專利名稱：利用稻草生產(chǎn)黃腐酸的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明與生物發(fā)酵技術(shù)有關(guān)，特別與利用生物技術(shù)綜合開發(fā)利用農(nóng)業(yè)廢棄物有關(guān)，更具體地說(shuō)與通過(guò)微生物復(fù)合菌群發(fā)酵稻草生產(chǎn)生化黃腐酸的方法有關(guān)。
背景技術(shù)：
農(nóng)作物秸稈是一種有機(jī)物，其中碳、氧、氫三種化學(xué)成分總和占95%以上，其余為鉀、氮、磷、硅、鈣、鎂、硫、鐵、鎂等礦質(zhì)元素；有機(jī)成分以纖維素、半纖維素為主，其次是木質(zhì)素、蛋白質(zhì)、脂肪、灰分等。稻草主要成分為全氮8. 1克/千克，全碳426. 1克/千克，碳/ 氮(C/N) 52. 6，水溶性氮2.7克/千克，水溶性碳45.7克/千克，水溶性碳/氮(C/N) 16. 9， 半纖維素177. 9克/千克，纖維素觀8. 4克/千克，木質(zhì)素61. 3克/千克，二氧化硅152. 3 克/千克。我國(guó)每年有稻草約1.8億噸，占全國(guó)秸稈總量的25.4%，是我國(guó)第一大秸稈資源， 是開發(fā)新型有機(jī)物原料的寶貴資源。目前約10 20%的稻草秸稈作草食動(dòng)物飼料；20% 左右直接作為燃料或生物質(zhì)能源；造紙或其它工業(yè)原料不到3%，其余的大部分稻草秸稈被閑置廢棄形成新的農(nóng)業(yè)垃圾或就地焚燒污染環(huán)境。黃腐酸是一類成分較為復(fù)雜的混合物，含有大量具有生長(zhǎng)活性的酶類、氨基酸、維生素等生理效應(yīng)物質(zhì)以及微量元素養(yǎng)分，對(duì)促進(jìn)植株生長(zhǎng)發(fā)育、健壯根系有顯著功效。也是目前發(fā)現(xiàn)的能最有效調(diào)節(jié)葉面氣孔開張度的生理活性物質(zhì)，應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上可協(xié)調(diào)植物葉面氣孔對(duì)蒸騰、干旱的調(diào)控效應(yīng)，保持植株和土壤較多的水分過(guò)度蒸發(fā)，從而增強(qiáng)植物抗旱性能。目前國(guó)內(nèi)外生產(chǎn)黃腐酸主要①利用泥炭、褐煤以及風(fēng)化煤等煤炭資源，通過(guò)化學(xué)方法降解，然后提取黃腐酸類物質(zhì)。該法對(duì)環(huán)境有不利影響；②模擬天然黃腐酸生成過(guò)程， 以多元酚、醌、尿素、木質(zhì)素。纖維、含氮有機(jī)物等進(jìn)行氧化合成黃腐酸類混合物，該法成本一般比較高；③以農(nóng)副產(chǎn)品的下腳料如糖渣、果渣、啤酒廠廢酵母等為原料，利用生物發(fā)酵生產(chǎn)黃腐酸，目前該方法受原料資源本身特性差異，需要針對(duì)不同的物料篩選特定的微生物群落更有利于提高效率。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是為了提供一種能大大縮短發(fā)酵周期，大大提高發(fā)酵效率和黃腐酸收率，利于環(huán)保的利用稻草生產(chǎn)生化黃腐酸的方法。本發(fā)明的目的是這樣來(lái)實(shí)現(xiàn)的本發(fā)明利用稻草生產(chǎn)生化黃腐酸的方法，該方法包括以下步驟1)配備稻草秸桿和養(yǎng)分養(yǎng)分包括麩皮、糠皮、豆粕或花生餅、氮源，麩皮和糠皮主要提供磷、鐵、鈣、鎂、鉀等礦質(zhì)養(yǎng)分以及維生素等微生物生長(zhǎng)所需的生長(zhǎng)因子，麩皮與糠皮按照2 1比例混合；豆粕或花生餅主要提供微生物快速生長(zhǎng)所需蛋白質(zhì)、氨基酸等養(yǎng)分，氮源主要提供微生物快速生長(zhǎng)所的氮素養(yǎng)分；2)稻草秸桿軟化處理機(jī)械破碎稻草至變軟，浸泡于重量百分濃度3 4%的石灰水溶液中，24 4 后撈出，軟化好的稻草質(zhì)地柔軟，茶褐色，含水量60 70% (將草緊擰見水漬而不下滴)，稻草不同于其它農(nóng)作物秸稈，由于水稻是典型的喜硅作物，其莖葉干物質(zhì)中含SiA達(dá)15 % 20 %，水稻秸稈硅質(zhì)不僅存在于硅質(zhì)細(xì)胞內(nèi)，而且在所有表皮細(xì)胞表面都積累有許多硅質(zhì)化大分子不可溶解的晶體結(jié)構(gòu)，這種硅化物晶體結(jié)構(gòu)在細(xì)胞壁與半纖維素、木質(zhì)素形成角質(zhì)一硅一蠟層特殊屏障結(jié)構(gòu)，使得稻草表皮的機(jī)械強(qiáng)度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其它作物秸稈，從而構(gòu)成保護(hù)稻草秸稈被生物降解的特殊屏障。因此，稻草秸稈微生物發(fā)酵前的軟化處理，破壞其“特殊屏障”是以下深度發(fā)酵制備黃腐酸的關(guān)鍵技術(shù)環(huán)節(jié)；3)第一階段微生物發(fā)酵經(jīng)充分軟化處理的稻草秸稈，按高1 1. 5米、寬1. 5 2 米，分三層接種堆積發(fā)酵，其中一、二層各厚30 60cm，第三層20 50cm，分別在各層之間接種發(fā)酵混合菌劑，撒施養(yǎng)分，每噸稻草秸稈混合菌劑用量20 100kg、養(yǎng)分100 200kg， 各層之間養(yǎng)分及菌種至下而上按照重量比4 5 3 4 1 2分配，接種完成后將發(fā)酵堆體頂和四周稍壓實(shí)拍平，用直徑3 5cm的棍每隔50 70cm從頂部垂直向下打洞，再覆薄膜和草簾保濕保溫，當(dāng)料溫上升到至少60°C時(shí)，維持M-48小時(shí)，翻堆至少2次，完成第一階段微生物發(fā)酵；4)第二階段微生物發(fā)酵經(jīng)過(guò)第一階段的發(fā)酵所得的發(fā)酵物料基本形成固液混合物，再次接種混合發(fā)酵菌液，并補(bǔ)充微生物生長(zhǎng)所必需的養(yǎng)分，完成第二階段固液混合物深度發(fā)酵過(guò)程，每噸固液混合物用混合發(fā)酵菌液量控制在20 50kg，養(yǎng)分補(bǔ)充量為第一階段用量的50 70%，第二階段為糖化固液混合物深度發(fā)酵；5)制備黃腐酸經(jīng)充分發(fā)酵后的固液混合物，板框擠壓過(guò)濾得到的懸浮液體，通過(guò)0. 1 0. 2mol/L堿液溶解抽提分離，調(diào)PH 2. 0所得液體部分為黃腐酸母液，黃腐酸含量可達(dá)到10 30%，黃腐酸母液經(jīng)濃縮精制干燥，制得60 70%的黃腐酸固體物。上述步驟所制得的黃腐酸母液，含有大量具有生長(zhǎng)活性的酶類、氨基酸、維生素等生理效應(yīng)物質(zhì)以及微量元素養(yǎng)分，對(duì)促進(jìn)植株生長(zhǎng)發(fā)育、健壯根系有顯著功效。可用于生產(chǎn)抗旱肥料、植物蒸騰劑抑制劑、植物葉面肥、促根劑等精細(xì)農(nóng)化產(chǎn)品。上述步驟過(guò)濾所得濾渣含有豐富的微生物菌落及有機(jī)活性養(yǎng)分，可進(jìn)一步制備微生物菌劑，用于秸稈還田的催腐劑；也可以直接用于制備生物有機(jī)菌肥，作為基肥施用。上述的發(fā)酵混合菌劑是按以下步驟制備的1)準(zhǔn)備第一發(fā)酵菌種組放線菌、鏈霉菌、巨大芽孢桿菌；準(zhǔn)備第二發(fā)酵菌種組 纖維菌、纖維多囊菌、熱纖維梭菌；準(zhǔn)備第三發(fā)酵菌種組枯草芽孢桿菌；準(zhǔn)備第四發(fā)酵菌種組黑曲霉、綠色木霉；某一種菌種濃度或比例最大不超過(guò)3份，以避免優(yōu)勢(shì)菌種過(guò)度繁殖而影響發(fā)酵深度，具體混合比例根據(jù)稻草前處理狀況、發(fā)酵期間環(huán)境溫度、干濕狀況篩選確定。在前處理比較一致的情況下，冬季發(fā)酵要求第一、二組按較高比例進(jìn)行混合，夏天發(fā)酵要求第三、四組按較高比例混合，春秋兩季按照平均比例進(jìn)行；2)將上述四組發(fā)酵菌種組中每組至少1種菌種、按照各菌種生長(zhǎng)特性進(jìn)行放大培養(yǎng)，當(dāng)菌種濃度分別達(dá)到IX IO9 1(1個(gè)/克的濃度后，按照1 3 1 3 1 3 1 3比例進(jìn)行混合，即制得發(fā)酵混合菌劑；某一種菌種濃度或比例最大不超過(guò)2份，以避免優(yōu)勢(shì)菌種過(guò)渡繁殖而影響黃腐酸質(zhì)量。上述的方法中將米曲霉、產(chǎn)朊假絲酵母、假單胞桿菌、熱帶假絲酵母、釀酒酵母中的3 4種菌種，按照各菌種生長(zhǎng)特性，進(jìn)行放大培養(yǎng)，當(dāng)菌種濃度分別達(dá)到1 X IO9 1(1個(gè)/ 克的濃度后，按照1 2 1 2 1 2或1 2 1 2 1 2 1 2比例進(jìn)行混合，即制得混合發(fā)酵菌液。上述的氮源包括尿素、碳酸氫銨、磷酸二銨、磷酸一銨中的至少1種。本發(fā)明方法以稻草為原料，采用細(xì)菌、真菌等微生物多菌群組合，按照物料狀態(tài)混合生物發(fā)酵技術(shù)，降解稻草中的纖維、半纖維、木質(zhì)素等碳水化合物為小分子的黃腐酸活性物，并經(jīng)分級(jí)、抽離、濃縮得到高含量黃腐酸產(chǎn)品，并以此黃腐酸為原料制備抗旱、防凍系列應(yīng)用制劑，微生物催腐劑，生物有機(jī)肥等農(nóng)用生物產(chǎn)品。本發(fā)明方法具有以下優(yōu)點(diǎn)①針對(duì)稻草的特殊結(jié)構(gòu)和化合物組成，篩選高效菌群組合，采用“機(jī)械軟化處理一兩段式發(fā)酵”工藝路線進(jìn)行深度發(fā)酵，將稻草中的大分子碳水化合物降解成小分子活性黃腐酸類化合物。采用機(jī)械破碎處理解決了稻草生物降解中“特殊屏障結(jié)構(gòu)”的保護(hù)作用；同時(shí)，通過(guò)兩段式發(fā)酵有效解決了不同菌群對(duì)空氣的需求差異，有助優(yōu)勢(shì)菌群的培養(yǎng)，大大縮短了發(fā)酵周期，加強(qiáng)了發(fā)酵深度，大大提高了發(fā)酵效率和黃腐酸收率；②本發(fā)明所用菌種都是已知菌種，可通過(guò)商業(yè)手段、從腐殖土、糞便等中分離篩選目標(biāo)菌株或其它途徑獲得，因而所用菌種資源不會(huì)限制本發(fā)明技術(shù)的實(shí)施，其放大培養(yǎng)方法也是常規(guī)方法，屬于公知技術(shù)。③本發(fā)明工藝方法，其生物發(fā)酵過(guò)程不受季節(jié)溫度的限制，一年四季均可進(jìn)行；其生產(chǎn)過(guò)程沒(méi)有高溫、高壓等特殊條件或特殊設(shè)備要求，整個(gè)生產(chǎn)過(guò)程條件溫和，沒(méi)有任何安
^^^ 急 ^^ ο④本發(fā)明以我國(guó)最大的秸稈資源稻草為原料制備小分子生化黃腐酸活性化合物， 既是對(duì)我國(guó)大量的可再生資源的高效利用，變廢為寶，又是對(duì)生態(tài)環(huán)境的維護(hù)；同時(shí)整個(gè)工藝方法沒(méi)有三廢排放，所有主產(chǎn)物、副產(chǎn)物都被充分利用與開發(fā)，因此，本發(fā)明所述及黃腐酸制備工藝方法是非常高效、清潔、環(huán)保的技術(shù)方法。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1 原料準(zhǔn)備新鮮稻草秸稈5t，4%石灰水2t，麩皮300kg，糠皮150kg，豆粕75kg，磷酸二銨150kg，碳酸氫銨150kg第一階段發(fā)酵混合菌劑100kg，其中第一 第四發(fā)酵菌種組比例按1 :1:3:3 進(jìn)行，具體用量如下放線菌(Sti^ptomyces spim) 5kg，菌種濃度1 X IO9 1(1個(gè)/克、巨大芽孢桿菌 (Bacillus mega terium) 5kg，菌種濃度 1 X IO9 1 個(gè) / 克熱纖維梭菌(clostridimnthermocellum) 10kg，菌種濃度 1 X IO9 1CI 個(gè) / 克枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis) 30kg，菌種濃度1 X IO9 1CI個(gè)/克黑曲霉(Aspergillusniger van tieghem) 15kg，菌種濃度 1 X IO9 1CI 個(gè) / 克、綠色木霉(Trichoderma viride Pes) 15kg，菌種濃度 1 X IO9 1CI 個(gè) / 克第二階段菌混合發(fā)酵菌液100kg，各菌種比例按1 1 1進(jìn)行，其中產(chǎn)朊假絲酵母33kg，菌種濃度分別達(dá)到IXlO9 1(1個(gè)/克假單胞桿菌33kg，菌種濃度分別達(dá)到IXlO9 1(1個(gè)/克釀酒酵母34kg，菌種濃度分別達(dá)到IXlO9 1(1個(gè)/克
上述各菌種是采用公知的常規(guī)放大培養(yǎng)方法按照各菌種生長(zhǎng)特性進(jìn)行放大培養(yǎng)的。制備方法第一步，將5t稻草鋪在干凈地面上，用石磙反復(fù)碾壓至稻草變軟，浸泡于4%的石灰水溶液中，24h后撈出，攤晾至含水量60 %。第二步，將軟化處理的稻草秸稈，按高1米、寬1. 5米，長(zhǎng)度不限，分三層接種堆積發(fā)酵。其中，一層厚30cm，二層厚40cm，第三層30cm，并將混合好的第一階段發(fā)酵混合菌劑 IOOkg按照至下而上4 4 2比例撒施于各層之間，同時(shí)撒施麩皮200kg，糠皮100kg，豆粕50kg，磷酸二銨100kg，碳酸氫銨100kg，各層之間養(yǎng)分用量按照至下而上4 4 2分配，接種完成后將發(fā)酵堆體頂和四周稍壓實(shí)拍平，用直徑3cm的木棍每隔50cm從頂部垂直向下打洞，再覆薄膜和草簾保濕保溫，當(dāng)料溫上升至60°C以上時(shí)，維持48h，翻堆。如此翻堆 2次，完成第一階段微生物發(fā)酵。在第二次翻堆后24h后，均勻接種預(yù)先混合好的第二階段的混合發(fā)酵菌液，并補(bǔ)充麩皮100kg，糠皮50kg，豆粕25kg，磷酸二銨50kg，碳酸氫銨50kg 養(yǎng)分，要求菌種、養(yǎng)分、物料必須均勻混合，確保微生物良好生長(zhǎng)，促進(jìn)第二階段徹底發(fā)酵。第三步，制備黃腐酸經(jīng)充分發(fā)酵后的固液混合物，板框擠壓過(guò)濾得到的懸浮液體，通過(guò)0. lmol/LnaOH(也可用KOH等)堿液溶解抽提分離，調(diào)pH 2. 0所得液體部分為黃腐酸母液，黃腐酸含量> 15%，黃腐酸母液經(jīng)濃縮精制干燥，可得到60%的黃腐酸固體物。
第四步，取黃腐酸母液，加入表面活性劑(如吐溫80)，磷酸二氫鉀等，控制黃腐酸含量至1-3 %，0. 01 %吐溫80，0. 5-1 %磷酸二氫鉀，即為蒸騰抑制劑。也可取母液加微量元素或N、P、K養(yǎng)份，制備抗旱肥，各組分含量以產(chǎn)品稀釋倍數(shù)調(diào)整。第五步，過(guò)濾后的酵渣，微生物有效活菌數(shù)彡1 X 107 8個(gè)/克，有機(jī)質(zhì)彡40%，直接低溫造粒后，即為生物菌肥。實(shí)施例2 原料準(zhǔn)備自然風(fēng)干稻草5噸，4%石灰水4t，麩皮700kg，糠皮350kg，花生餅 200kg，尿素 400kg，磷酸一銨 200kg第一階段發(fā)酵混合菌劑500kg，其中第一 第四發(fā)酵菌組比例按1 1 1 1進(jìn)行，具體用量如下放線菌(Str印tomycesspim)65kg，菌種濃度1 X IO9 1CI個(gè)/克、鏈霉菌 (Streptomyces) 60kg,菌種濃度 1 X IO9 10/ 克纖維菌(Cytophagal) 65kg，菌種濃度1 X IO9 1(1個(gè)/克，纖維多囊菌(Poly angiumcellulosum) 60kg,菌種濃度 1 X IO9 1CI 個(gè) / 克枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis) 125kg，菌種濃度1 X IO9 1CI個(gè)/克黑曲霉(Aspergillusniger van tieghem) 65kg，菌種濃度 1 X IO9 1 個(gè) / 克、綠色木霉(Trichoderma viride Pes) 60kg，菌種濃度 1 X IO9 1CI 個(gè) / 克第二階段混合發(fā)酵菌液250kg，各菌種比例按2 :1:1: 1進(jìn)行，其中產(chǎn)朊假絲酵母100kg，菌種濃度分別達(dá)到1 X IO9 1(1個(gè)/克假單胞桿菌50kg，菌種濃度分別達(dá)到IXlO9 1(1個(gè)/克熱帶假絲酵母50kg，菌種濃度分別達(dá)到IXlO9 1(1個(gè)/克釀酒酵母50kg，菌種濃度分別達(dá)到IXlO9 1(1個(gè)/克。
制備方法第一步，將5t稻草鋪在干凈地面上，用石磙反復(fù)碾壓至稻草變軟，浸泡于3%的石灰水溶液中，48h后撈出，攤晾至含水量65 %。第二步，將軟化處理的稻草秸稈，按高1. 5米、寬2米，長(zhǎng)度不限，分三層接種堆積發(fā)酵。其中，一層厚40cm，二層厚60cm，第三層50cm，并將混合好的第一階段發(fā)酵混合菌劑 500kg按照至下而上5 3 2比例撒施于各層之間，同時(shí)撒施麩皮350kg，糠皮17^g，花生餅100kg，磷酸一銨100kg，尿素200kg，各層之間養(yǎng)分用量按照至下而上5 3 2分配， 接種完成后將發(fā)酵堆體頂和四周稍壓實(shí)拍平，用直徑3cm的木棍每隔50cm從頂部垂直向下打洞，再覆薄膜和草簾保濕保溫，當(dāng)料溫上升至80°C以上時(shí)，維持Mh，翻堆。如此翻堆2次， 完成第一階段發(fā)酵。在第二次翻堆后4 后，均勻接種預(yù)先混合好的第二階段混合發(fā)酵菌液，并補(bǔ)充麩皮:350kg，糠皮17Ag，花生餅100kg，磷酸一銨100kg，尿素200kg養(yǎng)分，要求菌種、養(yǎng)分、物料必須均勻混合，確保微生物良好生長(zhǎng)，促進(jìn)第二階段徹底發(fā)酵第三步，制備黃腐酸經(jīng)充分發(fā)酵后的固液混合物，板框擠壓過(guò)濾得到的懸浮液體，通過(guò)0. 2mol/LNa0H堿液溶解抽提分離，調(diào)pH 2. 0所得液體部分為黃腐酸母液，黃腐酸含量> 30%，黃腐酸母液經(jīng)濃縮精制干燥，可得到> 70%的黃腐酸固體物。其余具體操作同實(shí)施例1。上述實(shí)施例是對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容作進(jìn)一步的說(shuō)明，但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于上述實(shí)施例。凡基于上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。
權(quán)利要求
1.利用稻草生產(chǎn)生化黃腐酸的方法，該方法包括以下步驟1)配備稻草秸桿和養(yǎng)分養(yǎng)分包括麩皮、糠皮、豆粕或花生餅、氮源；2)稻草秸桿軟化處理機(jī)械破碎稻草至變軟，浸泡于重量百分濃度3 4%的石灰水溶液中，M 4 后撈出，軟化好的稻草質(zhì)地柔軟，茶褐色，含水量60 70% ；3)第一階段微生物發(fā)酵經(jīng)充分軟化處理的稻草秸稈，按高1 1.5米、寬1. 5 2米， 分三層接種堆積發(fā)酵，其中一、二層各厚30 60cm，第三層20 50cm，分別在各層之間接種發(fā)酵混合菌劑，撒施養(yǎng)分，每噸稻草秸稈混合菌劑用量20 100kg、養(yǎng)分100 200kg，各層之間養(yǎng)分及菌種至下而上按照重量比4 5 3 4 1 2分配，接種完成后將發(fā)酵堆體頂和四周稍壓實(shí)拍平，用直徑3 5cm的棍每隔50 70cm從頂部垂直向下打洞，再覆薄膜和草簾保濕保溫，當(dāng)料溫上升到至少60°C時(shí)，維持M-48小時(shí)，翻堆至少2次，完成第一階段微生物發(fā)酵；4)第二階段微生物發(fā)酵經(jīng)過(guò)第一階段微生物發(fā)酵所得的發(fā)酵物料基形成固液混合物，再次接種混合發(fā)酵菌液，并補(bǔ)充微生物生長(zhǎng)所必需的養(yǎng)分，完成第二階段固液混合物深度發(fā)酵過(guò)程，每噸固液混合物用混合發(fā)酵菌液量控制在20 50kg，養(yǎng)分補(bǔ)充量為第一階段用量的50 70% ；5)制備黃腐酸經(jīng)充分發(fā)酵后的固液混合物，板框擠壓過(guò)濾得到的懸浮液體，通過(guò) 0. 1 0. 2mol/L堿液溶解抽提分離，調(diào)pH 2. 0所得液體部分為黃腐酸母液，黃腐酸含量可達(dá)到10 30%，黃腐酸母液經(jīng)濃縮精制干燥，制得60 70%的黃腐酸固體物。
2.如權(quán)利要求1所述的利用稻草生產(chǎn)生化黃腐酸的方法，其特征在于發(fā)酵混合菌劑是按以下步驟制備的1)準(zhǔn)備第一發(fā)酵菌種組放線菌、鏈霉菌、巨大芽孢桿菌；準(zhǔn)備第二發(fā)酵菌種組纖維菌、纖維多囊菌、熱纖維梭菌；準(zhǔn)備第三發(fā)酵菌種組枯草芽孢桿菌；準(zhǔn)備第四發(fā)酵菌種組 黑曲霉、綠色木霉；2)將上述四組發(fā)酵菌種組中每組至少1種菌種、按照各菌種生長(zhǎng)特性進(jìn)行放大培養(yǎng)， 當(dāng)菌種濃度分別達(dá)到IX IO9 1(1個(gè)/克的濃度后，按照1 3 1 3 1 3 1 3比例進(jìn)行混合，即制得發(fā)酵混合菌劑。
3.如權(quán)利要求1或2所述的利用稻草生產(chǎn)生化黃腐酸的方法，其特征在于將米曲霉、 產(chǎn)朊假絲酵母、假單胞桿菌、熱帶假絲酵母、釀酒酵母中的3 4種菌種，按照各菌種生長(zhǎng)特性，進(jìn)行放大培養(yǎng)，當(dāng)菌種濃度分別達(dá)到IXlO9 1(1個(gè)/克的濃度后，按照1 2 1 2: 1 2或1 2:1 2:1 2: 1 2比例進(jìn)行混合，即制得混合發(fā)酵菌液。
4.如權(quán)利要求1或2所述的利用稻草生產(chǎn)生化黃腐酸的方法，其特征在于氮源包括尿素、碳酸氫銨、磷酸二銨、磷酸一銨中的至少1種。
全文摘要
本發(fā)明利用稻草生產(chǎn)黃腐酸的方法包括1)配備稻草秸桿和養(yǎng)分；2)稻草秸桿軟化處理3)第一階段微生物發(fā)酵；4)第二階段微生物發(fā)酵5)制備黃腐酸。本發(fā)明方法是以稻草秸稈為原料，篩選高效菌群組合，采用機(jī)械軟化處理—兩段式微生物發(fā)酵工藝進(jìn)行深度發(fā)酵，將稻草中的大分子碳水化合物降解成小分子活性黃腐酸類化合物。采用機(jī)械破碎處理解決了稻草生物降解中特殊屏障結(jié)構(gòu)的保護(hù)作用；同時(shí)，通過(guò)兩段式發(fā)酵有效解決了不同菌群對(duì)空氣的需求差異，有助優(yōu)勢(shì)菌群的培養(yǎng)，大大縮短了發(fā)酵周期，加強(qiáng)了發(fā)酵深度，大大提高了發(fā)酵效率和黃腐酸收率。
文檔編號(hào)C05F11/02GK102206102SQ20111005837
公開日2011年10月5日 申請(qǐng)日期2011年3月11日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月11日
發(fā)明者嚴(yán)慶海, 侯勇, 夏中梅, 曾顯斌, 朱彭玲, 王蘭英, 陳浩 申請(qǐng)人:四川省蘭月農(nóng)化科技開發(fā)有限責(zé)任公司, 四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)核技術(shù)研究所