專利名稱：楮頭紅莖段組織快繁方法
技術領域：
本發明涉一種植物組培快繁方法，具體涉及楮頭紅莖段組織快繁方法。
技術背景楮頭紅(Sarcopyramis n印alensis Wall)屬于野牡丹 科Melastomataceae肉穗草屬Sarcopyramis,明顯區別于同屬植物東方肉穗草 (Sarcopyramis bodinieri)。楮頭紅具有清肺熱，去肝火之功效，是我國閩南地區的一種常 用于治療急、慢性肝炎中草藥的原植物，經常被人們誤為東方肉穗草。另外，楮頭紅還主治 風濕痹痛，耳鳴耳聾及目霧羞明。野生的楮頭紅多生于海拔800米以上的林下陰濕處及溪 邊，生境條件要求較嚴格。近年來隨著楮頭紅用藥需求量的不斷加大，對野生資源的采集量 逐漸增大，楮頭紅資源幾近枯竭。利用組織快繁技術，增加其繁殖系數，不僅有利于楮頭紅 資源的保護，也能滿足人們對楮頭紅藥材的需求。 發明內容本發明的目的是提供一種利用楮頭紅的莖段組織培養的方法快速繁 殖楮頭紅。 本發明的目的是通過以下方法實現的。 本發明的楮頭紅莖段組織快繁方法包括材料選擇、消毒處理、芽誘導、芽繼代增 殖、生根培養、煉苗與移栽，具體方法如下 1、材料選擇取楮頭紅植株帶頂芽的嫩莖段和帶節的嫩莖段4 6cm，最佳為 5cm ; 2、消毒處理將步驟1的嫩莖段用流水沖洗干凈后，用飽和洗衣粉液浸泡20 30min，再用自來水沖洗10 15min，在無菌室用70 % 75 %的酒精浸泡1 2min，再用 0. 1% HgCl2消毒5 8min，然后用無菌水沖洗不少于6次； 3、芽誘導從消毒后的材料上切下0. 5cm 1. 0cm帶頂芽和/或帶節的楮頭紅 嫩莖段接種到誘導培養基上培養小苗；所述誘導培養基為MS+1.0mg/L BA+0. lmg/L NAA+ 瓊脂+蔗糖，所述瓊脂占誘導培養基總重量的0.8%、所述蔗糖占誘導培養基總重量的 3% ;用NaHC03或HC1調誘導培養基至pH 5. 8 6. 0 ;所述MS為組培中常用的培養基包 括大量元素NH4N031650mg/LKN031900mg/L， CaCl2 2H20 440mg/L， MgS04 7H20370mg/L， KH2P041700mg/L，微量元素KI 0. 83mg/L， H3B036. 2mg/L， MnS04 4H20 22. 3mg/L， ZnS04 7H20 8. 6mg/L， Na2Mo04 2H20 0. 25mg/L， CuS04 5H20 0. 025mg/L， CoCl2 6H20 0. 025mg/L， FeS04 7H20(27. 8mg/L)+Na2_EDTA 2H20(37. 3mg/L);機成分肌醇100mg/L，煙酸0. 5mg/L， 鹽酸吡哆醇(維生素B6) 0. 5mg/L，鹽酸硫胺素(維生素Bl) 0. 5mg/L，甘氨酸2mg/L。 BA為 組培中常用的細胞分裂激素，NAA為萘乙酸。 4、芽繼代增殖將誘導培養基上產生的無根小苗，剪成1 2個節的切段轉接到繼 代增殖培養基中培養，所述繼代增殖培養基為MS+2.0mg/LBA+0. lmg/L NAA+瓊脂+蔗糖，所 述瓊脂占繼代增殖培養基總重量0. 8%，所述蔗糖占繼代增殖培養基總重量3% ;調繼代增 殖培養基至pH 5. 8 6. 0 ; 5、生根培養將繼代增殖培養基中長3 5cm的無根苗轉接到裝在玻璃三角瓶中 的生根培養基上，其余小芽繼代培養；所述生根培養基為MS+0. lmg/L NAA+1. Omg/L IBA+瓊脂+蔗糖，所述瓊脂占生根培養基總重量0. 8% ，所述蔗糖占生根培養基總重量的3% ;調生 根培養基至pH 5. 8 6. 0 ; 所述芽誘導、芽繼代增殖和生根培養，培養溫度23士lt:，光照度140001x 160001x，光照時間不少于12h d—、 6、煉苗與移栽無根苗在生根培養基中培養，當根伸長為2 4cm時，打開瓶蓋，在 常溫下煉苗3 4d后，經消毒、清洗后移植到由腐殖土和珍珠巖混合的基質中，并置于復有 遮陽網的塑料拱棚中栽培管理至新芽伸長成活；所述腐殖土和珍珠巖混合的基質中腐殖土
和珍珠巖的配比為3 : 1。 本發明的楮頭紅莖段組織快繁方法，成功地將組織培養技術用于楮頭紅植物的快 繁，并采用芽誘導和芽繼代增殖結合的二段培養方法，有效地克服了楮頭紅莖段組織的褐 化，使楮頭紅莖段組織的褐化降低31. 3%。本發明的楮頭紅莖段組織快繁方法，具有芽誘 導率高和移栽成活率高的優點，芽誘導率一般可達50. 17%;移栽成活率一般可達93. 2%以上。 具體實施例為了充分公開本發明的楮頭紅莖段組織快繁方法，以下結合實施例 加以說明。 實施例1 :楮頭紅莖段組織快繁方法
楮頭紅莖段組織快繁方法，具體方法如下 1、材料選擇外植體的獲得從楮頭紅植株切下帶頂芽的嫩莖段和/或帶節的嫩莖 段5cm。 2、消毒處理用流水沖洗干凈材料，用飽和洗衣粉浸泡20min后，再用自來水沖洗 10min，在無菌室用70%酒精浸泡lmin，再用0. 1% HgCl2消毒5min，無菌水沖洗6次；
3、芽誘導切下1.0cm帶頂芽和/或帶節的嫩莖段，分別接種到裝在玻璃三角瓶中 的誘導培養基上； 4、芽繼代增殖將芽誘導產生的無根小苗，剪成2個節的切段轉接到裝在玻璃三 角瓶中的繼代增殖培養基中培養； 5、生根培養將增殖培養基中長3cm的無根苗轉接到裝在玻璃三角瓶中的生根培 養基上培養，其余的小芽繼續繼代培養； 所述芽誘導、芽繼代增殖和生根培養，培養溫度23t:，光照度150001x，光照時間 12h d—、 6、煉苗與移栽無根苗在生根培養基中培養，當根伸長至3cm，打開瓶蓋，在常 溫下煉苗4d，然后將瓶苗取出，洗凈附著在根部的培養基，用0. 1 %的多菌靈消毒液浸苗 5min，移植到由腐殖土和珍珠巖以3 : 1的比率混合的基質中，澆透水，蓋上復有遮陽網的 塑料拱棚中。移植后的環境溫度保持在161:，濕度80%，至新芽伸長成活。
權利要求
一種楮頭紅莖段組織快繁方法，其特征在于由下列步驟組成(1)材料選擇取楮頭紅植株帶頂芽的嫩莖段和帶節的嫩莖段4～6cm，最佳為5cm；(2)消毒處理將步驟(1)的嫩莖段用流水沖洗干凈后，用飽和洗衣粉液浸泡20～30min，再用自來水沖洗10～15min，在無菌室用70％～75％的酒精浸泡1～2min，再用0.1％HgCl2消毒5～8min，然后用無菌水沖洗不少于6次；(3)芽誘導從步驟(2)消毒后的材料上切下0.5cm～1.0cm帶頂芽和/或帶節的楮頭紅嫩莖段接種到誘導培養基上培養小苗；所述誘導培養基為MS+1.0mg/L BA+0.1mg/L NAA+瓊脂+蔗糖，所述瓊脂占誘導培養基總重量的0.8％、所述蔗糖占誘導培養基總重量的3％；調誘導培養基至pH 5.8～6.0；(4)芽繼代增殖將步驟(3)誘導培養基上產生的無根小苗，剪成1～2個節的切段轉接到繼代增殖培養基中培養，所述繼代增殖培養基為MS+2.0mg/L BA+0.1mg/L NAA+瓊脂+蔗糖，所述瓊脂占繼代增殖培養基總重量0.8％，所述蔗糖占繼代增殖培養基總重量3％；調繼代增殖培養基至pH 5.8～6.0；(5)生根培養將步驟(4)繼代增殖培養基中長3～5cm的無根苗轉接到裝在玻璃三角瓶中的生根培養基上，其余小芽繼代培養；所述生根培養基為MS+0.1mg/L NAA+1.0mg/L IBA+瓊脂+蔗糖，所述瓊脂占生根培養基總重量0.8％，所述蔗糖占生根培養基總重量的3％；調生根培養基至pH 5.8～6.0；(6)煉苗與移栽無根苗在生根培養基中培養，當根伸長為2～4cm時，打開瓶蓋，在常溫下煉苗3～4d后，經消毒、清洗后移植到由腐殖土和珍珠巖混合的基質中，并置于復有遮陽網的塑料拱棚中栽培管理至新芽伸長成活。
2. 根據權利要求1所述的一種楮頭紅莖段組織快繁方法，其特征在于所述腐殖土和珍 珠巖混合的基質中腐殖土和珍珠巖的配比為3 : 1。
3. 根據權利要求1所述的一種楮頭紅莖段組織快繁方法，其特征在于所述煉苗與移栽 中的消毒，使用0. 1%的多菌靈消毒液浸苗5min。
4. 根據權利要求1所述的一種楮頭紅莖段組織快繁方法，其特征在于所述移植后的環 境溫度保持在16t:，濕度80%，至新芽伸長成活。
全文摘要
楮頭紅莖段組織快繁方法，包括材料選擇、消毒處理、芽誘導、芽繼代增殖、生根培養、煉苗與移栽，本發明的方法，成功地將組織培養技術用于楮頭紅植物的快繁，并采用芽誘導和芽繼代增殖結合的二段培養方法，有效地克服了楮頭紅莖段組織的褐化，使楮頭紅莖段組織的褐化降低31.3％。本發明的快繁方法，具有芽誘導率高和移栽成活率高的優點，芽誘導率一般可達50.17％；移栽成活率一般可達93.2％以上。
文檔編號A01H4/00GK101715728SQ200910112938
公開日2010年6月2日 申請日期2009年12月9日 優先權日2009年12月9日
發明者寧書菊, 林亮亮, 郭雄偉, 魏道智 申請人:福建農林大學