專利名稱：一種通過體胚發生大量繁殖大花蕙蘭的方法
技術領域：
本發明涉及一種通過體胚發生大量繁殖大花蕙蘭的方法。
背景技術：
大花蕙蘭(Cymbidium hybridum)，有“蘭花之王”稱譽，在所有的觀賞洋蘭中，大花蕙蘭的平均市場售價最高。大花蕙蘭種苗傳統繁殖方式為分株繁殖或用組織培養以芽增方式快繁，繁殖系數較低，周期較長，尤其是工廠化生產條件下，優良品種的快繁有較高的種苗生產成本，較難在較短時間內形成規模產量。
發明內容
本發明提供了一種通過體胚發生大量繁殖大花蕙蘭的方法，它極大地節約了生產成本，縮短了繁殖周期，解決了大花蕙蘭優良品種在較短時間內難以形成規模產量的問題。
本發明采用了以下技術方案如下一種通過體胚發生大量繁殖大花蕙蘭的方法，它采用如下步驟步驟一，采取正在生長中的未展葉新芽消毒處理后，在顯微鏡下剝取莖尖，在無菌條件下，將莖尖接種于培養基上，建立無菌體系；步驟二，切取無菌體系幼苗的莖段，在適宜的激素組合和適宜的培養基上，誘導體細胞胚胎的發生；步驟三，對體胚進行切傷處理后，接種在適宜的培養基上快速大量增殖；步驟四，將得到的足夠數量的體細胞胚團，在適宜的分化培養基上培育成完整的小植株；步驟五，將得到的足夠數量的小植株培養至狀苗后出瓶移栽；步驟六，對小苗進行正常管理，培育至成品花。
在繁殖前需要對快繁的大花蕙蘭品種存檔保存親本圖像資料。步驟一中所述的對未展葉新芽進行消毒的過程為首先流水沖洗10min后，75％酒精表面滅菌5～8s，無菌水沖凈，然后在3％次氯酸鈉溶液中浸10min，無菌水沖洗3～5遍后。步驟一中莖尖接種的培養基為大花蕙蘭組培芽增殖培養基。
采用如上技術方案，本發明利用細胞全能性的原理，使大花蕙蘭種苗在規模生產時直接以體細胞胚胎發生的方式進行，較短時間內得到大量單細胞起源的、同步性好的胚性細胞和兩極性的胚狀體，進而得到大量個體間遺傳背景一致、無性系變異小的完整植株，從而解決了在較短時間內形成規模產量的問題，極大地節約了生產成本，縮短了繁殖周期。
具體實施例方式
本發明為一種通過體胚發生大量繁殖大花蕙蘭的方法，它采用如下步驟步驟一，采取正在生長中的未展葉新芽，首先用流水沖洗10min后，75％酒精表面滅菌5～8s，無菌水沖凈，然后在3％次氯酸鈉溶液中浸10min，無菌水沖洗3～5遍后，在顯微鏡下剝取莖尖，在無菌條件下，將莖尖接種于大花蕙蘭組培芽增殖培養基，建立無菌體系；步驟二，切取無菌體系幼苗的莖段，在激素組合和適宜的培養基上，誘導體細胞胚胎的發生，選取不同發育階段的體胚細胞團，用鋒利的單面刀片切割成0.2cm×0.2cm×0.2cm的材料塊，材料用FAA(70％)固定，注射器抽氣，正丁醇逐級脫水，石蠟透入包埋，常規石蠟切片，切片厚度8-10μm，番紅-固綠對染，顯微鏡下觀察照相，建立檔案；步驟三，對體胚進行切傷處理后，接種在適宜的培養基上快速大量增殖；步驟四，將得到的足夠數量的體細胞胚團，在適宜的分化培養基上培育成完整的小植株；步驟五，將得到的足夠數量的小植株培養至狀苗后出瓶移栽；步驟六，對小苗進行正常管理，培育至成品花。
本發明在繁殖前選擇需要快繁的大花蕙蘭品種，用數碼相機拍照，存檔保存親本圖像資料；
權利要求
1.一種通過體胚發生大量繁殖大花蕙蘭的方法，它采用如下步驟步驟一，采取正在生長中的未展葉新芽消毒處理后，在顯微鏡下剝取莖尖，在無菌條件下，將莖尖接種于培養基上，建立無菌體系；步驟二，切取無菌體系幼苗的莖段，在適宜的激素組合和適宜的培養基上，誘導體細胞胚胎的發生；步驟三，對體胚進行切傷處理后，接種在適宜的培養基上快速大量增殖；步驟四，將得到的足夠數量的體細胞胚團，在適宜的分化培養基上培育成完整的小植株；步驟五，將得到的足夠數量的小植株培養至狀苗后出瓶移栽；步驟六，對小苗進行正常管理，培育至成品花。
2.根據權利要求1所述的一種通過體胚發生大量繁殖大花蕙蘭的方法，其特征是在繁殖前需要對快繁的大花蕙蘭品種存檔保存親本圖像資料。
3.根據權利要求1所述的一種通過體胚發生大量繁殖大花蕙蘭的方法，其特征是步驟一中所述的對未展葉新芽進行消毒的過程為首先用流水沖洗10min后，75％酒精表面滅菌5～8s，無菌水沖凈，然后在3％次氯酸鈉溶液中浸10min，無菌水沖洗3～5遍后。
4.根據權利要求1所述的一種通過體胚發生大量繁殖大花蕙蘭的方法，其特征是步驟一中莖尖接種的培養基為大花蕙蘭組培芽增殖培養基。
全文摘要
本發明公開了一種通過體胚發生大量繁殖大花蕙蘭的方法，它采用如下步驟步驟一，采取正在生長中的未展葉新芽消毒處理后，在顯微鏡下剝取莖尖，在無菌條件下，將莖尖接種于培養基上，建立無菌體系；步驟二，切取無菌體系幼苗的莖段，在適宜的激素組合和適宜的培養基上，誘導體細胞胚胎的發生；步驟三，對體胚進行切傷處理后，接種在適宜的培養基上快速大量增殖；步驟四，將得到的足夠數量的體細胞胚團，在適宜的分化培養基上培育成完整的小植株；步驟五，將得到的足夠數量的小植株培養至狀苗后出瓶移栽；步驟六，對小苗進行正常管理，培育至成品花。
文檔編號A01G1/00GK1994069SQ20061016152
公開日2007年7月11日 申請日期2006年12月27日 優先權日2006年12月27日
發明者李 杰 申請人:李 杰