專利名稱：一種復合酶蛋白的制備方法
技術領域：
本發明涉及一種酶蛋白的制備方法，尤其涉及一種復合酶蛋白的制備方法。
背景技術：
將"酶"添加到飼料中提高飼料營養價值和畜禽生產性能的設想和實踐，
已有數十年的歷史。早在20世紀50年代，Jensen等(1957)和Fry等(1958) 曾報道，添加粗制淀粉酶和蛋白酶，可顯著提高雞的生長速度和飼料轉化率。 早期是從大麥芽中得到淀粉酶，以后用動物來源的胃蛋白酶和胰蛋白酶；植物 來源的木瓜蛋白酶(papain);曲霉中制取了植酸酶，但在相當長的歷史時期內， 由于生產成本高、活性低、穩定性差等問題， 一直未能進入實用階段。20世紀 卯年代前后，由于生物工程特別是酶工程的迅猛發展，生產成本下降，活性和 穩定性大幅度提高。到了20世紀末，在全國范圍內，酶制劑在配合飼料中的 用量都有極大增加。二十世紀80年代末，酶制劑開始引入我國， 一些國外企 業的飼用酶制劑陸續進入我國市場，如美國建明公司、芬蘭詞料國際有限公司 的飼用酶制劑等。目前，除了進口產品外，近年來也開發出各種飼用酶制劑， 并已進入飼料市場。近年來，國內外大量的伺養實驗和消化代謝實驗都充分證 明添加各種飼用酶制劑不僅能有效地消除飼料抗營養因子的有害作用，而且能 全面促進養分的分解消化和吸收利用，提高畜禽的生長速度、飼料轉化效率和 增進畜禽健康。不僅如此，在應用各種酶制劑提高氮、磷利用率的同時，還可 以減少與生態效益兼顧的重要科學技術措施，酶制劑在飼料工業中有廣闊的應 用前景。
發明內容
本發明的目的在于提供一種復合酶蛋白的制備方法，該方法制備的產物高動物生產性能，發揮生產潛力，改善飼料轉化率，降低飼料成本，無殘毒， 無耐藥性。
本發明是這樣來實現的，其特征是制備方法為
1、 好氧發酵培養基配置將血粉、皮革粉、羽毛、麩皮按照l: 2: 1: 12 的重量比例混合，并將混合物與水按1.8: l的重量比例混合；
2、 厭氧發酵培養基配置將果渣、米糠、甘薯粉渣按照3: 1: 1的重量 比例混合，并將混合物與水按6: 4的重量比例混合；
3、 培養基滅菌將培養基放入滅菌器中高溫蒸汽滅菌；
4、 菌種激活①按各菌種要求配置基礎培養基；②分裝將配好的培養 基分裝于待接種三角瓶中，并塞上棉塞；③滅菌在O.lMPa下滅菌15min, 其后讓其自然降壓至常壓，冷卻，待接種；④接種待培養基冷卻至4(TC接種， 接種量為0.5%;⑤培養將接種后的試管放入恒溫培養箱內培養，培養完畢 后備用；
5、 擴增龜養將母發酵劑擴大培養得到所需量的工作發酵劑，培養結束放 入4'C的冰箱中保存備用；
6、 接種在無菌條件下，以一定的接種量向物料中加入生產發酵劑，好氧
發酵菌種的接種量為1%-2%，厭氧發酵菌種的接種重量為3%，其中好氧發酵菌
種包括米曲霉、棲土曲霉、黑曲霉、扣囊擬內孢酶，厭氧發酵菌種包括蘇氨酸
高產菌、植物乳桿菌、糞鏈球菌、酵母菌；
7、 好氧發酵條件發酵溫度28-35'C，時間2天，自動控溫，間歇通風， 通風量為1. 2立方米/ min;
8、 厭氧發酵條件厭氧發酵為自然堆積發酵，時間為7天；
9、 低溫干燥采用低溫氣流干燥，物料溫度在65"C以內，水分控制在14%以內；
10、 混合將好氧條件和厭氧條件下產生的酶蛋白按4: 1比例混合得到 復合酶蛋白；
11、 包裝即可。
本發明的優點是1、菌種優良，傳代穩定性強；2、各菌種在發酵過程中 起協同作用，各菌生長、代謝旺盛，產酶能力增強；3、好氧發酵和厭氧發酵 菌分開分別進行發酵，讓每個菌株最大產酶性能發揮出來；4、原料中不易被 動物吸收的蛋白轉化成容易消耗吸收的菌體單細胞蛋白，使產品營養價值得到 提高。
具體實施例方式
實施例一
1、 好氧發酵培養基配置將血粉、皮革粉、羽毛、麩皮按照l: 2: 1: 12 的重量比例混合，并將混合物與水按1.8: 1的重量比例混合；
2、 厭氧發酵培養基配置將果渣、米糠、甘薯粉渣按照3: 1: 1的重量 比例混合，并將混合物與水按6: 4的重量比例混合；
3、 培養基滅菌將培養基放入滅菌器中高溫蒸汽滅菌；
4、 菌種激活①按好氧發酵菌種和厭氧發酵菌種配置基礎培養基；②分 裝將配好的培養基分裝于待接種三角瓶中，并塞上棉塞；③滅菌在O.lMPa 下滅菌15min，其后讓其自然降壓至常壓，冷卻，待接種；④接種待培養基 冷卻至40'C接種，接種量為0.5%;⑤培養將接種后的試管放入恒溫培養箱 內培養，培養完畢后備用；
5、 擴增培養將母發酵劑擴大培養得到工作發酵劑，培養結束放入4t:的
冰箱中保存備用；
6、 接種在無菌條件下，以好氧發酵菌種的接種量為1%_2%和厭氧發酵菌 種的接種量為3%向物料中加入生產發酵劑，其中好氧發酵菌種包括米曲霉、棲土曲霉、黑曲霉、扣囊擬內孢酶，厭氧發酵菌種包括蘇氨酸高產菌、植物乳桿 菌、糞鏈球菌、酵母菌；
7、 好氧發酵條件發酵溫度28。C，時間2天，自動控溫，間歇通風，通 風量為1. 2立方米/ min;
8、 厭氧發酵條件厭氧發酵為自然堆積發酵，時間為7天；
9、 低溫干燥采用低溫氣流干燥，物料溫度為5CTC，水分控制在14%以
內；
10、 混合將好氧條件和厭氧條件下產生的酶蛋白按4: 1比例混合得到 復合酶蛋白；
11、 包裝即可。 實施例二
1、 好氧發酵培養基配置將血粉、皮革粉、羽毛、麩皮按照l: 2: 1: 12 比例混合，并將混合物與水按1.8: l混合；
2、 厭氧發酵培養基配置將果渣、米糠、甘薯粉渣按照3: 1: 1混合， 并將混合物與水按6: 4混合；
3、 培養基滅菌將培養基放入滅菌器中高溫蒸汽滅菌；
4、 菌種激活①按各菌種要求配置基礎培養基；②分裝將配好的培養 基分裝于待接種三角瓶中，并塞上棉塞；(D滅菌在O.lMPa下滅菌15min, 其后讓其自然降壓至常壓，冷卻，待接種；④接種待培養基冷卻至4(TC接種，
接種量為0.5%;⑤培養將接種后的試管放入恒溫培養箱內培養，培養完畢
后備用；
5、 擴增培養將母發酵劑擴大培養得到所需量的工作發酵劑，培養結束放 入4"C的冰箱中保存備用；
6、 接種在無菌條件下，以一定的接種量向物料中加入生產發酵劑，好氧發酵菌種的接種量為2%，厭氧發酵菌種的接種重量為3%，其中好氧發酵菌種 包括米曲霉、棲土曲霉、黑曲霉、扣囊擬內孢酶，厭氧發酵菌種包括蘇氨酸高
產菌、植物乳桿菌、糞鏈球菌、酵母菌；
7、 好氧發酵條件發酵溫度35t:，時間2天，自動控溫，間歇通風，通 風量為1.2立方米/ min;
8、 厭氧發酵條件厭氧發酵為自然堆積發酵，時間為7天；
9、 低溫干燥采用低溫氣流干燥，最高物料溫度為65。C，水分控制在14% 以內；
10、 混合將好氧條件和厭氧條件下產生的物質按4: l比例混合；
11、 包裝即可。
權利要求
1、一種復合酶蛋白的制備方法，其特征是制備方法為(1)好氧發酵培養基配置將血粉、皮革粉、羽毛、麩皮按照1∶2∶1∶12的重量比例混合，并將混合物與水按1.8∶1的重量比例混合；(2)厭氧發酵培養基配置將果渣、米糠、甘薯粉渣按照3∶1∶1的重量比例混合，并將混合物與水按6∶4的重量比例混合；(3)培養基滅菌將培養基放入滅菌器中高溫蒸汽滅菌；(4)菌種激活①按好氧發酵菌種和厭氧發酵菌種配置基礎培養基；②分裝將配好的培養基分裝于待接種三角瓶中，并塞上棉塞；③滅菌在0.1MPa下滅菌15min，其后讓其自然降壓至常壓，冷卻，待接種；④接種待培養基冷卻至40℃接種，接種量為0.5％；⑤培養將接種后的試管放入恒溫培養箱內培養，培養完畢后備用；(5)擴增培養將母發酵劑擴大培養得到工作發酵劑，培養結束放入4℃的冰箱中保存備用；(6)接種在無菌條件下，以好氧發酵菌種的接種量為1％-2％和厭氧發酵菌種的接種量為3％向物料中加入生產發酵劑，其中好氧發酵菌種包括米曲霉、棲土曲霉、黑曲霉、扣囊擬內孢酶，厭氧發酵菌種包括蘇氨酸高產菌、植物乳桿菌、糞鏈球菌、酵母菌；(7)好氧發酵條件發酵溫度28-35℃，時間2天，自動控溫，間歇通風，通風量為1.2立方米/min；(8)厭氧發酵條件厭氧發酵為自然堆積發酵，時間為7天；(9)低溫干燥采用低溫氣流干燥，物料溫度低于65℃，水分控制在14％以內；(10)混合將好氧條件和厭氧條件下產生的酶蛋白按4∶1比例混合得到復合酶蛋白；(11)包裝即可。
全文摘要
一種復合酶蛋白的制備方法，其特征是制備方法為好氧發酵培養基配置、厭氧發酵培養基配置、培養基滅菌、菌種激活、擴增培養、接種、好氧發酵條件、厭氧發酵條件、低溫干燥、混合、包裝即可。本發明的優點是1.菌種優良，傳代穩定性強；2.各菌種在發酵過程中起協同作用，各菌生長、代謝旺盛，產酶能力增強；3.好氧發酵和厭氧發酵菌分開分別進行發酵，讓每個菌株最大產酶性能發揮出來；4.原料中不易被動物吸收的蛋白轉化成容易消耗吸收的菌體單細胞蛋白，使產品營養價值得到提高。
文檔編號A23K1/165GK101507469SQ20091011507
公開日2009年8月19日 申請日期2009年3月16日 優先權日2009年3月16日
發明者濤 楊 申請人:江西普潤藥業有限公司