專利名稱：海雜回交商品苗種的培育方法
技術領域：
本發明屬于貝類水產養殖的育種技術，尤其是涉及一種海雜回交商品苗種的培育方法。
背景技術：
海灣扇貝(Argopecten irradians irradians)原產于美國大西洋沿岸，于1982 年引入我國。海灣扇貝生長速度快，溫度適應范圍廣，抗逆性強，非常適合我國北方海域的養殖，目前產量和養殖面積占我國扇貝養殖的50%以上。由于引進后長期近交，海灣扇貝在養殖過程中種質退化嚴重，表現為商品貝規格越來越小，育苗養殖過程中死亡率較高，例如2007年海灣扇貝親貝死亡率高達約70%，因此扇貝養殖業迫切需要對海灣扇貝進行遺傳改良，其中雜交育種是最有效的方法之一。發明人自2007年首次從秘魯引進了紫扇貝(Argopecten purpuratus)。紫扇貝是原產于南太平洋的一種速生型中型扇貝，與海灣扇貝都屬于Argopecten屬，染色體數相同，且都是雌雄同體，但二者在個體大小、生長和溫度適應性等方面性狀互補。因此發明人又通過將紫扇貝與海灣扇貝進行種間雜交，培養出正交(紫扇貝卵子和海灣扇貝精子受精)和反交(海灣扇貝卵子和紫扇貝精子受精)兩種雜交子一代。雜交子一代生長較快， 個體較大，部分個體僅雌區發育，性成熟時僅排放卵子且可育(王春德等，2009.紫扇貝與海灣扇貝種間雜交的研究。海洋科學，33 (10) 84-87 ；Chunde Wang等，2011. Introduction of the Peruvian scallop and its hybridization with the bay scallop in China, Aquaculture,2011, 310 :380-387)。進一步研究表明，雜交子一代雖然可以產生較大的雜種優勢，但要大面積推廣仍存在著兩個較大的困難。首先，由于引進的紫扇貝的溫度適應范圍很窄，在青島及以南海域不能度夏，在青島及以北海域也不能越冬，因而要獲得大量用于培育雜交子一代的紫扇貝親貝十分困難。其次，由于海灣扇貝和紫扇貝都是雌雄同體的扇貝，同時排放精子和卵子， 卵子容易受到同種精子的污染，難以大量獲得未受精卵用于種間雜交，從而導致所獲得的商品苗種中真正的雜交后代的比例大大降低，使產量的提高幅度大大受限。
發明內容
本發明的目的是提供一種實用的海雜回交商品苗種的培育方法，以彌補現有利用紫扇貝和海灣扇貝生產雜交扇貝商品苗種技術的不足。本發明基于以下構思1)首先在親貝促熟方面摒棄了傳統的海灣扇貝從4°C開始培育，而且產卵前需要提高到19°C的常規方法，通過研究雜交子一代扇貝的溫度適應特性， 專門選擇了從10°C開始培育雜交子一代親貝，到產卵前逐漸提高到17°C ；2)紫扇貝與海灣扇貝的雜交子一代中有部分個體僅雌區發育且排出的卵子可育，這樣就可以用容易培育的雜交子一代可育個體替代紫扇貝，實現方便地獲得大量有受精能力的未受精卵；幻海灣扇貝的精子和卵子大小不同，可以用500目的篩絹過濾獲得不含卵子的精液；4)用雜交子一代的未受精卵與海灣扇貝精子回交可獲得100%的回交商品苗種，能實現方便、高效地生產雜交苗種；最后幻所獲得的本發明的海雜回交商品苗種在生長、個體大小和溫度耐受性方面具有顯著的優勢。本發明的技術方案是選擇來自紫扇貝與海灣扇貝的雜交子一代家系或群體中的僅雌區發育的優良個體，與雌雄同體的海灣扇貝優良個體同步促熟；再用常規的陰干和溫度刺激的方法誘導上述雜交子一代個體排卵，獲得未受精卵；同時刺激海灣扇貝產卵排精， 然后用500目篩絹過濾獲得海灣扇貝精液；將上述獲得的雜交子一代的卵子與海灣扇貝精子受精，待受精卵孵化后按常規方法進行幼蟲培育和苗種中間培育即獲得具有顯著雜種優勢的海雜回交商品苗種；上述同步促熟是從10°C開始培育雜交子一代親貝，到產卵前逐漸提高到17°C。本發明培育的海雜回交商品苗種同時具有海灣扇貝和紫扇貝的特性，在生長、個體大小和溫度耐受性方面比紫扇貝具有顯著優勢，因此能在北方海區如青島、大連等海域養殖，且當年產量可比海灣扇貝提高50%以上。
具體實施例方式本發明的操作方法或步驟如下1)親貝的選擇和促熟從正交(紫扇貝卵子和海灣扇貝精子受精)或反交(海灣扇貝卵子和紫扇貝精子受精)家系或群體中選擇大個體雜交子一代扇貝，同時選擇大個體的海灣扇貝親貝，在1月初納入育苗室水體內，蓄養密度為100個/m3，選擇從10°C開始培育親貝。每天分6次投喂濃度為200-300萬細胞/毫升的三角褐指藻和扁藻等單胞藻類， 每次投喂15升/m3，每天換水三分之一，每6天倒一次池，用空氣壓縮機連續充氣。在10°C 培育10天性腺開始膨大后開始升溫，每天提高0. 5°C，待升到17°C時性腺接近成熟，逐漸增加餌料的投喂量直到扇貝達到性成熟。2)海雜回交商品苗種的培育挑選50個以上性腺發育成熟、個體較大，且性腺僅有雌區發育的子一代扇貝，陰干刺激30分鐘，將這些扇貝置于預先加入23°C海水的水泥池中，使其產卵。再選擇20個以上性腺發育成熟的海灣扇貝，置于預先加入23°C海水的塑料桶中，產卵排精后用500目的篩絹過濾，收集不含海灣扇貝卵子的精液，然后向雜交子一代卵子中加入少量的海灣扇貝精液，攪拌使精卵混合均勻，顯微鏡下觀察使每個卵子周圍有 5-6個精子，將受精卵置于黑暗環境下孵化，按常規方法進行幼蟲培育和苗種中間培育，即可以獲得殼高達到1.5厘米以上的海雜回交商品苗種，用于商業化養殖。實施例12008年3月底取成熟紫扇貝，經溫度刺激后獲得紫扇貝卵子，用海灣扇貝的精子授精后獲得紫扇貝(卵)和海灣扇貝(精)雜交子一代苗，獲得成貝。2009年春天將從上述雜交子一代扇貝促熟后從中選擇個體大且僅雌區發育的扇貝，經陰干和溫度刺激后獲得卵子，以海灣扇貝的精子授精，培養出了雜交子一代與海灣扇貝的回交商品苗種。至2009年 11月底，本發明的回交商品苗種的殼高、殼長、殼寬及體重分別比同期培育的海灣扇貝自交群體大 26. 5%,27. 5%, 16. 2%和 91. 30% (表 1)。表1海雜回交商品苗種與同期海灣扇貝群體表型的比較(n = 30)
權利要求
1.一種海雜回交商品苗種的培育方法，其特征在于選擇來自紫扇貝與海灣扇貝的雜交子一代家系或群體中的僅雌區發育的優良個體，與雌雄同體的海灣扇貝優良個體同步促熟；再用常規的陰干和溫度刺激方法誘導上述雜交子一代個體排卵，獲得未受精卵；同時刺激海灣扇貝產卵排精，然后取用500目篩絹過濾獲得海灣扇貝精液；將上述獲得的雜交子一代的卵子與海灣扇貝精子受精，受精卵孵化后按照常規方法進行幼蟲培育和苗種中間培育，即獲得具有顯著雜種優勢的海雜回交商品苗種；上述同步促熟是從10°C開始培育雜交子一代親貝，到產卵前逐漸提高到17°C。
2.海雜回交商品苗種的培育方法，其特征在于具體步驟如下1)親貝的選擇和促熟從用紫扇貝卵子和海灣扇貝精子或海灣扇貝卵子和紫扇貝精子受精所獲得的家系或群體中選擇大個體雜交子一代扇貝，同時選擇大個體的海灣扇貝親貝，在1月初納入育苗室水體內，蓄養密度為100個/ m3，選擇從10°C開始培育親貝；每天分6次投喂濃度為200-300萬細胞/毫升的三角褐指藻和扁藻等單胞藻類，每次投喂15升 / m3，每天換水三分之一，每6天倒一次池，用空氣壓縮機連續充氣；在10°C培育10天性腺開始膨大后開始升溫，每天提高0. 5°C，待升到17°C時性腺接近成熟，逐漸增加餌料的投喂量直到扇貝達到性成熟；2)海雜回交商品苗種的培育挑選50個以上性腺發育成熟、個體較大且性腺僅有雌區發育的子一代親貝，陰干刺激30分鐘，將這些扇貝置于預先加入23°C海水的水泥池中， 使其產卵；再選擇20個以上性腺發育成熟的海灣扇貝，置于預先加入23°C海水的塑料桶中，產卵排精后用500目的篩絹過濾，收集不含海灣扇貝卵子的精液，然后向雜交子一代卵子中加入少量的海灣扇貝精液，攪拌使精卵混合均勻，顯微鏡下觀察使每個卵子周圍有5-6 個精子，將受精卵置于黑暗環境下孵化，按常規方法進行幼蟲培育和苗種中間培育，即得用于商業化養殖的海雜回交商品苗種。
全文摘要
本發明涉及一種海雜回交商品苗種的培育方法，其特征是選擇來自紫扇貝與海灣扇貝的雜交子一代家系或群體中的僅雌區發育的優良個體，與海灣扇貝優良個體同步促熟；再用常規的陰干和溫度刺激的方法誘導上述雜交子一代個體排卵，獲得未受精卵；同時刺激海灣扇貝產卵排精，然后用500目篩絹過濾獲得海灣扇貝精液；將上述雜交子一代的卵子與海灣扇貝精子受精，受精卵孵化后按常規方法培育，即可獲殼高達到1.5厘米以上的海雜回交苗種用于商業化養殖。本發明培育的海雜回交商品苗種同時具有海灣扇貝和紫扇貝的特性，在生長、個體大小和溫度耐受性方面比紫扇貝具有顯著優勢，因此實現了能在北方海區，如青島、大連等海域養殖，且當年產量比海灣扇貝提高50％以上。
文檔編號A01K61/00GK102301969SQ201110223340
公開日2012年1月4日 申請日期2011年8月5日 優先權日2011年8月5日
發明者劉保忠, 李建立, 李繼強, 杜厚寬, 王文琪, 王春德 申請人:青島農業大學