專利名稱：雙態微生物液體培養菌絲體的兩次發酵法的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種雙態微生物液體培養菌絲體的兩次發酵法。
背景技術：
目前，微生物發酵是獲取微生物菌體的重要手段之一，世界上有三種微生物發酵的方法，第一種固體斜面菌種——固體發酵——菌絲體產品；第二種固體斜面菌種——液體菌種——液體發酵——菌絲體產品；第三種固體斜面菌種——液體菌種——固體發酵——菌絲體產品。此三種方法對獲取微生物菌體的收益率均只有1～1.5％，且投資大周期長，質量不穩定，很難工業化大生產。
發明內容
本發明的目的是提供一種雙態微生物液體培養菌絲體的兩次發酵法，主要經過雙態兩次發酵法的互補作用，集兩者優勢為一體從而提高了菌體的質量，解決了目前常規發酵技術中，生產產出率低的難題，可使深層培養物在質量穩定的前提下，使收率翻幾倍，無需加設備和生產成本，便可工業化大生產。
本發明是提供一種雙態微生物液體培養菌絲體的兩次發酵法，其特征的制作步驟是
一、半固體菌種，在常規固體培養基中，減半凝固劑的用量制成半固體培養基，再加入三分之一的玻璃球，然后，按固定常規接種培養方法封口滅菌，菌絲萌發后，用力搖動使培養基成液體狀，即形成液體菌種；二、擴大液體菌種，接入常規液體培養基進行培養，培養結束再轉入常規固體培養基2～3天；三、固態發酵，再轉入常規固體培養基2～3天；四、再液態發酵，將上述固體菌種的2～6％作為增粘劑或添加劑，加入擴大培養的發酵罐內，進行再次液態發酵而成為菌絲體產品。
本發明是提供一種雙態微生物液體培養菌絲體的兩次發酵法，上述凝固劑是瓊脂。
本發明產出量高而獲取率為3～8％；生產周期縮短到7～10天，并可工業化生產。
具體實施例方式
本發明的典型實施例的制作步驟如下1、半固體菌種在常規固體培養基中，減半凝固劑(瓊脂)的用量制成半固體培養基，再加入三分之一的玻璃球，然后封口滅菌(按固定常規接種培養方法)，菌絲萌發后，用力搖動使培養基成液體狀，即形成液體菌種；2、擴大液體菌種接入常規液體培養基進行培養，培養結束再轉入常規固體培養基，2～3天后；3、固態發酵，再轉入常規固體培養基，2～3天；4、再液態發酵將上述固體菌種的2～6％作為增粘劑或添加劑，加入擴大培養的發酵罐內，進行再次液態發酵既成為菌絲體產品。
綜上所述本發明的工藝流程半固體菌種——液體菌種——固態發酵——再液態發酵。
本發明的優點1、有效控制污染問題；由于半固體培養基便于檢查污染，而現有技術的液體培養基，在接種時菌種被液體沉沒，而無法檢查出是否被污染。
2、由于又有固態發酵，常規固體發酵中含有的有益物質，填補液體發酵中有益物質含量低，而液體發酵中的有益物質又填補了固體發酵中物質含量低，兩者經過雙態兩次發酵法的互補作用，集兩者優勢為一體從而提高了菌體的質量；3、再液態發酵，由于在發酵過程中加入了2～6％的固體菌種作為增粘劑或添加劑，該增粘劑或添加劑也形成了純的菌絲體，使液體培養基的粘度增高，營養更全面，因此，產出量高而獲取率為3～8％；生產周期由常規15～20天，縮短到7～10天，并可工業化生產；另外設備投資是常規的一半；又技術含量低，無需專業技術人員操作。
權利要求
1.一種雙態微生物液體培養菌絲體的兩次發酵法，其特征的制作步驟是一、半固體菌種，在常規固體培養基中，減半凝固劑的用量制成半固體培養基，再加入三分之一的玻璃球，然后，按固定常規接種培養方法封口滅菌，菌絲萌發后，用力搖動使培養基成液體狀，即形成液體菌種；二、擴大液體菌種，接入常規液體培養基進行培養，培養結束再轉入常規固體培養基2～3天；三、固態發酵，再轉入常規固體培養基2～3天；四、再液態發酵，將上述固體菌種的2～6％作為增粘劑或添加劑，加入擴大培養的發酵罐內，進行再次液態發酵而成為菌絲體產品。
2.根據權利要求1所述的一種雙態微生物液體培養菌絲體的兩次發酵法，其特征是上述凝固劑是瓊脂。
全文摘要
本發明涉及一種雙態微生物液體培養菌絲體的兩次發酵法。其工藝流程半固體菌種、液體菌種、固態發酵，以及再液態發酵，將上述液體菌種的2～6％作為增粘劑或添加劑，加入擴大培養的發酵罐內，進行再次液態發酵而成為菌絲體產品。從而，產出量高，獲取率為3～8％；生產周期縮短到7～10天，并可工業化生產。
文檔編號A01G1/04GK1644011SQ20051000746
公開日2005年7月27日 申請日期2005年2月22日 優先權日2005年2月22日
發明者余兆豐, 黃偉, 余蓓蓓, 沈承歡 申請人:余兆豐