不定芽分化率（％)=(分化出不定芽的愈傷數/接種愈傷 數）X 100%，結果如表1 ; 表1光質對花燭愈傷組織不定芽分化率的影響
【主權項】
1. 一種基于LED光源的花燭組織培養(yǎng)方法，該方法步驟如下： (1) 外植體的選擇和消毒：選擇完全展開的花燭幼嫩葉片(保留中脈)，先置75%乙醇中 30s，無菌水洗5次，再置于5%次氯酸鈉中滅菌15min，無菌水洗5次，用無菌吸水紙吸干水 分； (2) 愈傷組織的誘導：取滅菌的葉片，切割成1 cm2方塊，接種于愈傷組織誘導培養(yǎng)基 中，每個培養(yǎng)皿接種4個葉片外植體，Parafilm封口，置于黑暗培養(yǎng)； (3) 愈傷組織不定芽分化：將葉片誘導生成的愈傷組織接種于培養(yǎng)皿中，每瓶接種愈傷 組織0. 3g左右，然后將接種后的培養(yǎng)皿置于LED紅/藍（1:1)光下處理； (4) 不定芽生根壯苗：將誘導出的不定芽接種至不定芽增殖培養(yǎng)基中置于日光燈下進 行復壯培養(yǎng)，然后將進行過復壯培養(yǎng)的花燭接種至生根壯苗培養(yǎng)基中，每瓶4株，置于LED 光源紅/藍（1:1)光下培養(yǎng)； (5) 馴化移栽：將生根的花燭苗移栽到水苔基質中，附加營養(yǎng)液為1/2 MS，在熒光燈培 養(yǎng)箱內預培養(yǎng)3天后，置于LED光源紅/藍（7:1)光下培養(yǎng)。
2. 根據權利要求1所述方法，其特征在于：愈傷組織誘導培養(yǎng)基為MS (1/4 NH4N03) + 2, 4-D 0? lmg ? I71 + TDZ 0? 4 mg ? I71;不定芽分化培養(yǎng)基為 1/2MS + BA 0? 2mg ?廠1 + KT 0? 5mg ? L_S不定芽增殖培養(yǎng)基為1/2 MS + BAO. 2 mg ? L-1 + KT 0? 5 mg ? L_S生根壯苗培 養(yǎng)基為 1/2 MS + BA 0? 2 mg ? I71 + IBA 0? 2 mg ? I71 + KT 0? 5 mg ? L'
3. 根據權利要求1所述方法，其特征在于：所述LED光源紅藍比為光強比；藍光峰值波 長為460nm，波長半寬為5nm ;紅光峰值波長為658nm，波長半寬為5nm。
4. 根據權利要求1所述方法，其特征在于：花燭培養(yǎng)環(huán)境光照強度為50 ii mol ?nT2 左右，光照時間12 h^cf1，相對濕度為（75±5)%，溫度為（25 ±2) °C。
【專利摘要】花燭為天南星科花燭屬多年生常綠草本植物，在全球熱帶花卉中，花燭僅次于熱帶蘭花而名列第二。本發(fā)明涉及一種基于LED光源的花燭愈傷組織不定芽分化方法，屬于植物組織培養(yǎng)技術領域。該方法在花燭愈傷組織不定芽分化、生根壯苗和馴化移栽期間采用不同光質的LED光源處理，以期縮短花燭組培快繁時間，獲得高質量的花燭苗。
【IPC分類】A01H4-00
【公開號】CN104521749
【申請?zhí)枴緾N201410612910
【發(fā)明人】崔瑾, 章銳
【申請人】南京七色光農業(yè)科技有限公司
【公開日】2015年4月22日
【申請日】2014年11月5日