專利名稱:一種植物用殺蟲菌的生產方法
技術領域:
本發明涉及一種植物用殺蟲菌的生產方法。
使用高效、無毒、無公害、無污染的殺蟲劑以消除植物害蟲,是人們長期以來的愿望,由美國俄亥俄州立大學Dean,D.H教授提供的蘇云金芽孢桿菌以色列變種(Bacillus thuringiensis var.israelensis)即為具有這種性能的植物用殺蟲菌,(見生物工程學報3(3)230-232,1987)。該菌種自引進以來,國內已有廠家批量生產,但所得產品,有的是液體狀態,其包裝、運輸、貯存都比較困難,有的雖為顆粒狀態,質量還不夠穩定,不能滿足要求。
本發明的目的是要提供一種蘇云金芽孢桿菌以色列變種的生產方法,使用這種方法批量培養的殺蟲菌,其成品中活孢子數高,質量穩定,成本低,有效期長,便于包裝、運輸、貯存和使用。
本發明的目的是這樣實現的將由死亡的鱗翅目蟲體上取得的臟液,接種于空白的斜面上,在31±1℃溫度下,經過48小時,蘇云金芽孢桿菌以色列變種(以下簡稱殺蟲菌),生成豐滿的菌落,再經過培養、繁殖,制成種子液后、發酵、吸附、過濾,再用真空轉鼓烘干機烘干,粉碎,包裝制出成品。
本發明方法有以下優點1.用本法生產的殺蟲菌質量穩定可靠因采用真空轉鼓烘干機,烘烤菌體時間短,菌種不會死亡,因而活孢子數達到100億/克以上,增強了產品的殺蟲力。
2.產品攜帶方便,容易保存因產品為干燥的灰白色粉末,故便于包裝和攜帶;因產品水份控制在5%以內,又無營養源,使芽孢進入穩定地休眠狀態,使保存時間可達2年。
3.產品成本低產品只為化學農藥價格的20~50%,社會效益好。
本發明各步工序,由以下實施例說明1.選育菌種從死亡的鱗翅目蟲體上取出臟液,接種于無菌的斜面培養基上,在31±1℃下經48小時,生成豐滿的殺蟲菌落。
2.制備種子液將殺蟲菌落接種到裝有60毫升培養基的500毫升瓶中,搖瓶在轉速為150轉/分的搖床上轉動,經48~50小時,在31±1℃下,生成一級種子液。
3.大量增育種子液將由搖瓶制得的種子液,按0.1%重量比接種入已裝有培養基的種子罐中,在罐內溫度31±1℃,氣壓0.04MPa,空氣流量為1∶0.8V/V/分條件下,經18~24小時,罐內懸浮液基本澄清,大部分懸浮菌體運動緩慢,無雜菌,菌體濃度達1億/毫升以上,即為二級種子液。
4.大量發酵生產將二級種子液按5%重量比通過管道接種于裝有培養基的發酵罐內,在罐內溫度為31±1℃,氣壓0.04MPa,空氣流量為1∶1V/V/分條件下,經24~30小時,使罐內菌體95%以上已形成孢子,菌體濃度達到1億個/毫升。
5.吸附過濾將發酵液放入吸附池內,加入適量CaCO3吸附孢子,30分鐘后,用真空轉鼓抽濾機在0.2MPa壓力下,使發酵液通過7號濾布抽濾,制得濾餅。
6.烘干將濾餅放入真空轉鼓烘干機中升溫達60℃,烘干4小時,制得含水量小于5%,菌體濃度達100億/克以上的濾餅。
7.粉碎和包裝將烘干后的濾餅,經高速粉碎機粉碎,使其粒徑在120目以上,然后包裝出廠。
權利要求
1.一種植物用殺蟲菌的生產方法,其特征在于由下列各道工序所構成1)選育菌種從死亡的鱗翅目蟲體上取出臟液,接種于無菌的斜面培養基上,在31±1℃下經48小時,生成豐滿的殺蟲菌落。2)制備種子液將殺蟲菌落接種到裝有60毫升培養基的500毫升瓶中,搖瓶在轉速為150轉/分的搖床上轉動,經48~50小時,在31±1℃下,生成一級種子液。3)大量增育種子液將由搖瓶制得的種子液,按0.1%重量比接種入已裝有培養基的種子罐中,在罐內溫度31±1℃,氣壓0.04MPa,空氣流量為10.8V/V/分條件下,經18~24小時,罐內懸浮液基本澄清,大部分懸浮菌體運動緩慢,無雜菌,菌體濃度達1億/毫升以上,即為二級種子液。4)大量發酵生產將二級種子液按5%重量比通過管道接種于裝有培養基的發酵罐內,在罐內溫度為31±1℃,氣壓0.04MPa,空氣流量為11V/V/分條件下,經24~30小時,使罐內菌體95%以上已形成孢子,菌體濃度達到1億個/毫升。5)吸附過濾將發酵液放入吸附池內,加入適量CaCO3吸附孢子,30分鐘后,用真空轉鼓抽濾機在0.2MPa壓力下,使發酵液通過7號濾布抽濾,制得濾餅。6)烘干將濾餅放入真空轉鼓烘干機中升溫達60℃,烘干4小時,制得含水量小于5%,菌體濃度達100億/克以上的濾餅。7)粉碎和包裝將烘干后的濾餅,經高速粉碎機粉碎,使其粒徑在120目以上,然后包裝出廠。
全文摘要
一種植物殺蟲菌的生產方法,特別是蘇云金芽孢標菌以色列變種的殺蟲菌生產方法。該法是從死亡蟲體上取出臟液,經過選育菌種,制備種子液、大量發酵生產、吸附、過濾、粉碎和包裝,制得含水量小于5%的粒徑為120目以上而活孢子數達到100億/克以上的顆粒產品,本發明所得產品,質量穩定可靠,殺蟲力強而對人畜無害,其成本只為化學農藥價格的20-50%,社會效益好。
文檔編號A01N63/04GK1059830SQ9110512
公開日1992年4月1日 申請日期1991年7月29日 優先權日1991年7月29日
發明者劉家運, 柳順方, 魏炳義, 王玉海, 李艷君, 李俊英, 張可瑛 申請人:商丘市醫藥化工廠