一種厚葉旋蒴苣苔植株再生的快速繁殖方法
【專利摘要】本發明研究了一種厚葉旋蒴苣苔植株再生的快速繁殖方法，包括無菌葉片的獲得，愈傷組織的誘導，愈傷組織的分化，生根誘導等步驟。本研究對厚葉旋蒴苣苔的組織培養及無性系建立展開了探索，最終成功建立了厚葉旋蒴苣苔的再生系，為其進一步開發利用奠定了技術基礎。
【專利說明】一種厚葉旋蒴苣苔植株再生的快速繁殖方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及植物組織培養的快繁方法，屬于植物【技術領域】。
【背景技術】
[0002]厚葉旋蒴苣苔，Boea crassifolia Hemsl.，苦苣苔科，多年生草本，又名厚葉牛耳草、巖白菜，葉基生，卵形或近圓形，稀為長圓形，長6-lOcm，邊緣具細鈍鋸齒，兩面均伏生短柔毛，葉具柄，分布于湖北、四川、貴州、云南。厚葉旋蒴苣苔可做藥用，性味:甘，平，滋補強壯，止血，止咳，主治肝脾虛弱，勞傷吐血，內傷咯血，肺病咳喘，白帶，無名腫毒等癥。
【發明內容】
[0003]本發明所要解決的技術問題是提供厚葉旋蒴苣苔植株再生的快速繁殖方法，本研究對厚葉旋蒴苣苔的組織培養及無性系建立展開了探索，最終成功建立了厚葉旋蒴苣苔的再生系，為其進一步開發利用奠定了技術基礎。
[0004]本發明所要解決的技術問題是通過以下方案來實現的:
取厚葉旋蒴苣苔幼嫩葉片，在lg/L多菌靈+25mg/L四環素的溶液中浸泡lh，無菌水沖洗3次，超凈工作臺上0.05%升汞處理6min，無菌水沖洗5次，消毒處理過的厚葉旋蒴苣苔葉片接入培養基為SH+2，4-D2.0mg/L+6-BAl.0mg/1誘導培養基中進行愈傷組織誘導，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，暗光照，溫度25土 1°C，誘導出來的愈傷組織放入分化培養基 SH+6-BA1.0mg/L+TDZ0.5mg/L+2,4-D2.0mg/L,附加蔗糖 30g/L，瓊脂 6.5g/L，pH5.8，光照12001x，溫度25土 1°C，分化培養出來的厚葉旋蒴苣苔芽苗放入生根培養基3/2SH+NAA0.01-0.02mg/L+IAA0.01-0.02mg/L,附加蔗糖 20g/L，瓊脂 5.0g/L, pH5.85，光照55001x，溫度 25±1°C。
[0005]采用本發明制備的厚葉旋蒴苣苔成活率高，培養周期短，利于大規模種植。
[0006]下面將結合【具體實施方式】對本發明作進一步闡述，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。
【具體實施方式】
[0007]實施例1
取厚葉旋蒴苣苔幼嫩葉片，在lg/L多菌靈+25mg/L四環素的溶液中浸泡lh，無菌水沖洗3次，超凈工作臺上0.05%升汞處理6min，無菌水沖洗5次，消毒處理過的厚葉旋蒴苣苔葉片接入培養基為SH+2，4-D2.0mg/L+6-BAl.0mg/1誘導培養基中進行愈傷組織誘導，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，暗光照，溫度25土 1°C，誘導出來的愈傷組織放入分化培養基 SH+6-BA1.0mg/L+TDZ0.5mg/L+2,4-D2.0mg/L,附加蔗糖 30g/L，瓊脂 6.5g/L，pH5.8，光照12001x，溫度25土 1°C，分化培養出來的厚葉旋蒴苣苔芽苗放入生根培養基3/2SH+NAA0.01mg/L+IAA0.01mg/L,附加蔗糖 20g/L，瓊脂 5.0g/L, pH5.85，光照 55001x，溫度25±1°C，生根率90%。
[0008]實施例2
取厚葉旋蒴苣苔幼嫩葉片，在lg/L多菌靈+25mg/L四環素的溶液中浸泡lh，無菌水沖洗3次，超凈工作臺上0.05%升汞處理6min，無菌水沖洗5次，消毒處理過的厚葉旋蒴苣苔葉片接入培養基為SH+2，4-D2.0mg/L+6-BAl.0mg/1誘導培養基中進行愈傷組織誘導，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，暗光照，溫度25土 1°C，誘導出來的愈傷組織放入分化培養基 SH+6-BA1.0mg/L+TDZ0.5mg/L+2,4-D2.0mg/L,附加蔗糖 30g/L，瓊脂 6.5g/L，pH5.8，光照12001x，溫度25土 1°C，分化培養出來的厚葉旋蒴苣苔芽苗放入生根培養基3/2SH+NAA0.02mg/L+IAA0.02mg/L,附加蔗糖 20g/L，瓊脂 5.0g/L, pH5.85，光照 55001x，溫度25 ± I °C，生根率91%。
[0009]實施例3
取厚葉旋蒴苣苔幼嫩葉片，在lg/L多菌靈+25mg/L四環素的溶液中浸泡lh，無菌水沖洗3次，超凈工作臺上0.05%升汞處理6min，無菌水沖洗5次，消毒處理過的厚葉旋蒴苣苔葉片接入培養基為SH+2，4-D2.0mg/L+6-BAl.0mg/1誘導培養基中進行愈傷組織誘導，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，暗光照，溫度25土 1°C，誘導出來的愈傷組織放入分化培養基 SH+6-BA1.0mg/L+TDZ0.5mg/L+2,4-D2.0mg/L,附加蔗糖 30g/L，瓊脂 6.5g/L，pH5.8，光照12001x，溫度25土 1°C，分化培養出來的厚葉旋蒴苣苔芽苗放入生根培養基3/2SH+NAA0.02mg/L+IAA0.0 lmg/L,附加蔗糖 20g/L，瓊脂 5.0g/L, pH5.85，光照 55001x，溫度25 ± I °C，生根率92%。
【權利要求】
1.一種厚葉旋蒴苣苔植株再生的快速繁殖方法，包括無菌葉片的獲得，愈傷組織的誘導，愈傷組織的分化，生根誘導，其主要步驟如下: (1)取厚葉旋蒴苣苔的幼嫩葉片，對其進行消毒處理； (2)將步驟(1)消毒處理過的厚葉旋蒴苣苔葉片接入培養基為SH+2，4-D2.0mg/L+6-BA1.0mg/1誘導培養基中進行愈傷組織誘導，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，暗光照，溫度25±1°C ; (3)取步驟(2)誘導出來的愈傷組織放入分化培養基SH+6-BA1.0mg/L+TDZ0.5mg/L+2,4-D2.0mg/L,附加蔗糖 30g/L，瓊脂 6.5g/L，ρΗ5.8，光照 12001χ，溫度 25±1°C ; (4)取步驟(3)分化培養出來的厚葉旋蒴苣苔芽苗放入生根培養基3/2SH+NAA0.01-0.02mg/L+IAA0.01-0.02mg/L,附加蔗糖 20g/L，瓊脂 5.0g/L, pH5.85，光照55001x，溫度 25±1°C。
2.按照權利要求1所述的一種厚葉旋蒴苣苔植株再生的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(1)中所述厚葉旋蒴苣苔無菌葉片的獲得為，取厚葉旋蒴苣苔幼嫩葉片，在lg/L多菌靈+25mg/L四環素的溶液中浸泡lh，無菌水沖洗3次，超凈工作臺上0.05%升汞處理6min，無菌水沖洗5次。
【文檔編號】A01H4/00GK104255529SQ201410550609
【公開日】2015年1月7日 申請日期:2014年10月17日 優先權日:2014年10月17日
【發明者】劉東鋒, 楊成東 申請人:南京帝道農業科技有限公司