專利名稱：苜蓿青貯添加劑的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及的是一種生物技術(shù)領(lǐng)域的制備方法，具體是一種苜蓿青貯添加劑的制備方法。
背景技術(shù)：
紫花苜蓿(以下簡(jiǎn)稱苜蓿)(Medicago sativa L.)是一種多年生豆科牧草，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值豐富，是草食動(dòng)物優(yōu)質(zhì)的飼草，有“牧草之王”的美譽(yù)。長(zhǎng)期以來，紫花苜蓿的保存主要以曬制干草為主，這種方法的最大缺點(diǎn)是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失嚴(yán)重。近幾年，加拿大、日本等國(guó)家開始利用青貯的方法保存苜蓿，解決了苜蓿保存過程中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失嚴(yán)重的問題。由于苜?？扇苄蕴呛康?，緩沖能高，屬于難青貯的豆科牧草，直接青貯效果不好，需要在青貯發(fā)酵過程中使用添加劑。國(guó)外目前使用比較普遍的添加劑種類有甲酸、乳酸菌制劑、酶制劑、以及乳酸菌和酶制劑的混合物等。
經(jīng)對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的文獻(xiàn)檢索發(fā)現(xiàn)，Mitsuaki Ohshima等(1997)在AnimalFeed Science Technology雜志第66期(129-137頁)首次提出綠汁發(fā)酵液(Previously Fermented Juice，簡(jiǎn)寫為PFJ)的制作方法及其在苜蓿青貯中的效果。該方法的主要制作過程如下新鮮苜?！兴椤铀n→粉碎(打漿)→過濾→濾液中加葡萄糖→發(fā)酵→制成PFJ。由于綠汁發(fā)酵液含有多種來源于苜蓿的乳酸菌菌種，在苜蓿青貯中有明顯降低青貯料pH值的作用，并且，綠汁發(fā)酵液制作簡(jiǎn)單，取材方便，家畜食用青貯料后無副作用，青貯制作過程中對(duì)人體無害，因此，逐漸開始在生產(chǎn)中得到應(yīng)用。作為乳酸發(fā)酵的啟動(dòng)因子，綠汁發(fā)酵液能夠在青貯過程中促進(jìn)乳酸菌種群擴(kuò)大，抑制其它有害菌的生長(zhǎng)，改善苜蓿青貯品質(zhì)。許多的研究證明用綠汁發(fā)酵液青貯苜蓿，其作用比接種單一乳酸菌更有效，可顯著降低青貯苜蓿的pH值。然而，綠汁發(fā)酵液中除含有多種乳酸菌外，還含有多種有害的菌種，這些菌種同樣也具有啟動(dòng)因子的作用，在苜蓿青貯過程中誘導(dǎo)有害菌種群擴(kuò)大，因而降低或減緩了綠汁發(fā)酵液更好地促進(jìn)乳酸菌擴(kuò)大繁殖的作用，使得青貯苜蓿在預(yù)備發(fā)酵期和酸化前期不能在短期內(nèi)急劇降低青貯料的pH值，這是綠汁發(fā)酵液作為青貯添加劑在苜蓿青貯中存在的最大缺陷，影響到青貯苜蓿高質(zhì)量發(fā)酵和形成高質(zhì)量的青貯料。在進(jìn)一步的檢索中，還未見將綠汁發(fā)酵液和甲酸配合作為苜蓿青貯添加劑以及制備方法的報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明針對(duì)背景技術(shù)中綠汁發(fā)酵液青貯的不足和缺陷，提供一種苜蓿青貯添加劑的制備方法，使其在使用PFJ的基礎(chǔ)上，配合使用甲酸以快速降低預(yù)備發(fā)酵期的pH值，有效地抑制有害菌的繁殖，為耐酸性能較強(qiáng)的乳酸菌繁殖創(chuàng)造條件，從而快速降低預(yù)備發(fā)酵期和酸化前期青貯苜蓿pH值，提高苜蓿青貯料的質(zhì)量。
本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的，本發(fā)明所述的苜蓿青貯添加劑，由綠汁發(fā)酵液和甲酸組成，其重量百分比是40～60％40～60％，制備步驟如下(1)制備綠汁發(fā)酵液；(2)確定甲酸使用量；(3)綠汁發(fā)酵液(PFJ)和甲酸溶液配合使用，形成苜蓿青貯添加劑。
所述的步驟(1)，具體為(a)取新鮮的苜蓿植株，去掉基部和頂部各約10cm，同時(shí)去掉主枝和比較粗的枝條，將剩余的幼枝和葉保留，切碎成3-5cm；(b)按苜蓿(g)和水(ml)1∶2.5的比例加入蒸餾水，充分混合，用高速組織粉碎機(jī)將混合后的苜蓿搗碎，靜置1小時(shí)，雙層紗布過濾；(c)按苜蓿原料∶葡萄糖＝10g∶1g的比例在濾液中加入葡萄糖或相當(dāng)葡萄糖量的糖漿，充分?jǐn)嚢瑁糜?0℃的環(huán)境中發(fā)酵48小時(shí)，制成綠汁發(fā)酵液。
所述的步驟(2)，具體為以每公斤苜蓿4.0～6.0ml 100％濃度的甲酸作為實(shí)施用量。
所述的步驟(3)，具體為綠汁發(fā)酵液(PFJ)與100％濃度的甲酸溶液(FA)按40～60％∶40～60％的比例形成苜蓿青貯添加劑，青貯時(shí)每公斤苜蓿添加4.0～6.0mlPFJ和4.0～6.0ml FA(或相當(dāng)甲酸量的非100％甲酸溶液)，綠汁發(fā)酵液和甲酸溶液先后分別噴灑在苜蓿表面。
本發(fā)明的特點(diǎn)在于將甲酸與PFJ兩個(gè)功能互補(bǔ)的添加劑配合使用，形成本添加劑，它不同于國(guó)外單獨(dú)用甲酸或PFJ作為苜蓿青貯添加劑的方法。綠汁發(fā)酵液是乳酸發(fā)酵的啟動(dòng)因子，而甲酸有抑制有害菌繁殖的作用，兩種添加劑的綜合和互補(bǔ)，既能直接快速降低預(yù)備發(fā)酵期的pH值，抑制有害菌繁殖，又可促進(jìn)預(yù)備發(fā)酵期和酸化前期乳酸菌大量繁殖，產(chǎn)生更多的乳酸，形成最終較低的pH值，從而有效提高青貯苜蓿的質(zhì)量。使用本添加劑比綠汁發(fā)酵液?jiǎn)为?dú)使用有更好的降低pH值和提高青貯質(zhì)量的效果。用本添加劑處理的苜蓿，經(jīng)30天青貯，青貯料pH值比用綠汁發(fā)酵液處理降低14.3～17.1％。
具體實(shí)施例方式
結(jié)合本發(fā)明方法步驟提供以下實(shí)施例實(shí)施例一1、綠汁發(fā)酵液制作(1)取新鮮的苜蓿植株，去掉基部和頂部各約10cm，同時(shí)去掉主枝和比較粗的枝條，將剩余的幼枝和葉保留，切碎成3-5cm，(2)按苜蓿(g)和水(ml)1∶2.5的比例加入蒸餾水，充分混合，用高速組織粉碎機(jī)搗碎，靜置1小時(shí)，雙層紗布過濾，按苜蓿原料∶葡萄糖＝10g∶1g的比例在濾液中加入葡萄糖或相當(dāng)葡萄糖量的糖漿，充分?jǐn)嚢瑁糜?0℃的環(huán)境中發(fā)酵48小時(shí)，制成綠汁發(fā)酵液；2、甲酸使用量以每公斤苜蓿4.0ml 100％濃度的甲酸作為實(shí)施用量。
3、苜蓿青貯添加劑的制作綠汁發(fā)酵液(PFJ)與100％濃度的甲酸溶液(FA)60％∶40％的比例形成苜蓿青貯添加劑，青貯時(shí)每公斤苜蓿添加6.0mlPFJ和4.0mlFA(或相當(dāng)甲酸量的非100％甲酸溶液)，綠汁發(fā)酵液和甲酸溶液先后分別噴灑在苜蓿表面。
表1 實(shí)施例一的苜蓿青貯效果
從表1看出，用本發(fā)酵液處理的苜蓿，經(jīng)30天青貯，青貯料感觀評(píng)價(jià)達(dá)到優(yōu)良，而PFJ的感觀評(píng)價(jià)為中等；pH值和蛋白質(zhì)含量分別比PFJ處理低14.3％和提高20.9％，差異均達(dá)到顯著水平。
實(shí)施例二1、綠汁發(fā)酵液制作(1)取新鮮的苜蓿植株，去掉基部和頂部各約10cm，同時(shí)去掉主枝和比較粗的枝條，將剩余的幼枝和葉保留，切碎成3-5cm，(2)按苜蓿(g)和水(ml)1∶2.5的比例加入蒸餾水，充分混合，用高速組織粉碎機(jī)搗碎，靜置1小時(shí)，雙層紗布過濾，按苜蓿原料∶葡萄糖＝10g∶1g的比例在濾液中加入葡萄糖或相當(dāng)葡萄糖量的糖漿，充分?jǐn)嚢瑁糜?0℃的環(huán)境中發(fā)酵48小時(shí)，制成綠汁發(fā)酵液；2、甲酸使用量以每公斤苜蓿5.0ml 100％濃度的甲酸作為實(shí)施用量；3、苜蓿青貯添加劑制作綠汁發(fā)酵液(PFJ)與100％濃度的甲酸溶液(FA)按50％∶50％的比例形成苜蓿青貯添加劑，青貯時(shí)每公斤苜蓿添加5.0mlPFJ和5.0ml FA(或相當(dāng)甲酸量的非100％甲酸溶液)，綠汁發(fā)酵液和甲酸溶液先后分別噴灑在苜蓿表面。
表2 實(shí)施例二的苜蓿青貯效果
從表2看出，用本發(fā)酵液處理的苜蓿，經(jīng)30天青貯，青貯料感觀評(píng)價(jià)達(dá)到優(yōu)良，而PFJ的感觀評(píng)價(jià)為中等；pH值和蛋白質(zhì)含量分別比PFJ處理低14.9％和提高19.2％，差異均達(dá)到顯著水平。
實(shí)施例三1、綠汁發(fā)酵液制作(1)取新鮮的苜蓿植株，去掉基部和頂部各約10cm，同時(shí)去掉主枝和比較粗的枝條，將剩余的幼枝和葉保留，切碎成3-5cm，(2)按苜蓿(g)和水(ml)1∶2.5的比例加入蒸餾水，充分混合，用高速組織粉碎機(jī)搗碎，靜置1小時(shí)，雙層紗布過濾，按苜蓿原料∶葡萄糖＝10g∶1g的比例在濾液中加入葡萄糖或相當(dāng)葡萄糖量的糖漿，充分?jǐn)嚢瑁糜?0℃的環(huán)境中發(fā)酵48小時(shí)，制成綠汁發(fā)酵液；2、甲酸使用量以每公斤苜蓿6.0ml 100％濃度的甲酸作為實(shí)施用量；4、PFJ甲酸苜蓿青貯添加劑制作綠汁發(fā)酵液(PFJ)與100％濃度的甲酸溶液(FA)按40％∶60％的比例形成苜蓿青貯添加劑，青貯時(shí)每公斤苜蓿添加4.0mlPFJ和6.0ml FA(或相當(dāng)甲酸量的非100％甲酸溶液)，綠汁發(fā)酵液和甲酸溶液先后分別噴灑在苜蓿表面。
表3 實(shí)施例三的苜蓿青貯效果
從表3看出，用本發(fā)酵液處理的苜蓿，經(jīng)30天青貯，青貯料感觀評(píng)價(jià)達(dá)到優(yōu)良，而PFJ的感觀評(píng)價(jià)為中等；pH值和蛋白質(zhì)含量分別比PFJ處理低17.1％和提高21.3％，差異均達(dá)到顯著水平。
上述三個(gè)實(shí)施例的制作方法流程可以簡(jiǎn)述為新鮮苜?！x→切碎→浸漬→粉碎(打漿)→靜置→過濾→加葡萄糖→發(fā)酵→制成PFJ→甲酸→苜蓿青貯添加劑。
權(quán)利要求
1.一種苜蓿青貯添加劑的制備方法，其特征在于，所述的苜蓿青貯添加劑，由綠汁發(fā)酵液和甲酸組成，其重量百分比是40～60％∶40～60％，步驟如下(1)制備綠汁發(fā)酵液；(2)確定甲酸使用量；(3)綠汁發(fā)酵液和甲酸溶液按比例配合使用，形成苜蓿青貯添加劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的苜蓿青貯添加劑的制備方法，其特征是，所述的步驟(1)，具體為(a)取新鮮的苜蓿植株，去掉基部和頂部各10cm，同時(shí)去掉主枝和比較粗的枝條，將剩余的幼枝和葉保留，切碎成3-5cm；(b)加入蒸餾水，充分混合，用高速組織粉碎機(jī)將混合后的苜蓿搗碎，靜置1小時(shí)，雙層紗布過濾；(c)在濾液中加入葡萄糖，充分?jǐn)嚢?，置?0℃的環(huán)境中發(fā)酵48小時(shí)，制成綠汁發(fā)酵液。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的苜蓿青貯添加劑的制備方法，其特征是，所述的(b)中，按苜蓿g和水ml 1∶2.5的比例加入蒸餾水。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的苜蓿青貯添加劑的制備方法，其特征是，所述的(c)中，按苜蓿原料∶葡萄糖＝10g∶1g的比例在濾液中加入葡萄糖。
5.根據(jù)權(quán)利要求2或者4所述的苜蓿青貯添加劑的制備方法，其特征是，葡萄糖或采用相當(dāng)葡萄糖量的糖漿。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的苜蓿青貯添加劑的制備方法，其特征是，所述的步驟(2)，具體為以每公斤苜蓿4.0～6.0ml 100％濃度的甲酸作為實(shí)施用量。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的苜蓿青貯添加劑的制備方法，其特征是，所述的步驟(3)，具體為綠汁發(fā)酵液與100％濃度的甲酸溶液按40～60％∶40～60％的比例形成苜蓿青貯添加劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的苜蓿青貯添加劑的制備方法，其特征是，青貯時(shí)每公斤苜蓿添加4.0～6.0ml綠汁發(fā)酵液和4.0～6.0ml 100％濃度的甲酸，綠汁發(fā)酵液和甲酸溶液先后分別噴灑在苜蓿表面。
9.根據(jù)權(quán)利要求7或者8所述的苜蓿青貯添加劑的制備方法，其特征是，或者采用相當(dāng)甲酸量的非100％甲酸溶液。
全文摘要
一種生物技術(shù)領(lǐng)域的苜蓿青貯添加劑的制備方法，所述的苜蓿青貯添加劑，由綠汁發(fā)酵液和甲酸組成，其重量百分比是4～60％∶40～60％，步驟如下(1)制備綠汁發(fā)酵液；(2)確定甲酸使用量；(3)綠汁發(fā)酵液和甲酸溶液按比例配合使用，形成苜蓿青貯添加劑。本發(fā)明在使用PFJ的基礎(chǔ)上，配合使用甲酸以快速降低預(yù)備發(fā)酵期的pH值，有效地抑制有害菌的繁殖，為耐酸性能較強(qiáng)的乳酸菌繁殖創(chuàng)造條件，從而快速降低預(yù)備發(fā)酵期和酸化前期青貯苜蓿pH值，提高苜蓿青貯料的質(zhì)量。
文檔編號(hào)A23K1/16GK1718077SQ20051002869
公開日2006年1月11日 申請(qǐng)日期2005年8月11日 優(yōu)先權(quán)日2005年8月11日
發(fā)明者安淵, 田瑞霞, 王光文 申請(qǐng)人:上海交通大學(xué)