一種文冠果的無性快繁方法
【專利摘要】本發明涉及一種文冠果的無性快繁方法,通過合子胚的誘導接種、體細胞胚的繼代與增殖培養、不定芽的繼代培養、體細胞胚的萌發培養、不定芽旳生根培養、煉苗共六步驟實現;本發明提供一種文冠果的快速無性繁殖方法,從根本上解決文冠果種源不足的問題,實現快速繁殖,并能保持植株的優良性狀,滿足文冠果在經濟、藥用、觀賞樹種等各方面的應用需求。
【專利說明】一種文冠果的無性快繁方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及園藝領域,具體涉及一種文冠果的無性快繁方法。
【背景技術】
[0002]文冠果,無患子科文冠果屬,一屬一種,又名文冠木、文官果、土木瓜等。在垂直方向上文冠果分布廣泛,原產于我國北方的黃土高原地區,栽培樹林范圍涉及廣泛。文冠果在城市園林綠化的應用中,常常被培育成小喬木狀,樹型優美。文冠果非常適合栽種在庭院之中,做觀賞樹種,由于其長壽、吉祥的寓意。文冠果具有優美的樹型,開闊的樹冠,婆娑的干型,奇特的葉子,同時其花美,花期長,絢麗多彩。另外,經過人工控制后,文冠果的樹形更加優美,能夠創造效果出眾的奇景,從而大大的增加文冠果的觀賞價值。
[0003]現階段,文冠果的繁殖生產主要還是靠種子進行有性繁殖,浪費土地的同時也耗費種源。文冠果的種子在未經任何處理的情況下,發芽率極低,同時,由于文冠果的坐果率非常之低,素稱之“千花一果”,從而導致了種源的嚴重不足。自然生長狀態下,主要靠根孽繁殖的文冠果植株后代的退化現象嚴重,且變異較大。嫁接、扦插等傳統的無性繁殖方法,繁殖的系數低,且繁殖周期長,不利于文冠果的快速繁殖,也不能滿足高速發展的生產和經濟的需要。
【發明內容】
[0004]本發明主要解決的技術問題是提供一種文冠果的無性快繁方法,從根本上解決文冠果種源不足的問題,實現快速繁殖,并能保持植株的優良性狀,滿足文冠果在經濟、藥用、觀賞樹種等各方面的應用需求。
[0005]為解決上述技術問題,本發明的目的是這樣實現的:
[0006](I)合子胚的誘導接種:將文冠果果實先用洗衣粉水清洗表面,多次噴洗和擦拭,用滅菌解剖刀將其切開,取出種子放在無菌培養皿內(墊有無菌濾紙);用滅菌鑷子和解剖刀去除種皮,取出其中的合子胚,切成0.3cm3小塊,接種到含有不同植物生長調節劑6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L 的 MS 培養基中,暗培養;
[0007](2)體細胞胚的繼代與增殖培養:將上述誘導的體細胞胚按照體細胞胚的發育情況,分別進行繼代培養:體細胞胚發育良好的,切離外植體,繼代在不含任何生長調節劑的MS培養基中;體細胞胚不易剝離的,連同外植體一起繼代在其誘導率較高的新鮮培養中;暗培養28d,觀察統計體細胞胚的繼代生長情況;
[0008](3)不定芽的繼代培養:將誘導培養獲得的不定芽按照發育生長情況,分別進行繼代培養:不定芽長勢較好的連同外植體切成5cm3塊小,轉移到6-BA0.2mg/L+NAA0.2mg/L的新鮮培養基中;不定芽長勢較弱的連同外植體切成5cm3小塊,轉移到6-BA0.5mg/L+NAA0.3mg/L培養基中;僅有芽點狀突起的外植體,直接轉入6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L的新鮮培養基中,繼續進行誘導;
[0009](4)體細胞胚的萌發培養:將外觀形態發育成熟的了葉胚,轉入不加任何植物生長調節劑的1/2MS和MS培養基中進行萌發;
[0010](5)不定芽旳生根培養:選取生長較整齊一致的不定芽,切取2.5cm,接種在含6-BA(0.4-1.0mg/L)、NAA(0.2-0.4mg/L)和 2%蔗糖的 1/2MS 培養基中誘導生根;
[0011](6)煉苗:選取生根的不定芽,在MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.2mg/L的條件下,暗培養。
[0012]本發明的有益效果是:從體細胞胚發生這種途徑,建立出一個成熟穩定的文冠果無性快繁再生技術,繼代周期短,增殖倍數高。
【具體實施方式】
[0013]下面對本發明的較佳實施例進行詳細闡述,以使本發明的優點和特征能更易于被本領域技術人員理解,從而對本發明的保護范圍做出更為清楚明確的界定。
[0014]本發明實施例包括:
[0015]一種文冠果的無性快繁方法,其特征在于,包括以下步驟:
[0016](I)合子胚的誘導接種:將文冠果果實先用洗衣粉水清洗表面,多次噴洗和擦拭,用滅菌解剖刀將其切開,取出種子放在無菌培養皿內(墊有無菌濾紙);用滅菌鑷子和解剖刀去除種皮,取出其中的合子胚,切成0.3cm3小塊,接種到含有不同植物生長調節劑6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L 的 MS 培養基中,暗培養;
[0017](2)體細胞胚的繼代與增殖培養:將上述誘導的體細胞胚按照體細胞胚的發育情況,分別進行繼代培養:體細胞胚發育良好的,切離外植體,繼代在不含任何生長調節劑的MS培養基中;體細胞胚不易剝離的,連同外植體一起繼代在其誘導率較高的新鮮培養中;暗培養28d,觀察統計體細胞胚的繼代生長情況;
[0018](3)不定芽的繼代培養:將誘導培養獲得的不定芽按照發育生長情況,分別進行繼代培養:不定芽長勢較好的連同外植體切成5cm3塊小,轉移到6-BA0.2mg/L+NAA0.2mg/L的新鮮培養基中;不定芽長勢較弱的連同外植體切成5cm3小塊,轉移到6-BA0.5mg/L+NAA0.3mg/L培養基中;僅有芽點狀突起的外植體,直接轉入6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L的新鮮培養基中,繼續進行誘導;
[0019](4)體細胞胚的萌發培養:將外觀形態發育成熟的了葉胚,轉入不加任何植物生長調節劑的1/2MS和MS培養基中進行萌發;
[0020](5)不定芽旳生根培養:選取生長較整齊一致的不定芽,切取2.5cm,接種在含6-BA(0.4-1.0mg/L)、NAA(0.2-0.4mg/L)和 2%蔗糖的 1/2MS 培養基中誘導生根;
[0021](6)煉苗:選取生根的不定芽,在MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.2mg/L的條件下,暗培養。
[0022]以上所述僅為本發明的實施例,并非因此限制本發明的專利范圍,凡是利用本發明說明書內容所作的等效結構或等效流程變換,或直接或間接運用在其他相關的【技術領域】,均同理包括在本發明的專利保護范圍內。
【權利要求】
1.一種文冠果的無性快繁方法,其特征在于,包括以下步驟: (1)合子胚的誘導接種:將文冠果果實先用洗衣粉水清洗表面,多次噴洗和擦拭,用滅菌解剖刀將其切開,取出種子放在無菌培養皿內(墊有無菌濾紙);用滅菌鑷子和解剖刀去除種皮,取出其中的合子胚,切成0.3cm3小塊,接種到含有不同植物生長調節劑6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L的MS培養基中,暗培養; (2)體細胞胚的繼代與增殖培養:將上述誘導的體細胞胚按照體細胞胚的發育情況,分別進行繼代培養:體細胞胚發育良好的,切離外植體,繼代在不含任何生長調節劑的MS培養基中;體細胞胚不易剝離的,連同外植體一起繼代在其誘導率較高的新鮮培養中;暗培養28d,觀察統計體細胞胚的繼代生長情況; (3)不定芽的繼代培養:將誘導培養獲得的不定芽按照發育生長情況,分別進行繼代培養:不定芽長勢較好的連同外植體切成5cm3塊小,轉移到6-BA0.2mg/L+NAA0.2mg/L的新鮮培養基中;不定芽長勢較弱的連同外植體切成5cm3小塊,轉移到6-BA0.5mg/L+NAA0.3mg/L培養基中;僅有芽點狀突起的外植體,直接轉入6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L的新鮮培養基中,繼續進行誘導; (4)體細胞胚的萌發培養:將外觀形態發育成熟的了葉胚,轉入不加任何植物生長調節劑的1/2MS和MS培養基中進行萌發; (5)不定芽旳生根培養:選取生長較整齊一致的不定芽,切取2.5cm,接種在含6-BA(0.4-1.0mg/L)、NAA (0.2-0.4mg/L)和 2%蔗糖的 1/2MS 培養基中誘導生根; (6)煉苗:選取生根的不定芽,在MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.2mg/L的條件下,暗培養。
【文檔編號】A01H4/00GK104160957SQ201410355211
【公開日】2014年11月26日 申請日期:2014年7月25日 優先權日:2014年7月25日
【發明者】吳義師 申請人:合肥德美畜牧技術有限公司