專利名稱：一種利用益生菌和微藻生產微生態葉面肥的方法
技術領域：
本發明屬于生物技術領域，特別是提供了一種利用益生菌和微藻生產微生態葉面 肥的方法，在生產安全無毒和復合高效植物葉面肥方面具有非常重要的應用價值和前景。
背景技術：
葉面肥指施于植物葉片并能被其吸收利用的肥料，由于葉面肥可以從葉部直接進 入植物體內，參與作物的新陳代謝和有機物的合成過程，因此在作物生長發育后期根系吸 收能力弱時可以及時彌補作物所需的營養物質。合理施用葉面肥可以提高作物的產量和品 質。作為新興肥料代表的葉面肥，其研究與應用已經越來越受到人們的普遍重視。葉面肥最早起源于法國，自1884年植物學家Grisb把!^eSO4溶液涂抹在發黃葡萄 葉片上用以矯正因缺鐵引起的黃葉病以來，葉面肥在生產實踐中應用與研究有了長足的發 展。農業化學創始人之一的Byccehro認為，葉子在吸收水滴的同時能夠象根一樣把營養物 質吸收到植物中去。進一步研究表明植物能夠經過葉部同化鎂和鉀及微量元素。早在200 多年前我國浙江省農民開始對水稻施用葉面肥，開辟了我國應用葉面肥的先例。二十世紀 八十年代中期我國開始了研究生產不同種類含有植物生長調節劑或農藥成分的新型葉面 肥，使葉面肥的功能更加多樣化。二十世紀九十年代后，一些新型葉面肥在西瓜、柑桔和葡 萄等經濟作物的種植中施用效果十分顯著。隨著葉面肥研究與應用的深入，葉面肥的類型 不斷豐富，種類不斷增加，已經從最初的單一型葉面肥，發展到現在的多類復合型葉面肥。 目前葉面肥主要類型有營養型葉面肥、調節型葉面肥、微生物型葉面肥、單一型微量元素葉 面肥和復合型葉面肥等，其中微生物葉面肥異軍突起，成為葉面肥中的佼佼者。微生物葉面 肥含有微生物菌體及其代謝物，能夠刺激作物生長，促進作物代謝，減輕和防止病蟲害的發 生。但在采用益生菌與微藻進行組合來生產微生態葉面肥方面卻沒有報道。動物微生態制劑指運用微生態原理將從動物體內分離的益生菌，經特殊工藝培養 成的活菌制劑。益生菌(probiotics) —詞最早用以描述“由一種微生物分泌的能刺激另一 種微生物生長的物質”。1989年益生菌被定義為“通過改善腸道菌群平衡而有益于動物宿 主的活菌飼料添加劑”。2002年歐洲食品與飼料協會給出了益生菌的最新定義為“益生菌 是活的微生物，通過攝入可對宿主產生一種或多種特殊且經論證功能性健康益處”。因為微 生態制劑能夠促進動物生長，提高肉、蛋和奶品質并有望取代抗生素，已經成為國內外研究 與應用的熱點和前沿，但采用益生菌作為植物葉面肥領域的研究報道卻不多見。微藻屬于低等植物，是最簡單的光合作用有機體。微藻中的小球藻(Chlorella) 是一種單細胞綠藻，含有豐富的蛋白質、類胡蘿卜素、多糖、維生素和小球藻生長因子等多 種營養及活性成分，小球藻糖蛋白具有抗腫瘤、提高免疫力和抗病毒感染的活性，是高價值 的人類健康食品。小球藻生長因子具有增強細胞代謝、延緩細胞衰老的活性，具有重要的藥 用價值。但采用小球藻作為葉面肥方面卻沒有報道。
發明內容
為了解決上述問題，本發明的目的是提供一種采用多種益生菌和小球藻生產出一 種能夠促進植物生長安全無毒的微生態葉面肥，通過噴灑于植物葉片表面，以達到提高植 物產量和品質的目的的生產微生態葉面肥的方法。本發明的技術方案一種利用益生菌和微藻生產微生態葉面肥的方法，其特征在 于，具體包括以下工步驟首先，分別各自培養獲得細胞濃度達到100億/ml以上的芽孢桿菌、乳酸菌和沼澤 紅假單胞，及細胞濃度達到20億/ml以上的小球藻和酵母菌的液體培養物；其次，分別將占體積百分比為10-20%的芽孢桿菌的的培養物、占體積百分比為 10-20%的乳酸菌的培養物、占體積百分比為10-30%的沼澤紅假單胞菌的培養物、占體積 百分比為10-20%的酵母菌培養物和占體積百分比為10-20%的小球藻的液體培養物進行 均勻混合，即可獲得總細胞濃度達到50億/ml以上液體高價值微生態葉面肥。本發明的優點在于1)所用菌種和小球藻均系人類可以食用的益生菌和健康食 品，安全無毒。2、微生態葉面肥集益生菌和小球藻及其代謝產物促進植物生長的優勢集合 在一起。幻每隔10天將微生態葉面肥稀釋100倍噴灑于植物葉面上后，60天左右可以提 高植物產量達到30%以上。在有機食品、蔬菜、花卉、水果、茶葉和煙葉生產等領域具有重要 的應用價值。
圖1是本發明的具體實施例1的制備過程中分別獲得不同益生菌和小球藻培養物 中細胞濃度圖。圖2是本發明的具體實施例1的制備過程中獲得微生態葉面肥的總細胞濃度圖。圖3是本發明的具體實施例1生產的微生態葉面肥提高大白菜生長速度的圖。
具體實施例方式下面結合具體的實施例對本發明的技術方案做進一步說明。本發明的原理是益生菌培養物包含菌細胞及其代謝物，具備刺激植物生長和代 謝，減輕和防止病蟲害發生功能。小球藻培養物富含蛋白質、類胡蘿卜素、多糖、維生素、小 球藻生長因子和代謝產物等多種活性成分，也具有促進植物生長的作用。將益生菌培養物 和小球藻培養物按照一定比例混合后生產出的微生態葉面肥，將藻和菌及其代謝產物提高 植物生長的優勢結合在一起，可以大幅度提高植物的生長速度與抗病能力。實施例1首先將各自發酵培養獲得細胞濃度分別為1 億/ml納豆芽孢桿菌、118億/ml乳 酸桿菌、106億/ml沼澤紅假單胞菌、25億/ml釀酒酵母菌和22億/ml小球藻USTB-Ol的 液體培養物，如附圖1所示，分別將細胞濃度為1 億/ml納豆芽孢桿菌100ml、118億/ml 乳酸桿菌100ml、106億/ml沼澤紅假單胞菌100ml、25億/ml釀酒酵母菌IOOml和22億/ ml小球藻USTB-OlIOOml進行混合，獲得了總細胞濃度為80億/ml的微生態葉面肥，如附圖 2所示。將生產的由4種益生菌和小球藻培養物組成的微生態葉面肥，采用水稀釋100倍 后，按照每間隔10天均勻噴灑于大白菜葉面上1次的方法使用，待大白菜生長60天分別取噴灑使用和不噴灑使用微生態葉面肥的各10顆白菜進行稱重，結果顯示噴灑使用微生態 葉面肥的大白菜平均每顆重量為5. 6千克，而沒有噴灑使用微生態葉面的平均每顆大白菜 重量僅為4. 3千克，如附圖3所示，使用微生態葉面肥的大白菜增加產量達到了 30. 2%。實施例2首先將各自發酵培養獲得細胞濃度分別為120億/ml納豆芽孢桿菌、128億/ml乳 酸桿菌、102億/ml沼澤紅假單胞菌J6億/ml釀酒酵母菌和25億/ml小球藻USTB-Ol共 5種液體培養物，分別按照各占總體積百分比10^^20^^30^^20%* 20%的比例進行混 合，獲得了總細胞濃度為78. 4億/ml的微生態葉面肥。實施例3 首先將各自發酵培養獲得細胞濃度分別為130億/ml納豆芽孢桿菌、120億/ml乳 酸桿菌、105億/ml沼澤紅假單胞菌、23億/ml釀酒酵母菌和25億/ml小球藻USTB-Ol共 5種液體培養物，分別按照各占總體積百分比20^^20%,30^^10%和20%的比例進行混 合，獲得了總細胞濃度為88. 8億/ml的微生態葉面肥。
權利要求
1. 一種利用益生菌和微藻生產微生態葉面肥的方法，其特征在于，具體包括以下工步驟首先，分別各自培養獲得細胞濃度達到100億/ml以上的芽孢桿菌、乳酸菌和沼澤紅假 單胞，及細胞濃度達到20億/ml以上的小球藻和酵母菌的液體培養物；其次，分別將占體積百分比為10-20%的芽孢桿菌的的培養物、占體積百分比為 10-20%的乳酸菌的培養物、占體積百分比為10-30%的沼澤紅假單胞菌的培養物、占體積 百分比為10-20%的酵母菌培養物和占體積百分比為10-20%的小球藻的液體培養物進行 均勻混合，即可獲得總細胞濃度達到50億/ml以上液體高價值微生態葉面肥。
全文摘要
本發明屬于生物技術領域，涉及一種利用益生菌和微藻生產微生態葉面肥的方法。首先分別培養獲得細胞濃度達到100億/ml以上的芽孢桿菌、乳酸菌、沼澤紅假單胞菌、及細胞濃度20億/ml以上的酵母菌和小球藻的液體培養物，然后將制得的4種益生菌和1種小球藻液體培養物按照各占一定的體積比例進行混合，即可獲得總細胞濃度達到50億/ml以上的液體微生態葉面肥。本發明的優點是所用菌種和小球藻均系人類可以食用的益生菌，安全無毒；微生態葉面肥集益生菌和小球藻及其代謝產物促進植物生長的優勢集合在一起；每隔10天將微生態葉面肥用水稀釋100倍噴灑于植物葉面上，60天時間內提高植物產量達到30％以上。在提高糧食等作物的產量和品質方面具有重要的應用價值。
文檔編號C05F11/08GK102060578SQ20101054619
公開日2011年5月18日 申請日期2010年11月15日 優先權日2010年11月15日
發明者冀宇婷, 劉曉璐, 呂樂, 尹春華, 山其米克, 張可毅, 張鑫, 張雯景, 許倩倩, 閆海 申請人:北京科技大學