一種高抗白粉病苦瓜的育種方法
【專利摘要】本發明公開了一種高抗白粉病苦瓜的育種方法，是利用高抗白粉病材料MC42-52，通過連續回交轉育，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法對后代進行抗白粉病單株篩選，最后選育出高抗白粉病的優良自交系，再利用本發明育成的高抗白粉病的自交系組配成高抗白粉病的雜交種。本方法是在苗期利用苦瓜離體葉片對后代進行抗白粉病單株篩選，具有簡便、高效、準確率高和占用空間小的優點。
【專利說明】一種高抗白粉病苦瓜的育種方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于作物遺傳育種【技術領域】，具體來說是涉及一種高抗白粉病苦瓜的育種方法。
【背景技術】
[0002]苦瓜(Momordica charantia L.)起源于東南亞的熱帶地區,南宋時傳入我國，歷經幾百年的栽培，已形成了豐富的類型和品種。其主要分布在兩廣、海南、福建、臺灣、四川、湖南等南方省區，隨著苦瓜種植面積和規模的逐漸擴大，苦瓜在生產中的病害發病率也日益嚴重。苦瓜栽培種大多以常規種植為主，普遍存在抗病性差的缺點。抗病苦瓜是育種工作者進行品種改良的重要目標，近年來也取得一定進展。采用抗病品種可以節省人力物力，有效減少農藥的使用，有利生產綠色或有機蔬菜迎合消費者對食品安全的需求。但是隨著新品種的推廣應用，種植年代的增加，病原菌也會發生變異，產生新的生理小種從而喪失抗性。
[0003]苦瓜白粉病是苦瓜生產中常見的主要病害之一,屬于氣候性病害,主要在春秋兩季爆發流行。目前，尚未發現有完全對白粉病免疫的苦瓜資源，一些具備高抗白粉病的資源在產量、外形、風味等商品性上大多不能迎合消費需求。
[0004]因此，將抗白粉病基因轉育到栽培種或性狀優良的自交材料中，育成既高產又兼顧抗白粉病性狀的苦瓜品種，是苦瓜品種改良的一個目標。
【發明內容】
[0005]本發明的目的在于提供一種高抗白粉病苦瓜的育種方法，以獲得抗白粉病又兼顧其它優良農藝性狀的苦瓜品種。
[0006]為實現本發明的目的，主要是通過以下技術方案來實現的:
[0007]一種高抗白粉病苦瓜的育種方法，是利用高抗白粉病材料MC42-52，通過連續回交轉育，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法對后代進行抗白粉病單株篩選，最后選育出高抗白粉病的優良自交系，利用選育的高抗白粉病的自交系組配成高抗白粉病的苦瓜雜交種。
[0008]本發明所提供的技術方案，包括以下步驟:
[0009](I)選育高抗白粉病自交系方法
[0010]A、將MC42-52與農藝性狀優良的自交系雜交，得到雜交F1 ；
[0011]B、以雜交F1與優良自交系回交，得到回交一代BC1F1 ；
[0012]C、種植BC1F1，選農藝性狀好的單株自交，同時與優良自交系回交，做好對應編號，分別單株單瓜收獲BC1F2和BC2F1 ；
[0013]D、隨機取BC1F2單株單瓜種子播種，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法進行抗白粉病鑒定，種植具高抗白粉病的對應的BC2F1單株，選農藝性狀好的單株自交，同時與優良自交系回交，做好對應編號，分別單株單瓜收獲BC2F2和BC3F1 ；
[0014]E、隨機取BC2F2單株單瓜種子播種，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法進行抗白粉病鑒定，種植具高抗白粉病的對應的BC3F1單株，選農藝性狀好的單株自交，同時與優良自交系回交，做好對應編號，分別單株單瓜收獲BC3F2和BC4F1 ；
[0015]F、隨機取BC3F2單株單瓜種子播種，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法進行抗白粉病鑒定，種植具高抗白粉病的對應的BC4F1單株，選農藝性狀好的單株自交，同時與優良自交系回交，做好對應編號，分別單株單瓜收獲BC4F2和BC5F1 ；
[0016]G、隨機取BC4F2單株單瓜種子播種，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法進行抗白粉病鑒定，種植具高抗白粉病的對應的BC5F1單株，選農藝性狀好的單株自交，同時與優良自交系回交，做好對應編號，分別單株單瓜收獲BC5F2和BC6F1 ；
[0017]H、播種BC5F2，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法進行抗白粉病鑒定，選留高抗白粉病的植株，連續2代自交，自交代均表現為高抗白粉病，單瓜收種，種成瓜行，在瓜行中選株種成株系，獲得高抗白粉病的自交系。
[0018](2)利用上述方法所育成的高抗白粉病自交系進行雜交，可選育出高抗白粉病的苦瓜雜交種。
[0019]作為優選，步驟(I)C中所述單株自交方法為:于授粉前一天分別給雌花與雄花套袋，第二天選擇同一株的雄花作為花粉給同一株的雌花授粉，授粉后立即套袋。
[0020]作為優選，步驟(I)D中所述苗期為長至4葉I心的苦瓜苗。
[0021]步驟(I)中所述農藝性狀好是指具有高產、優質、商品性好的育種目標性狀。
[0022]本發明的有益.效果
[0023](I)在苗期利用苦瓜離體葉片對回交后代進行白粉病的鑒定與篩選，具有簡便、高效、準確率高且占用空間小的優點。
[0024](2)本發明育成的高抗白粉病品種，具備抗病性強且農藝性狀良好的特點，在農業生產上推廣應用，可以減少化學農藥的使用，既有利生產無毒無害的綠色產品滿足消費需求，又保護生態環境促進農業的可持續發展，具有很好的經濟效益和社會效益。
【具體實施方式】
[0025]下面結合具體實施例對本發明作進一步詳細說明。
[0026]實施例:
[0027]A、2008年春，將MC42_52(從來源于亞洲蔬菜研究與發展中心(AVRDC)的苦瓜種質T0T4206經自交分離而來，對白粉病的抗性由隱性基因控制)與另一個優良自交系MC35-37 (從商品種新翠經6代自交系譜選擇獲得)雜交，得到雜交F1 ；
[0028]B、以雜交F1與此35_37回交，得到回交一代BC1F1 ；
[0029]C、2009年，種植BC1F1并進行單株自交，同時與自交系MC35-37回交，做好對應編號，分別單瓜收獲BC1F2和BC2F1 ；
[0030]其中苦瓜白粉病離體葉片鑒定法:在苗期取苦瓜基生葉，用打孔器制成直徑為5cm的葉碟,清水沖洗1min,用3%的次氯酸鈉消毒8min,最后用無菌水沖冼4次,正面朝上放入滅菌消毒的鋪有雙層濕潤濾紙的培養皿中，每個葉碟表面均勻地噴入濃度為IXlO5個/ml苦瓜白粉病孢子懸浮液，以葉面不滴水為準，封口后置于28°C /16h，20°C /8h的培養箱中光暗交替培養7d。于7d后進行病情指數的統計分析。
[0031]抗白粉病鑒定中病害分級標準為:0級:無癥狀；1級:葉片上出現少量白粉狀病斑且病斑模糊不清，病斑面積占葉片面積的5%以下；2級:葉片上出現明顯病斑，但分散不連片，病斑面積總面積的6%?25%，；3級:葉片上產生中等數量的白粉狀病斑且病斑連成片，病斑面積占總面積的26%?50% ；4級:葉片的白粉病病斑數量較多，占葉面積的51%?75% ;5級:葉片上的白粉病病斑數量很多且粉層較厚，占葉面積的76%?100%。
[0032]病情指數的統計分析公式:DI = Σ (sXn) X 100/NX S (DI_病情指數，s-各病情級別的代表數值，η-各病情級別病葉數，N-調查總葉數，S-最高級別代表值)計算病情指數。
[0033]抗病性鑒定的標準為:高抗:0 <病情指數< 15 ;抗病:15 <病情指數< 35沖抗:35 <病情指數< 55 ;感病:55 <病情指數< 75 ;高感:病情指數> 75。
[0034]D、將BC1F2單瓜種子播種，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法進行抗白粉病鑒定，種植具高抗白粉病的對應的BC2F1單株，選農藝性狀好的單株自交，同時與自交系MC35-37回交，做好對應編號，分別單株單瓜收獲BC2F2和BC3F1 ；
[0035]Ε、隨機取BC2F2單瓜種子播種，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法進行抗白粉病鑒定，種植具高抗白粉病的對應的BC3F1單株，選農藝性狀好的單株自交，同時與自交系MC35-37回交，做好對應編號，分別單株單瓜收獲BC3F2和BC4F1 ；
[0036]F、隨機取BC3F2單株單瓜種子播種，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法進行抗白粉病鑒定，種植具高抗白粉病的對應的BC4F1單株，選農藝性狀好的單株自交，同時與自交系MC35-37回交，做好對應編號，分別單株單瓜收獲BC4F2和BC5F1 ；
[0037]G、隨機取BC4F2單株單瓜種子播種，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法進行白粉病鑒定，種植具高抗白粉病的對應的BC5F1單株，選農藝性狀好的單株自交，同時與自交系MC35-37回交，做好對應編號，分別單株單瓜收獲BC5F2和BC6F1 ；
[0038]Η、2012年，播種BC5F2，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法進行抗白粉病鑒定，選留高抗白粉病的植株，連續2代自交，自交代均表現為高抗白粉病，單瓜收種，種成瓜行，在瓜行中選株種成株系，獲得高抗白粉病的自交系。
[0039]2013年，將通過上述程序育成的高抗白粉病自交系進行雜交，收獲雜交種F1,隨機取F1種子進行種植，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法進行抗白粉病鑒定，結果均表現出高抗白粉病的特性，選育出高抗白粉病的苦瓜雜交種。
[0040]前述對本發明的具體示例性實施方案的描述是為了說明和例證的目的。這些描述并非想將本發明限定為所公開的精確形式，并且很顯然，根據上述教導，可以進行很多改變和變化。對示例性實施例進行選擇和描述的目的在于解釋本發明的特定原理及其實際應用，從而使得本領域的技術人員能夠實現并利用本發明的各種不同的示例性實施方案以及各種不同的選擇和改變。本發明的范圍意在由權利要求書及其等同形式所限定。
【權利要求】
1.一種高抗白粉病苦瓜的育種方法，是利用高抗白粉病材料MC42-52，通過連續回交轉育，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法對后代進行抗白粉病單株篩選，最后選育出高抗白粉病的優良自交系，再利用選育出自交系組配成高抗白粉病的苦瓜雜交種，其包括以下步驟: (1)選育高抗白粉病自交系。 A、將MC42-52與農藝性狀優良的自交系雜交，得到雜交匕； B、以雜交匕與優良自交系回交，得到回交一代BC^； C、種植BCR，選農藝性狀好的單株自交，同時與優良自交系回交，做好對應編號，分別單株單瓜收獲Β@2和BCR ； D、隨機取BC^單株單瓜種子播種，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法進行抗白粉病鑒定，種植具高抗白粉病的對應的BC2Fi單株，選農藝性狀好的單株自交，同時與優良自交系回交，做好對應編號，分別單株單瓜收獲BC2F2和BC^ ； E、隨機取BC2F2單株單瓜種子播種，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法進行抗白粉病鑒定，種植具高抗白粉病的對應的BC^單株，選農藝性狀好的單株自交，同時與優良自交系回交，做好對應編號，分別單株單瓜收獲BC3F2和BCR ； F、隨機取BC3F2單株單瓜種子播種，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法進行抗白粉病鑒定，種植具高抗白粉病的對應的BC4Fi單株，選農藝性狀好的單株自交，同時與優良自交系回交，做好對應編號，分別單株單瓜收獲BC4F2和BC5Fi ； G、隨機取BC4F2單株單瓜種子播種，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法進行抗白粉病鑒定，種植具高抗白粉病的對應的BC^單株，選農藝性狀好的單株自交，同時與優良自交系回交，做好對應編號，分別單株單瓜收獲BC5F2和BCR ； H、播種BC5F2，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法進行抗白粉病鑒定，選留高抗白粉病的植株，連續2代自交，自交代均表現為高抗白粉病，單瓜收種，種成瓜行，在瓜行中選株種成株系，獲得高抗白粉病的自交系。 (2)利用步驟(1)所育成的高抗白粉病自交系進行雜交，選育出高抗白粉病的苦瓜雜交種。
2.如權利要求1所述的育種方法，其特征在于:步驟(1)C中所述單株自交方法為:于授粉前一天分別給雌花與雄花套袋，第二天選擇同一株的雄花作為花粉給同一株的雌花授粉，授粉后立即套袋。
3.如權利要求1所述的育種方法，其特征在于:步驟(1)D中所述苗期為長至4葉1心的苦瓜苗。
4.如權利要求1所述的育種方法，其特征在于:步驟(1)中所述農藝性狀好是指具有高產、優質、商品性好的育種目標性狀。
【文檔編號】A01H1/02GK104303992SQ201410582901
【公開日】2015年1月28日 申請日期:2014年10月27日 優先權日:2014年10月27日
【發明者】黃如葵, 黃熊娟, 陳小鳳, 陳振東, 梁家作, 馮誠誠, 黃玉輝, 車江旅, 劉杏連 申請人:廣西壯族自治區農業科學院蔬菜研究所