一種提高滇重樓植物體中多種甾體皂苷含量的方法

專利名稱：一種提高滇重樓植物體中多種甾體皂苷含量的方法
技術領域：
本發明涉及一種提高植物體中多種甾體皂苷含量的方法，具體地說，涉及一 種利用外源植物生長調節劑促進滇重樓植物體中多種甾體皂苷含量的方法。
背景技術：
滇重樓是延齡草科重樓屬的多年生草本植物，主要分布于中國西南部，特別 是云南、四川及貴州等地。滇重樓是名貴的藥用植物，其根狀莖中含有的甾體皂 苷類化合物主要包括偏諾皂苷和薯蕷皂苷，是其主要活性成分，具有抗癌、止血、 消炎、鎮痛、止咳平喘和免疫調節等活性。近年來，隨著市場對其需求量的迅速 增長，人們在野外肆意地掠奪性采挖、生態環境的人為破壞、滇重樓資源分布破 碎化，加之滇重樓本身繁殖率低等因素嚴重影響了其在原產地的生長和繁衍，導 致滇重樓己逐步步入瀕危植物行列，重樓的工業藥用原料出現嚴重緊缺。從實施 可持續發展戰略和保存滇重樓自然資源的角度出發，對其進行人工栽培是一條必 然之路，因此進行滇重樓的人工馴化栽培已迫在眉睫。
滇重樓生長發育的物候特點表現在4 6月份根狀莖頂芽出土 (出苗)，隨后 展葉、展花、花粉囊開放(或葉、花、花粉囊同時展放)，5 7月份生長停止，9~10 月份果實開裂，11-12月份地上部分枯萎、倒苗。滇重樓植物的生理特征表現為 光合面積小，一二年生幼苗只有1片葉，4年生有4 6片葉，5年成熟后也只有5 ll枚葉片；葉片光能利用率低，光合能力弱；生長期短，僅6 7個月時間。
由此可以看出，滇重樓每年生物量積累較少，致使從幼苗到根狀莖入藥至少 需要7 10年的時間，且藥材質量有待提高。為改善這一狀況，研究一種簡單可行 的方法來提高滇重樓中甾體皂苷含量，對于滇重樓的人工馴化栽培具有重要的作 用。

發明內容
本發明的目的在于彌補現有技術的不足，提供一種提高滇重樓植物體中多種 甾體皂苷含量的方法。
為實現上述目的，本發明采用如下技術方案 一種提高滇重樓植物體中多種 甾體皂苷含量的方法，包括以下步驟-
(l)將丁酰肼或2-氯乙基三甲基氯化胺或甲哌嗡溶于水中，配制成濃度為50~500 mg七"的丁酰肼溶液，或濃度為39-2500 mg七"的2-氯乙基三甲基氯化胺 溶液，或濃度為0.125-0.5 mg'g'1的甲哌嗡溶液；
(2)在一個自然年度的7~8月份對展葉完全的滇重樓葉片均勻噴施一次丁酰肼 溶液或2-氯乙基三甲基氯化胺溶液或甲哌嗡溶液，直到葉片上的溶液將要滴落時 停止噴施。
上述步驟(l)中是將丁酰肼或2-氯乙基三甲基氯化胺或甲哌嗡溶于水中，配制 成濃度為500 mg七'1的丁酰肼溶液或濃度為625 mg丄—1的2-氯乙基三甲基氯化胺 溶液，或濃度為0.125 mg，g—1的甲哌嗡溶液。
上述步驟(2)中是于傍晚時分，對展葉完全的滇重樓葉片均勻噴施一次丁酰肼 溶液或2-氯乙基三甲基氯化胺溶液或甲哌嗡溶液。
上述步驟(2)中是對展葉完全的滇重樓葉片的正反兩面均勻噴施一次丁酰肼溶 液或2-氯乙基三甲基氯化胺溶液或甲哌嗡溶液。
上述步驟(2)中是在每年的7~8月份對展葉完全的滇重樓葉片均勻噴施一次丁 酰肼溶液或2-氯乙基三甲基氯化胺溶液或甲哌嗡溶液，直至其根狀莖可以入藥。
實驗結果表明，本發明中采用濃度為500mg七"的丁酰肼溶液，或濃度為625 mg丄"的2-氯乙基三甲基氯化胺溶液，或濃度為0.125 mg.g"的甲哌嗡溶液，在每 年的7~8月份于傍晚時分，對展葉完全的滇重樓植株的葉片正反兩面均勻噴施一 次，直至其根狀莖可以入藥，能夠達到最佳效果。
本發明具有如下優點
1. 丁酰肼、2-氯乙基三甲基氯化胺和甲哌嗡是用途很廣的植物生長調節劑，在 適宜濃度下，將它們分別噴施于滇重樓植株上，可以調節植株生長，優化株型， 使植株堅實抗倒伏，提高植株根狀莖產量，且能提高葉片的光能利用率，增加滇 重樓中甾體皂苷含量。本發明中采用上述三種溶液，使滇重樓中甾體皂苷含量分 別提高了 11%、 26%和25%;
2. 所需藥品、儀器設備簡單便宜，因此投入少，成本低；
3. 實施過程簡單易行，可以顯著提高甾體皂苷含量，對人畜無毒害，對環境無 影響。
具體實施例方式
下面通過具體實施例對本發明作進一歩說明，其目的在于幫助更好地理解本 發明的內容，但這些具體實施例不以任何方式限制本發明的保護范圍。
4實施例1
將丁酰肼溶于水配制成濃度為50、 500 11^丄'1的溶液，在每年的7 8月份于
傍晚時分對展葉完全的滇重樓葉片的正反兩面均勻噴施一次，直到葉片上的丁酰 肼溶液將要滴落時停止噴施。另取分別與上述噴施量等量的水，采用同樣的方式 對沒有噴施丁酰肼溶液的滇重樓植株的葉片正反兩面均勻噴施一次，以作為對照。 如遇下雨，可進行補噴。待噴施水和噴施丁酰肼溶液的滇重樓植株倒苗后，用
RP-HPLC方法分別檢測滇重樓植株中甾體皂苷的含量，與噴施水的滇重樓作對比， 結果表明噴施500 mg七"丁酰肼溶液的滇重樓根狀莖偏諾皂苷含量提高了 14%， 噴施50、 500 mg丄'1的丁酰肼溶液的滇重樓根狀莖薯蕷皂苷含量分別提高了 9%、 7%，使總甾體皂苷含量分別提高了 10%、 11%。 實施例2
按照與實施例1相同的方法進行實驗，不同之處在于采用濃度為10、 39、 625、 2500 mg丄"的2-氯乙基三甲基氯化胺溶液進行噴施。滇重樓根狀莖偏諾皂苷含量 分別提高了55%、 12%、 47%、 37%,噴施625 mg七'1 2-氯乙基三甲基氯化胺溶液 的滇重樓根狀莖薯蕷皂苷含量提高了 23%，使總甾體皂苷含量提高了 26%。 實施例3
按照與實施例1相同的方法進行實驗，不同之處在于采用濃度為0.125、 0.25、 0.5mg'g"的甲哌嗡溶液進行噴施。滇重樓根狀莖偏諾皂苷含量分別提高了 80%、 21%、 49%，根狀莖薯蕷皂苷含量分別提高了 18%、 1%、 3%，總甾體皂苷含量分 別提高了 25%、 5%、 8%。
權利要求
1. 一種提高滇重樓植物體中多種甾體皂苷含量的方法，其特征在于包括以下步驟(1)將丁酰肼或2-氯乙基三甲基氯化胺或甲哌嗡溶于水中，配制成濃度為50～500mg·L-1的丁酰肼溶液，或濃度為39～2500mg·L-1的2-氯乙基三甲基氯化胺溶液，或濃度為0.125～0.5mg·g-1的甲哌嗡溶液；(2)在一個自然年度的7～8月份對展葉完全的滇重樓葉片均勻噴施一次丁酰肼溶液或2-氯乙基三甲基氯化胺溶液或甲哌嗡溶液，直到葉片上的溶液將要滴落時停止噴施。
2. 根據權利要求1所述的提高滇重樓植物體中多種甾體皂苷含量的方法，其特征 在于步驟(l)中是將丁酰肼或2-氯乙基三甲基氯化胺或甲哌嗡溶于水中，配制 成濃度為500 mg七-1的丁酰肼溶液，或濃度為625 mg.L/1的2-氯乙基三甲基氯 化胺溶液，或濃度為0.125 mg'g"的甲哌嗡溶液。
3. 根據權利要求1或2所述的提高滇重樓植物體中多種甾體皂苷含量的方法，其 特征在于步驟(2)中是于傍晚時分，對展葉完全的滇重樓葉片均勻噴施一次丁 酰肼溶液或2-氯乙基三甲基氯化胺溶液或甲哌嗡溶液。
4. 根據權利要求1~3中任一項所述的提高滇重樓植物體中多種甾體皂苷含量的 方法，其特征在于步驟(2)中是對展葉完全的滇重樓葉片的正反兩面均勻噴施 一次丁酰肼溶液或2-氯乙基三甲基氯化胺溶液或甲哌嗡溶液。
5. 根據權利要求1~4中任一項所述的提高滇重樓植物體中多種甾體皂苷含量的 方法，其特征在于步驟(2)中是在每年的7 8月份對展葉完全的滇重樓葉片均 勻噴施一次丁酰肼溶液或2-氯乙基三甲基氯化胺溶液或甲哌嗡溶液，直至其根 狀莖可以入藥。
全文摘要
本發明公開了一種提高滇重樓植物體中多種甾體皂苷含量的方法，包括以下步驟將丁酰肼或2-氯乙基三甲基氯化胺或甲哌嗡溶于水中，配制成濃度為50～500mg·L^-1的丁酰肼溶液，或濃度為39～2500mg·L^-1的2-氯乙基三甲基氯化胺溶液，或濃度為0.125～0.5mg·g^-1的甲哌嗡溶液；在一個自然年度的7～8月份對展葉完全的滇重樓葉片均勻噴施一次丁酰肼溶液或2-氯乙基三甲基氯化胺溶液或甲哌嗡溶液，直到葉片上的溶液將要滴落時停止噴施。可在每年的7～8月份噴施一次，直至根狀莖可以入藥。采用本發明方法使滇重樓甾體皂苷含量分別提高了11％、26％和25％，且所需藥品、儀器設備簡單便宜，因此投入少，成本低。此外，實施過程簡單易行，對人畜無毒害，對環境無影響。
文檔編號A01N43/34GK101518185SQ20091006142
公開日2009年9月2日 申請日期2009年4月3日 優先權日2009年4月3日
發明者坤 余, 李家儒, 韋建榮, 青 馬 申請人:武漢大學;云南白藥集團股份有限公司