專利名稱：一種以噬菌體為主要組分的環境生物消毒劑及其應用的制作方法
技術領域：
本發明提供一種以多株分離的裂解性噬菌體為主要組分的環境消毒劑及其在養殖場、屠宰場、食品加工廠、醫院等場所的環境及其相關器皿上大腸桿菌、沙門氏菌、志賀氏菌等病原菌的殺滅和凈化應用。屬于生物工程領域。
背景技術：
目前，養殖場細菌性疾病蔓延、呈多發、高發及混合感染趨勢，對養殖場疫病控制及畜牧業養殖效益以及畜產品致病菌污染等產生很大危害，近幾年在養殖場(豬場、雞場、 牛場及鴨場等)的疫病發生及流行特點調查發現養殖場的細菌性疾病非常厲害，是直接影響動物生產、動物產品安全的重要因素。環境消毒劑多是化學類消毒劑，這些制劑多數毒性較大，如戊二醛、福爾馬林等， 或氣味較難聞，如過氧乙酸、福爾馬林等。化學消毒劑消毒效果雖好，但存在著穩定性差，使用時需稀釋且稀釋后一周用完，有一定的刺激異味等不足之處使其使用范圍受到了限制。 化學消毒劑是通過本身對細胞的毒性作用而殺菌的。有些消毒劑對人體有毒性作用；有些消毒劑生物降解速度極慢，容易造成環境污染；有些消毒劑對物品有腐蝕性及其他損害作用。同時，這些化學消毒劑長期應用于養殖場食品動物的消毒還會引起殘留，用于器皿的消毒會產生腐蝕作用。另外，隨著大量消毒劑的長期使用，養殖場的部分細菌對消毒劑產生了一定的耐藥性，而使消毒效果逐漸變弱。因此，人們希望得到一種短時間內即可達到滅菌效果，無異味，作用時間長，使用方便，無毒或低毒、刺激性小而滅菌殺毒效果又好的消毒劑。隨著近幾年人們的保健和消毒防病意識逐漸加強，新型生物環境消毒劑成為一種發展趨勢。噬菌體是一類細菌依賴性的病毒，又稱細菌病毒。對靶細菌有很強的特異性裂解作用，對環境其他生物無危害，是理想的環境中靶細菌的克星。對環境中存在的各種靶細菌有很強的殺菌作用，起到凈化消毒的目的。申請人:在養殖場污水和糞便中曾經分離獲得大腸桿菌噬菌體、腸炎沙門氏菌噬菌體、雞白痢沙門氏菌噬菌體、福氏志賀氏菌噬菌體等多株裂解性噬菌體，其中，大腸桿菌噬菌體的保藏號為CCTCC M 209208，由200910263^5. 0號專利申請公開，腸炎沙門氏菌噬菌體的保藏號為CTCC M 2010226，由201010508259. 9號專利申請公開，雞白痢沙門氏菌噬菌體的保藏號為CCTCC M 2011042，由201110053518. 8號專利申請公開，福氏志賀氏菌噬菌體的保藏號為CCTCC M 209029，由200910(^9306. 9號專利申請公開。目前，在對大腸桿菌、沙門氏菌、志賀氏菌等病原菌有殺滅和凈化作用的制劑中， 采用所述的大腸桿菌噬菌體、腸炎沙門氏菌噬菌體、雞白痢沙門氏菌噬菌體、福氏志賀氏菌噬菌體進行復合組成，并未予以報道。
發明內容
本發明的目的在于提供一種以多株裂解性噬菌體為主要組分的環境生物消毒劑及其在養殖場、屠宰場、畜產品加工廠等場所的環境及器皿中細菌的殺滅和凈化應用。本發明的另一個目的是提供一種新的環境中細菌污染的防治和凈化方法和措施。一種以噬菌體為主要組分的環境生物消毒劑，其特征在于按體積百分比計，其配方為大腸桿菌噬菌體CCTCC M 209208 10-30%，腸炎沙門氏菌噬菌體CTCC M 2010226 10-30%，雞白痢沙門氏菌噬菌體CCTCC M 2011042 10-30%，福氏志賀氏菌噬菌體CCTCC M 209029 10-30%，肉桂提取液5_8%，白頭翁提取液5_8%，余量為輔劑；其中各種純化的噬菌體制備成濃度彡104pfu/mL·所述的輔劑為生物消毒劑用常規輔劑。所述的生物消毒劑用常規輔劑是指水或甘油所述的肉桂提取液為選擇肉桂，洗凈切碎，按體積比1 10加入95%乙醇，70°C浸提5小時，真空抽慮，旋轉蒸發儀蒸至近干，過濾，用水溶液溶解，獲得肉桂提取液。所述的白頭翁提取液是由白頭翁屬植物中獲得的植物提取物，所述的白頭翁屬植物為擇一選擇的白頭翁、金縣白頭翁、興安白頭翁、蒙古白頭翁、西南白頭翁、掌葉白頭翁、 黃花白頭翁、鐘萼白頭翁、紫蕊白頭翁、細葉白頭翁、朝鮮白頭翁和腎葉白頭翁。一種以噬菌體為主要組分的環境生物消毒劑的應用，其特征在于將該環境消毒劑用于抑制或消殺環境中相應的大腸桿菌、沙門氏菌和志賀氏菌的污染。本發明的優點是1)由于本發明所涉及的裂解性噬菌體是在養殖場的污水和糞便中分離獲得，且裂解譜比較廣，對養殖場的特異致病菌有很強的針對性，殺菌消毒效果更強，也對畜產品中攜帶的致病菌同樣有很強的殺滅作用；2)由于該發明是幾種裂解性噬菌體的復合物，與單一的噬菌體相比，大大擴寬了其噬菌譜，既能殺滅環境中的大腸桿菌，也能殺滅環境中存在的沙門氏菌和志賀氏菌致病菌，大大提高了對養殖場常見致病菌的殺滅效力。幻該發明克服了以往環境消毒劑的腐蝕性及刺激性氣味，對環境及器皿消毒凈化效果好，無臭無味、還有一點中藥的香味、安全無毒，可以帶動物和帶器具進行消毒使用。4)同時本發明對養殖場及屠宰場等場所和器具上的耐藥性大腸桿菌和沙門氏菌及志賀氏菌有很好的殺滅作用。
具體實施例方式實施例1、環境生物消毒劑的組成將本實驗室保藏的4種純化噬菌體，分別活化后進行稀釋，使其濃度分別彡104pfu/ml即可，然后按照以下體積比進行混合，混合均勻，然后按照以下體積比加入白頭翁提取液和肉桂提取液，進行充分混合，然后在加入適量輔劑。配方組成如下腸炎沙門氏菌噬菌體(CTCCM 2010226) :10-30% ；雞白痢沙門氏菌噬菌體(CCTCC M 2011042) :10-30% ；大腸桿菌噬菌體(CCTCCM 209208) :10-30% ；福氏志賀氏菌噬菌體(CCTCCM 209029) :10-30% ；肉桂提取液(外購)5-8%;白頭翁提取液(自制)5-8 % ；輔劑補充至100%。制備成液體，備用；
其中所述的白頭翁提取液是這樣獲得的。所述的輔劑為水。具體實施時，所述的白頭翁屬植物可以擇一選擇的白頭翁、金縣白頭翁、興安白頭翁、蒙古白頭翁、西南白頭翁、掌葉白頭翁、黃花白頭翁、鐘萼白頭翁、紫蕊白頭翁、細葉白頭翁、朝鮮白頭翁和腎葉白頭翁。所述的輔劑還可以采用甘油，或采用在生物消毒劑中的其他常規輔劑。實施例2 環境消毒劑對房間空氣自然菌的殺菌凈化效果本實驗選擇一種商品化的消毒劑過氧乙酸消毒劑作為對比，研究本發明消毒劑對房間空氣自然菌的進化消毒能力。將本發明的環境生物消毒劑成溶液，經噴霧器造成氣溶膠，噴霧前后密閉門窗lh。 過氧乙酸噴霧前后也密閉lh。上述2種不同的消毒劑均采用氣溶膠噴霧法，分別于消毒前 30min、消毒后30min采樣進行細菌培養。空氣消毒監測方法根據衛生部頒發的《消毒技術規范》要求，均采用平板暴露法， 按消毒房間面積大小放置平板數，每次在同一高度，同一位置布點，于消毒前后進行空氣采樣，培養皿暴露5min，合蓋檢測。消毒效果檢測結果表明，兩種消毒產品均顯示出良好的消毒效果，本發明提供的環境生物消毒劑殺菌率略低于過氧乙酸，但差異不顯著，本發明提供的環境生物消毒劑無刺激性氣味、無腐蝕作用，還有一定的中藥香味。噬菌體消毒劑溶液經噴霧器造成氣溶膠， 其粒子細小擴散作用既快又強。該法不僅具有消毒作用，還能使塵埃沉降，并濕化、清新空氣。結果表明本發明提供的環境消毒劑與過氧乙酸具有同等的對自然菌的殺菌效力，且無刺激性氣味，可在公共場所噴霧使用，解決了長期以來未能解決的動態環境下的消毒問題以及耐藥菌的問題。表1環境消毒劑對室內空氣自然菌殺滅效果
權利要求
1.一種以噬菌體為主要組分的環境生物消毒劑，其特征在于按體積百分比計，其配方為大腸桿菌噬菌體CCTCC M 209208 10_30%，腸炎沙門氏菌噬菌體CTCC M 2010226 10-30%，雞白痢沙門氏菌噬菌體CCTCC M 2011042 10_30%，福氏志賀氏菌噬菌體CCTCC M 209029 10-30%,肉桂提取液5_8%，白頭翁提取液5_8%，余量為輔劑；其中各種純化的噬菌體制備成濃度彡104pfu/ml。
2.根據權利要求1所述一種以噬菌體為主要組分的環境生物消毒劑，其特征在于所述的輔劑為生物消毒劑用常規輔劑。
3.根據權利要求2所述一種以噬菌體為主要組分的環境生物消毒劑，其特征在于所述的生物消毒劑用常規輔劑是指水或甘油。
4.根據權利要求1所述一種以噬菌體為主要組分的環境生物消毒劑，其特征在于所述的白頭翁提取液是由白頭翁屬植物中獲得的植物提取物，所述的白頭翁屬植物為擇一選擇的白頭翁、金縣白頭翁、興安白頭翁、蒙古白頭翁、西南白頭翁、掌葉白頭翁、黃花白頭翁、 鐘萼白頭翁、紫蕊白頭翁、細葉白頭翁、朝鮮白頭翁和腎葉白頭翁。
5.一種如權利要求1所述環境生物消毒劑的應用，其特征在于將該環境消毒劑用于抑制或消殺環境中相應的大腸桿菌、沙門氏菌和志賀氏菌的污染，尤其是用于養殖場、畜舍、屠宰場、食品倉庫和畜產品加工廠環境及器具的凈化消毒。
全文摘要
本發明提供一種以噬菌體為主要組分的環境生物消毒劑及其應用，由大腸桿菌噬菌體CCTCCM209208，腸炎沙門氏菌噬菌體CTCCM2010226，雞白痢沙門氏菌噬菌體CCTCC M2011042，福氏志賀氏菌噬菌體CCTCCM209029，肉桂提取液，白頭翁提取液和輔劑組成；其中各種純化的噬菌體制備成濃度≥104pfu/ml，用于環境場所及器具上殺菌和凈化。它具有殺菌力強、殺菌快、無毒害、無刺激、無腐蝕性、無著色等特點，非常適合養殖場、屠宰場、畜產品加工廠、食品倉庫等環境和器具的消毒和凈化，具有很好的推廣使用價值。
文檔編號A01N65/32GK102349548SQ20111023407
公開日2012年2月15日 申請日期2011年8月16日 優先權日2011年8月16日
發明者包紅朵, 張輝, 王冉 申請人:江蘇省農業科學院