一種光合細菌一步食物鏈高密度養殖鹵蟲的方法
【專利摘要】本發明公開一種光合細菌一步食物鏈高密度養殖鹵蟲的方法，包括如下步驟：(1)光合細菌培養容器消毒處理，對培養容器的器壁進行消毒處理，消毒后用煮沸海水沖洗干凈；(2)鹵蟲培養容器消毒處理，對培養容器的器壁進行消毒處理，消毒后用煮沸海水沖洗干凈；(3)鹵蟲養殖液的配制；(4)光合細菌的接種與培養；(5)鹵蟲的接種與培養。本發明的優點是采用光合細菌作為鹵蟲的單一餌料，采用一步食物鏈養殖方式，營養全面、培養方便、無毒無害、成本較低。
【專利說明】一種光合細菌一步食物鏈高密度養殖鹵蟲的方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于鹵蟲養殖領域，尤其是涉及一種光合細菌一步食物鏈高密度養殖鹵蟲的方法。
【背景技術】
[0002]光合細菌(PSB, photosynthetic bacteria)是一類厭氧或者兼性厭氧自養細菌，廣泛分布于土壤、鹽湖、淡水、海水、溫泉甚至兩極地區，在污染嚴重的排污口也大量存在。光合細菌能夠在厭氧條件下進行光合作用，但是不釋放氧氣，胞內含有多種菌綠素和類胡蘿卜素，光照條件下能夠利用硫化氫、硫代硫酸鹽、分子氫等將二氧化碳還原成有機物，同時固定大氣中的氮。光合細菌含有豐富的營養物質:蛋白質，維生素B12、葉酸、核黃素、類胡羅卜素、輔酶QlO等促長因子和生理活性物質。
[0003]目前，光合細菌僅作為一種營養添加劑應用于水產養殖，如魚類、蝦蟹等，但是單純將光合細菌作為單一的餌料進行養殖的技術還沒有相關案例。
[0004]鹵蟲(Artemia sp.)又稱豐年蟲,是一種廣溫耐鹽性的一種小型甲殼動物,能夠在淡水和咸水中生活。齒蟲含有豐富的營養物質，干品含有蛋白質60%、脂肪20%以及豐富的高級不飽和脂肪酸、微量元素和種類豐富的生長因子。鹵蟲作為一種優質的活體餌料，在水產養殖中應用非常廣泛。但是目前國際上鹵蟲資源有限，成體鹵蟲資源主要依靠野生繁殖，國際上人工養殖鹵蟲的技術含量也比較低，主要是越南等國家的粗放養殖為主。目前常用的養殖方法是在養殖的初期以肥水和補充生物餌料豐富的鹵水為主，使透明度保持在30cm左右，隨著鹵蟲的生長發育，需要逐步投喂有機碎屑，如糠麩、油餅類、玉米、雞糞、牛羊糞等。顆粒要小于50μπι，投喂量30— 50kg/天?公頃，要分次飼喂。有條件可使用無機肥，每周每公頃水面施加尿素20kg、磷酸氫二銨25kg。因此，高技術含量的鹵蟲高密度養殖技術亟待解決。
【發明內容】
[0005]本發明要解決的技術問題是提供一種利用光合細菌一步食物鏈高密度養殖鹵蟲的方法，尤其適合高密度養殖鹵蟲。
[0006]本發明的技術方案是一種光合細菌一步食物鏈高密度養殖鹵蟲的方法，包括以下步驟:
[0007]一種光合細菌一步食物鏈高密度養殖鹵蟲的方法，包括如下步驟:
[0008](I)光合細菌培養容器消毒處理
[0009]對培養容器的器壁進行消毒處理，消毒后用煮沸海水沖洗干凈；
[0010](2)鹵蟲培養容器消毒處理
[0011]對培養容器的器壁進行消毒處理，消毒后用煮沸海水沖洗干凈；
[0012](3)光合細菌培養基的配制；
[0013](4)鹵蟲養殖液的配制；
[0014](5)光合細菌的接種與培養；
[0015](6)鹵蟲的接種與培養。
[0016]進一步，所述步驟(I)和步驟(2)均采用6%的次氯酸鈉溶液對培養容器進行12h的消毒處理。
[0017]進一步，所述步驟(3)光合細菌培養基的配制方法是:將過濾后的飽和鹵水與淡水混合，配制成鹽度為30?150%。的人工海水；或者用海水晶或海水素調和淡水配制。
[0018]進一步，所述步驟(4)鹵蟲養殖液的配制包括如下步驟:
[0019](I)將過濾后的飽和鹵水與淡水混合,或者用海水晶或海水素調和淡水配制，配制成鹽度為30?150%。鹵蟲養殖液；
[0020](2)次氯酸鈉消毒，調節pH為6.5?7.5 ;
[0021](3)充分曝氣，紫外線照射后得到鹵蟲養殖液。
[0022]進一步，所述步驟(5)的光合細菌的接種與培養方法為:將光合細菌菌種以10%體積比以上的接種量接種到光合細菌培養基中，厭氧培養，維持溫度為25?35°C，pH
6.5?8.5，光照強度2000LUX以上，鹽度為30?150%。，光合細菌密度達到109ind/ml以上時培養完成，得到成品光合細菌。
[0023]進一步，所述步驟出)的鹵蟲的接種與培養方法為:將孵化后的鹵蟲無節幼體接種到鹵蟲養殖液中，接種密度為1500?10，000ind/L，維持培養溫度為25?35°C，pH為
6.5?7.5，溶解氧D03.0?8.0ppm,自然光照，鹽度為30?150%。，鹵蟲養殖液在培養容器中的深度為10?60cm，培養過程中持續在鹵蟲養殖液中加入光合細菌成品，當鹵蟲體長大于Icm時,養殖結束。
[0024]進一步，所述的培養過程中持續向鹵蟲養殖液中加入光合細菌成品，培養結束時鹵蟲養殖液透明度為1cm左右。
[0025]本發明采用的鹵蟲無節幼體密度的測量方法為從混勻的孵化液中取100 μ I鹵蟲5次，在解剖鏡下分別計數，計算五次平均值作為鹵蟲無節幼體的密度；采用的鹵蟲體長的測量方法為隨機選擇鹵蟲10只，在顯微鏡鏡下分別測量體長，計算10個數據的平均值作為鹵蟲的平均體長；根據鹵蟲無節幼體的成活率、生長及攝食情況，實時調節成品光合細菌的投喂量。
[0026]本發明的優點及效果:本發明采用光合細菌作為鹵蟲的單一餌料，采用一步食物鏈養殖方式，營養豐富、培養方便、無毒無害、成本較低。而且光合細菌含有種類豐富的促生長因子，能夠提高鹵蟲抵抗力，生長迅速，能夠在20d左右長為成蟲，體長>lcm，而且養殖密度可以達到1000?10，000ind/L。本方法培養出的鹵蟲營養均衡豐富，含有豐富的蛋白質和脂肪酸，抵抗力高。
【具體實施方式】
[0027]為了使本發明實現的技術手段、創作特征、達成目的與功效易于明白了解，下面針對本發明做進一步闡述，但不限定本發明的保護范圍。
[0028]實施例一
[0029](I)、光合細菌培養容器消毒處理
[0030]采用6%的次氯酸鈉溶液對4個50L透明培養袋進行消毒，處理12h。然后用煮沸海水沖洗干凈。
[0031](2)、鹵蟲培養容器消毒處理
[0032]采用6%的次氯酸鈉溶液對200L培養池進行消毒，處理12h。然后用煮沸海水沖洗干凈；
[0033](3)、光合細菌培養基的配制
[0034]用50 μ m濾布將飽和鹵水過濾,然后與曝氣12h后的自來水混合,配制成人工海水鹽度為80%0。
[0035]配制IL 微量元素母液包括 H3BO3 2.86g、MnCl2.4Η201.81g、ZnSO4.7Η200.22g、Na2MoO4.2Η200.39g、CuSO4.5Η200.08g、CoCl2.6Η200.05g、FeCl3.6Η200.005g。121。。20min滅菌后備用。
[0036]使用時在IL光合細菌培養基中加入Iml微量兀素母液。
[0037]配制200L 光合細菌培養基包括 NH4Cll.0g、NaHCO3 1.0g、KH2PO4 0.2g、CH3C00Na5.0g、MgSO4.7H200.2g、酵母膏 0.2g、蛋白胨 0.lg、CaCl2.2H20 0.lg, IL 光合細菌培養基利用IL沸騰人工海水溶解，使用NaHCO3調節pH為7。
[0038]向200L光合細菌培養基中加入200ml微量元素母液，充分混勻，光合細菌培養基配制完成。
[0039](4)、鹵蟲養殖液的配制
[0040]用50 μ m濾布將飽和鹵水過濾,然后與曝氣12h后的自來水混合,配制成鹵蟲養殖液鹽度為80%。。使用6%次氯酸鈉消毒12h，硫代硫酸鈉調節pH為7。純氧充分曝氣，溶氧為8ppm，紫外線照射2h后得到鹵蟲養殖液。
[0041](5)、光合細菌的接種與培養
[0042]將培養液分裝到4個培養袋后，將光合細菌菌種以20%體積比的接種量接種。扎緊培養袋口，隔絕空氣培養，控制溫度為30°C，pH在6.5?8.5，光照強度5000LUX。每天搖晃培養袋，培養液顏色逐漸變深。7d后，光合細菌密度達到8X108ind/ml，；10d后，光合細菌密度達到5X109ind/ml，培養完成。
[0043](6)、鹵蟲的接種與培養
[0044]選擇渤海灣品系鹵蟲卵進行孵化，以5000ind/L的密度接種到鹵蟲養殖液中。控制溫度為28?32°C，pH為6.5?7.5，鹽度浮動在80%。左右。
[0045]在鹵蟲卵孵化24小時之后開始投喂成品光合細菌維持鹵蟲養殖液透明度為1cm左右，投放的光合細菌成品需要充分曝氣llh-13h以后才能投飼。
[0046]最終，鹵蟲的成活率為74.3%，平均養殖密度為3715ind/L。
[0047]實施例二
[0048](I)、光合細菌培養容器消毒處理
[0049]采用6%的次氯酸鈉溶液對4個50L透明培養袋進行消毒，處理12h。然后用煮沸海水沖洗干凈。
[0050](2)、鹵蟲培養容器消毒處理
[0051]采用6%的次氯酸鈉溶液對200L培養池進行消毒，處理12h。然后用煮沸海水沖洗干凈；
[0052](3)、光合細菌培養基的配制
[0053]同實施例一的步驟(3)，鹽度為100%。。
[0054](4)、鹵蟲培養基的配制
[0055]同實施例一的步驟(4)，鹽度為100%。。
[0056](5)、光合細菌的接種與培養
[0057]將培養液分裝到4個培養袋后，將光合細菌菌種以20%體積比的接種量接種。
[0058]扎緊培養袋口，隔絕空氣培養，控制溫度為30 °C，pH在6.5?8.5，光照強度5000LUX。
[0059]每天搖晃培養袋，培養液顏色逐漸變深。7d后，光合細菌密度達到6.3X108ind/ml, ； 1d后，光合細菌密度達到3.4X109ind/ml，lld后，光合細菌密度達到5.7X109ind/ml，培養完成。
[0060](6)、鹵蟲的接種與培養
[0061]選擇渤海灣品系鹵蟲卵進行孵化，以3000ind/L的密度進行接種。控制溫度為28?32°C，pH為6.5?7.5，鹽度浮動在100%?左右。
[0062]在鹵蟲卵孵化24小時之后開始投喂成品光合細菌維持鹵蟲養殖液透明度為1cm左右，投放的光合細菌成品需要充分曝氣llh-13h以后才能投飼。
[0063]最終，鹵蟲的成活率為72.1 %，平均養殖密度為2163ind/L。
[0064]實施例三
[0065](I)、光合細菌培養容器消毒處理
[0066]采用6%的次氯酸鈉溶液對4個50L透明培養袋進行消毒，處理12h。然后用煮沸海水沖洗干凈。
[0067](2)、鹵蟲培養容器消毒處理
[0068]采用6%的次氯酸鈉溶液對200L培養池進行消毒，處理12h。然后用煮沸海水沖洗干凈；
[0069](3)、光合細菌培養基的配制
[0070]同實施例一的步驟(3)，鹽度為60%0。
[0071](4)、鹵蟲培養基的配制
[0072]同實施例一的步驟(4)，鹽度為60%。。
[0073](5)、光合細菌的接種與培養
[0074]將培養液分裝到4個培養袋后，將光合細菌菌種以20%體積比的接種量接種。
[0075]扎緊培養袋口，隔絕空氣培養，控制溫度為30°C，pH在6.5?8.5，光照強度5000LUX。
[0076]每天搖晃培養袋，培養液顏色逐漸變深。7d后，光合細菌密度達到9.3X108ind/111;10(1后，光合細菌密度達到6.4\10吖11(1/1111，培養完成。
[0077](6)、鹵蟲的接種與培養
[0078]選擇渤海灣品系鹵蟲卵進行孵化，以1500ind/L的密度進行接種。控制溫度為28?32 °C，pH為6.5?7.5，鹽度浮動在60%?左右。
[0079]在鹵蟲卵孵化24小時之后開始投喂成品光合細菌維持鹵蟲養殖液透明度為1cm左右，投放的光合細菌成品需要充分曝氣llh-13h以后才能投飼。
[0080]最終，鹵蟲的成活率為83.4%，平均養殖密度為1260ind/L。
[0081]以上對本發明的三個實施例進行了詳細說明，但所述內容僅為本發明的較佳實施例，不能被認為用于限定本發明的實施范圍。凡依本發明申請范圍所作的均等變化與改進等，均應仍歸屬于本發明的專利涵蓋范圍之內。
【權利要求】
1.一種光合細菌一步食物鏈高密度養殖鹵蟲的方法，包括如下步驟: (1)光合細菌培養容器消毒處理 對培養容器的器壁進行消毒處理，消毒后用煮沸海水沖洗干凈； (2)齒蟲培養容器消毒處理 對培養容器的器壁進行消毒處理，消毒后用煮沸海水沖洗干凈； (3)光合細菌培養基的配制； (4)鹵蟲養殖液的配制； (5)光合細菌的接種與培養； (6)鹵蟲的接種與培養。
2.根據權利要求1所述的光合細菌一步食物鏈高密度養殖鹵蟲的方法，其特征在于，所述步驟(I)和步驟(2)均采用6%的次氯酸鈉溶液對培養容器進行12h的消毒處理。
3.根據權利要求1所述的光合細菌一步食物鏈高密度養殖鹵蟲的方法，其特征在于，所述步驟(3)光合細菌培養基的配制方法是:將過濾后的飽和鹵水或與淡水混合，配制成鹽度為30?150%。的人工海水；或者用海水晶或海水素調和淡水配制。
4.根據權利要求1所述的光合細菌一步食物鏈高密度養殖鹵蟲的方法，其特征在于，所述步驟(4)鹵蟲養殖液的配制包括如下步驟: (1)將過濾后的飽和鹵水與淡水混合，或者用海水晶或海水素調和淡水配制，配制成鹽度為30?150%。鹵蟲養殖液； (2)次氯酸鈉消毒，調節pH為6.5?7.5 ; (3)充分曝氣，紫外線照射后得到鹵蟲養殖液。
5.根據權利要求1所述的光合細菌一步食物鏈高密度養殖鹵蟲的方法，其特征在于，所述步驟(5)的光合細菌的接種與培養方法為:將光合細菌菌種以10%體積比以上的接種量接種到光合細菌培養基中，厭氧培養，維持溫度為25?35°C，pH6.5?8.5，光照強度2000LUX以上，鹽度為30?150%。，光合細菌密度達到109ind/ml以上時培養完成，得到成品光合細菌。
6.根據權利要求1所述的光合細菌一步食物鏈高密度養殖鹵蟲的方法，其特征在于，所述步驟(6)的鹵蟲的接種與培養方法為:將孵化后的鹵蟲無節幼體接種到鹵蟲養殖液中，接種密度為1500?10，000ind/L，維持培養溫度為25?35。。，pH為6.5?7.5，溶解氧D03.0?8.0ppm,自然光照，鹽度為30?150%。，鹵蟲養殖液在培養容器中的深度為10?60cm,培養過程中持續在齒蟲養殖液中加入光合細菌成品，當齒蟲體長大于Icm時,養殖結束。
7.根據權利要求6所述的光合細菌一步食物鏈高密度養殖鹵蟲的方法，其特征在于，所述的培養過程中持續向齒蟲養殖液中加入光合細菌成品，培養結束時齒蟲養殖液透明度為1cm左右。
【文檔編號】A01K67/033GK104222022SQ201410412364
【公開日】2014年12月24日 申請日期:2014年8月20日 優先權日:2014年8月20日
【發明者】錢浩, 柴慈民 申請人:天津海友佳音生物科技股份有限公司