一種蘋果品種煙富6號組培快繁的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種蘋果品種煙富6號組培快繁的方法，該蘋果品種煙富6號組培快繁的方法，通過采用培養(yǎng)基為MS+6-BA0.5mg/L+IBA0.1mg+PVP500mg/L的培養(yǎng)基初代培養(yǎng)、采用MS+6-BA0.5mg/L+IBA0.1mg/L處理的繼代培養(yǎng)、采用生根培養(yǎng)基1/2MS+IBA1.0mg/L的生根培養(yǎng)、用純鋸末的煉苗移栽；實(shí)現(xiàn)了蘋果品種煙富6號快速的繁殖，不僅保證了較高的成活率，而且也保留了品種的優(yōu)良特性，為蘋果產(chǎn)業(yè)的發(fā)展和進(jìn)一步擴(kuò)大提供了便捷的方法和途徑。
【專利說明】一種蘋果品種煙富6號組培快繁的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于蘋果苗木栽培【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其涉及一種蘋果品種煙富6號組培快繁的 方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 蘋果產(chǎn)業(yè)在中國農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)中占有非常重要的地位，2013年中國蘋果種植面積 225.3萬公頃，產(chǎn)量為3170萬噸。占世界總產(chǎn)量的1/2。目前，我國的蘋果生產(chǎn)模式由傳統(tǒng) 低效郁閉果園模式逐步的轉(zhuǎn)變?yōu)楝F(xiàn)代化矮砧密植集約高效生產(chǎn)栽培模式、并由世界蘋果生 產(chǎn)大國逐步的轉(zhuǎn)變?yōu)樘O果產(chǎn)業(yè)強(qiáng)國。蘋果苗木是蘋果生產(chǎn)栽培的基礎(chǔ)，苗木的質(zhì)量直接影 響著蘋果樹體的生長、開花、結(jié)果以及抗逆性、抗病能力和壽命。苗木受到病毒的侵染之后， 樹體正常的細(xì)胞增殖，就會受到破壞，嚴(yán)重的話會影響果樹的生長勢、果實(shí)品質(zhì)和產(chǎn)量等正 常生理機(jī)制，這成為中國蘋果產(chǎn)業(yè)發(fā)展的隱患。今后一段時期是我國蘋果大規(guī)模更新?lián)Q代 的關(guān)鍵時期，如何從苗木方面提供支持和保障便成為一個值得高度重視的問題。煙富6號 是長富2號的優(yōu)良芽變。相比于母株長富2號，煙富6號為短枝型芽變，幼樹期結(jié)果早，早 期產(chǎn)量高，果個大，著色良好，得到廣大果農(nóng)的喜愛。本發(fā)明建立一種蘋果品種煙富6號快 速繁殖組培快繁的方法，對于生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)短枝型蘋果苗木，具有重要意義，市場前景廣闊。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003] 本發(fā)明實(shí)施例的目的在于提供一種蘋果品種煙富6號組培快繁的方法，旨在為我 國蘋果苗木的栽培提供一種組培快繁的方法，以加快我國蘋果大規(guī)模更新?lián)Q代。
[0004] 本發(fā)明實(shí)施例是這樣實(shí)現(xiàn)的，一種蘋果品種煙富6號組培快繁的方法，該蘋果品 種煙富6號組培快繁的方法包括以下步驟：
[0005] 步驟一，以蘋果品種煙富6號為材料，選擇生長健壯無病蟲害的母樹，于3月份取 1年生枝條，放置25°C的溫室內(nèi)進(jìn)行水培，每升水含有30g蔗糖，每隔3d換一次水并剪掉舊 剪口，當(dāng)水培的一年生枝條上的芽抽生為1. 5?2. 0cm時，剪取嫩芽，去除展開葉片，在自來 水下沖洗6?811，用75%酒精處理88,0.1%升汞處理71^11;
[0006] 步驟二，進(jìn)行消毒處理后，用超聲波清洗機(jī)清洗3min，再用無菌水沖洗3?4次，將 處理好的嫩芽接種到MS+6-BA0. 5mg/L+IBA0. lmg+PVP (聚乙烯吡咯烷酮）500mg/L的培養(yǎng)基 中進(jìn)行培養(yǎng)，每升培養(yǎng)基附加30g蔗糖，8g瓊脂，然后放置在光照16h/d、光照20001u X，26°C 條件下進(jìn)行培養(yǎng)；
[0007] 步驟三，將獲得的煙富6號無菌外植體接種MS+6-BA0. 5mg/L+IBA0. lmg/L瓊脂8g/ L，光照20001ux的培養(yǎng)基中進(jìn)行繼代培養(yǎng)，每升附加30g蔗糖，8g瓊脂；
[0008] 步驟四，選擇繼代培養(yǎng)獲得的生長健壯，高度大于1. 5cm，生長時間為20天的芽 子，接種于1/2MS+IBA1. Omg/L (蔗糖30g/L，瓊脂8g/L)生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)；
[0009] 步驟五，當(dāng)組培苗根長度達(dá)到2cm后，移到室外遮陰煉苗10?12天左右，然后將 培養(yǎng)容器瓶口打開，自然光下進(jìn)行開瓶煉苗2?4天后，將生根苗從培養(yǎng)基中取出，放入濃 度為0. 1 %多菌靈溶液中浸泡5min，并把根部多余的培養(yǎng)基清洗干凈，最后用清水沖洗2? 3次，然后用純鋸末移栽到的營養(yǎng)缽中。
[0010] 進(jìn)一步，在步驟五中，移栽苗的管理方式為：移栽后將生根苗在遮陰網(wǎng)下進(jìn)行管 理，第一周采用濃度為0. 1 %多菌靈溶液進(jìn)行噴灌，第二周每天用水噴灌一次，保持移栽基 質(zhì)濕潤透氣。待生根苗抽生出新芽之后即可移出遮陰網(wǎng)。
[0011] 本發(fā)明提供的蘋果品種煙富6號組培快繁的方法，通過采用培養(yǎng)基為 MS+6-BA0. 5mg/L+IBA0. lmg+PVP500mg/L的培養(yǎng)基初代培養(yǎng)，成活率為30. 77%，有利于煙 富6號組培苗的建立；采用MS+6-BA0. 5mg/L+IBA0. lmg/L處理的繼代培養(yǎng)，擴(kuò)繁系數(shù)高達(dá) 5. 64 ;采用生根培養(yǎng)基1/2MS+IBA1. Omg/L的生根培養(yǎng)且生根率達(dá)45. 8% ;用純鋸末進(jìn)行煉 苗移栽，成活率達(dá)75% ;重復(fù)的對煙富6號品種進(jìn)行繼代培養(yǎng)，生根培養(yǎng)和移栽能夠在較短 的時間內(nèi)實(shí)現(xiàn)蘋果品種煙富6號無病毒苗木的快速的繁殖。通過組織培養(yǎng)技術(shù)保留了煙富 6號品種的優(yōu)良特性，有利于煙富6號優(yōu)良品種的保存，為蘋果煙富6號的無病毒苗木提供 了高效便捷的繁育技術(shù)，促進(jìn)蘋果產(chǎn)業(yè)的進(jìn)一步發(fā)展。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0012] 圖1是本發(fā)明實(shí)施例提供的蘋果品種煙富6號組培快繁的方法流程圖。
【具體實(shí)施方式】
[0013] 為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下結(jié)合實(shí)施例，對本發(fā)明 進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于 限定本發(fā)明。
[0014] 下面結(jié)合附圖及具體實(shí)施例對本發(fā)明的應(yīng)用原理作進(jìn)一步描述。
[0015] 如圖1所示，本發(fā)明實(shí)施例的蘋果品種煙富6號組培快繁的方法包括以下步驟：
[0016] S101 :以蘋果品種煙富6號為材料，選擇生長健壯無病蟲害的母樹，于3月份取1 年生枝條，放置25°C的溫室內(nèi)進(jìn)行水培，每升水含有30g蔗糖，每隔3d換一次水并剪掉舊剪 口，當(dāng)水培的一年生枝條上的芽抽生為1. 5?2. 0cm時，剪取嫩芽，去除展開葉片，在自來水 下沖洗6?8h，用75 %酒精處理8s，0. 1 %升萊處理7min ;
[0017] S102 :進(jìn)行消毒處理后，用超聲波清洗機(jī)清洗3min，再用無菌水沖洗3?4次，將 處理好的嫩芽接種到MS+6-BA0. 5mg/L+IBA0. lmg+PVP (聚乙烯吡咯烷酮）500mg/L的培養(yǎng)基 中進(jìn)行培養(yǎng)，每升培養(yǎng)基附加30g蔗糖，8g瓊脂，然后放置在光照16h/d、光照20001u X，26°C 條件下進(jìn)行培養(yǎng)；
[0018] S103 :將獲得的煙富6號無菌外植體接種最優(yōu)培養(yǎng)基處理，即MS+6-BA0. 5mg/ L+IBAO. lmg/L瓊脂8g/L，光照20001ux的培養(yǎng)基中進(jìn)行繼代培養(yǎng)，每升附加30g蔗糖，8g瓊 脂；
[0019] S104 :選擇繼代培養(yǎng)獲得的生長健壯，高度大于1. 5cm，生長時間為20天的芽子， 接種于1/2MS+IBA1. Omg/L (蔗糖30g/L，瓊脂8g/L)生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)；
[0020] S105 :當(dāng)組培苗根長度達(dá)到2cm后，移到室外遮陰煉苗10?12天左右，然后將培 養(yǎng)容器瓶口打開，自然光下進(jìn)行開瓶煉苗2?4天后，將生根苗從培養(yǎng)基中取出，放入濃度 為0. 1 %多菌靈溶液中浸泡5min，并把根部多余的培養(yǎng)基清洗干凈，最后用清水沖洗2?3 次，然后用純鋸末移栽到的營養(yǎng)缽中。
[0021] 在步驟S105中，移栽苗的管理方式為：移栽后將生根苗在遮陰網(wǎng)下進(jìn)行管理，第 一周采用濃度為〇. 1%多菌靈溶液進(jìn)行噴灌，第二周每天用水噴灌一次，保持栽培基質(zhì)濕潤 透氣。待生根苗抽生出新芽之后即可移出遮陰網(wǎng)。
[0022] 本發(fā)明的具體步驟如下：
[0023] 步驟一，初代培養(yǎng)
[0024] 蘋果品種煙富6號為材料，選擇生長健壯無病蟲害的母樹，于3月份取1年生枝 條，放置25°C的溫室內(nèi)進(jìn)行水培（每升水含有30g蔗糖），每隔3d換一次水并剪掉舊剪口， 當(dāng)水培的一年生枝條上的芽抽生為1. 5?2. 0cm時，剪取嫩芽，去除展開葉片，在自來水下 沖洗6?8h，用75%酒精處理8s，0. 1 %升汞處理7min，進(jìn)行消毒處理后，用超聲波清洗機(jī) 清洗3min，再用無菌水沖洗3?4次，將處理好的嫩芽接種到MS+6-BA0. 5mg/L+IBA0. lmg/ L+不同濃度處理（0、0. 3、0. 5、0. 7、1.0g/L)的聚乙烯吡咯烷酮（PVP)的培養(yǎng)基中進(jìn)行培 養(yǎng)，每升培養(yǎng)基附加30g蔗糖，8g瓊脂，每個三角瓶接3個芽，每處理15瓶，然后放置在光 照16h/d、光照20001u X，26°C條件下進(jìn)行培養(yǎng)，14d后分別調(diào)查污染率、褐化率、成活率，得 出煙富6號的初代培養(yǎng)是最適宜的培養(yǎng)基為MS+6-BA0. 5mg/L+IBA0. lmg+PVP500mg/L (蔗糖 30g/L，瓊脂 8g/L);
[0025] 步驟二，繼代培養(yǎng)
[0026] 將獲得的無菌外植體接種到含有不同濃度6-BA行繼代培養(yǎng)，每升附加30g蔗糖， 8g瓊脂，每瓶3株，每個處理10瓶，重復(fù)3次，煙富6號的最優(yōu)培養(yǎng)基為，即MS+6-BA0. 5mg/ L+IBAO. lmg/L (瓊脂 8g/L，光照 20001ux);
[0027] 步驟三，生根培養(yǎng)
[0028] 選擇繼代培養(yǎng)獲得的生長健壯，高度大于1. 5cm的植株，生長時間為20天的芽 子，接種于1/2MS+不同濃度IBA處理（0、1.0、0. 9、1.0、1. lmg/L)的生根培養(yǎng)中進(jìn)行生 根培養(yǎng)，每瓶接種3個，每個處理10瓶，重復(fù)3次，得到煙富6號最適宜的生根培養(yǎng)基為 1/2MS+IBA1. Omg/L (蔗糖 30g/L，瓊脂 8g/L);
[0029] 步驟四，煉苗移栽
[0030] 當(dāng)組培苗根長度達(dá)到2cm后，移到室外遮陰煉苗10?12天左右，然后將培養(yǎng)容器 瓶口打開，自然光下進(jìn)行開瓶煉苗2?4天后，將生根苗從培養(yǎng)基中取出，放入濃度為0. 1% 多菌靈溶液中浸泡5min，并把根部多余的培養(yǎng)基清洗干凈，最后用清水沖洗2?3次，然后 移栽到容量相同的不同基質(zhì)處理（純鋸末、鋸末+基質(zhì)、純基質(zhì)、基質(zhì)+珍珠巖）的營養(yǎng)缽 中，移栽苗的管理方式為：將生根苗在遮陰網(wǎng)下進(jìn)行管理，第一周采用濃度為〇. 1 %多菌靈 溶液進(jìn)行噴灌，第二周每天用水噴灌一次，保持移栽基質(zhì)濕潤透氣。于14天后統(tǒng)計煉苗移 栽成活率，得出用純鋸末的煉苗移栽成活率最好。
[0031] 通過以下的實(shí)驗(yàn)和數(shù)據(jù)對本發(fā)明的原理做進(jìn)一步的說明：
[0032] 1、參考表1不同濃度PVP處理對外植體生長的影響；
[0033] 表1不同濃度PVP處理對外植體生長的影響
[0034]
【權(quán)利要求】
1. 一種蘋果品種煙富6號組培快繁的方法，其特征在于，該蘋果品種煙富6號組培快繁 的方法包括以下步驟： 步驟一，以蘋果品種煙富6號為材料，用超聲波清洗機(jī)清洗3min，再用無菌水沖洗3? 4次，將處理好的嫩芽接種到聚乙烯吡咯烷酮500mg/L的培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)；每升培養(yǎng)基加 3〇g蔗糖，8g瓊脂，然后放置在光照16h/d、光照20001u X，26°C條件下進(jìn)行培養(yǎng)； 步驟二，將獲得的無菌外植體接種到MS+6-BA0. 5mg/L+IBA0. lmg/L，光照20001ux的培 養(yǎng)基中進(jìn)行繼代培養(yǎng)，每升培養(yǎng)基中加30g蔗糖，8g瓊脂； 步驟三，選擇繼代培養(yǎng)獲得的生長健壯，高度大于1. 5cm的植株，生長時間為20天的芽 子，接種于1/2MS+IBA1. Omg/L生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)，每升培養(yǎng)基中附加30g蔗糖。
2. 如權(quán)利要求1所述的蘋果品種煙富6號組培快繁的方法，其特征在于，在步驟五中， 在步驟一用超聲波清洗機(jī)清洗之前，以蘋果品種煙富6號為材料，選擇生長健壯無病蟲害 的母樹，于3月份剪取1年生枝條，放置25°C的溫室內(nèi)進(jìn)行水培，水培為每升水含有30g蔗 糖，每隔3d換一次水并剪掉水培枝條的舊剪口，當(dāng)水培的一年生枝條上的芽抽生為1. 5? 2. 0cm時，剪取嫩芽，去除展開葉片，在自來水下沖洗6?8h，用75%酒精處理8s，0. 1%升 萊處理7min。
3. 如權(quán)利要求1所述的蘋果品種煙富6號組培快繁的方法，其特征在于，在步驟五中， 在步驟三的生根培養(yǎng)步驟之后，組培苗根長度達(dá)到2cm，移到室外遮陰煉苗10?12天，然后 將培養(yǎng)容器瓶口打開，自然光下進(jìn)行開瓶煉苗2?4天后，將生根苗從培養(yǎng)基中取出，放入 濃度為〇. 1 %多菌靈溶液中浸泡5min，并把根部多余的培養(yǎng)基清洗干凈，最后用清水沖洗 2?3次，然后用純鋸末移栽到的營養(yǎng)缽中。
4. 如權(quán)利要求3所述的蘋果品種煙富6號組培快繁的方法，其特征在于，在步驟五中， 移栽苗的管理方式為：移栽后將生根苗在遮陰網(wǎng)下進(jìn)行管理，第一周采用濃度為〇. 1 %多 菌靈溶液進(jìn)行噴灌，第二周每天用水噴灌一次，保持移栽基質(zhì)濕潤透氣，待生根苗抽生出新 芽之后即移出遮陰網(wǎng)。
【文檔編號】A01G31/00GK104054549SQ201410333455
【公開日】2014年9月24日 申請日期:2014年7月14日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月14日
【發(fā)明者】韓明玉, 王超, 張東, 陳錫龍, 韓靜, 趙彩平 申請人:西北農(nóng)林科技大學(xué)