專利名稱：一種牙鲆用魚蛋白寡肽的制作方法
技術領域：
本發明屬于海水魚類配合飼料添加劑，是促進牙鲆生長的一種促生長劑。
背景技術：
長期以來由于水產養殖和水產飼料中廣泛使用抗生素、化學合成藥物、激素等促生長保健劑，水產品中藥物殘留嚴重，不僅直接危害人體健康，而且水產品質下降，導致缺乏市場競爭力和信譽；細菌耐藥性增強，耐藥菌株增多，破壞生態環境等。隨著鰻魚、蝦等水產品出口受阻事件的發生，消費者對食品的安全、衛生、健康等問題日益關注，對水產品品質的要求越來越高。加速開發，推廣和應用新型安全高效的飼料原料，提高飼料和食品的安全與質量迫在眉睫。按照現代消化理論，寡膚可直接被消化道吸收，具有轉運速度快，耗能低和不易飽和等特點，可消除與游離氨基酸的吸收競爭，大大地提高了蛋白的吸收利用率。由于魚蛋白的氨基酸組成比例與人體肌肉組成極為接近，吸收利用率高，因而開發魚蛋白寡肽引起人們廣泛的興趣。但是目前有關魚蛋白寡肽的研究很少，將其應用到水產飼料中的報道很有限。王家林等(2006)以魚蛋白寡肽替代飼料中12.6%的蛋白質配制成飼料喂養鱸魚，發現其特定生長率和蛋白沉積率最高。劉峰等(2006)以魚蛋白寡肽替代25%魚粉蛋白，制成微顆粒飼料投喂大黃魚的稚魚，可明顯地提高其成活率。 牙鲆屬鰈形目，鰈亞目，鲆科，牙鲆屬，是鰈形目中一種底棲肉食性魚類，由于其肉質嫩、味道鮮美、營養豐富，深受人們喜愛，市場需求旺盛，經濟價值較高。目前牙鲆的配合飼料主要使用硬顆粒飼料和膨化飼料，存在適口性差，生長速度慢等問題。以往有關牙鲆的綠色環保的促生長劑主要包括酶制劑、益生素、大豆低聚糖等，應用過程中會受到成本、工藝等方面的影響。利用魚下腳料生產魚蛋白寡肽作為牙鲆的促生長劑，既充分利用了資源，又減少了魚粉的用量，能夠明顯促進牙鲆生長，提高了蛋白質的利用率。
發明內容
本發明的目的是通過在牙鲆飼料中添加 一 定比例、分子量范圍《1000Da(>85%)的魚蛋白寡肽，替代飼料中的蛋白質，以提高牙鲆的生長和成活率，提高蛋白質沉積率和飼料轉化率。 為了解決背景技術中所存在的問題，本發明采用以下技術方案首先制備魚蛋白寡肽。取新鮮冷凍的太平洋狹鱈下腳料，絞碎后升溫至95t:保溫l(rCmin滅菌，加入Alcalase蛋白酶和Flavourzyme蛋白酶，pH調至8. 5—9. 0，在55。C反應4小時。然后升溫至95t:并保溫10min進行蛋白酶滅活，粗濾分離骨剌，酶解液進一步三相離心分別獲得可溶性蛋白寡肽水相、不溶性蛋白沉淀和魚油，可溶性蛋白寡肽水相分別經lKDa和5Ka超濾膜超濾提純，冷凍干燥后獲得不同分子量范圍的魚蛋白寡肽粉。 將魚蛋白寡肽加入飼料中，它是通過將魚粉21 30% 、花生粕50% 、高筋粉10 12. 5% 、膽堿0. 5% 、卵磷脂0. 5% 、磷酸二氫鈣1 % 、維生素預混料1 % 、礦物質預混料1 % 。各種原料按用量充分混勻后，加入魚蛋白寡肽0 6.0%，再次混勻，變異系數《10%，再加入60g/kg的魚油，充分混勻，以2%的褐藻酸鈉做粘合劑，制粒后飼喂牙鲆。
本發明具有以下有益效果利用魚類的下腳料生產魚蛋白寡肽，改變其營養功效，
變動物下腳料為具有生物活性的肽蛋白，是一種資源豐富、價廉質優的肽蛋白制品，它不僅
為氮源沉積和利用提供氨基酸來源，而且所含的小肽能夠迅速被吸收，緩解了腸壁細胞對
不同游離氨基酸攝入的競爭，提高蛋白質的合成效率；將研制的魚蛋白寡肽添加到牙鲆配
合飼料中，不但可以促進其生長，而且改善了飼料的適口性，提高飼料轉化率。
圖1是本發明實驗飼料配方的示意圖； 圖2是本發明實驗期間牙鲆的生長及對飼料的利用的示意圖； 圖3是本發明牙鲆對四種飼料的消化率和蛋白凈利用率及沉積率的示意圖； 圖4是本發明四種飼料對牙鲆魚體化學組成的影響示意圖。
具體實施例方式
本具體實施方式
采用以下技術方案 魚蛋白寡肽的制作將新鮮冷凍的太平洋狹鱈魚的下腳料經絞肉機絞碎后投入酶
反應器，升溫至95"保溫10°C min滅菌，再加水和蛋白酶混合，料水比1 : 1，采用Alcalase
酶E/S = 90AU+Flavourzyme酶E/S = 15000LAPU復合酶酶解方法，酶解溫度55°C 、起始pH
=8.5、酶解3h，然后酶解液升溫使蛋白酶滅活，粗濾分離骨剌，酶解液進一步三相離心分
別獲得可溶性蛋白寡肽水相、不溶性蛋白沉淀和魚油。 一部分可溶性蛋白寡肽水相經1K超
濾膜超濾提純，噴霧干燥后獲得蛋白寡肽粉，分子量《1000Da，另一部分可溶性蛋白寡肽水
相經5K超濾膜超濾提純，噴霧干燥后獲得蛋白寡肽粉，分子量1000-5000Da。 牙鲆用魚蛋白寡肽的篩選先將滿足牙鲆營養需求的主要原料混合均勻，然后
添加上述兩種不同分子量組成的魚蛋白寡肽粉，添加比例均為3%，再次混勻，變異系數
《10% ，再加入60g/kg的魚油，充分混勻，以2%的褐藻酸鈉做粘合劑，制粒后飼喂牙鲆。經
過兩個月的生長實驗，實驗結束時通過比較生長率、成活率以及飼料效率的結果，進行綜合
評定，發現分子量《1000Da的魚蛋白寡肽的促生長效果優于另一種魚蛋白寡肽。 魚蛋白寡肽添加量的選擇通過在牙鲆的配合飼料中添加不同含量的分子量
《1000Da的魚蛋白寡肽，實驗的飼料配方見圖1，制成4組等氮飼料，進行了 3個月的喂養
試驗，投喂試驗結束時，測定牙鲆的生長情況、飼料利用狀況以及蛋白質利用率。 參看圖2中可看出牙鲆飼料中添加3.7%魚蛋白寡肽的3號飼料增重效果最明顯，
明顯地高于其他三個組，但是成活率在各組之間差異不顯著。添加3.7%魚蛋白寡肽組的飼
料系數最低，明顯的低于其他三組。肝體比在各組之間沒有顯著性差異。由此可見，魚蛋白
寡肽的添加量為3. 7%，可以顯著地提高魚體增重率和飼料利用率。 參看圖3為牙鲆對四種實驗飼料的消化率和蛋白質凈利用率及沉積率。從表中可 以看出，添加魚蛋白寡肽使牙鲆對飼料的消化率提高，其中以添加量為3.7%，效果最明顯。 同樣添加魚蛋白寡肽使牙鲆對飼料中的蛋白質凈利用率明顯高于未添加組，添加魚蛋白寡 肽組中3. 7%和6%兩組的蛋白質凈利用率明顯高于1. 2%組。牙鲆蛋白質沉積率以3. 7% 組最高，顯著高于其他三組。
參看圖4，試驗結束時牙鲆的水分、脂肪和灰分含量各組之間差異不顯著。使用添 加魚蛋白寡肽的飼料喂養牙鲆，其蛋白質含量高于不添加組，但僅有3.7%組的體蛋白質含 量顯著高于不添加組。 本具體實施方式
3號飼料喂養牙鲆的效果最好，它所添加魚蛋白寡肽的組成為分 子量《1000Da( > 85% )，在牙鉀飼料中最佳添加量為3. 7%，可以明顯地提高牙鉀的生長 率、飼料效率，增加蛋白質的凈利用率和沉積率，同時魚體蛋白質含量顯著提高。
權利要求
一種牙鲆用魚蛋白寡肽，其特征在于魚蛋白寡肽是利用鱈魚的下腳料生產的，在牙鲆飼料中添加一定比例、分子量范圍≤1000Da(≥85％)的魚蛋白寡肽，替代飼料中的蛋白質，以提高牙鲆的生長和成活率，提高蛋白質沉積率和飼料轉化率，在牙鲆飼料中最佳添加量為3.7％，可以明顯地提高牙鲆的生長率、飼料效率，增加蛋白質的凈利用率和沉積率，同時魚體蛋白質含量顯著提高。
全文摘要
一種牙鲆用魚蛋白寡肽，它涉及一種海水魚類配合飼料添加劑。魚蛋白寡肽是利用鱈魚的下腳料生產的，在牙鲆飼料中添加一定比例、分子量范圍≤1000Da(≥85％)的魚蛋白寡肽，替代飼料中的蛋白質，以提高牙鲆的生長和成活率，提高蛋白質沉積率和飼料轉化率，在牙鲆飼料中最佳添加量為3.7％，可以明顯地提高牙鲆的生長率、飼料效率，增加蛋白質的凈利用率和沉積率，同時魚體蛋白質含量顯著提高。
文檔編號A23K1/10GK101715894SQ20091022344
公開日2010年6月2日 申請日期2009年11月16日 優先權日2009年11月16日
發明者姚洪波, 常青, 方偉, 梁萌青, 鄭珂珂 申請人:中國水產科學研究院黃海水產研究所