專利名稱：用于動物頸內(nèi)注射的針頭的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實用新型涉及一種用于動物頸內(nèi)注射的針頭。
背景技術(shù)：
腦中風(fēng)是嚴(yán)重危害人類健康和生命安全的常見的難治性疾病，目前已成為世界范圍內(nèi)的頑癥之一。而且腦中風(fēng)存在著發(fā)病率高、致殘率高、死亡率高的“三高”現(xiàn)象。據(jù)統(tǒng)計，我國每年發(fā)生腦中風(fēng)病人達200萬，發(fā)病率高達120/10萬，致殘率更是高達了 75%。我國每年中風(fēng)病人死亡120萬。大鼠的腦中風(fēng)模型是研究該疾病最常用的動物模型。檢測候選藥物(化學(xué)藥物，具有治療功能的細(xì)胞、核酸、蛋白等)的療效時，對模型動物進行靜脈和口服給藥到達腦部的劑量只有1/6-1/5 (因腦部的血占心臟總排出量的1/6-1/5)，加上大腦屏障的存在，許多藥物不能穿透大腦屏障，使其臨床效果甚微。而采用頸總動脈(CCA)注射可以直接把全部藥物注入大腦的病變部位，使藥物直接發(fā)揮其療效。頸內(nèi)動脈(ICA)是頸總動脈在甲狀腺的后端向外側(cè)發(fā)出的一個小分支，從頸深部穿行達顱底，在鼓室后分出一大分支一翼腭動脈(PPA)，這也是頸內(nèi)動脈的唯一顱外分支。頸內(nèi)動脈從頸總動脈發(fā)出后走行5mm后便發(fā)出翼腭動脈。頸內(nèi)動脈主干分與翼腭動脈和頸內(nèi)動脈形成“Y”形結(jié)構(gòu)。翼腭動脈行向外側(cè)，相當(dāng)于人類上頜動脈，分支分布于眼眶、鼻腔和部分口腔結(jié)構(gòu)以及硬腦膜。頸內(nèi)動脈相對行于內(nèi)側(cè)，沿鼓室內(nèi)側(cè)延伸一小段距離后進入顱腔，發(fā)出顱內(nèi)分支。目前常用的頸內(nèi)注射方法有兩種:一種是導(dǎo)管注射法，另外一種是用注射針直接注射法。前者注射前需要先置導(dǎo)管于頸內(nèi)動脈內(nèi)，后者多采用價格昂貴的Hamilton針(針孔位于針尖部位)進行直接注射。導(dǎo)管的方法容易在留在頸內(nèi)動脈內(nèi)的導(dǎo)管周圍形成微血栓，直接進針法不但在進針和出針是容易造成大出血，而且操作時要求非常高，否則容易戳破動脈管壁。更為不便的是，上述兩種方法皆需要結(jié)扎翼腭動脈。翼腭動脈位置很深，實驗中常需要剪開二腹肌后腹才能暴露，結(jié)扎該動脈具有比較大的難度，容易導(dǎo)致血管斷裂出血，對大鼠造成較大的損傷。此外，翼腭動脈起始部的舌咽神經(jīng)叢的分離亦是精細(xì)的操作。而且翼腭動脈在永久性閉塞情況下,頸內(nèi)動脈內(nèi)的栓線周圍容易形成血栓對再灌注成功率有影響。
實用新型內(nèi)容本實用新型的目的是提供一種用于動物頸內(nèi)注射的針頭。本實用新型提供了一種注射針頭，它包括注射器針頭的本體1，其特征在于:所述針頭的針尖2呈鈍圓形且沒有開口，所述針頭的出液孔3位于針頭本體的側(cè)壁上。由于針尖采用了鈍圓形，不容易在頸內(nèi)注射時戳破動脈管壁并造成大出血。根據(jù)動物的種類，可以選擇具體的針頭型號(管徑的大小和側(cè)口到針尖的距離
-rf* ) O[0009]所述注射針頭特別適用于對大鼠進行頸內(nèi)注射，尤其適用于對大鼠腦中風(fēng)模型進行頸內(nèi)注射，從而用于篩選治療腦中風(fēng)的藥物。所述出液孔距離所述針尖的距離可為5mm。所述針頭的本體的外直徑可為0.3-0.5_。所述針頭的本體的長度可為2.5-5.5cm。采用所述針頭對大鼠進行注射時，注射速度可為24G-32G。本實用新型還保護一種注射針，由注射器和所述注射針頭組成；所述注射針頭安裝于所述注射器的出液口。采用本實用新型提供的注射針對大鼠進行頸內(nèi)注射時可以從頸總動脈進針也可以從頸外動脈進針，針頭前端抵大鼠眶下裂周圍骨面，從而使側(cè)面流出的液體進入頸內(nèi)動脈入顱分支支配的區(qū)域。采用本實用新型提供的針頭進行大鼠頸內(nèi)注射，可以使藥物(化學(xué)藥物，具有治療功能的細(xì)胞、核酸、蛋白等)專向進入大鼠頸內(nèi)動脈的顱內(nèi)分支，與現(xiàn)有的大鼠頸內(nèi)注射方法相比，操作簡單、易于掌握、更重要的是不需要結(jié)扎翼腭動脈，避免了分離該血管對周圍神經(jīng)的影響以及再灌注的影響。采用本實用新型提供的針頭進行大鼠頸內(nèi)注射，大鼠的成活率高，術(shù)后并發(fā)癥少，對于科研模型的注射非常實用，可以滿足科學(xué)研究和有關(guān)領(lǐng)域發(fā)展的需要。應(yīng)用此頸內(nèi)注射針可治療腦類相關(guān)疾病。
圖1為本實用新型提供的針頭的結(jié)構(gòu)示意圖。圖2為大鼠頸內(nèi)注射針的進針模式圖；A:從頸外動脈進針；B:從頸總動脈進針。圖3為模型大鼠頸內(nèi)注射純藍墨水示蹤的照片'K'翼腭動脈注射純藍墨水；B:采用本實用新型的注射針在未結(jié)扎翼腭動脈的情況下，向頸內(nèi)動脈注射純藍墨水。圖4為模型大鼠頸內(nèi)注射MSCs后的細(xì)胞追蹤。A-B為體外MSCs細(xì)胞的diI染色；C-E為利用頸內(nèi)注射針頸內(nèi)注射后MSCs的體內(nèi)示蹤。
具體實施方式
以下結(jié)合附圖對本實用新型做進一步說明，但本實用新型并不局限于以下實施例。本實用新型提供了一種注射針頭，它包括注射器針頭的本體1，所述針頭的針尖2呈鈍圓形(光滑不尖銳)且沒有開口，所述針頭的出液孔3位于針頭的側(cè)壁上。所述注射針頭和注射器配套使用可完成動物頸內(nèi)注射。由于針尖采用了鈍圓形，不容易在頸內(nèi)注射時戳破動脈管壁并造成大出血。根據(jù)動物的種類，可以選擇具體的針頭型號(管徑的大小和側(cè)口到針尖的距離等)。當(dāng)動物為大鼠時，所述出液孔與所述針尖的距離可為5mm，所述針頭本體的外徑可為0.3-0.5_。所述針頭的長度可為2.5-5.5cm。采用所述針頭對大鼠進行注射時，注射速度可為24G-32G。本實用新型提供的注射針頭特別適用于對大鼠腦中風(fēng)模型進行頸內(nèi)注射，從而用于篩選治療腦中風(fēng)的藥物。將本實用新型提供的針頭與注射器組裝后得到注射針，可對大鼠進行頸內(nèi)注射，注射時可以從頸總動脈進針也可以從頸外動脈進針，針頭前端抵大鼠眶下裂周圍骨面，從而使側(cè)面流出的液體進入頸內(nèi)動脈入顱分支支配的區(qū)域。ECA代表頸外動脈，ICA代表頸內(nèi)動脈，CCA代表頸總動脈。[0020]頸總動脈進針的方法如下(參見圖2B):①結(jié)扎頸總動脈和頸外動脈的近心端；②在頸內(nèi)動脈的近分叉處放置預(yù)留線后，用動脈夾暫時阻斷頸內(nèi)動脈的血流(來自 willis 環(huán))；③在頸總動脈的遠心端用剪刀或者尖頭針插一小孔，然后應(yīng)用注射針插入一直進針直到動脈夾處，此時，將預(yù)留線打一活結(jié)防止出血；④移除小動脈夾，繼續(xù)進針，直到有一定的阻力，其前端抵眶下裂周圍骨面，此時可以推注射器將藥物注入。頸外動脈進針的方法如下(參見圖2A):①結(jié)扎頸外動脈的遠心端；②在頸內(nèi)動脈的近分叉處放置預(yù)留線后，用動脈夾暫時阻斷頸內(nèi)動脈的血流(來自 willis 環(huán))；③動脈夾暫時阻斷頸總動脈的血流；此時，將頸外動脈的近心端剪斷；④在頸外動脈的殘端進針，直到有一定的阻力，其前端抵眶下裂周圍骨面，此時可以推注射器將藥物注入。注射針的具體應(yīng)用如下: 一、大鼠MCAO模型的制作大鼠MCAO模型的制作(局灶性腦缺血再灌注模型):以10%水合氯醛將大鼠進行腹腔麻醉(0.3ml/100g)，頸正中切口，暴露頸總動脈、頸外動脈及翼腭動脈。大鼠通過左側(cè)CCA切口處插入栓線(栓線購自北京沙東生物技術(shù)有限公司，#2634)，翼腭動脈短暫夾閉以防誤插，栓線長度自CCA分叉處約18 20mm。栓塞左側(cè)大腦中動脈，然后縫合皮膚。缺血達到2h后小心抽出栓線，即形成再灌注。在缺血期間及再灌注后2h保持體溫在(37±0.5)°C。模型成功的標(biāo)志為以大鼠手術(shù)麻醉清醒后出現(xiàn)右側(cè)肢體癱瘓，站立不穩(wěn)，提尾時向一側(cè)轉(zhuǎn)圈為模型成功的判斷標(biāo)準(zhǔn)。二、頸內(nèi)注射藍墨水示蹤將步驟一得到的模型大鼠分別采用兩種方式注射純藍墨水:1、結(jié)扎頸內(nèi)動脈的入顱分支:結(jié)扎頸總動脈和頸外動脈的近心端；分離翼腭動脈和頸內(nèi)動脈后，將頸內(nèi)動脈結(jié)扎，使純藍墨水注入翼腭動脈分支，照片見圖3A。從結(jié)果可以看出，翼腭動脈的血流供應(yīng)主要為眼眶，鼻腔和部分口腔結(jié)構(gòu)，另有一個小的分支腦膜中動脈入顱，供應(yīng)腦膜的血流，但并不支配大腦的血流。2、應(yīng)用注射針堵塞翼腭動脈分支:結(jié)扎頸總動脈和頸外動脈的近心端；在頸內(nèi)動脈與頸外動脈的分叉處放置預(yù)留線后，用動脈夾暫時阻斷頸內(nèi)動脈的血流(來自willis環(huán))；在頸總動脈的遠心端用剪刀或者尖頭針插一小孔，然后應(yīng)用注射針插入一直進針直到動脈夾處，此時，將預(yù)留線打活結(jié)防止出血；移除小動脈夾，繼續(xù)進針，直到有一定的阻力，其前端抵眶下裂周圍骨面，此時可以推注射器將純藍墨水注入，照片見圖3B。通過上述兩種方法比較發(fā)現(xiàn)，本實用新型提供的注射針能將翼腭動脈暫時封閉，使墨水定向注入大腦內(nèi)。三、頸內(nèi)注射MSCs的細(xì)胞示蹤l、MSCs細(xì)胞的Dil染色[0040]將MSCs 細(xì)胞米用突光染料 DiL (1，I’ -dioctadecyl-3, 3, 3’ , 3’ -tetramethyIindocarbocyanine perchlorate)進行標(biāo)記，使用時IOml培養(yǎng)基加40-50微升染液(lmg/ml),在培養(yǎng)箱中染色15分鐘，PBS洗3次，每次5分鐘。于熒光顯微鏡(X 10)下觀察細(xì)胞存活情況結(jié)果見圖5A和圖4B (圖4A為紅色熒光，圖4B為白光)。2、頸內(nèi)注射MSCs將標(biāo)記后MSCs用0.25%胰酶和0.02%EDTA消化后，應(yīng)用從頸總動脈進針的途徑進行頸內(nèi)注射。3、移植細(xì)胞在腦內(nèi)存活情況將移植MSCs的MCAO模型大鼠分別于14天后處死，斷頭取腦，去除額極部分，-20°C預(yù)凍15min，將大腦連續(xù)切成2mm厚的片狀。取前端第二片4%的多聚甲醛固定，以O(shè)CT包埋，作水平橫斷面的連續(xù)冰凍切片，厚度為10 μ m，連切5片。附于多聚賴氨酸包被的載玻片上，切片表面滴加適量90%甘油PBS緩沖液，蓋玻片封片。于熒光顯微鏡(X20)下觀察細(xì)胞存活情況，拍照保存，結(jié)果見圖4C-E (圖4C為腦組織的細(xì)胞核，圖4D為進入腦內(nèi)的MSCs，圖4E為圖4C和圖4D的合并圖像)。從該結(jié)果中可以看出，該注射針能夠有效的將細(xì)胞注入大腦內(nèi)。
權(quán)利要求1.一種注射針頭，它包括注射器針頭的本體(1)，其特征在于:所述針頭的針尖(2)呈鈍圓形且沒有開口，所述針頭的出液孔(3)位于針頭本體的側(cè)壁上。
2.如權(quán)利要求1所述的注射針頭，其特征在于:所述出液孔(3)距離所述針尖(2)的距離為5mm。
3.如權(quán)利要求1所述的注射針頭，其特征在于:所述針頭的本體(I)的外直徑為0.3-0.5mm。
4.如權(quán)利要求1所述的注射針頭，其特征在于:所述針頭的本體(I)的長度為2.5-5.5cm。
5.一種注射針，由注射器和注射針頭組成；所述注射針頭安裝于所述注射器的出液口 ；所述注射針頭為權(quán)利要求1至4中任一所述的注射針頭。
專利摘要本實用新型公開了一種用于動物頸內(nèi)注射的針頭。本實用新型提供的注射針頭包括注射器針頭的本體(1)，其特征在于所述針頭的針尖(2)呈鈍圓形且沒有開口，所述針頭的出液孔(3)位于針頭本體的側(cè)壁上。由于針尖采用了鈍圓形，不容易在頸內(nèi)注射時戳破動脈管壁并造成大出血。本實用新型還保護一種注射針，由注射器和所述注射針頭組成；所述注射針頭安裝于所述注射器的出液口。采用本實用新型提供的針頭進行大鼠頸內(nèi)注射，可以使藥物專向進入大鼠頸內(nèi)動脈的顱內(nèi)分支，與現(xiàn)有的大鼠頸內(nèi)注射方法相比，操作簡單、易于掌握、更重要的是不需要結(jié)扎翼腭動脈，避免了分離該血管對周圍神經(jīng)的影響以及再灌注的影響。
文檔編號A61D7/00GK203017131SQ20122057918
公開日2013年6月26日 申請日期2012年11月6日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月6日
發(fā)明者吳耀炯, 郭玲, 葛建峰 申請人:清華大學(xué)深圳研究生院