專利名稱：一種細胞工程苗煉苗方法
技術領域：
本項發明屬于植物細胞工程技術領域。
背景技術：
植物細胞工程苗從實驗室到大田中栽培之前一定要經過煉苗這一重要過程才行。而一般的煉苗方法常常使剛剛從培養基這種優越環境中移出的植物細胞工程苗的死亡率很高，這一問題長期以來沒能得到很好的解決，難以真正植物細胞工程苗的優勢，阻礙了植物細胞工程苗這一克隆繁育技術的推廣和應用。
現有的煉苗方法沒能解決剛剛從培養基轉移到野外時植物細胞工程苗十分嫩弱，適應性差的問題。因此，現有的煉苗方法，極易使植物細胞工程苗出現萎嫣或腐爛，死亡率很高。本發明可以大幅度提高植物細胞工程苗煉過程中的成活率，對植物細胞工程苗這種無性克隆繁育技術的大面積推廣提供可靠保障。真正實現植物細胞工程苗可以快速擴繁的優勢，同時也降低了生產植物細胞工程苗的成本，為這一快速擴繁技術的實際應用提供了廣闊的前景。
目前國內外尚無這種植物細胞工程苗煉苗方法研究及相關報道。
發明內容
(1)本發明需要解決的問題是①煉苗過程中，植物細胞工程苗較嫩弱，極易失水萎嫣②從培養基轉移到煉苗缽體的過程中，易引起小苗傷根。
③避免季節節律對細胞工程苗煉苗的不良影響。
④解決一般煉苗占地多的問題，實現室內、立體集約化、工廠化煉苗。
(2)本發明的具體技術方案是我們針對植物細胞工程苗的這些特點，發明了在植物細胞工程苗煉苗過程中能為其提供適宜的溫度、濕度、光照、二氧化碳、氧氣等良好的環境條件以及根部、葉面營養，還設計了為植物細胞工程苗防病、治病的方案。為植物細胞工程苗提供良好的生活狀態，促使植物細胞工程苗根、莖、葉的生長發育與復壯，提高其適應性和抵抗力，大大提高其成活率，為植物細胞工程苗能大批量的從實驗室走向大田打下堅實的基礎。具體技術方案如下
①煉苗裝置的準備與調試②栽培缽體和基質處理③植物細胞工程苗的處理及移栽④煉苗。
(2)本發明與現有技術比較，其顯著性進步為①本發明利用透氣性、吸水性好且可以高溫高壓滅菌的材料作基質，用自動定時霧化系統為植物細胞工程苗提供極細小的霧狀液，使得小苗處在潤濕舒適的空氣中進行光合作用。并結合根部、葉面供肥和滅菌措施，確保植物細胞工程苗順利渡過煉苗期。使植物細胞工程苗的成活率可達90％以上，大大提高其煉苗的成活率。
②本發明對植物細胞工程苗傷害少，且能為植物細胞工程苗在煉苗過程中提供適宜的成活、生長、復壯條件。
③本發明不受季節的限制，可常年進行植物細胞工程苗的煉苗，大大延長了生產時間。
④該方法采用室內立體多層架式煉苗，可大批量、工廠化、集約化煉苗，解決了煉苗占地多的問題。
⑤該方法所用的材料經濟易得并可多次反復利用，具有可持續性等四具體實施方式
(1)煉苗裝置的準備與調試購買貨架角鋼，根據場所大小，將其加工成一定尺寸大小的多層式立柜式框架；框架體的上下、左右、和后側用透光度高的塑料薄膜密封；每個隔層用硬膠板作底托，并在其中央打一個一定大小的圓孔，把一根略長于架體、和圓孔同徑的塑料管穿過圓孔，使得管道位于架體的中央。然后再每一層的管道上端略下處打一周小孔，將霧化器的噴嘴與架體管道下端口相連通；在每層一側頂端安裝一個微型空氣擾動器；框架每層的前面用塑料膜做成可活動的門簾。將其置于見陽光處或每層安裝日光燈管補充光照。調試到適宜的霧化量和時間設定，用70％的酒精噴灑各層消毒和紫外線燈消毒處理后備用。
(2)栽培缽體和基質處理購買質量優等250ml的一次性塑料杯，在其底部和周圍打一些小園孔；用2mm篩將蛭石過篩分成粗、細兩部分，高溫高壓滅菌后備用。先將粗顆粒蛭石放入杯中至2/3高度，表面撒一層細蛭石，噴灑500ppm的滅菌靈待用。
(3)植物細胞工程苗的處理及移栽把培養好的生根良好的植物細胞工程苗從培養基中取出放入清水中，小心去除根部的培養基，用高錳酸鉀溶液消毒，用無菌水漂洗后將其輕輕放入上述杯中細蛭石上，輕輕地從苗的四周撒細蛭石將其根的周圍填充好，在桌面上輕輕敦幾下，再其上面再撒粗蛭石至杯高4/5左右，然后將杯體排放在有營養液(見表1)的托盤中浸潤，也可同時在杯面滴加營養液至潤透。最后向小苗和杯口面噴灑500ppm的多菌靈溶液，將其排放在煉苗裝置中。
表1 養液成分配比
(4)煉苗將霧化器和微型空氣擾動器設定為24小時循環定時交替開關，即霧化噴霧、微型空氣擾動器停止——霧化器停止噴霧、微型空氣擾動器開動——霧化噴霧、微型空氣擾動器停止——霧化器停止噴霧、微型空氣擾動器開動——……。開關時間長度可根據具體情況而定。白天噴霧時間間隔短些，晚上噴霧時間間隔長些；霧化一定時期的水后，插入一次霧化營養液。
(5)換盆煉苗10至15天后，將小苗小心移栽到有營養基質的杯中，繼續煉苗5至10天后，將小苗連同培養基一并取出移入大田。
權利要求
1.一種細胞工程苗的煉苗裝置，其特征是多層式立柜式框架半封閉系統，框架內為多層結構，內有霧化管道系統和空氣擾動系統，框架外有霧化器，通過定時開、關霧化器為植物細胞工程苗的煉苗提供良好條件。
2.一種細胞工程苗的煉苗方法，其特征是通過細胞工程苗的煉苗裝置的霧化系統霧化水和霧化營養液，空氣擾動系統器提供良好的通氣條件；基質高溫高壓消毒和苗體消毒措施提供無病菌或微病菌等條件；室內多層立體式煉苗提高空間利用率。
全文摘要
本發明屬于植物細胞工程技術領域。運用本項發明，解決了植物細胞工程苗煉苗過程中成活率低這一長期困擾科技工作者的難題，確保植物細胞工程苗順利渡過煉苗期，大大提高其成活率；本發明為室內、立體工廠化煉苗技術，可節約面積、避免季節性干擾、延長生產時間，為充分發揮植物細胞工程苗的優勢打下牢固的基礎；本項發明所用材料為可多次反復利用，具有可持續性。
文檔編號A01H4/00GK1600081SQ200410064730
公開日2005年3月30日 申請日期2004年9月24日 優先權日2004年9月24日
發明者王光, 欽佩, 何禎祥, 龔津平 申請人:南京大學