專利名稱：楊樹(shù)PtSEP基因用于植物早開(kāi)花誘導(dǎo)的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種植物早開(kāi)花誘導(dǎo)的方法，尤其涉及一種楊樹(shù)PtSEP基因用于植物早開(kāi)花誘導(dǎo)的方法。
背景技術(shù)：
開(kāi)花決定過(guò)程是植物生殖生長(zhǎng)啟動(dòng)的第1個(gè)階段，直接控制植物生育期的早晚， 因此與植物的產(chǎn)品密切相關(guān)。對(duì)于花卉植物可以讓其早開(kāi)花，以生產(chǎn)人們所需的產(chǎn)品。某些植物的提早開(kāi)花則有利于果實(shí)的生長(zhǎng)，改變生長(zhǎng)周期和育種周期，有可能使農(nóng)民在一年中可以多種一季。延遲作物如蔬菜開(kāi)花有益于讓它們產(chǎn)生更多地長(zhǎng)葉子，因?yàn)殚_(kāi)花會(huì)消耗過(guò)多的營(yíng)養(yǎng)和能量?，F(xiàn)有技術(shù)中一般通過(guò)花期調(diào)控(如植物激素)和溫室技術(shù)等對(duì)植物的花期進(jìn)行調(diào)控，或采用雜交的方法獲取需要的品種。上述現(xiàn)有技術(shù)至少存在以下缺點(diǎn)花期調(diào)控方法的調(diào)控能力有限，雜交方法的需要有相應(yīng)的親本材料，且周期長(zhǎng)、育種過(guò)程復(fù)雜。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種周期短、見(jiàn)效快的楊樹(shù)PtSEP基因用于植物早開(kāi)花誘導(dǎo)的方法。本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的本發(fā)明的楊樹(shù)PtSEP基因用于植物早開(kāi)花誘導(dǎo)的方法，包括用楊樹(shù)的PtSEP基因作為目的基因，克隆其cDNA全長(zhǎng)，構(gòu)建所述PtSEP基因的超表達(dá)載體并轉(zhuǎn)入植物，用于提前植物的開(kāi)花時(shí)間；所述PtSEP基因包括以下cDNA序列或與以下cDNA序列具有90%以上同源性且功能相同的DNA序列 ATGGGGAGAGGTAGGGTTGAGTTGAAGAGAATTGAGAACAAGATCAACAGGCAAGTAACATTTGCAAAG
AGAAGGAATGGACTTTTGAAGAAAGCCTATGAGCTTTCCGTTCTTTGTGATGCAGAGATTGCTCTCATCATCTTCTC
CAATAGAGGAAAGCTGTACGAGTTTTGCAGTAGTTCAAGCATGCTCAAAACTCTTGAGAGGTACCAGAAGTGCAACT
ATGGAGCACCAGAGCCAAATGTGTCAGCAAGGGAGGCCTTGGAACTGAGTAGCCAGCAGGAATATCTGAAGCTTAAA
GCACGCTACGAAGCTCTGCAAAGAACCCAGAGGAATCTTTTGGGAGAAGACCTTGGCCCTCTGAGCAGCAAAGAGCT
TGAATCACTTGAAAGACAGCTTGATATGTCACTGAAGCAGATCAGATCAACAAGGACCCAGTACATGCTGGATCAGC
TCAATGATCTACAGCATAAGGAACACATGTTGACTGCAGCTAATAAGTCTCTGAGAGAAAGGTTGATGGAAGGTTAC
GAAGTAAATTCACTCCAGTTGAATCTAAGTGCAGAAGATGTGGGTTTTTCTCGACAACAAGCTCAACCCCAAGGTTA
TGGATTCTTTCATCCTTTGGAGTGCGAACCTACTTTACAAATTGGGTATCAGCCTGACAGTGCTATAACAGTGGTCA
CTTCTGGCCCAAGTATGACTGCTTACATGCCAGGTTGGTTACCATGA。 所述的植物包括煙草及與煙草相近的植物。
所述的植物包括花卉。采用所述PtSEP基因的超表達(dá)方式實(shí)現(xiàn)。由上述本發(fā)明提供的技術(shù)方案可以看出，本發(fā)明所述的楊樹(shù)PtSEP基因用于植物早開(kāi)花誘導(dǎo)的方法，用楊樹(shù)的PtSEP基因作為目的基因，克隆其cDNA全長(zhǎng)，構(gòu)建所述PtSEP 基因的超表達(dá)載體并轉(zhuǎn)入植物，用于提前植物的開(kāi)花時(shí)間，利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)用于植物早開(kāi)花誘導(dǎo)，特別花卉的提前開(kāi)花，周期短、見(jiàn)效快。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明的楊樹(shù)PtSEP基因用于植物早開(kāi)花誘導(dǎo)的方法，其較佳的具體實(shí)施方式
包括用楊樹(shù)的PtSEP基因作為目的基因，克隆其cDNA全長(zhǎng)，構(gòu)建所述PtSEP基因的超表達(dá)載體并轉(zhuǎn)入植物，用于提前植物的開(kāi)花時(shí)間；所述PtSEP基因包括以下cDNA序列或與以下cDNA序列具有90%以上同源性且功能相同的DNA序列ATGGGGAGAGGTAGGGTTGAGTTGAAGAGAATTGAGAACAAGATCAACAGGCAAGTAACATTTGCAAAG AGAAGGAATGGACTTTTGAAGAAAGCCTATGAGCTTTCCGTTCTTTGTGATGCAGAGATTGCTCTCATCATCTTCTC CAATAGAGGAAAGCTGTACGAGTTTTGCAGTAGTTCAAGCATGCTCAAAACTCTTGAGAGGTACCAGAAGTGCAACT ATGGAGCACCAGAGCCAAATGTGTCAGCAAGGGAGGCCTTGGAACTGAGTAGCCAGCAGGAATATCTGAAGCTTAAA GCACGCTACGAAGCTCTGCAAAGAACCCAGAGGAATCTTTTGGGAGAAGACCTTGGCCCTCTGAGCAGCAAAGAGCT TGAATCACTTGAAAGACAGCTTGATATGTCACTGAAGCAGATCAGATCAACAAGGACCCAGTACATGCTGGATCAGC TCAATGATCTACAGCATAAGGAACACATGTTGACTGCAGCTAATAAGTCTCTGAGAGAAAGGTTGATGGAAGGTTAC GAAGTAAATTCACTCCAGTTGAATCTAAGTGCAGAAGATGTGGGTTTTTCTCGACAACAAGCTCAACCCCAAGGTTA TGGATTCTTTCATCCTTTGGAGTGCGAACCTACTTTACAAATTGGGTATCAGCCTGACAGTGCTATAACAGTGGTCA CTTCTGGCCCAAGTATGACTGCTTACATGCCAGGTTGGTTACCATGA。上述的植物包括花卉和普通植物。如煙草及與煙草相近的植物，采用所述PtSEP基因的超表達(dá)方式實(shí)現(xiàn)。本發(fā)明公開(kāi)了毛白楊SEP編碼基因，該基因顯著提前了轉(zhuǎn)基因煙草的開(kāi)花時(shí)間， 轉(zhuǎn)基因煙草的花序分枝也明顯減少，并且這種性狀能夠穩(wěn)定遺傳。本發(fā)明的具體實(shí)施例中，利用毛白楊次生維管再生系統(tǒng)，結(jié)合蛋白質(zhì)組學(xué)方法對(duì)再生不同時(shí)期的樣品中的堿性蛋白進(jìn)行了研究，獲得105個(gè)堿性蛋白，從中挑選出了能夠調(diào)控草本植物開(kāi)花的MADS-Box家族的PtSEP基因作為目的基因，克隆了其cDNA全長(zhǎng)。構(gòu)建了 PtSEP基因的超表達(dá)載體并轉(zhuǎn)入煙草，通過(guò)觀察發(fā)現(xiàn)，超表達(dá)轉(zhuǎn)基因煙草出現(xiàn)了開(kāi)花時(shí)間提前和花序分枝明顯減少。MADS-box基因家族對(duì)于花器官發(fā)育各個(gè)階段有重要調(diào)控用，為了通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)進(jìn)一步研究PtSEP蛋白基因的功能，本發(fā)明構(gòu)建了其超量表達(dá)載體，采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的葉盤(pán)法將其轉(zhuǎn)化煙草，獲得了 19株超表達(dá)轉(zhuǎn)基因煙草，有6株發(fā)現(xiàn)了相同的異常表型。相同生長(zhǎng)條件和時(shí)間下的轉(zhuǎn)基因與野生型煙草相比，當(dāng)展開(kāi)葉數(shù)目均為6片時(shí)轉(zhuǎn)基因煙草的莖間已經(jīng)明顯伸長(zhǎng)，頂端已有花苞出現(xiàn)，而野生型依舊還處于營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)階段，要在25片展開(kāi)葉之后才會(huì)開(kāi)花，可以看出轉(zhuǎn)基因煙草開(kāi)花時(shí)間大大提前了，轉(zhuǎn)基因煙草的花序分枝也大
4大減少了。上述早開(kāi)花煙草三代后收獲的種子，仍保持早開(kāi)花的特性。
以上所述，僅為本發(fā)明較佳的具體實(shí)施方式
，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此， 任何熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明揭露的技術(shù)范圍內(nèi)，可輕易想到的變化或替換， 都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。核苷酸或氨基 脧序列
<110>
<120>楊樹(shù)PtSEP基因用于植物早開(kāi)花誘導(dǎo)的方法
<140>
<141>
<160>1
<210>1
<211>732
<212>cDNA
<213>楊樹(shù)的PtSEP基因
<220>
<223>
<400>1
atggggagaggtagggttgagttgaagagaattgagaacaagatcaacaggcaagtaaca60
tttgcaaagagaaggaatggacttttgaagaaagcctatgagctttccgttctttgtgat120
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caaggttatggattctttcatcctttggagtgcgaacctactttacaaattgggtatcag660
cctgacagtgctataacagtggtcacttctggcccaagtatgactgcttacatgccaggt720
tggttaccatga732
權(quán)利要求
1.一種楊樹(shù)PtSEP基因用于植物早開(kāi)花誘導(dǎo)的方法，其特征在于，包括用楊樹(shù)的PtSEP基因作為目的基因，克隆其cDNA全長(zhǎng)，構(gòu)建所述PtSEP基因的超表達(dá)載體并轉(zhuǎn)入植物，用于提前植物的開(kāi)花時(shí)間；所述PtSEP基因包括以下cDNA序列或與以下cDNA序列具有90%以上同源性且功能相同的DNA序列ATGGGGAGAGGTAGGGTTGAGTTGAAGAGAATTGAGAACAAGATCAACAGGCAAGTAACATTTGCAAAGAGA AGGAATGGACTTTTGAAGAAAGCCTATGAGCTTTCCGTTCTTTGTGATGCAGAGATTGCTCTCATCATCTTCTCCAA TAGAGGAAAGCTGTACGAGTTTTGCAGTAGTTCAAGCATGCTCAAAACTCTTGAGAGGTACCAGAAGTGCAACTATG GAGCACCAGAGCCAAATGTGTCAGCAAGGGAGGCCTTGGAACTGAGTAGCCAGCAGGAATATCTGAAGCTTAAAGCA CGCTACGAAGCTCTGCAAAGAACCCAGAGGAATCTTTTGGGAGAAGACCTTGGCCCTCTGAGCAGCAAAGAGCTTGA ATCACTTGAAAGACAGCTTGATATGTCACTGAAGCAGATCAGATCAACAAGGACCCAGTACATGCTGGATCAGCTCA ATGATCTACAGCATAAGGAACACATGTTGACTGCAGCTAATAAGTCTCTGAGAGAAAGGTTGATGGAAGGTTACGAA GTAAATTCACTCCAGTTGAATCTAAGTGCAGAAGATGTGGGTTTTTCTCGACAACAAGCTCAACCCCAAGGTTATGG ATTCTTTCATCCTTTGGAGTGCGAACCTACTTTACAAATTGGGTATCAGCCTGACAGTGCTATAACAGTGGTCACTT CTGGCCCAAGTATGACTGCTTACATGCCAGGTTGGTTACCATGA。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的楊樹(shù)PtSEP基因用于植物早開(kāi)花誘導(dǎo)的方法，其特征在于，所述的植物包括煙草及與煙草相近的植物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的楊樹(shù)PtSEP基因用于植物早開(kāi)花誘導(dǎo)的方法，其特征在于，所述的植物包括花卉。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的楊樹(shù)PtSEP基因用于植物早開(kāi)花誘導(dǎo)的方法，其特征在于，采用所述PtSEP基因的超表達(dá)方式實(shí)現(xiàn)。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種楊樹(shù)PtSEP基因用于植物早開(kāi)花誘導(dǎo)的方法，用楊樹(shù)的PtSEP基因作為目的基因，克隆其cDNA全長(zhǎng)，構(gòu)建所述PtSEP基因的超表達(dá)載體并轉(zhuǎn)入植物，用于提前煙草等植物的開(kāi)花時(shí)間，利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)用于植物特別是花卉的早開(kāi)花誘導(dǎo)，周期短、見(jiàn)效快。
文檔編號(hào)A01H5/00GK102304546SQ20101010091
公開(kāi)日2012年1月4日 申請(qǐng)日期2010年1月25日 優(yōu)先權(quán)日2010年1月25日
發(fā)明者盧孟柱, 唐雯, 戚曉利, 王敏杰, 胡建軍, 趙樹(shù)堂, 郭偉 申請(qǐng)人:中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院林業(yè)研究所