專利名稱：：一種枯草芽孢桿菌油懸浮劑及其制備方法
技術領域：
：本發明涉及一種油懸浮劑及其制備方法，特別涉及枯草芽孢桿菌油懸浮劑及其制備方法。
背景技術：
：枯草芽孢桿菌，英文名(5aci2iussub"2is),是芽孢桿菌屬的一種。單個細胞O.7-0.8X2.0~3.0微米，著色均勻。無莢膜，周生鞭毛，能運動。革蘭氏陽性菌，芽孢0.60.9X1.01.5微米，橢圓到柱狀，位于菌體中央或稍偏，芽孢形成后菌體不膨大。菌落表面粗糙不透明，污白色或微黃色。枯草芽孢桿菌可利用蛋白質、多種糖及淀粉，分解色氨酸形成吲哚。有的菌林是a-淀粉酶和中性蛋白酶的重要生產菌；有的菌林具有強烈降解核苷酸的酶系，故常作選育核苷生產菌的親株或制取5'-核苷酸酶的菌種，在遺傳學研究中應用廣泛。因廣泛分布在土壤及腐敗的有機物中，易在枯草浸汁中繁殖，故名。枯草芽孢桿菌是一種微生物殺菌劑，對多種植物真菌和細菌病原菌具有抑制生長的作用，可用于農林植物多種病蟲害的防治。它通過營養竟爭進行生長繁殖從而占據生存空間的方式來阻止植物病原菌的生長，能在植物表面迅速形成一層高密保護膜，使病原菌得不到生存空間，從而保護作物免受病原菌危害；枯草芽孢桿菌菌體生長過程中產生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短桿菌肽等活性物質，抑制病菌孢子萌發和菌絲生長，乂人而達到預防與治療的目的。經田間藥效試驗結果表明，枯草芽孢桿菌對于黃瓜白粉病、草莓白粉病、灰霉病的防治效果較好。目前國內外生產的枯草芽孢桿菌均為可濕性粉劑和水劑，因枯草芽孢桿菌為微生物活體，水劑保存時間短，最多三個月，影響使用。枯草芽孢桿菌可濕性粉劑相對而言保存時間較長，但在存貯條件惡劣如溫度高時，孢子數下降較多；另外用于大棚使用時，因兌水較多而增加了大棚的濕度；用于森林病蟲害防治或果樹殺菌時，因樹木高大，用噴水霧方法較為困難，且對操作人員危害嚴重，枯草芽孢桿菌大量流失于土壤中，造成污染。
發明內容本發明針對現有技術中枯草芽孢桿菌可濕性粉劑和水劑的不足，提供一種枯草芽孢桿菌油懸浮劑，所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑保存時間長，藥效高，對環境和操作人員毒害小，適用于森林、果園等場合的防病除蟲。為了實現上述發明目的，本發明采用以下技術方案一種枯草芽孢桿菌油懸浮劑，其組分以重量百分比計包括2x10"活芽孢/克的枯草芽孢桿菌母粉1%~20%稀釋劑60%~80%表面活性劑5%~20%。所述稀釋劑優選為為甲酯化的植物油之一或或幾種混合，優選為曱酯化葵花籽油、曱酯化菜籽油、曱酯化大豆油、曱酯化花生油的一種或幾種混合。植物油的主要成分是高級不飽和脂肪酸甘油酯，即長鏈的烯酸和炔酸的甘油酯，將植物油經催化劑催化與曱醇發生酯化反應生成某酸甲酯即為曱酯化，植物油經曱酯化后作為農藥助劑、溶劑，有助于提高制劑的藥效。曱酯化的植物油還是清潔的高性能的噴霧助劑，具有粘附、溶解植物表面蠟質層的功能，使有效成分大多作用在作物上，且其來源于植物、生物降解性好、毒性低、對環境無毒害，可更好地防治作物多種病害。表面活性劑可以增加懸浮率，并在使用過程中均勻地與稀釋劑相溶。本發明所述表面活性劑優選采用烷基酚聚氧乙烯醚0P-4、烷基酚聚氧乙烯醚0P-7、烷基酚聚氧乙烯醚OP-10、烷基酚聚氧乙烯醚0P-21、山梨醇酐單月桂酸酯SPAN-20、山梨醇酐單棕櫚酸酯SPAN-20、山梨醇酐單油酸酯SPAN-80中的一種或兩種以上混合。本發明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑還可包含常規的防凍液、增效劑、穩定劑或與其他有效成分進行復配，可以大大提高枯草芽孢桿菌油懸浮劑的藥效和農業上的實用性。所述增效劑優選木質素磺酸鈉、十二烷基笨璜酸鈣、三苯乙基苯酚聚氧乙烯聚氧丙烯醚、蓖麻油聚氧乙烯醚、苯乙基聚氧乙烯醚、仲烷醇聚氧乙烯醚。所述穩定劑優選沸點20(TC以上的多烷基取代芳烴、二甘醇、三甘醇、鄰二氯苯的一種或兩種以上混合。所述防凍劑優選乙二醇或丙二醇或兩種混合。本發明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑中枯草芽孢桿菌的濃度為2x109~4xlO"活芽孢/克。經田間藥效試驗證明，由于霧滴粒徑極小(2-5um),故在作物上的覆蓋面大，因此藥效比普通制劑高20%以上。施藥功效高，即省工省時，功效為常規噴霧的10倍，故大大降低施藥成本。本發明還提供一種枯草芽孢桿菌油懸浮劑的制備方法。本發明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑的制備方法如下按配方量將枯草芽孢桿菌、稀釋劑、表面活性劑均勻混合，再將其粉碎，使固體顆粒達到2-5^m以下的膠體粒徑，使其成為均勻的油懸浮劑，即得本發明所述枯草芽孢桿菌。經檢測有效成分含量、pH值、傾倒性、穩定性等各項指標合格后進行包裝儲運。本發明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑的突出特點為1.本發明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑使枯草芽孢桿菌的孢子懸浮于稀釋劑中，這種方法增加了微生物活體的存活時間，3(TC貯存18周穩定性實驗顯示其分解率不到2。/。，而枯草芽孢桿菌可濕性粉劑的分解率高達20%。可見油懸浮劑貨架期大大增加，更易于商品化。2.熱霧劑通常是將農藥原藥溶解于高沸點溶劑中，形成單相溶液，因枯草芽孢桿菌母藥不能溶解，因此不能制成熱霧劑。本發明克服了枯草芽孢桿菌不能溶解，因此不能制成熱霧劑的缺陷，提供的枯草芽孢桿菌油懸浮劑可形成熱霧，由于它的霧滴微細，能被氣霧機送至很遠很高的距離，并具有產長時間的飄浮能力，可用于森林、果園等場合，防病除蟲。3.提高了藥效。由于霧滴粒徑極小(2-5^im占80%以上)，故在作物上的覆蓋面大，可覆蓋常規噴霧無法到達的植抹葉背和葉片基部等隱蔽處，達到了對才直抹病害的全方位防治，因此藥效比普通制劑高20%以上。4.施藥功效高，省工省時。由于霧滴粒徑小，彌散性好，絕大部分可沉積于植株表面，藥液利用率高，可節省大量人工、藥械及時間，功效約為常規噴霧的10倍，大大降低施藥成本。5.對環境和操作人員毒害小。常規噴水霧對高大密植作物噴霧時，對操作人員危害嚴重，且藥滴大量流失于土壤中，造成污染。6.無污染。本發明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑的表面活性劑、稀釋劑都采用綠色物質，對環境無影響。具體實施例方式下面結合實施例，進一步闡述本發明以上所述僅是本發明的優選實施方式，應當指出，對于本
技術領域：
的普通技術人員來說，在不脫離本發明原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本發明的保護范圍。7實施例1:本發明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑的制備稱取2x1()H個活芽孢/克的枯草芽孢桿菌母粉200克，曱酯化葵花籽植物油750克，OP-10表面活性劑50克，在混合釜中混合，在泵入超微粉碎妙、磨機中粉碎3小時，即可形成穩定的油懸浮劑，經檢測顆粒粒徑達到5um以下，枯草芽孢桿菌的濃度為4x10"舌芽孢/克。實施例2:本發明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑的制備稱取2x10"個活芽孢/克的枯草芽孢桿菌200克，稀釋劑(甲酯化的葵花籽植物油)600克，OP-10表面活性劑200克，在混合釜中混合，再泵入超微粉碎砂磨機中粉碎3小時，形成一穩定的油懸浮劑，經檢測顆粒粒徑達到5um以下，枯草芽孢桿菌的濃度為4xl(T活芽孢/克。實施例3:本發明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑的制備稱取2x10"個活芽孢/克枯草芽孢桿菌母粉10克，稀釋劑(葵花籽植物油)800克，SPAN-20表面活性劑190克，在混合釜中混合，再泵入超微粉碎砂磨機中粉碎3小時，形成一穩定的油懸浮劑，經^r測顆粒粒徑達到5um以下，枯草芽孢桿菌的濃度為2x10'活芽孢/克。實施例4:稱取2x10"個活芽孢/克的枯草芽孢桿菌母粉100克，葵花籽植物油300克，OP-10表面活性劑200克，防凍液乙二醇、增效劑十二烷基^t酸4丐、穩定劑鄰二氯苯共計400g,在混合釜中混合，再泵入超微粉碎砂磨機中粉碎3小時，形成穩定的油懸浮劑，經檢測顆粒粒徑達到5um以下，枯草芽孢桿菌的濃度為2xl(T活芽孢/克。實施例5:本發明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑的田間藥效試驗參照GBT17980.67-2004農藥田間藥效試驗準則(二)，于2008年7-8月在湖北省裏樊市進行2x109、lxl(T、4x10"活芽孢/克枯草芽孢桿菌油懸浮劑的田間藥效試驗，進行超低容噴霧，防治水稻稻瘟病(葉瘟)，共施藥兩次，施藥制劑量為1200克/公項。藥前病情指數分別為1.02、0.99、1.00。第二次施藥后14天調查，病情指數分別為2.09、1.41、I.25,空白對照病情指數為9.57,該藥劑防效達到79.19%、85.42%、87.28%。同年在廣東省和海南省對該藥劑進行的田間藥效試^r，防效均達到80%以上。實施例5:本發明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑的各項檢測指標表l、枯草芽孢桿菌油懸浮劑檢測指標<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>低溫穩定性和熱貯穩定性試驗在正常生產情況下，每3個月至少抬r驗一次。表2、本發明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑小試生產產品;險測結果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>實施例6:本發明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑與不同劑型穩定性對比試驗將含量分別為1.25x109、1.32x活芽孢/克枯草芽孢桿菌油懸浮劑和可濕性粉劑各200克，貯存于3(TC的恒溫箱內，18周后，通過鑒別及定量測定試驗測定每克菌劑所含活芽孢數量。結果表明，枯草芽孢桿菌油懸浮劑的分解率低于2%,而可濕性粉劑的分解率則高達20°/，油懸浮劑中活芽孢的存活率明顯高于可濕性粉劑，說明本發明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑穩定性高，可延長枯草芽孢桿菌制劑的貨架期。表3、兩種枯草芽孢桿菌制劑3(TC貯存18周穩定性實驗<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>實施例7:本發明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑與其他劑型的藥效對比試驗參照GBT17980.67-2004農藥田間藥效試驗準則(二)、GB/T17980.111-2004農藥田間藥效試—驗準則(二)第lll部分殺菌劑防治番茄葉霉病、以及GB/T17980.95-2004農藥田間藥效試'驗準則(二)第95部分殺菌劑防治香蕉葉斑病，對本發明實施例l、2、3制備的枯草芽孢桿菌油懸浮劑的藥效進行對比試驗，其結果如下表所示。表4、本發明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑與其他劑型的藥效對比實驗<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>由以上對比試驗結果可知，本發明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑藥效比普通制劑高20%左右。權利要求1.一種枯草芽孢桿菌油懸浮劑，其成分以重量百分比計包括2×1011活芽孢/克的枯草芽孢桿菌母粉1％～20％稀釋劑60％～80％表面活性劑5％～20％。2.根據權利要求1所述的枯草芽孢桿菌油懸浮劑，其特征在于，所述稀釋劑為曱酯化植物油的一種或幾種混合，優選為曱酯化葵花籽油、曱酯化菜籽油、曱酯化大豆油、曱酯化花生油的一種或幾種混合。3.根據權利要求1所述的枯草芽孢桿菌油懸浮劑，其特征在于，所述表面活性劑為烷基酚聚氧乙烯醚OP-4、烷基酚聚氧乙烯醚OP-7、烷基酚聚氧乙烯醚OP-10、烷基酚聚氧乙烯醚0P-21、山梨醇酐單月桂酸酯SPAN-20、山梨醇酐單棕櫚酸酯SPAN-20、山梨醇酐單油酸酯SPAN-80中的一種或兩種以上混合。4、根據權利要求1所述的枯草芽孢桿菌油懸浮劑，其特征在于，還包含防凍液、增效劑和穩定劑。5、根據權利要求4所述的枯草芽孢桿菌油懸浮劑，其特征在于，所述增效劑為木質素磺酸鈉、十二烷基苯磺酸鈣、三苯乙基苯酚聚氧乙烯聚氧丙烯醚、蓖麻油聚氧乙烯醚、苯乙基聚氧乙烯醚或仲烷醇聚氧乙烯醚的一種或兩種以上混合。6、根據權利要求4所述的枯草芽孢桿菌油懸浮劑，其特征在于，所述穩定劑包括二甘醇、三甘醇、鄰二氯苯或兩種以上混合。7、根據權利要求4所述的枯草芽孢桿菌油懸浮劑，其特征在于，所述防凍劑包括乙二醇或丙二醇或兩種混合。8.—種權利要求1所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑的制備方法，其特征在于，按配方量將枯草芽孢桿菌、稀釋劑、表面活性劑均勻混合，粉碎至膠體粒徑為5^m以下，即得所述枯草芽孢桿菌的油懸浮劑。9.根據權利要求8所述的的制備方法，其特征在于，所述稀釋劑為曱酯化植物油的一種或幾種混合，優選為曱酯化葵花籽油、曱酯化菜籽油、甲酯化大豆油、曱酯化花生油的一種或幾種混合。10、根據權利要求8所述的的制備方法，其特征在于，所述表面活性劑為烷基酚聚氧乙烯醚0P-4、烷基酚聚氧乙烯醚0P-7、烷基酚聚氧乙烯醚OP-IO、烷基酚聚氧乙烯醚0P-21、山梨醇酐單月桂酸酯SPAN-20、山梨醇酐單棕櫚酸酯SPAN-20、山梨醇酐單油酸酯SPAN-8Q中的一種或兩種以上混合。全文摘要本發明提供一種枯草芽孢桿菌油懸浮劑，其成分以重量百分比計包括2×10<sup>11</sup>活芽孢/克的枯草芽孢桿菌1％～20％、稀釋劑60％～80％、表面活性劑5％～20％。本發明還提供所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑的制備方法，即將枯草芽孢桿菌母粉或孢子粉加入稀釋劑、表面活性劑中，將菌體均勻地分散，粉碎至膠體粒徑為5μm以下即得。本發明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑具有藥效高、成本低、對環境和操作人員污染毒害小的特點，是一種新型微生物殺菌劑，具有十分廣闊的應用前景。文檔編號A01N25/04GK101611707SQ200910166429公開日2009年12月30日申請日期2009年8月12日優先權日2009年8月12日發明者勇劉,劉國忠,張潔巖,新李申請人:海南利蒙特生物農藥有限公司