利用段木制作蜜環菌菌種的方法
【專利摘要】本發明屬于菌種栽培【技術領域】，涉及一種利用段木制作蜜環菌菌種的方法，該方法包括：A、拌料：按照培養基配方稱取培養料，混合均勻，加水至含水量為55%-70%；所述培養基按重量份計由以下組分組成：雜木樹枝的枝段干重8-12份、麩皮12-18份、玉米粉8-12份、黃豆粉2-4份、白糖1份、石膏粉1份、磷酸二氫鉀1份；B、將上述混勻的培養料進行裝袋、滅菌、接種；C、培養：將接種后的料袋于20-25℃下培養，至蜜環菌菌絲長滿料袋即可。該方法中的培養基組分和配比適宜，營養均衡，進行蜜環菌菌種的制作，培養基保水性強，營養充分，獲得的蜜環菌菌絲粗壯，成活率高，產量高。
【專利說明】利用段木制作蜜環菌菌種的方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于菌種栽培【技術領域】，涉及一種利用段木制作蜜環菌菌種的方法。
【背景技術】
[0002]蜜環菌(Armillaria mellea)又稱小蜜環菌、蜜色環菌、蜜蘑，屬于真菌門，擔子菌亞門，層菌綱，無隔擔子菌亞綱，傘菌目，口蘑科，蜜環菌屬，是一種藥食兼用菌。其子實體一般中等大；菌蓋直徑4-14cm，淡土黃色、蜂蜜色至淺黃褐色；老后棕褐色，中部有平伏或直立的小鱗片，有時近光滑，邊緣具條紋；菌肉白色；菌褶白色或稍帶肉粉色，老后常出現暗褐色斑點；菌柄細長，圓柱形，稍彎曲，同菌蓋色，纖維質，內部松軟變至空心，基部稍膨大；菌環白色，生柄的上部，幼時常呈雙層，松軟，后期帶奶油色。
[0003]研究發現，蜜環菌中含有胞內多糖、萜類化合物、酯類化合物、氨基酸等多種營養物質，具有定驚、熄風、健腦、增強人體免疫力、抗腫瘤等多種藥理活性，可以治療多種疾病。此外，蜜環菌還是名貴中藥天麻和豬苓栽培必備的共生菌，蜜環菌的菌索侵入天麻塊莖和豬苓菌核后被后者消化利用，成為它們的營養源。蜜環菌主要生活在樹林中木材上，尤以枯枝落葉和死樹營腐生生活；又可寄生在活樹的根部造成樹木的根腐營寄生生活，過著兼性寄生的苗頭生活方式。人們根據它的這種生活方式將蜜環菌菌種接種在木材上和其他培養料上，用來作為栽培天麻的材料。
[0004]本發明所指的蜜環菌菌種是人工培養進行擴大繁殖和用于生產的純菌絲體和菌索，為生產種或栽培種。菌種質量好壞直接影響栽培的成敗和產量的高低，只有優良的菌種才能獲得高產和優質的產品，因此生產優良的菌種是食用菌栽培的一個極其重要的環節。用于擴大繁殖成蜜環菌菌種的原種，一般可從以下三種途徑獲得:1)通過自制或引進健壯的純菌種作種，人工培養的固體純菌種；2)采集、分離純化得到的野生菌種；3)從培菌和栽種天麻的單位直接引購的菌種。在實際生產中，大多采用第三種途徑獲得原種，并對原種進行擴大繁殖，從而獲得蜜環菌菌種，再直接用于天麻等的栽植。
[0005]CN102342219B中公開了一種瓶裝蜜環菌菌種的制備方法，其使用的培養基組成為:雜木屑82.7%、小麥麩10%、玉米粉5%、石膏粉1%、白糖1%、磷酸二氫鉀0.2%、硫酸鎂
0.1% ;其制備方法包括對干培養料進行裝瓶、裝料后的菌種瓶浸入水池中灌水的步驟。該方法解決了培養料太濕，不易裝瓶，以及加水多滅菌時水分溢出，污染封口物的問題。但是，這種方法制作的培養基，濕度難以控制，培養料潤濕也不均勻。另外，以雜木屑為主料的培養基，本身還存在菌種菌絲長勢弱、不致密，在菌材培養中不耐高溫、高濕等環境，接種后菌種容易死亡，成功接種率低等問題。
[0006] 隨著天麻栽培及蜜環菌菌種制作技術的發展，蜜環菌生產種質量獲得了較大的改善，當前大規模生產中一般以小的雜木短樹棍為主要原料通過裝瓶、滅菌、接種并通過一定時間的培養，待菌絲長滿后作為生產種使用。但是，就雜木短樹棍蜜環菌生產種制作技術而言，已公開的培養基成分和制備方法在實際生產中并不能達到理想的效果，突出的缺點就在于培養基營養不均衡，菌種成活率低、產量低，以及段木保水性差等。[0007]為解決上述現有技術存在的問題，發明人對段木制作蜜環菌菌種的方法進行了改進發明。
【發明內容】
[0008]有鑒于此，本發明首先提供一種營養豐富、適合培養蜜環菌菌種的培養基。
[0009]為實現上述目的，本發明的技術方案為:
[0010]用于培養蜜環菌菌種的培養基，按重量份計由以下組分組成:雜木樹枝的枝段干重8-12份、麩皮12-18份、玉米粉8-12份、黃豆粉2_4份、白糖1份、石膏粉1份、磷酸二氫鉀1份。
[0011]所述雜木樹枝可根據當地的林木資源，選用適當的闊葉樹樹種，一般常用青岡、樺木、野櫻桃、栗樹、牛奶五樹、水冬瓜、竹子、葛根、法國梧桐、洋槐等。木質結構緊密、緊實的樹種，如青R接菌較慢、耐腐；木質結構不很緊密的樹種，如樺木接菌較快，但不耐腐。使用時，可把耐腐和不耐腐的樹材混合使用。進一步，優選新砍的鮮樹枝，鮮樹枝養分集中，雜菌感染少，發菌快，還可延長菌材的使用時間。用半干或脫水20%-30%的干的、未朽爛、無雜菌感染的樹枝制作，或干鮮樹枝混合使用亦可。優選帶皮的樹枝，因韌皮部和木質部交界面是最適宜蜜環菌生長的地方。優選直徑在3cm以下,砍成長度為l-6cm的小樹枝。
[0012]進一步，所述用于培養蜜環菌菌種的培養基，按重量份計由以下組分組成:新鮮雜木樹枝的枝段干重9份、麩皮15份、玉米粉10份、黃豆粉3份、白糖1份、石膏粉1份、磷酸二氫鉀1份。
[0013]進一步,所述樹枝的枝段直徑為1-1.5cm,長為2_3cm。該大小的樹枝最適合蜜環菌的生產，并且不會妨礙培養料的裝瓶或裝袋。
[0014]本發明用于培養蜜環菌菌種的培養基，其組分和配比適宜，在各組分的協同作用下，為蜜環菌生長提供了充分的碳源`、氮源、微量元素、支撐物等，營養均衡，特別適合蜜環菌的萌發和生長。
[0015]本發明在上述提供的培養基的基礎上，還提供一種成活率高、產量高的利用段木制作蜜環菌菌種的方法。
[0016]為實現上述目的，本發明的技術方案為:
[0017]利用段木制作蜜環菌菌種的方法，包括以下步驟:
[0018]A、拌料:按照培養基配方稱取培養料，混合均勻，加水至含水量為55%_70% ;所述培養基按重量份計由以下組分組成:雜木樹枝的枝段干重8-12份、麩皮12-18份、玉米粉8-12份、黃豆粉2-4份、白糖1份、石膏粉1份、磷酸二氫鉀1份；
[0019]B、將上述混勻的培養料進行裝袋、滅菌、接種；
[0020]C、培養:將接種后的料袋于20_25°C下培養，至蜜環菌菌絲長滿料袋即可。
[0021]進一步，利用段木制作蜜環菌菌種的方法，包括以下步驟:
[0022]A、拌料:按照培養基配方稱取培養料，混合均勻，加水至含水量為60% ;所述培養基按重量份計由以下組分組成:新鮮雜木樹枝的枝段干重9份、麩皮15份、玉米粉10份、黃豆粉3份、白糖1份、石膏粉1份、磷酸二氫鉀1份；
[0023]B、將上述混勻的培養料進行裝袋、滅菌、接種；
[0024]C、培養:將接種后的料袋于20_25°C下培養35_45天，發出的菌絲即可用于生產。[0025]進一步，所述樹枝的枝段直徑為1-1.5cm,長為2_3cm。
[0026]進一步，所述拌料是先將樹枝的枝段浸泡于水中，待其泡發至原來重量的0.5倍以上取出，再與培養基的其它組分干拌成培養料，并用浸泡的水噴灑培養料至其總含水量為60%。這樣有利于水分浸透樹枝，充分進入樹枝內部，且水分不容易散失，提高培養基保水性。在該過程中，對于易長菌的樹木，還可在浸泡的水中加入0.15%的多菌靈或滅霉靈浸泡，以減少雜菌感染。
[0027]進一步，所述用浸泡的水噴灑培養料是多次進行的，每次噴灑至有水滴出即停止，于通風處放置至無水滴出，再繼續噴灑，直至達到所需的含水量。該操作也有利于水分充分進入培養基內部，且水分不容易散失，提高培養基保水性。
[0028]進一步，所述培養基的拌料過程中，用到的水的pH為5.5-6.5。該pH環境下，蜜環菌生長良好。
[0029]進一步，所述裝袋是將拌勻后的培養料裝入菌種瓶或者菌種袋。所述菌種袋可為聚乙烯或聚丙烯材料的塑料袋。
[0030]進一步，所述滅菌是將裝料后的料袋于100°C滅菌8-12小時，或者于120°C滅菌1-2小時。
[0031]進一步，所述培養過程中，于第10天和第25天向料袋口噴灑三十烷醇，濃度分別為0.2mg/m2和0.05mg/m2。 三十燒醇是一種天然的長碳鏈植物生長調節劑,化學名稱正三十烷醇，結構式CH3 (CH2) 28CH20H,又稱蜂花醇，是從蜜蜂蠟中純化提取的天然生物產品，對人畜無害及副作用，對環境無污染。將其用于蜜環菌的生長調節，可縮短密環菌菌種的培養時間，提高生產效率。由于三十烷醇不溶于水，可將其制成混懸溶液進行噴灑。
[0032]本發明利用段木制作蜜環菌菌種的方法，獲得的培養基組分和配比適宜，在各組分的協同作用下，為蜜環菌生長提供了充分的碳源、氮源、微量元素、支撐物等，營養均衡，特別適合蜜環菌的萌發和生長；采用上述方法進行蜜環菌菌種的制作，培養基保水性強，營養充分，獲得的蜜環菌菌絲粗壯，成活率高，產量高。
【具體實施方式】
[0033]以下對本發明的優選實施例和對照例進行詳細描述。本實施例和對照例中用于擴大繁殖成蜜環菌菌種的原種購買自河南農富康生物科技有限公司；其中未注明具體條件的實驗方法，參照NY/T528-2010《食用菌菌種生產技術規程》標準要求進行。
[0034]實施例1
[0035]將直徑為1-1.5cm的新鮮雜木樹枝切成2_3cm長的小段9份(按干重計)、麩皮15份、玉米粉10份、黃豆粉3份、白糖1份、石膏粉1份和磷酸二氫鉀1份，拌勻，控制含水量為60%。將混勻的培養料裝入菌種瓶，于100°C高溫滅菌10小時。按NY/T528-2010《食用菌菌種生產技術規程》標準要求進行接種培養等操作管理，于20-25°C下培養，45天左右蜜環菌菌絲即長滿整個菌種瓶。獲得的蜜環菌菌種菌絲粗壯，菌索密集，菌索韌。
[0036]實施例2
[0037]將直徑為1-1.5cm的新鮮雜木樹枝切成2-3cm長的小段9份(按干重計)、麩皮15份、玉米粉10份、黃豆粉3份、白糖1份、石膏粉1份和磷酸二氫鉀1份，拌勻，控制含水量為60%。將混勻的培養料裝入菌種瓶，于120°C滅菌1.5小時。按NY/T528-2010《食用菌菌種生產技術規程》標準要求進行接種培養等操作管理，于20-25°C下培養，40天左右蜜環菌菌絲即長滿整個菌種瓶。獲得的蜜環菌菌種菌絲粗壯，菌索密集，菌索韌。
[0038]實施例3
[0039]將直徑為1-1.5cm的新鮮雜木樹枝切成2-3cm長的小段9份(按干重計)、麩皮15份、玉米粉10份、黃豆粉3份、白糖1份、石膏粉1份和磷酸二氫鉀1份，拌勻，控制含水量為60%。將混勻的培養料裝入菌種袋，于100°C高溫滅菌10小時。按NY/T528-2010《食用菌菌種生產技術規程》標準要求進行接種培養等操作管理，于20-25°C下培養，并于第10天向料袋口噴灑三十烷醇，濃度為0.2mg/m2,32天左右蜜環菌菌絲即長滿整個菌種瓶。獲得的蜜環菌菌種菌絲粗壯，菌索密集，菌索韌。
[0040]實施例4
[0041]將直徑為1-1.5cm的新鮮雜木樹枝切成2-3cm長的小段9份(按干重計)、麩皮15份、玉米粉10份、黃豆粉3份、白糖1份、石膏粉1份和磷酸二氫鉀1份，拌勻，控制含水量為60%。將混勻的培養料裝入菌種袋，于100°C高溫滅菌10小時。按NY/T528-2010《食用菌菌種生產技術規程》標準要求進行接種培養等操作管理，于20-25°C下培養，并于第10天和第25天向料袋口噴灑三十烷醇，濃度分別為0.2mg/m2和0.05mg/m2,27天左右蜜環菌菌絲即長滿整個菌種瓶。獲得的蜜環菌菌種菌絲粗壯，菌索密集，菌索韌。
[0042]實施例5
[0043]準備培養基配料:直徑為1-1.5cm的新鮮雜木樹枝切成2-3cm長的小段9份(按干重計)、麩皮15份、玉米粉10份、黃豆粉3份、白糖1份、石膏粉1份和磷酸二氫鉀1份。先將樹枝的枝段浸泡于水中，待其泡發至原來重量的0.5倍以上取出，再與培養基的其它組分干拌成培養料，并用浸泡的水多次噴灑培養料至其總含水量為60%。將混勻的培養料裝入菌種瓶，于100°C高溫滅菌12小時。按NY/T528-2010《食用菌菌種生產技術規程》標準要求進行接種培養等操作管理，于20-`25°C下培養，42天左右蜜環菌菌絲即長滿整個菌種瓶。獲得的蜜環菌菌種菌絲粗壯，菌索密集，菌索韌。
[0044]實施例6
[0045]準備培養基配料:直徑為1-1.5cm的新鮮雜木樹枝切成2_3cm長的小段9份(按干重計)、麩皮15份、玉米粉10份、黃豆粉3份、白糖1份、石膏粉1份和磷酸二氫鉀1份。先將樹枝的枝段浸泡于水中，待其泡發至原來重量的0.5倍以上取出，再與培養基的其它組分干拌成培養料，并用浸泡的水多次噴灑培養料至其總含水量為60%，該過程中水的pH維持在5.5-6.5。將混勻的培養料裝入菌種瓶，于120°C滅菌2小時。按NY/T528-2010《食用菌菌種生產技術規程》標準要求進行接種培養等操作管理，于20-25°C下培養，43天左右蜜環菌菌絲即長滿整個菌種瓶。獲得的蜜環菌菌種菌絲粗壯，菌索密集，菌索韌。
[0046]對照例I
[0047]將直徑為1-1.5cm的新鮮雜木樹枝切成2-3cm長的小段9份(按干重計)、麩皮15份、玉米粉10份、白糖1份、石膏粉1份和磷酸二氫鉀1份，拌勻，控制含水量為60%。將混勻的培養料裝入菌種瓶，于100°c高溫滅菌10小時。按NY/T528-2010《食用菌菌種生產技術規程》標準要求進行接種培養等操作管理，于20-25°C下培養，46天左右蜜環菌菌絲長到最佳狀態。獲得的蜜環菌菌種菌絲細脆，菌索稀疏，小部分料袋未萌發菌絲。
[0048]對照例2[0049]將直徑為1-1.5cm的陳放了 2_3年的雜木樹枝切成2_3cm長的小段4份(按干重計)、麩皮20份、玉米粉10份、白糖1份、石膏粉1份和磷酸二氫鉀1份，拌勻，控制含水量為60%。將混勻的培養料裝入菌種瓶，于120°C滅菌1.5小時。按NY/T528-2010《食用菌菌種生產技術規程》標準要求進行接種培養等操作管理，于20-25°C下培養，49天左右蜜環菌菌絲長到最佳狀態。獲得的蜜環菌菌種菌絲細脆，菌索極為稀疏，較多料袋未萌發菌絲。
[0050]對照例3
[0051 ] 將雜木屑78%、麩皮20%、石膏粉1%和白糖1%，拌勻，控制含水量為60%。將混勻的培養料裝入菌種瓶，于100°c高溫滅菌10小時。按NY/T528-2010《食用菌菌種生產技術規程》標準要求進行接種培養等操作管理，于20-25°C下培養，49天左右蜜環菌菌絲長到最佳狀態。獲得的蜜環菌菌種菌絲細脆，菌索稀疏。
[0052]采集實施例1-6和對照例1-3培養的蜜環菌菌索，稱重，以對照例3獲得的蜜環菌菌種重量為基準，統計結果如表1所示。
[0053]表1蜜環囷囷種廣星統計結果
[0054]
【權利要求】
1.利用段木制作蜜環菌菌種的方法，其特征在于，包括以下步驟: A、拌料:按照培養基配方稱取培養料，混合均勻，加水至含水量為55%-70%;所述培養基按重量份計由以下組分組成:雜木樹枝的枝段干重8-12份、麩皮12-18份、玉米粉8-12份、黃豆粉2-4份、白糖1份、石膏粉1份、磷酸二氫鉀1份； B、將上述混勻的培養料進行裝袋、滅菌、接種； C、培養:將接種后的料袋于20-25°C下培養，至蜜環菌菌絲長滿料袋即可。
2.根據權利要求1所述的利用段木制作蜜環菌菌種的方法，其特征在于，包括以下步驟: A、拌料:按照培養基配方稱取培養料，混合均勻，加水至含水量為60%;所述培養基按重量份計由以下組分組成:新鮮雜木樹枝的枝段干重9份、麩皮15份、玉米粉10份、黃豆粉3份、白糖1份、石膏粉1份、磷酸二氫鉀1份； B、將上述混勻的培養料進行裝袋、滅菌、接種； C、培養:將接種后的料袋于20-25°C下培養35-45天，發出的菌絲即可用于生產。
3.根據權利要求1或2所述的利用段木制作蜜環菌菌種的方法，其特征在于:所述樹枝的枝段直徑為1-1.5cm,長為2-3cm。
4.根據權利要求1所述的利用段木制作蜜環菌菌種的方法，其特征在于:所述拌料是先將樹枝的枝段浸泡于水中，待其泡發至原來重量的0.5倍以上取出，再與培養基的其它組分干拌成培養料，并用浸泡的水噴灑培養料至其總含水量為60%。
5.根據權利要求4所述的利用段木制作蜜環菌菌種的方法，其特征在于:所述用浸泡的水噴灑培養料是多次進行的，每次噴灑至有水滴出即停止，于通風處放置至無水滴出，再繼續噴灑，直至達到所需的含水量。
6.根據權利要求1、2、4或5所述的利用段木制作蜜環菌菌種的方法，其特征在于:所述水的PH為5.5-6.5。
7.根據權利要求1所述的利用段木制作蜜環菌菌種的方法，其特征在于:所述裝袋是將拌勻后的培養料裝入菌種瓶或者菌種袋。
8.根據權利要求1所述的利用段木制作蜜環菌菌種的方法，其特征在于:所述滅菌是將裝料后的料袋于100°C滅菌8-12小時，或者于120°C滅菌1_2小時。
9.根據權利要求1所述的利用段木制作蜜環菌菌種的方法，其特征在于:所述培養過程中，于第10天和第25天向料袋口噴灑三十烷醇，濃度分別為0.2mg/m2和0.05mg/m2。
10.用于培養蜜環菌菌種的培養基，其特征在于，按重量份計由以下組分組成:雜木樹枝的枝段干重8-12份、麩皮12-18份、玉米粉8-12份、黃丑粉2_4份、白糖1份、石骨粉I份、磷酸二氫鉀1份。
【文檔編號】C05G3/00GK103688751SQ201310681599
【公開日】2014年4月2日 申請日期:2013年12月12日 優先權日:2013年12月12日
【發明者】馬明山, 岳忠濤 申請人:重慶市福鑫洋食用菌有限公司