附子納哌林型二萜生物堿酰化物與合成及應用的制作方法

專利名稱：附子納哌林型二萜生物堿酰化物與合成及應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及附子中納哌林型二萜生物堿酰化物的合成方法及其應用，屬于醫藥、農藥藥 物合成技術領域。
(二)
背景技術：
納哌林型二萜生物堿是毛茛科烏頭屬植物中的一類天然化合物，主要包括宋果靈、歐烏 頭堿、12-表-歐烏頭堿、興國烏頭堿及準葛爾堿等。其中，宋果靈為毛茛科植物烏頭"c朋it"歷 csr肌'c/A^乃'Debx.)的子根(中藥附子)中的一種重要有效成分，多以鹽酸鹽的形式存在于 烏頭中。據《神農本草經》記載，附子有回陽救逆、驅寒散風之功效，但因其有大毒而被列 為下等藥。近代藥理研究表明，二萜生物堿具有抗炎、鎮痛、強心、抗癌和抗心律失常等主 要作用。除做中藥外，我國古時的人民曾將附子浸提液制用于制作毒箭及殺蟲害之用。隨著 植物源農藥的開發，關于二萜生物堿殺蟲作用越來越多的被報道。丁偉等發現烏頭的乙醇、 乙醚提取物對粘蟲具有一定的防效。杜曉英等發現烏頭甲醇提取物對赤擬谷盜、家蠅具有一 定的毒殺和趨避活性。余大剛還將烏頭液作為配方之一申請了復配中草藥農藥的專利。高占 林發現北烏頭C4co"/^m ^訓ezo^O的丙酮浸液對禾谷縊管蚜、繡線菊蚜和菜縊管岈具有較高 的生物活性，對吡蟲啉和氧化樂果均表現明顯增效。陳立等研究發現，瓜葉烏頭對小菜蛾和 斜蚊夜蛾有明顯殺蟲活性。王海麗等發現露蕊烏頭甲醇提取物對紋夜蛾的拒食活性約為72%。
國外亦有文獻報道關于阿替生型二萜生物堿的新作用，Patricia Gonz'alez等將43種阿替生型 二萜生物堿作用于寄生蟲，發現其對利什曼原蟲有抗增殖作用，而其中15, 22-0-二乙酰基-19-過氧二羥基阿替生有顯著作用。主要是押制原蟲的前鞭毛體生長并且對宿主細胞無毒害作用。 在地中海地區利什曼原蟲可導致人與狗患內臟利什曼病。近年來隨著對附子及其主要成分殺 蟲作用的研究越來越多，也有關于宋果靈殺蟲作用的研究，楊小生等在文獻已經報道宋果靈
在一定濃度下對乙酰膽堿酯酶有一定的抑制作用。
王勇等人對二萜生物堿構效關系進行了總結，發現二萜生物堿取代基種類、位置不同，
毒性不同。含氧取代基多的毒性大于含氧取代基少的；C3位的不同酯基對毒性和鎮痛活性 都有關系；羥基的酯化程度、酯基數目和大小對二萜生物堿的毒性也有影響。對二萜生物堿 進行結構修飾研究雖已開展多年，但都主要針對其鎮痛活性、抗腫瘤活性、抗心律失常等醫
藥用途的活性為研究點，但針對其殺蟲活性的研究并未見報道。四川大學王鋒鵬課題組對二萜生物堿的發現、結構改造及其抗腫瘤和鎮痛等藥理活性進行了較為深入的研究。如以滇烏 堿為原料分別對結構中的ABC環進行結構修飾來得到紫杉醇類似結構并對其進行抗腫瘤活 性的篩選。西北師范大學高黎明等運用氧化劑KMn04對天然二萜生物堿talatisamine (它拉烏 頭胺)的結構進行改造，得到了內酰胺型、亞胺型和酰化型等4個非天然產物。
(三)

發明內容
1、 發明目的本發明的目的是提供一種具有生物活性的附子納哌林型二萜生物堿酰化物 的合成方法。
2、 技術方案實現發明采用的手段是將附子納哌林型二萜生物堿溶于吡啶，加入酰化試 劑在冰浴或室溫條件下反應，即可合成酰化衍生物。
本發明將宋果靈溶于吡啶，與摩爾量1~5倍的酰化試劑反應6~30小時即可生成酰化衍生
物。使用的酰化試劑有乙酸酐、丙酸酐、鄰氯苯甲酰氯、對氯苯甲酰氯、苯甲酰氯、正己酰
氯等酸酐或酰氯。反應在在0-4(TC下進行，堿化反應體系pH值至8 10。采用的萃取方法， 將生物堿全部轉移到小極性溶劑層中。溶劑通過減壓蒸餾的方式用旋轉蒸發儀進行回收。得 到的產品可能是單一化合物，只需要進行簡單的純化處理，如重結晶；產品也可能是多種酯 化的生物堿混合物，應根據極性的差異對其進行柱層析分離。所有的生物堿利用紅外色譜、 電子轟擊電離質譜、核磁共振等波譜聯合進行表征和分析。
(四) 具體實施
實施例1
將46. 6mg宋果靈溶解于lml吡啶中，再逐滴加入0. 5ml乙酸酐，室溫下攪拌20小時。 飽和碳酸鈉溶液調pH到9，氯仿萃取后，氯仿層分別用水和飽和食鹽水洗3次，干燥，減壓 蒸餾得1-0-乙酰基-15-0-乙酰基宋果靈53mg。
產物結構用質譜檢測證實，EI-Msm/z: 442(M+);
核磁檢測，1HNMR(CDC13) (ppm): 5.64， 5.25 (eachlH， s,環外雙鍵氫)，2.11， 2.03 (each3H， s, COCH3)，3.15 (3H, t, NCH2CH3), 0.75 (3H， s， 18-CH3);
核磁檢測，13CNMR(CDC13) S : 208.8，170.6, 170.3,145.2, 112.9, 50.6, 13.5 (NCH2CH3).
實施例2
將37. 9mg宋果靈溶解于lml吡啶中，再逐滴加入0. 5ml丙酸酐，室溫下攪拌20小時。 飽和碳酸鈉溶液調pH到9，氯仿萃取后，氯仿層分別用水和飽和食鹽水洗3次，干燥，減壓蒸餾得宋果靈丙酰化混合物38. lmg。上硅膠柱用石油醚/丙酮5:l洗脫，得1-0-丙酰基-15-0-丙酰基宋果靈28. 3mg。
產物結構用質譜檢測證實，EI-Msw/z: 470.3 (M+);
核磁檢測，'HNMR(CDCl3)(Ppm): 5.66(1H ,s)，5.25(lH, d),5.03(lH, dd), 4.99(1H, s), 2.75(1H: q), 2.58(1H, m)， 2.53(1H, d)， 2.44(1H, m), 2.30(3H， m)， 2.21(1H, d)， 2.18(1H, m), 2.13(3H， s), 2.02(1H， m), 1.94(1H, m)， 1.60(4H, m)， 1.43(1H, dd), 1.41(1H, d), 1.23(3H， t), 1.19(3H, t), U5(3H,t)
實施例3
殺蟲活性的測定用分析天平(O.OOOlg)稱取一定質量的原藥，加含有0.1%吐溫一80 的溶劑(DMF)，配制成5%制劑。稱取一定質量的制劑，加蒸餾水(點滴法稀釋用丙酮)稀 釋配制成測定所需濃度的藥液，普篩濃度為500mg/L。將蠶豆葉片剪去兩端，背面朝上放在 小塊棉花上，置于塑料培養皿內，加少量水，接苜蓿蚜成蚜以產若蚜。24h后去除成蚜，繼 續培養2d后將葉片在藥液中充分浸潤5s后，重新置于棉花上，自然涼干。以丁硫克百威(IO mg/L)和空白CK為對照。24h后檢查結果，1-0-乙酰基-15-0-乙酰基宋果靈和1-0-丙酰基 -15-0-丙酰基宋果靈有較好的殺蟲活性。
權利要求
1、附子納哌林型二萜生物堿酰化物，為如下分子式通式(I)所示的化合物式中R1和R2為氫、羥基或酰基(R1和R2中至少有一個酰基)；R3為1-4個碳原子的烷基。
2、如權利要求1所述附子納哌林型二萜生物堿酰化物的合成方法，其特征是以納哌林型 二萜生物堿(分子式通式(II))為原料，在0-40。C下與酰化試劑攪拌反應，反應完畢后調 pH值到8-10，萃取后減壓蒸餾，通過重結晶或柱層析獲得的納哌林型二萜生物堿酰化物。<formula>formula see original document page 2</formula>(II)式中K和R2為氫或羥基；&為1-4個碳原子的垸基c
3、 如權利要求2所述的附子納哌林型二萜生物堿酰化物的合成方法，其特征在于所述酰化試劑為乙酸酐、丙酸酐、鄰氯苯甲酰氯、對氯苯甲酰氯、苯甲酰氯、正己酰氯等酸酐或酰氯0
4、 如權利要求書1所述的納哌林型二萜生物堿酰化物的應用，其特征是作為殺蟲藥物應用。
5、 如權利要求書l所述的納哌林型二萜生物堿酰化物的應用，其特征是作為鎮痛、抗心 律失常、抗腫瘤藥物應用。
全文摘要
本發明公開了一種烏頭屬植物烏頭中天然納哌林型二萜生物堿的酰化物(化合物結構如圖)的制備及應用，屬于醫藥、農藥藥物合成技術領域。該納哌林型二萜生物堿酰化物的制備方法是以附子中納哌林型二萜生物堿化合物為原料，在0-40℃下與酰化試劑酰氯或酸酐攪拌反應，反應完畢后調pH值到8-10，萃取后減壓蒸餾，通過重結晶或柱層析獲得納哌林型二萜生物堿酰化物。該納哌林型二萜生物堿酰化物可應用于農藥殺蟲劑方面，還可用于抗腫瘤、抗炎鎮痛及抗心律失常等醫藥方面的開發。式中R₁和R₂為氫、羥基或酰基(R₁和R₂中至少有一個酰基)；R₃為1-4個碳原子的烷基。
文檔編號A01P7/00GK101440064SQ20081014798
公開日2009年5月27日 申請日期2008年12月24日 優先權日2008年12月24日
發明者侯大斌, 徐春霞, 楊海君, 惠 王, 袁小紅, 賀新生, 林 馬 申請人:西南科技大學