專利名稱：一種玫煙色棒束孢油懸浮劑及其制備方法和應用的制作方法
技術領域：
本發明屬于無公害農藥制劑技術領域，具體涉及一種玫煙色棒束孢油懸浮劑及其制備方法和應用。
背景技術：
玫煙色棒束孢(/saria fumosorosea )是一種子囊菌類蟲生真菌，它廣布全世界， 寄主范圍廣泛，已記載有25個不同科的昆蟲，包括小菜蛾、麥雙尾蚜和煙粉虱等一些重要農業害蟲。玫煙色棒束孢分生孢子主要通過分泌多種胞外水解酶降解昆蟲體壁從而侵入寄主，具有不同于現有化學殺蟲劑的作用機理，對環境無污染，無殘留的特點。隨著經濟社會的發展和人們生活水平的提高，真菌殺蟲劑的研究和使用受到到越來越多的重視，近年來在真菌殺蟲劑的產業化方面取得較大進展。然而，包括玫煙色棒束孢在內的真菌都具有殺蟲效果慢、受環境影響較大、效果不穩定的缺點。雖然針對這些問題可以對菌株進行遺傳改良，通過基因工程方法人為提高真菌菌株的殺蟲效率，但真菌殺蟲劑的制劑性能也是影響藥效的關鍵因素。害蟲親脂性表皮和兌水使用的藥劑之間存在著很高的界面張力，讓藥劑很難與害蟲和植物表面親和。不合理的制劑，不僅造成部分菌體死亡或孢子失活，而且會將大大降低其效果發揮，從而影響持效性。制備穩定、效果好的新劑型是真菌殺蟲劑制備的關鍵。而尋找在制劑中添加玫煙色棒束孢子的適宜技術方案、提供制劑各組分合適的配伍比例，使孢子免受脅迫因子傷害，提高孢子存活率，讓制劑有更好的化學和物理穩定性，延長其使用期，是獲得穩定、效果好的新劑型的關鍵。目前玫煙色棒束孢多為粉劑，直接噴灑使用，但這種制劑，玫煙色棒束孢殺蟲效果慢、受環境影響較大、效果不穩定的缺點，且在這種制劑形態下，很難保證孢子高的存活率。
發明內容
本發明的目的是克服現有玫煙色棒束孢農藥制劑劑型的不足和玫煙色棒束孢在農藥應用方面的不足，提供了一種玫煙色棒束孢油懸浮劑，所述油懸浮劑克服了微生物農藥速效性差，效果不穩定的缺點，具有速效、高活性、化學和物理穩定性好的優點。本發明的另一個目的是提供所述玫煙色棒束孢油懸浮劑的制備方法。本發明還有一個目的是提供所述玫煙色棒束孢油懸浮劑的應用。本發明的目的通過以下技術方案予以實現
提供一種玫煙色棒束孢油懸浮劑，按質量百分比計，玫煙色棒束孢孢子懸浮液1 40%，植物油1 20%,乳化劑3 8%，分散劑0. 1 5%，穩定劑1 5%，防凍劑1 5%，余量為惰性礦物油或芳香烴溶劑。所述的玫煙色棒束孢油懸浮劑，優選的各組分按質量百分比計，玫煙色棒束孢孢子懸浮液20 30%,植物油10 15%，乳化劑3 5%，分散劑1%，穩定劑3%，防凍劑2 4%， 余量為惰性礦物油或芳香烴溶劑。
更為優選地，各組分按質量百分比計，玫煙色棒束孢孢子懸浮液30 %，植物油 15%，乳化劑4%，分散劑1%，穩定劑3%，防凍劑4%，余量為惰性礦物油或芳香烴溶劑。所述玫煙色棒束孢菌株可采用市購常規的菌株或者現有文獻公開的玫煙色棒束孢菌株。將菌轉接到PDA平板，然后置于培養箱(25°C、12L 12D)中培養7天(d)，待產孢后，在平板上加入適量含有質量百分比濃度為0. 03%吐溫80的植物油，以接種針輕刮平板上的孢子，將配制的菌液倒入燒杯，磁力攪拌器攪拌30分鐘，待孢子完全分散后，把孢子懸浮液滴到血球計數板上用顯微鏡觀察，保證孢子含量為10 100億個/mL。如果低于這個含量，繼續添加孢子粉，如果高于這個含量，以同種植物油稀釋，通過顯微鏡觀察血球計數板使孢子含量為10 100億個/ mL。其中，制備孢子懸浮液使用的植物油為大豆油、菜籽油、蓖麻油、玉米油、花生油或植物調和油中的一種，制備孢子懸浮液時使用植物油的量沒有計算在前述“玫煙色棒束孢油懸浮劑中，各組分按質量百分比計，植物油1 20%，余量為惰性礦物油”中。所述玫煙色棒束孢油懸浮劑中占質量百分比為1 20%的植物油為大豆油、菜籽油、蓖麻油、玉米油、花生油、植物調和油中的一種或兩種以上的組合，如果是兩種以上的組合，組合比例不做嚴格限定。所述乳化劑是烷基酚聚氧乙烯醚、苯乙烯基酚聚氧乙烯醚、烷基芳基聚氧丙烯聚氧乙烯醚、烷芳基酚聚氧乙烯醚磷酸酯、蓖麻油聚氧乙烯醚、烷基苯磺酸鹽、烷基酚聚氧乙烯磷酸鹽、聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酮、山梨糖醇酐酯、脂肪醇聚氧乙烯醚、順丁烯二酸二仲辛酯磺酸鈉、多元醇脂肪酸酯及其環氧乙烷加成物、十二烷基硫酸鈉中的兩種或多種的組合；如果是兩種以上的組合，組合比例不做嚴格限定。所述的穩定劑為2，6_ 二叔丁基-4-甲基苯酚、環氧大豆油、環氧亞麻油、環氧脂、 季戊四醇中的一種或兩種的組合；如果是兩種組合，組合比例不做嚴格限定。所述的分散劑是烷基酚聚氧乙烯醚甲醛縮合物硫酸鹽、亞甲基雙荼磺酸鈉(NNO) 或木質素磺酸鈉中的一種或幾種的混合；如果是兩種以上的組合，組合比例不做嚴格限定。所述的防凍劑是乙二醇、丙二醇、丙三醇、二乙二醇中的一種或兩種的組合；如果是兩種組合，組合比例不做嚴格限定。所述的惰性礦物油為煤油、柴油、石蠟油或白礦油，所述的芳香烴溶劑油為 SolvessolOO、Solvessol50 或 Solvesso200o本發明同時提供了所述玫煙色棒束孢油懸浮劑的制備方法，包括以下步驟
(1)將玫煙色棒束孢菌株轉接到PDA平板，置于培養箱培養產孢后，在平板上加入含有質量百分比濃度為0. 03%吐溫80的植物油，輕刮平板上的孢子，將所得的菌液攪拌分散后， 把孢子懸浮液滴到血球計數板上用顯微鏡觀察，保證孢子含量為10 100億個/mL ；
(2)將孢子懸浮液、植物油、乳化劑、分散劑、穩定劑、防凍劑和惰性礦物油或芳香烴溶劑按比例混合，加入到砂磨機中研磨即得。優選地，研磨過程的環境溫度不超過40°C，在1000 4000轉/分鐘條件下研磨 30 60分鐘即得成品。本發明所述玫煙色棒束孢油懸浮劑適用于果樹、蔬菜、小麥、水稻或花卉等作物的害蟲防治方面，尤其對鱗翅目、雙翅目高效，如煙蚜、粉虱、菜青蟲、小菜蛾等防治具有顯著的效果。
本發明的有益效果是
目前玫煙色棒束孢多為粉劑，直接噴灑使用，但玫煙色棒束孢殺蟲效果慢、受環境影響較大、效果不穩定的缺點，且在這種制劑形態下，很難保證孢子高的存活率。本發明針對這些問題，通過乳化劑和植物油的結合來降低制劑界面張力，使藥劑與害蟲體壁和植物葉片有很好的親和，耐雨水沖刷，本發明優化了制劑中各組分的配伍和比例，利用惰性礦物油或芳香烴溶劑與真菌對防治害蟲產生增效作用，提高孢子存活率，結果是真菌侵染速率大幅提升，大大提高藥劑的速效性和殺蟲活性，同時，加入適宜比例的分散劑、穩定劑、防凍劑和礦物油或芳香烴溶劑，讓制劑有更好的化學和物理穩定性，提高孢子存活率，延長其使用期，很好地滿足農業生產和森林、草原害蟲防治的需要。本發明所述玫煙色棒束孢油懸浮劑高效、低毒、對環境無殘留、人畜安全，對病害不易產生抗藥性，非常適用于果樹、蔬菜、小麥、水稻和花卉等作物的害蟲防治，尤其對鱗翅目、雙翅目高效，如煙蚜、粉虱、菜青蟲、小菜蛾等防治。經檢測，本發明所述油懸浮劑貯藏2 年孢子萌發率為80%。
具體實施例方式為了更好的理解本發明的實質，下面結合具體實施例進一步詳細說明本發明，相同物質的簡單替代不一一在實施例中贅述，但本發明的內容并不局限于此。除非特別說明， 本發明采用的原料和試劑均為市購常規原料、試劑。實施例1
本實施例采用的玫煙色棒束孢菌株來源于家白蟻Cb^ioteiTBe1S formosanus Shiraki 染菌蟲體上分離得到的玫煙色棒束孢菌株PFCF-O (請見《玫煙色棒束孢的生物學特性與其對小菜蛾致病力的相關性》，《植物保護學報》第37卷，第3期，2010年6月，雷研圓等。)， 華南農業大學昆蟲生態室以PDA斜面保存該菌株于-80°C冰箱中。所述菌株在PDA培養基上，菌落生長快，25°C下，菌落長絨毛狀，形成孢子后呈肉紅色，粉狀，背面無色，粉紅色的孢梗束單生或聚集成孢梗束，壁光滑，透明，大多由著生4 6個瓶梗組成輪生體的輪狀分枝組成。瓶梗基部球狀，或擬橢圓形膨大，上部細長，分生孢子柱形至梭形，光滑，透明至微淡紅色，無厚垣孢子。使用時，將菌轉接到PDA平板，然后置于培養箱(25°C、12L 12D)中培養7d，待產孢后，在平板上加入含有質量百分比濃度為0. 03%吐溫80的植物油，以接種針輕刮平板上的孢子，將配制的菌液倒入燒杯，磁力攪拌器攪拌30分鐘，待孢子完全分散后，獲得孢子懸浮液，顯微鏡觀察觀察血球計數板，要求孢子含量為10 100億個/ mL。如果低于這個含量，繼續添加孢子粉，如果高于這個含量，以同種植物油稀釋，使孢子含量為10 100億個 / mL。實施例2
將市購的玫煙色棒束孢菌(例如上海富眾生物科技發展有限公司或廣州市微生物研究所提供的玫煙色棒束孢菌)轉接到PDA平板，然后置于培養箱(25°C、12L 12D)中培養7d， 待產孢后，在平板上加入含有質量百分比濃度為0. 03%吐溫80的菜籽油或植物調和油，以接種針輕刮平板上的孢子，將配制的菌液倒入燒杯，磁力攪拌器攪拌30分鐘，待孢子完全分散后，把孢子懸浮液滴到血球計數板上用顯微鏡觀察，保證孢子含量為10 100億個/mL。如果低于這個含量，繼續添加孢子粉，如果高于這個含量，以同種植物油稀釋，通過顯微鏡觀察血球計數板，使孢子含量為10 100億個/ mL。實施例3
1、稱取10億個/克的玫煙色棒束孢孢子懸浮液10. Og,花生油5. Og,蓖麻油聚氧乙烯醚3. 0g，脂肪醇聚氧乙烯醚2. 0，烷基酚甲醛樹脂聚氧乙烯醚硫酸鹽1. 0g，環氧亞麻油2. 0 個，分散劑NNO和乙二醇4. Og,白礦油補足至100%，一起投到研磨機中，研磨過程中以水冷卻，溫度不能超過40°C，3000轉/分鐘研磨30分鐘，制得質量百分比濃度為10%的玫煙色棒束孢油懸浮劑。2、10%玫煙色棒束孢油懸浮劑室內活性測定實驗供試對象菜青蟲，室內飼養的敏感品系；
供試藥劑10%玫煙色棒束孢油懸浮劑，10%玫煙色棒束孢懸浮液； 條件溫度25°C，濕度RH70%，光照=L :D=12 :12 試驗方法用電子分析天平分別準確稱取供試藥劑，用水稀釋1000倍。實驗采用噴霧法進行處理，將培養皿中的油菜葉上接入健壯菜青蟲20頭，將稀釋好的藥液對準蟲體噴霧，以紗布封蓋放入培養箱中。以清水為空白對照，每個處理3次重復，96小時后檢查死亡、活蟲數。本發明10%玫煙色棒束孢油懸浮劑800倍藥后96小時室內防治效果為85. 6%，不加植物油和礦物油的相同含量的普通玫煙色棒束孢孢子懸浮液按照同樣方法使用，藥后96小時防治效果為60. 2%，說明本發明對菜青蟲的防效明顯優于普通玫煙色棒束孢懸浮劑，結果見表1
表1
11_ .調蒼時_乎均減譜率(W felEIBSt )I^mmmm _倍Sfi υ50.2Sfi 2d75.4 75.4BM 3d SS 4dSft 2 80.2 — ^1 iMiAtit, .!* 1 子1 ￥ (不含種物油 8_信He w6. 6.7Sfi 2i4&T 46.1SJS Μ 舊緣·60,2 _602_CKSMld0.0gjg M ............................:..(.. ..............................0,0 0-0Ii 磨 <ω0.0 I
實施例4
1、稱取50億個/克的玫煙色棒束孢孢子懸浮液20. 0g、蓖麻油10. 0g、烷基酚聚氧乙烯醚2.0g、多元醇脂肪酸酯及其環氧乙烷加成物1.5g、抗氧劑沈4 2g、S0PA-270 l.Og和丙三醇4. 0g, Solvesso200補足至100%，一起投到研磨機中，研磨過程中以水冷卻，溫度不能超過40°C，3000轉/分鐘研磨40分鐘，制得20%玫煙色棒束孢油懸浮劑。2、室內活性測定實驗方法同實施例2。將上述20%玫煙色棒束孢油懸浮劑按1000倍稀釋噴霧小菜蛾，藥后96小時室內防治效果為87. 6%，不加植物油和礦物油的相同含量的普通玫煙色棒束孢孢子懸浮液按照同樣方法使用，藥后96小時防治效果為60. 02%。 實施例5
1、稱取80億個/克的玫煙色棒束孢孢子懸浮液30. Og,大豆油15. Og,蓖麻油聚氧乙烯醚2. 5g、聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酮1. 0g、脂肪醇聚氧乙烯醚0. 5g、烷基酚甲醛樹脂聚氧乙烯醚硫酸鹽1. 0g、環氧大豆油3. Og和丙三醇4. 0g，柴油補足至100%，一起投到研磨機中，研磨過程中以水冷卻，溫度不能超過40°C，3000轉/分鐘研磨60分鐘，制得30%玫煙色棒束孢油懸浮劑。2、室內活性測定實驗方法同實施例2。將所述30%玫煙色棒束孢油懸浮劑按1000倍稀釋噴霧煙粉虱，藥后96小時室內防治效果為88. 6%，不加植物油和礦物油的相同含量的普通玫煙色棒束孢孢子懸浮液按照同樣方法使用，藥后96小時防治效果為64. 0%，結果見表3
表權利要求
1.一種玫煙色棒束孢(/saria /itfmsoroMa)油懸浮劑，其特征在于各組分按質量百分比計，玫煙色棒束孢孢子懸浮液1 40%，植物油1 20%，乳化劑3 8%，分散劑0. 1 5%，穩定劑1 5%，防凍劑1 5%，余量為惰性礦物油或芳香烴溶劑；所述玫煙色棒束孢懸浮液中孢子含量為10 100億個/克；所述植物油為大豆油、菜籽油、蓖麻油、玉米油、花生油、植物調和油中的一種或兩種以上的組合；所述乳化劑是烷基酚聚氧乙烯醚、苯乙烯基酚聚氧乙烯醚、烷基芳基聚氧丙烯聚氧乙烯醚、烷芳基酚聚氧乙烯醚磷酸酯、蓖麻油聚氧乙烯醚、烷基苯磺酸鹽、烷基酚聚氧乙烯磷酸鹽、聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酮、山梨糖醇酐酯、脂肪醇聚氧乙烯醚、順丁烯二酸二仲辛酯磺酸鈉、多元醇脂肪酸酯及其環氧乙烷加成物、十二烷基硫酸鈉中的兩種或多種的組合；所述的穩定劑為2，6_ 二叔丁基-4-甲基苯酚、環氧大豆油、環氧亞麻油、環氧脂、季戊四醇中的一種或兩種的組合；所述的分散劑是烷基酚聚氧乙烯醚甲醛縮合物硫酸鹽、亞甲基雙荼磺酸鈉、木質素磺酸鈉中的一種或幾種的混合；所述的防凍劑是乙二醇、丙二醇、丙三醇、二乙二醇中的一種或兩種的組合；所述的惰性礦物油為煤油、柴油或白礦油，所述的芳香烴溶劑為SolvessolOO、 Solvessol50 或 Solvesso200o
2.根據權利要求1所述的玫煙色棒束孢油懸浮劑，其特征在于各組分按質量百分比計，玫煙色棒束孢孢子粉20 30%，植物油10 15%，乳化劑3 5%，分散劑1%，穩定劑3%， 防凍劑2 4%，余量為惰性礦物油或芳香烴溶劑。
3.根據權利要求1所述的玫煙色棒束孢油懸浮劑，其特征在于各組分按質量百分比計，玫煙色棒束孢孢子粉30 %，植物油15%，乳化劑4%，分散劑1%，穩定劑3%，防凍劑4%， 余量為惰性礦物油或芳香烴溶劑。
4.一種權利要求1、2或3所述玫煙色棒束孢油懸浮劑的應用，其特征在于應用于制備防治果樹、蔬菜、小麥、水稻或花卉作物害蟲的制劑方面。
5.根據權利要求4所述玫煙色棒束孢油懸浮劑的應用，其特征在于應用于制備防治鱗翅目或雙翅目害蟲的制劑方面。
6.根據權利要求4所述玫煙色棒束孢油懸浮劑的應用，其特征在于應用于制備防治菜青蟲、煙蚜、粉虱、夜蛾、棉鈴蟲或小菜蛾的制劑方面。
7.—種權利要求1、2或3所述玫煙色棒束孢油懸浮劑的制備方法，其特征在于包括以下步驟(1)將玫煙色棒束孢菌株轉接到PDA平板，置于培養箱培養產孢后，在平板上加入含有質量百分比濃度為0. 03%吐溫80的植物油，輕刮平板上的孢子，將所得的菌液攪拌分散后， 獲得孢子懸浮液，孢子懸浮液中孢子含量為10 100億個/mL ；(2)將孢子懸浮液、植物油、乳化劑、分散劑、穩定劑、防凍劑和惰性礦物油或芳香烴溶劑按比例混合，加入到砂磨機中進行研磨即得。
8.—種權利要求7所述制備方法制備得到的玫煙色棒束孢油懸浮劑的應用，其特征在于應用于制備防治果樹、蔬菜、小麥、水稻或花卉作物害蟲的制劑方面。
9.根據權利要求8所述的應用，其特征在于應用于制備防治鱗翅目或雙翅目害蟲的制劑方面。
10.根據權利要求9所述的應用，其特征在于應用于制備防治菜青蟲、煙蚜、粉虱、夜蛾、棉鈴蟲或小菜蛾的制劑方面。
全文摘要
本發明公開一種玫煙色棒束孢油懸浮劑及其制備方法和應用。所述油懸浮劑中，按質量百分比計，玫煙色棒束孢孢子懸浮液1～40%，植物油1～20%，乳化劑3～8%，分散劑0.1～5%，穩定劑1～5%，防凍劑1～5%，余量為惰性礦物油或芳香烴溶劑。本發明所述的玫煙色棒束孢油懸浮劑的孢子存活期長，貯藏2年孢子萌發率為80%；經時穩定性良好，對農作物和環境安全，主要用于果樹、蔬菜、小麥、水稻和花卉等作物的害蟲防治，尤其對鱗翅目、雙翅目高效，如如煙蚜、粉虱、菜青蟲、小菜蛾等的防治方面有顯著的效果。
文檔編號A01N25/04GK102246750SQ20111013119
公開日2011年11月23日 申請日期2011年5月20日 優先權日2011年5月20日
發明者何余容, 呂利華, 王龍江, 謝梅瓊 申請人:華南農業大學