專利名稱：一種含香菇多糖和小分子肽的飼料添加劑的制備方法
技術領域：
本發明涉及水產飼料添加劑加工方法領域，尤其涉及到一種含香菇多糖和小分子肽的飼料添加劑的制備方法。
背景技術：
香菇多糖是從香菇中提取的有效活性成分，主要成分是多糖類和不飽和脂肪酸，還含有大量的可轉變為維生素D的麥角留醇和菌留醇，經熱水提取的香菇多糖可調節人休內有免疫功能的T細胞活性，可降低甲基膽蒽誘發腫瘤的能力。香菇對癌細胞有強烈的抑制作用，對小白鼠肉瘤180的抑制率為97. 5%，對艾氏癌的抑制率為80%。香菇還含有雙鏈核糖核酸，能誘導產生干擾素，具有抗病毒能力。此外香菇多糖還能 提高機體的超氧化物歧化酶(SOD)的活性，并具有清除自由基的作用。肽是介于氨基酸與蛋白質之間的一種生化物質，它比蛋白質分子量小，比氨基酸分子量大，是蛋白質的一個片段。由兩個以上以至多達幾十個氨基酸肽鍵相連聚合成肽，再由多個肽以側鏈相接聚合成蛋白質。兩個以上的氨基酸之間以肽鍵相連，形成的“氨基酸鏈”或“氨基酸串”就叫做肽。其中，10個以上氨基酸組成的肽被稱為多肽，而由2至9個氨基酸組成的就叫做寡肽，由2至4個氨基酸組成的就叫做小分子肽或小肽。據報道小分子肽能夠通過細胞膜的滲透以原形直接進入細胞內，而不需要再次消化，也不需要耗費能量，因此小分子肽的吸收、轉化和利用具有高效、完全、徹底的特點。小分子肽有很強的生物活性，參與酶的合成，激發酶的活性，強化酶的功能，維持酶的穩定；通過合成特異蛋白質，產生特殊的生理效應。小分子肽對于細胞的作用是雙重的，即可以補充營養需求修復缺損，又可以改善功能狀態。現有水產飼料添加劑大多不能很好地提高飼養動物的免疫能力，成為水產飼料加工制造的一個限制因素。綠色水產飼料添加劑的研究開發也是進年來該行業的發展方向，確保飼養動物綠色、環保是水產養殖行業的首要問題。本發明利用香菇柄下腳料和水產加工下腳料為原料，經發酵而成富含香菇多糖和小分子肽的水產飼料添加劑，原料取材本身就體現了變廢為寶，安全環保的宗旨，同時本發明生產的飼料添加劑能夠較好地提高飼養動物的免疫力。
發明內容
本發明的目的在于克服上述現有技術中的不足之處而提供一種工藝簡單、變廢為寶、制作方便的含香菇多糖和小分子肽的飼料添加劑的制備方法。本發明是通過如下方式實現的一種含香菇多糖和小分子肽的飼料添加劑的制備方法，其特征在于具體步驟如下一 .香菇多糖制備(一)、香菇柄超微粉碎處理
取已干燥的香菇柄下腳料，粗粉碎過60目篩得香菇柄粗粉，過60目篩的香菇柄粗粉，經過65°C鼓風干燥48h后，再進行超微粉碎處理；( 二)、液態產酶培養及酶液的制備用接種環刮I環綠色木霉孢子接種到含馬鈴薯液體培養基的三角瓶中，混勻，放置28°C的生化培養箱(或搖床)中培養72h ;取混合培養液進行低速離心(或定性濾紙過濾)，得上清液即為所需酶液；(三)、香菇柄糖化液的制備取經超微粉碎后的香菇柄粉末，與步驟(二)中的酶液進行酶解，去除酶解產物中的大顆粒殘渣即得香菇柄糖化液；
(四)香菇多糖溶液制備將步驟(三)中所得香菇柄糖化液經雙層過濾后，所得濾液通過靜置過夜自動分層、離心，所得的上清液即為香菇多糖溶液；二.小分子肽制備(一)、取水產品加工下腳料，去除雜質后，加入水，然后利用組織勻漿機破碎勻漿；(二)、將步驟(一)所得的勻漿加入海洋低溫堿性蛋白酶，進行酶解，酶解后得到酶解液；(三)、將步驟(二)的酶解液經篩網過濾，過濾后得到過濾液；(四)、將步驟(三)的過濾液用蝶式離心機進行離心過濾，得上清液；(五)、將步驟(四)的上清液，進行二次超濾濃縮，制得小分子肽溶液，并加入穩定劑備用；三.含香菇多糖和小分子肽的飼料添加劑的制備將步驟一所得香菇多糖溶液與步驟二所得小分子肽溶液充分混合，香菇多糖溶液與小分子肽溶液體積比為I : 5 10，進行噴霧干燥，干燥后即得含香菇多糖和小分子肽的飼料添加劑。所述的馬鈴薯液體培養基的制備方法為將馬鈴薯去皮，切成塊加水，煮沸30min，用紗布過濾，所得濾液加葡萄糖，補足水至100ml，裝入三角瓶。所述的海洋低溫堿性蛋白酶能水解水產品加工下腳料中的蛋白質，釋放出小分子肽，同時水解產生的油脂可用于飼料生產。所述的用蝶式離心機離心的過濾液的上層油脂干燥后可用于飼料生產。本發明利用香菇多糖能夠提高超氧化物歧化酶活性及其他多種生物學功能，具有免疫調節作用，同時也能夠激活小分子肽的生物學活性的特點。小分子肽也具有多種生物學效應，用于飼料添加劑不僅能發揮香菇多糖和小分子肽自身的作用，同時彼此有一個協同增強的作用，能較大地提高免疫能力。香菇多糖和小分子肽自身的營養價值也能提高飼料效率。香菇柄下腳料和水產加工下腳料一般都低值化處理，極大地浪費了資源，本發明將其充分回收利用，大大地提高了經濟效益。同時本發明生產的水產飼料添加劑能夠很好地提高飼養動物的免疫能力，降低餌料系數。本發明優點在于
I、生產工藝簡單，操作方便。2、有效地回收被浪費的資源。3、提高飼養動物的免疫能力，降低餌料系數。
具體實施例方式現詳述本發明
具體實施例方式一種含香菇多糖和小分子肽的飼料添加劑的制備方法，其特征在于具體步驟如下一 .香菇多糖制備 (一)、香菇柄超微粉碎處理取已干燥的香菇柄下腳料，粗粉碎過60目篩得香菇柄粗粉，過60目篩的香菇柄粗粉，經過65°C鼓風干燥48h后，再進行超微粉碎處理；( 二)、液態產酶培養及酶液的制備用接種環刮I環綠色木霉孢子接種到含馬鈴薯液體培養基的三角瓶中，混勻，放置28°C的生化培養箱(或搖床)中培養72h ;取混合培養液進行低速離心(或定性濾紙過濾)，得上清液即為所需酶液；(三)、香菇柄糖化液的制備取經超微粉碎后的香菇柄粉末，與步驟(二)中的酶液進行酶解，去除酶解產物中的大顆粒殘渣即得香菇柄糖化液；(四)香菇多糖溶液制備將步驟(三)中所得香菇柄糖化液經雙層過濾后，所得濾液通過靜置過夜自動分層、離心，所得的上清液即為香菇多糖溶液；二 .小分子肽制備(一)、取水產品加工下腳料，去除雜質后，加入水，然后利用組織勻漿機破碎勻漿；(二)、將步驟(一)所得的勻漿加入海洋低溫堿性蛋白酶，進行酶解，酶解后得到酶解液；(三)、將步驟(二)的酶解液經篩網過濾，過濾后得到過濾液；(四)、將步驟(三)的過濾液用蝶式離心機進行離心過濾，得上清液；(五)、將步驟(四)的上清液，進行二次超濾濃縮，制得小分子肽溶液，并加入穩定劑備用；三.含香菇多糖和小分子肽的飼料添加劑的制備將步驟一所得香菇多糖溶液與步驟二所得小分子肽溶液充分混合，香菇多糖溶液與小分子肽溶液體積比為I : 5 10，進行噴霧干燥，干燥后即得含香菇多糖和小分子肽的飼料添加劑。所述的馬鈴薯液體培養基的制備方法為將馬鈴薯去皮，切成塊加水，煮沸30min，用紗布過濾，所得濾液加葡萄糖，補足水至100ml，裝入三角瓶。所述的海洋低溫堿性蛋白酶能水解水產品加工下腳料中的蛋白質，釋放出小分子肽，同時水解產生的油脂可用于飼料生產。
所述的用蝶式離心機離心的過濾液的上層油脂干燥后可用于飼料生產。本發明利用香菇多糖能夠提高超氧化物歧化酶活性及其他多種生物學功能，具有免疫調節作用，同時也能夠激活小分子肽的生物學活性的特點。小分子肽也具有多種生物學效應，用于飼料添加劑不僅能發揮香菇多糖和小分子肽自身的作用，同時彼此有一個協同增強作用，能較大地提高免疫能力。香菇多糖和小分子肽自身的營養價值也能提高飼料效率。香菇柄下腳料和水產加工下腳料一般都低值化處理，極大地浪費了資源，本發明將其充分回收利用，大大地提高了經濟效益。同時本發明生產的水產飼料添加劑能夠很好地提高飼養動物的免疫能力，降低餌料系數。具體實施例一—.香燕多糖制備
(一)、香菇柄超微粉碎處理取已干燥的香菇柄下腳料lOOOg，粗粉碎過60目篩得香菇柄粗粉，過60目篩的香菇柄粗粉，經過65°C鼓風干燥48h后，以2kg IT1的加料速度在進行超微粉碎處理，粉碎機的工作壓力為I. OMpa，進料壓力0. 3Mpa，氣量為I. 8m3. mirT1 ；( 二 )、液態產酶培養及酶液的制備用接種環刮I環綠色木霉孢子接種到含馬鈴薯液體培養基的三角瓶中，混勻，放置28°C的生化培養箱(或搖床)中培養72h ;取混合培養液進行低速離心(或定性濾紙過濾)，得上清液即為所需酶液； (三)、香菇柄糖化液的制備取經超微粉碎后的香菇柄，與步驟(二)中的酶液進行酶解，所述的經超微粉碎后的香菇柄與步驟(二)中的酶液質量體積比為Ikg 150ml，酶解溫度為28°C，pH值為4. 5 ；酶解產物經去除大顆粒殘渣即得香菇柄糖化液；(四)香菇多糖溶液制備將步驟(三)中所得香菇柄糖化液經雙層過濾后，所得濾液通過靜置過夜自動分層、離心，所得的上清液即為香菇多糖溶液；二 .小分子肽制備(一 )、取水產品加工下腳料，去除雜質后稱重2000g，加入水，然后利用組織勻漿機破碎勻漿；( 二)、將步驟(一)所得的勻漿加入5000U/kg海洋低溫堿性蛋白酶，進行酶解，酶解控制反應溫度在18°C，反應pH為6. 8，酶解4天后得到酶解液；(三)、將步驟(二)的酶解液經篩網過濾，過濾后得到過濾液；(四)、將步驟(三)的過濾液用蝶式離心機進行離心過濾，得上清液；(五)、將步驟(四)的上清液，進行二次超濾濃縮，制得小分子肽溶液，并加入穩定劑備用；三.含香菇多糖和小分子肽的飼料添加劑的制備將步驟一所得香菇多糖溶液與步驟二所得小分子肽溶液充分混合，香菇多糖溶液與小分子肽溶液體積比為I : 5，進行噴霧干燥，干燥后即得含香菇多糖和小分子肽的飼料添加劑。
具體實施例二 一.香菇多糖制備(一)、香菇柄超微粉碎處理取已干燥的香菇柄下腳料lOOOg，粗粉碎過60目篩得香菇柄粗粉，過60目篩的香菇柄粗粉，經過65°C鼓風干燥48h后，以2kg IT1的加料速度在進行超微粉碎處理，粉碎機的工作壓力為I. OMpa，進料壓力0. 3Mpa，氣量為I. 8m3. mirT1 ；( 二 )、液態產酶培養及酶液的制備用接種環刮I環綠色木霉孢子接種到含馬鈴薯液體培養基的三角瓶中，混勻，放置28°C的生化培養箱(或搖床)中培養72h ;取混合培養液進行低速離心(或定性濾紙過濾)，得上清液即為所需酶液； (三)、香菇柄糖化液的制備取經超微粉碎后的香菇柄粉末，與步驟(二)中的酶液進行酶解，所述的經超微粉碎后的香菇柄與步驟(二)中的酶液質量體積比為Ikg 300ml，酶解溫度為30°C，pH值為5. 0 ;酶解產物經去除大顆粒殘渣即得香菇柄糖化液；(四)香菇多糖溶液制備將步驟(三)中所得香菇柄糖化液經雙層過濾后，所得濾液通過靜置過夜自動分層、離心，所得的上清液即為香菇多糖溶液；二 .小分子肽制備(一 )、取水產品加工下腳料，去除雜質后稱重2000g，加入水，然后利用組織勻漿機破碎勻漿；( 二)、將步驟(一)所得的勻漿加入7000U/kg海洋低溫堿性蛋白酶，進行酶解，酶解控制反應溫度在20°C，反應pH為7. 0，酶解4天后得到酶解液；(三)、將步驟(二)的酶解液經篩網過濾，過濾后得到過濾液；(四)、將步驟(三)的過濾液用蝶式離心機進行離心過濾，得上清液；(五)、將步驟(四)的上清液，進行二次超濾濃縮，制得小分子肽溶液，并加入穩定劑備用；三.含香菇多糖和小分子肽的飼料添加劑的制備將步驟一所得香菇多糖溶液與步驟二所得小分子肽溶液充分混合，香菇多糖溶液與小分子肽溶液體積比為I : 7，進行噴霧干燥，干燥后即得含香菇多糖和小分子肽的飼料添加劑。具體實施例三一.香菇多糖制備(一)、香菇柄超微粉碎處理取已干燥的香菇柄下腳料lOOOg，粗粉碎過60目篩得香菇柄粗粉，過60目篩的香菇柄粗粉，經過65°C鼓風干燥48h后，以2kg IT1的加料速度在進行超微粉碎處理，粉碎機的工作壓力為I. OMpa，進料壓力0. 3Mpa，氣量為I. 8m3. mirT1 ；(二 )、液態產酶培養及酶液的制備用接種環刮I環綠色木霉孢子接種到含馬鈴薯液體培養基的三角瓶中，混勻，放置28°C的生化培養箱(或搖床)中培養72h ;取混合培養液進行低速離心(或定性濾紙過濾)，得上清液即為所需酶液；(三)、香菇柄糖化液的制備取經超微粉碎后的香菇柄粉末，與步驟(二)中的酶液進行酶解，所述的經超微粉碎后的香菇柄與步驟(二)中的酶液質量體積比為Ikg 500ml，酶解溫度為33°C，pH值為5. 5 ;酶解產物經去除大顆粒殘渣即得香菇柄糖化液；(四)香菇多糖溶液制備將步驟(三)中所得香菇柄糖化液經雙層過濾后，所得濾液通過靜置過夜自動分層、離心，所得的上清液即為香菇多糖溶液；二.小分子肽制備(一 )、取水產品加工下腳料，去除雜質后稱重2000g，加入水，然后利用組織勻漿機破碎勻漿；二)、將步驟(一)所得的勻漿加入8000U/kg海洋低溫堿性蛋白酶，進行酶解，酶解控制反應溫度在22°C，反應pH為7. 3，酶解4天后得到酶解液；(三)、將步驟(二)的酶解液經篩網過濾，過濾后得到過濾液；(四)、將步驟(三)的過濾液用蝶式離心機進行離心過濾，得上清液；(五)、將步驟(四)的上清液，進行二次超濾濃縮，制得小分子肽溶液，并加入穩定劑備用；三.含香菇多糖和小分子肽的飼料添加劑的制備將步驟一所得香菇多糖溶液與步驟二所得小分子肽溶液充分混合，香菇多糖溶液與小分子肽溶液體積比為I : 10，進行噴霧干燥，干燥后即得含香菇多糖和小分子肽的飼料添加劑。本發明的實驗數據采用實施例一方法制備的飼料添加劑進行以下試驗，可見本發明所述的飼料添加劑能提高動物肌體抗病、抗不良環境的免疫能力，提高了成活率，降低了餌料系數，達到很好的經濟效益。試驗I苗期添加實施例一方法制備的飼料添加劑喂養的效果試驗某處養殖場設三個處理實驗，飼養期110天每口池；試驗結果見表I:表I南美白對蝦苗期添加實施例一制備的飼料添加劑試驗
權利要求
1.一種含香菇多糖和小分子肽的飼料添加劑的制備方法，其特征在于 具體步驟如下 一 香燕多糖制備 (一)、香菇柄超微粉碎處理 取已干燥的香菇柄下腳料，粗粉碎過60目篩得香菇柄粗粉，過60目篩的香菇柄粗粉，經過65 °C鼓風干燥48h后，再進行超微粉碎處理； (二)、液態產酶培養及酶液的制備 用接種環刮I環綠色木霉孢子接種到含馬鈴薯液體培養基的三角瓶中，混勻，放置.280C的生化培養箱或搖床中培養72h ;取混合培養液進行低速離心或定性濾紙過濾，得上清液即為所需酶液； (三)、香菇柄糖化液的制備 取經超微粉碎后的香菇柄粉末，與步驟(二)中的酶液進行酶解，去除酶解產物中的大顆粒殘渣即得香菇柄糖化液； (四)香菇多糖溶液制備 將步驟(三)中所得香菇柄糖化液經雙層過濾后，所得濾液通過靜置過夜自動分層、離心，所得的上清液即為香菇多糖溶液； 二.小分子肽制備 (一)、取水產品加工下腳料，去除雜質后，加入水，然后利用組織勻漿機破碎勻漿； (二)、將步驟(一)所得的勻漿加入海洋低溫堿性蛋白酶，進行酶解，酶解后得到酶解液； (三)、將步驟(二)的酶解液經篩網過濾，過濾后得到過濾液； (四)、將步驟(三)的過濾液用蝶式離心機進行離心過濾，得上清液； (五)、將步驟(四)的上清液，進行二次超濾濃縮，制得小分子肽溶液，并加入穩定劑備用; 三.含香菇多糖和小分子肽的飼料添加劑的制備 將步驟一所得香菇多糖溶液與步驟二所得小分子肽溶液充分混合，香菇多糖溶液與小分子肽溶液體積比為I : 5 10 (即比值為1/10 1/5)，進行噴霧干燥，干燥后即得含香菇多糖和小分子肽的飼料添加劑。
2.根據權利要求I所述的一種含香菇多糖和小分子肽的飼料添加劑的制備方法，其特征在于所述的馬鈴薯液體培養基的制備方法為將馬鈴薯去皮，切成塊加水，煮沸30min，用紗布過濾，所得濾液加葡萄糖，補足水至100ml，裝入三角瓶。
3.根據權利要求I所述的一種含香菇多糖和小分子肽的飼料添加劑的制備方法，其特征在于所述的海洋低溫堿性蛋白酶能定向水解水產品加工下腳料中的蛋白質，釋放小分子肽，同時水解產生的油脂可用于飼料生產。
4.根據權利要求I所述的一種含香菇多糖和小分子肽的飼料添加劑的制備方法，其特征在于所述的用蝶式離心機離心的過濾液的上層油脂干燥后可用于飼料生產。
全文摘要
本發明公開了一種含香菇多糖和小分子肽的飼料添加劑的制備方法；采用已干燥的香菇柄下腳料和水產品加工下腳料作為原料制成含香菇多糖和小分子肽的飼料添加劑；本發明將香菇柄下腳料和水產加工下腳料充分回收利用，且大大地提高了經濟效益。同時本發明生產的水產飼料添加劑能夠很好地提高飼養動物的免疫能力，降低餌料系數。
文檔編號A23K1/10GK102742726SQ20111010216
公開日2012年10月24日 申請日期2011年4月22日 優先權日2011年4月22日
發明者吳云通, 李慶華, 林鴻榮, 黃貞勝 申請人:福建大昌生物科技實業有限公司