甘薯近緣野生種抗莖線蟲病抗性鑒定方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種甘薯近緣野生種抗莖線蟲病抗性鑒定方法，屬農(nóng)作物近緣野生種病害抗性鑒定方法。將待鑒定的甘薯野生種栽種于盛有消毒土壤的花盆中，每盆栽種1棵。用根部滴加法向每棵野生種苗接種200頭莖線蟲，后在25℃，80%濕度，光周期14/10（L/D）的條件下培養(yǎng)。每天適量澆水，將花盆中土壤濕度控制在18-25%范圍內(nèi)。培養(yǎng)40天后，挖取野生種地下莖部分，用解剖剪將莖桿縱向剖開，測(cè)量莖桿內(nèi)莖線蟲病受害面積，根據(jù)受害部分占莖桿的比例劃分病情指數(shù)，確定野生種的抗性等級(jí)。該鑒定方法處理手段科學(xué)有效，操作過(guò)程簡(jiǎn)單，實(shí)驗(yàn)周期短，且能夠避免試驗(yàn)材料對(duì)環(huán)境造成的污染。試驗(yàn)結(jié)果能夠全面的體現(xiàn)甘薯近緣野生種對(duì)莖線蟲病的抗性水平。
【專利說(shuō)明】甘薯近緣野生種抗莖線蟲病抗性鑒定方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種農(nóng)作物近緣野生種抗莖線蟲病的抗性鑒定方法，具體的說(shuō)是一種甘薯近緣野生種抗莖線蟲病的抗性鑒定方法，屬于農(nóng)業(yè)植物保護(hù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]我國(guó)是世界第一大甘薯生產(chǎn)國(guó)，近年甘薯種植面積約為7000萬(wàn)畝，占世界甘薯種植面積的50.0%左右。甘薯莖線蟲病是影響甘薯產(chǎn)量和品質(zhì)最為嚴(yán)重的病害之一，經(jīng)南京農(nóng)業(yè)大學(xué)丁再福等鑒定，甘薯莖線蟲病的病原為馬鈴薯腐爛莖線蟲(Ditylenchusdestructor Thome),屬線蟲綱,墊刃目，莖線蟲屬。甘薯莖線蟲病在我國(guó)主要分布在河北、河南、山東、山西、安徽、江蘇等省。該病害在甘薯貯藏期可導(dǎo)致爛窖，育苗期可引起爛床。大田期甘薯受害后，薯塊出現(xiàn)糠心，表皮龜裂等癥狀，一般年份可引起甘薯減產(chǎn)10-20%，嚴(yán)重年份可達(dá)50-60%，甚至絕收，現(xiàn)已成為我國(guó)北方薯區(qū)最為嚴(yán)重的病害之一。抗性育種是控制莖線蟲病最為經(jīng)濟(jì)有效的方法，然而，在現(xiàn)有的甘薯品種中，可利用的抗性材料十分有限。自1949年以來(lái)，我國(guó)94%育成品種與南瑞苕和勝利百號(hào)有血緣關(guān)系，導(dǎo)致甘薯遺傳背景狹窄，制約了甘薯品種改良的進(jìn)度和質(zhì)量。甘薯近緣野生資源十分豐富，其中很多野生種具有抗病蟲害的優(yōu)良基因，這為從根本上解決甘薯遺傳基礎(chǔ)狹窄，有效資源匱乏，品種遺傳改良緩慢等問(wèn)題提供了可能。因此開展甘薯近緣野生種有益性狀鑒定工作能夠有效的促進(jìn)甘薯品種改良和對(duì)病蟲害抗性的提高。與甘薯不同，并不是所有甘薯野生種都能形成塊狀根，所以打孔接種的抗線鑒定方法不適用于野生種，且目前尚未見標(biāo)準(zhǔn)的甘薯野生種抗莖線蟲病抗性鑒定方法。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003]本發(fā)明提供一種甘薯近緣野生種抗莖線蟲病抗性鑒定方法，操作過(guò)程簡(jiǎn)單，實(shí)驗(yàn)周期短，且能夠避免試驗(yàn)材料對(duì)環(huán)境造成的污染。試驗(yàn)結(jié)果能夠全面的體現(xiàn)甘薯近緣野生種對(duì)莖線蟲病的抗性水平。是評(píng)價(jià)甘薯野生種抗莖線蟲病抗性的有效方法。
[0004]本發(fā)明是以如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:一種甘薯近緣野生種抗莖線蟲病抗性鑒定方法，將待鑒定的甘薯野生種單棵栽種于花盆中，采用根部滴加法向每盆接種200頭莖線蟲，40天后挖取野生種地下莖部分，對(duì)莖線蟲病的為害情況進(jìn)行調(diào)查，評(píng)價(jià)甘薯野生種抗莖線蟲病抗性；具體按如下步驟進(jìn)行:
[0005](I)莖線蟲培養(yǎng):在田間采集莖線蟲病發(fā)病薯塊，帶回實(shí)驗(yàn)室后用淺盤法分離莖線蟲；鏡檢確定為甘薯莖線蟲后，用1%硫酸鏈霉素消毒，滅菌水沖洗3次，采用打孔法將莖線蟲接種于莖線蟲高感品種栗子香薯塊中，用石蠟封口，置于25°C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，備用；
[0006](2)待測(cè)材料準(zhǔn)備:向直徑為IOcm的圓形塑料花盆中裝入Ikg滅菌后的土壤，將待測(cè)甘薯野生種栽種于花盆中，每盆栽種I棵。將甘薯野生種防治于植物生長(zhǎng)間中，在250C，80%濕度，光周期14/10 (L/D)的條件下培養(yǎng)；每天；澆水，將花盆中土壤濕度大約控制在18-25%范圍內(nèi)；[0007](3)待甘薯野生種幼苗長(zhǎng)出4片真葉時(shí)接入莖線蟲。莖線蟲接種時(shí)，先在幼苗根圍打一深5cm的小孔，將5ml消毒的莖線蟲懸浮液(含200頭莖線蟲)加入到小孔中，后用土將孔填平；每個(gè)鑒定的野生種栽種5盆，即5次重復(fù)，可以甘薯品種栗子香為感病對(duì)照；接種莖線蟲40天后對(duì)莖線蟲病的發(fā)病情況進(jìn)行調(diào)查；
[0008](4)發(fā)病情況調(diào)查:將野生種苗挖出后用清水沖洗干凈，用解剖剪將地下莖剖開，測(cè)量受害部寬度，根據(jù)受害部所占比例對(duì)病害進(jìn)行分級(jí)；
[0009]分級(jí)標(biāo)準(zhǔn):
[0010]O級(jí):全株不發(fā)病；
[0011]I級(jí):開始發(fā)病，尚不明顯；
[0012]2級(jí):受害部達(dá)全株1/3 ;
[0013]3級(jí):受害部達(dá)全株1/2 ;
[0014]4級(jí):受害部達(dá)全株2/3 ;
[0015]5級(jí):全株發(fā)病。
[0016]對(duì)樣品進(jìn)行分級(jí)后，根據(jù)以下公式計(jì)算病情指數(shù):
[0017]
【權(quán)利要求】
1.一種甘薯近緣野生種抗莖線蟲病抗性鑒定方法，其特征是:將待鑒定的甘薯野生種單棵栽種于花盆中，采用根部滴加法向每盆接種200頭莖線蟲，40天后挖取野生種地下莖部分，對(duì)莖線蟲病的為害情況進(jìn)行調(diào)查，評(píng)價(jià)甘薯野生種抗莖線蟲病抗性；具體按如下步驟進(jìn)行: (1)莖線蟲培養(yǎng):在田間采集莖線蟲病發(fā)病薯塊，帶回實(shí)驗(yàn)室后用淺盤法分離莖線蟲；鏡檢確定為甘薯莖線蟲后，用1%硫酸鏈霉素消毒，滅菌水沖洗3次，采用打孔法將莖線蟲接種于莖線蟲高感品種栗子香薯塊中，用石蠟封口，置于25°C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，備用； (2)待測(cè)材料準(zhǔn)備:向直徑為IOcm的圓形塑料花盆中裝入Ikg滅菌后的土壤，將待測(cè)甘薯野生種栽種于花盆中，每盆栽種I棵；將甘薯野生種防治于植物生長(zhǎng)間中，在25°C，80%濕度，光周期14/10 (L/D)的條件下培養(yǎng)；每天澆水，將花盆中土壤濕度控制在18-25%范圍內(nèi)； (3)待甘薯野生種幼苗長(zhǎng)出4片真葉時(shí)接入莖線蟲；莖線蟲接種時(shí)，先在幼苗根圍打一深5cm的小孔，將5ml消毒的莖線蟲懸浮液，含200頭莖線蟲)加入到小孔中，后用土將孔填平；每個(gè)鑒定的野生種栽種5盆，即5次重復(fù)，可以甘薯品種栗子香為感病對(duì)照；接種莖線蟲40天后對(duì)莖線蟲病的發(fā)病情況進(jìn)行調(diào)查； (4)發(fā)病情況調(diào)查:將野生種苗挖出后用清水沖洗干凈，用解剖剪將地下莖剖開，測(cè)量受害部寬度，根據(jù)受害部所占比例對(duì)病害進(jìn)行分級(jí)； 分級(jí)標(biāo)準(zhǔn): O級(jí):全株不發(fā)病； I級(jí):開始發(fā)病，尚不明顯； 2級(jí):受害部達(dá)全株1/3 ； 3級(jí):受害部達(dá)全株1/2 ； 4級(jí):受害部達(dá)全株2/3; 5級(jí):全株發(fā)病； 對(duì)樣品進(jìn)行分級(jí)后，根據(jù)以下公式計(jì)算病情指數(shù):病情撤=Σ(錄纖纖X雛纖)χ100%調(diào)査苗纖X 5 分級(jí)標(biāo)準(zhǔn):高感:病指> 80% ;感病:80% >病指> 60% ;中抗:60% >病指> 40% ;抗病:40% >病指≥20% ;高抗:20% >病指。
【文檔編號(hào)】A01K67/033GK103798044SQ201410058578
【公開日】2014年5月21日 申請(qǐng)日期:2014年2月21日 優(yōu)先權(quán)日:2014年2月21日
【發(fā)明者】徐振, 謝逸萍, 趙永強(qiáng), 曹清河, 孫厚俊, 唐君, 楊冬靜, 張成玲, 魏猛 申請(qǐng)人:江蘇徐州甘薯研究中心