一種解除牡丹種子休眠的方法
【專利摘要】本發明提供一種解除牡丹種子休眠的方法，本發明建立了解除牡丹種子休眠的成套技術體系，該體系分為實生苗和離體種胚兩種途徑。實生苗途徑操作步驟：1000mg/LGA3浸泡24h；附含100mg/LGA3+1mg/LBA+3mg/LCa(NO3)24℃濕砂儲藏；泥炭、菜園土和珍珠巖（3∶6∶1）基質播種；10mg/LGA3+1mg/LBA+3mg/LCa(NO3)2葉面噴灑。離體種胚途徑操作步驟：1000mg/LGA3浸泡24h；100mg/LGA3+1mg/LBA+3mg/LCa(NO3)2去殼浸泡24h；添加5mg/LGA3+1mg/LBA+3mg/LCa(NO3)2的WPM培養基培養4周。本發明能簡便、快速、高效地解除牡丹種子休眠，大大縮短了牡丹成苗成花的時間跨度，為牡丹、芍藥等具休眠特性物種的后續開發利用提供了全新的技術平臺。
【專利說明】一種解除牡丹種子休眠的方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及生物領域，特別涉及一種解除牡丹種子休眠的方法。
【背景技術】
[0002]牡丹(Paeonia suffruticosa),另lj名富貴花、百兩金、木茍藥、鼠姑、鹿韭,洛陽花，為芍藥科芍藥屬木本植物，落葉灌木，素有“國色天香”、“花中之王”的美譽，為我國國花之首選。牡丹不僅有較高的觀賞價值，還具備很好的藥用價值。早在漢代，藥用植物典籍《神農本草經》就有牡丹被馴化入藥的記載。隨著牡丹在園林綠化、藥材儲備中市場價值的增大，催生了牡丹的經濟市場，整個市場已經形成了從種苗、盆花、切花、干花到規模化景觀開發和精細化精油提取等完整的產業鏈條，鏈條上每個環節都蘊藏著誘人的商機和花卉產業全新的經濟增長點。擴大繁殖系數，提高擴繁效率，開展牡丹種苗規模化生產，為市場快速高效提供各級優質牡丹苗木，成為當今牡丹生產與研究的主要關注點。
[0003]牡丹的種苗繁殖以種子播種方式為主，其中包括結籽稀少的重瓣型品種，只有極少部分不結籽的重瓣型品種采用分株或嫁接方式進行后代繁殖。然而，牡丹種子在自然條件下具有休眠特性，具體表現在胚根(下胚軸)和胚芽(上胚軸)的休眠，尤以上胚軸休眠更為深沉。通常情況下，牡丹種子靠越冬低溫打破休眠而自然萌發成苗需兩年時間，開花需10年左右，時間跨度過長，生產效率過低，生產成本過高，嚴重制約牡丹經濟的蓬勃興起。因此，能夠快速高效破除上胚軸休眠特性，有效提高種子的發芽率及發芽勢，縮短牡丹種子成苗成花時間跨度，對日益升溫的牡丹經濟來說，意義重大。
【發明內容】
[0004]本發明提供一種解除牡丹種子深度休眠的方法，快速破除牡丹上胚軸休眠特性，盡快緩解牡丹種苗供需矛盾。
[0005]為達到以上目的，本發明采用以下技術方案:
本發明通過對解除牡丹種子休眠影響因素的探索，建立了解除牡丹種子深度休眠的成套技術體系，該體系分為實生苗和離體種胚兩種途徑。
[0006]實生苗途徑操作步驟:
(1)1000 mg/L GA3 浸泡 24 h ；
(2)附含100 mg/L GA3+ 1 mg/L BA + 3 mg/L Ca(N03)2 4°C濕砂儲藏；
(3)泥炭、菜園土和珍珠巖(3: 6: 1)基質播種；
(4)10 mg/L GA3 + 1 mg/L BA + 3 mg/L Ca(N03)2葉面噴灑。離體種胚途徑操作步驟:
(1)1000 mg/L GA3 浸泡 24 h ；
(2)100 mg/L GA3 + 1 mg/L BA + 3 mg/L Ca(N03)2 去殼浸泡 24 h ；
(3)添加5 mg/L GA3 + 1 mg/L BA + 3 mg/L Ca(N03)2 的 WPM 培養基培養 4 周。實生苗途徑獲得明顯主莖的牡丹苗木歷時180天，離體種胚途徑獲得明顯主莖的離體芽苗歷時30天。
[0007]本發明的有益效果在于:
本發明建立了解除牡丹種子休眠的技術體系。其意義在于:簡便、快速、高效地解除牡丹種子深度休眠，大大縮短了牡丹成苗成花的時間跨度，為牡丹、芍藥等具深度休眠特性物種的后續開發利用提供了全新的技術平臺。
【具體實施方式】
[0008]以下結合具體實施例對本發明做進一步闡述:
1、植物材料:鳳丹種子，自2010年至2012年，每逢9月采集于上海植物園科研中心牡丹育種苗圃，采后去莢、陰涼處風干，塑料袋分裝，4°C或_20°C冰箱保存備用。
[0009]2、材料處理:選取成熟飽滿的牡丹種子，用自來水沖洗2-4 h,濾紙吸干；再用70%酒精浸泡60s，無菌水或蒸餾水沖洗3次，濾紙吸干，4°C或-20°C冰箱保存備用。
[0010]母液制備:1000 mg/L的赤霉素(GA3)溶液，用分析純酒精助溶，現配現用；1 mg/L BA，用1 mol/L HC1助溶，4°C冰箱保存；5 mg/L Ca (N03) 2，直接溶于水，常溫保存。
[0011]培養基:WPM基本培養基，按需添加植物激素等，121°C滅菌20 min，用于種胚離體培養。
[0012]播種基質:泥炭、菜園土和珍珠巖(3: 6: 1)的基質，用于播種已發根的牡丹種子；冷藏所用濕砂，使用前121°C滅菌60 min，用于儲存各處理的牡丹種子。
[0013]GA3預處理對發根的影響:選取飽滿的牡丹種子，用0，200，600, 1000, 1400，1800 mg/L的GA3浸泡24 h，棄液，留種子，溫水洗3次，風干，埋藏于濕砂中，黑暗條件下常溫儲藏。
[0014]GA3對出苗的影響:將1000 mg/L的GA3浸泡24 h的牡丹種子埋藏于附含0，50，100，150，200，250 mg/L GA3的濕砂中，黑暗條件下4°C儲藏。
[0015]GA3對實生苗上胚軸伸長的影響:用0，5，10,15,20, 30 mg/L GA3.灑處理6(2)獲得的小苗葉片，3天/次，持續噴灑2個月。
[0016]6^對離體種胚上胚軸伸長的影響:選取經1000 mg/L GA3浸泡24 h、去殼并用100mg/L GA3浸泡24 h的牡丹離體種胚為實驗對象，直接接種于附含0，1，3,5,7, 10 mg/LGA3的WPM培養基中。
【權利要求】
1.一種解除牡丹種子休眠的方法，其特征在于:建立了解除牡丹種子休眠的成套技術體系，該體系分為實生苗和離體種胚兩種途徑。
2.根據權利要求1所述實生苗途徑操作步驟，其特征在于:
(1)1000 mg/L GA3 浸泡 24 h ； (2)附含100 mg/L GA3 + I mg/L BA + 3 mg/L Ca(NO3)2 4°C濕砂儲藏； (3)泥炭、菜園土和珍珠巖(3: 6:1)基質播種； (4)10 mg/L GA3 + I mg/L BA + 3 mg/L Ca(NO3)2 葉面噴灑。
3.根據權利要求1所述離體種胚途徑操作步驟，其特征在于:
(1)1000 mg/L GA3 浸泡 24 h ； (2)100 mg/L GA3 + I mg/L BA + 3 mg/L Ca(NO3)22 去殼浸泡 24 h ； (3)添加5 mg/L GA3 + I mg/L BA + 3 mg/L Ca(NO3)2 的 WPM 培養基培養 4 周。
【文檔編號】A01C1/00GK104429217SQ201310417397
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2013年9月13日 優先權日:2013年9月13日
【發明者】王阿慧 申請人:王阿慧