專利名稱:炭角菌菌株及其用途的制作方法
技術領域:
本發明涉及微生物領域,具體地說是一種內生真菌炭角菌菌株及其對促進植物生長等的影響作用。
背景技術:
內生真菌廣泛存在于植物組織內,不受外界環境的影響,對植物生長發育、抵抗病蟲害等具有廣泛的生物學作用,同時在一些植物及農作物的廣泛應用具有重要意義。隨著環境問題的持續惡化,植物資源經受著嚴峻的考驗,而內生真菌對植物的影響是多方面的,已經成為當今國內外研究的熱點問題之一。在農業生產、生態保護、中藥資源開發、醫藥衛生的發展都有重要的現實意義。近年來,人們發現在植物體存在有益的內生細菌和內生真菌,內源性菌株對植物病害的防治作用及生物開發應用已引起科學家的廣泛關注。植物內生真菌主要分布于植物的種子、花、莖、葉和根系中,與植物的關系是互惠共生的,而且植物內生真菌可以提供光合產物及礦物質,內生真菌代謝產物能夠刺激寄主植物的生長發育,提高寄主植物的生物應激和非生物脅迫抗性能力,即兩者之間存在物質與能量的循環交流,植物內生真菌對寄主植物的積極地促生效應,部分是通過植物內生真菌分泌的活性物質或者次級代謝產物對植物的生長作用的結果。
發明內容
本發明要解決的技術問題是提供一種新型的炭角菌及其用途,該菌株能促進植物,尤其是栽培水稻,栽培煙草以及栽培黃瓜的生長。為了解決上述技術問題,本發明提供一種炭角菌菌株保藏名稱為=Xylariastriata RK1-1,保藏單位中國典型培養物保藏中心,保藏地址中國武漢武漢大學;保藏日期2012 年 4 月 8,保藏號=CCTCC NO :M2012101。
本發明還同時提供了上述炭角菌菌株的用途,其特征是用于促進植物生長或增加生物量。作為本發明的炭角菌菌株的用途的改進植物為水稻、煙草或黃瓜。本發明的炭角菌菌株RKl-I (即 Xylaria striata RK1-1CCTCC NO M2012101)具有如下特性菌種在PDA培養基上的適宜生長溫度為25°C;菌落白色,培養3天后直徑2厘米,培養10天后直徑9厘米,呈輻射狀蔓延,之后生長減緩,并從菌落中心處開始出現黑色炭化菌絲。本發明的菌株是從植物疣粒野生稻中分離得到的,它屬于真菌界(Fungi),雙核亞界(Dikarya),子囊菌門(Ascomycota),盤菌亞門(Pezizomycotina),糞殼菌綱(Sordariomyceta),炭角菌目(Xylariomycetidae),炭角菌科(Xylariales),炭角菌屬(Xylariaceae)。
下面結合附圖對本發明的具體實施方式
作進一步詳細說明。圖I為炭角菌RKl-I在培養基上的形態圖;左圖為正面形態圖,右圖為背面形態圖;圖2為炭角菌RKl-I對水稻的促生作用圖;圖3為炭角菌RKl-I對煙草的促生作用圖;圖4為RKl-I對煙草葉片和根系個數的影響圖;圖5為RKl-I對煙草葉片和根系長度的影響圖;圖6為RKl-I對煙草葉片鮮重和干重的影響圖;
圖7為炭角菌RKl-I對黃瓜的促生作用圖;圖8為炭角菌RKl-I處理黃瓜促生作用的根部長度比較圖;圖9為RKl-I對黃瓜葉片生物量的影響柱狀圖;圖10為RKl-I對黃瓜根部生長影響柱狀圖。
具體實施例方式實施例I、炭角菌(Xylaria striata)菌株的分離培養與鑒定2%麥芽汁瓊脂培養基(malt extract agar,MEA):在麥芽浸出粉20g、瓊脂20g中加蒸餾水定容至IOOOmL ;然后進行常規的高溫滅菌(11個大氣壓,121°C下滅菌20min)。馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基(potato dextrose agar, PDA):在馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂20g中加蒸餾水定容至IOOOmL ;然后進行常規的高溫滅菌(11個大氣壓,121°C下滅菌 20min)。在實驗室中按下列條件分離培養,即可獲得本發明所述的炭角菌。從我國云南西雙版納自然保護區采集野生稻(Oryza granulata),將采集的野生稻用自來水漂洗干凈,野生稻根莖在75% (v/v)酒精溶液中消毒30秒,然后在1% (v/v)次氯酸鈉溶液中消毒10分種,無菌水漂洗3次。用無菌刀片將根切成約O. 6cm長的片段,置于含50μ g · πιΓ1氨芐青霉素和50μ g · πιΓ1鏈霉素的2%麥芽汁瓊脂培養基(MEA)平皿上,25°C暗培養,待菌絲長出后,將菌絲頂端移接到PDA培養基;分離得到菌落白色,培養3天后直徑2厘米,培養10天后直徑9厘米,呈輻射狀蔓延,之后生長減緩,并從菌落中心處開始出現黑色炭化菌絲的菌株,25°C暗培養,在PDA培養基上連續三次接種,確認為單菌落,沒有其他真菌或者細菌共同生長,認為是獲得純培養,命名為RKl-I。該菌劑為炭角菌菌株,進行了如下保藏保藏名稱為Xylaria striata RK1-1,保藏單位中國典型培養物保藏中心,保藏地址中國武漢武漢大學;保藏日期2012年4月8,保藏號CCTCC NO M2012101o實施例2、菌株RKl-I的鑒定本發明的炭角菌菌株RKl-I (即 Xylaria striata RK1-1CCTCC NO M2012101)具有如下特性菌種在PDA培養基上的適宜生長溫度為25°C;菌落白色,培養3天后直徑2厘米,培養10天后直徑9厘米,呈輻射狀蔓延,之后生長減緩,并從菌落中心處開始出現黑色炭化菌絲。形態圖如圖I所示。實施例3、炭角菌RKl-I對水稻的促生作用首先需要對水稻進行無菌苗的培養
(I)無菌環境下育種將水稻種子去殼,將種子放置在滅過菌的玻璃瓶中,先用無菌水沖洗2次,用75% (體積濃度)乙醇浸泡lOmin,隨后用1% (質量濃度)的NaClO表面消毒IOmin (充分搖勻),最后用無菌水清洗4次后備用。(2)配制MS培養基,配方如下表I (為常規技術)表I、MS培養基配方
權利要求
1.炭角菌菌株,其特征是保藏名稱為Xylariastriata RK1-1,保藏單位中國典型培養物保藏中心,保藏地址中國武漢武漢大學;保藏日期2012年4月8,保藏號=CCTCCNO M2012101o
2.根據權利要求I所述的炭角菌菌株,其特征是所述菌株RKl-I屬于真菌界(Fungi),雙核亞界(Dikarya),子囊菌門(Ascomycota),盤菌亞門(Pezizomycotina),糞殼菌綱(Sordariomyceta),炭角菌目(Xylariomycetidae),炭角菌科(Xylariales),炭角菌屬(Xylariaceae)。
3.根據權利要求2所述的炭角菌菌株,其特征是菌株RKl-I在PDA培養基上的適宜生長溫度為25°C ;菌落白色,培養3天后直徑2厘米,培養10天后直徑9厘米,呈輻射狀蔓延,之后生長減緩,并從菌落中心處開始出現黑色炭化菌絲。
4.如權利要求I 3中任一炭角菌菌株的用途,其特征是用于促進植物生長或增加生物量。
5.根據權利要求4所述的炭角菌菌株的用途,其特征是所述植物為水稻、煙草或黃瓜。
全文摘要
本發明公開了一種炭角菌菌株,保藏名稱為Xylaria striata RK1-1,保藏單位中國典型培養物保藏中心,保藏地址中國武漢武漢大學;保藏日期2012年4月8,保藏號CCTCC NOM2012101。該菌株RK1-1屬于真菌界(Fungi),雙核亞界(Dikarya),子囊菌門(Ascomycota),盤菌亞門(Pezizomycotina),糞殼菌綱(Sordariomyceta),炭角菌目(Xylariomycetidae),炭角菌科(Xylariales),炭角菌屬(Xylariaceae)。該菌株RK1-1能用于促進植物生長或增加生物量。
文檔編號A01P21/00GK102876584SQ20121010499
公開日2013年1月16日 申請日期2012年4月11日 優先權日2012年4月11日
發明者章初龍, 林福呈, 馮曉曉, 李穎 申請人:浙江大學